CC BY
4Оригинальная статья
@ Додохова М.А., Сафроненко А.В, Котиева И.М., Комарова Е.Ф.,
Трепель В.Г., Алхусейн-Кулягинова М.С., Шпаковский Д.Б., Милаева Е.Р., 2021
УДК: 615.277.3
DOI: 10.52420/2071-5943-2021-20-3-73-77
ИССЛЕДОВАНИЕ ОСТРОЙ ПЕРОРАЛЬНОЙ ТОКСИЧНОСТИ ОЛОВООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, СОДЕРЖАЩИХ ФРАГМЕНТ 2,6-ДИ-ТРЕТ-БУТИЛФЕНОЛА
М.А. Додохова 1 А.В. Сафроненко 1 И.М. Котиева 1 Е.Ф. Комарова 1
В.Г. Трепель 2, М.С. Алхусейн-Кулягинова 1 Д.Б. Шпаковский 3, Е.Р. Милаева 3
1 ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
2 Филиал ФГБУ «Информационно-методический центр по экспертизе, учету и анализу обращения средств медицинского применения» Росздравнадзора, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация
3 ФГБОУ ВО МГУ имени М.В. Ломоносова, г. Москва, Российская Федерация
Цель исследования — оценка безопасности применения в качестве фармацевтических субстанций оло-воорганических соединений, содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола, при внутрижелудочном введении аутбредным крысам линии Wistar (самки). Материалы и методы. Объектами исследования явились три оловоорганических соединения: ((3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) трифени-лолова (Ме-5), (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) триметилолова (Ме-4), бис(3,5-ди-трет-бу-тил-4-гидроксифенилтиолат) диметилолова (Ме-3). Исследование острой токсичности проведено на 106 крысах Wistar (самки) весом 190-210 г методами «фиксированной дозы» и «вверх и вниз» по протоколам OECD. Результаты. Согласно гармонизированной системе классификации опасности и маркировки химической продукции (СГС), исследованные оловоорганические соединения следует отнести к следующим классам токсичности: Ме-5 — IV, Ме-3 — V, Ме-4 — II. Средне летальная доза при внутрижелудочном введении для Ме-5 LDso = 955.0 ± 58.3 мг/кг, значение LDso для Ме3 условно принято много более 2000 мг/кг, для Ме-4 лежит в диапазоне от 5 до 50 мг/кг. Обсуждение. Модификация молекул оловоорганических соединений в ходе направленного синтеза открывает широкие перспективы для создания противоопухолевых препаратов нового класса. В ходе экспериментального исследования выявлены закономерности взаимосвязи «структура-токсичность» органических производных олова: ведение 2,6-ди-трет-бутилфенольной группы значительно снижает токсичность по сравнению с соответствующими исходными субстанциями; метильные производные более токсичны, чем их фенильные аналоги. Соединения IV и V класса токсичности по СГС могут рассматриваться как кандидаты-лидеры для перспективных доклинических исследований в области экспериментальной онкологии. Выводы. К дальнейшему исследованию в качестве противоопухолевых лекарственных агентов рекомендованы субстанции Ме-3 и Ме-5, обладающие наибольшей безопасностью при внутрижелудочном применении.
Ключевые слова: оловоорганические соединения, острая токсичность, доклинические исследования, противоопухолевые лекарственные препараты.
Цитирование: Иccлeдованиe острой пeроральной токсичности оловоорганичecкиx cоeдинeний, со-дeржащиx фрагмeнт 2,6-ди-трeт-бyтилфeнола / Додохова M. А., Сафро^нко А. В, Коти-eва И. M., [и др. ] // Уральский мeдицинcкий журнал. - 2021. - Т. 20, № 3. - С. 73-77. - Doi: 10.52420/2071-5943-2021-20-3-73-77.
Cite as: Study of acute oral toxicity of organotin compounds containing a 2,6-di-tert-butylphenol
fragment / Dodokhova M. A., Safronenko A. V, Kotieva I. M., [et al.] // Ural medical journal. -2021. - Vol. 20 (3). - P. 73-77. - Doi: 10.52420/2071-5943-2021-20-3-73-77.
Рукопись поступила: 30.04.2021. Принята в мчать: 11.05.2021
Original Article
DOI: 10.52420/2071-5943-2021-20-3-73-77
STUDY OF ACUTE ORAL TOXICITY OF ORGANOTIN COMPOUNDS CONTAINING A 2,6-DI-TERT-BUTYLPHENOL FRAGMENT
M.A. Dodokhova 1 A.V. Safronenko 1 I.M. Kotieva 1 E.F. Komarova 1
V.G. Trepel 2, M.S. Alkhuseyn-Kulyaginova 1 D.B. Shpakovskiy 3, E.R. Milaeva 3
1 Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
2 Branch of Informational and methodological center of expertise, accounting and analysis of medical products circulation, Rostov-on-Don, Russian Federation
3 M.V. Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russian Federation
The aim of the study was to evaluate the safety of the use of organotin compounds containing a fragment of 2,6-di-tert-butylphenol as pharmaceutical substances when administered intragastrically to Wistar outbred rats (females). Material and methods. The objects of the study were three organotin compounds: ((3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthiolate) triphenyltin (Me-5), (3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthiolate)trimethyltin (Me-4), bis(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenylthiolate) dimethyltin (Me-3). Acute toxicity study were performed on 106 Wistar rats (female) weighing 190-210 g by "fixed dose" and "up and down" methods according to the OECD protocols. Results. According to the harmonized system of hazard classification and labeling of chemical products (GHS) the studied organotin compounds should be assigned to the following toxicity classes: Me-5 — IV, Me-3 — V, Me-4 — II. Average lethal dose in intragastric administration for Me-5 is LD50 = 955.0 ± 58.3 mg/kg, the value of LD50 for Me-3 is conventionally assumed to be much more than 2000 mg/kg, for Me-4 is in the range of 5 to 50 mg/kg. Discussion. The modification of tin-organic molecules in the course of directed synthesis opens broad prospects for the creation of a new class of anticancer drugs. In the course of the experimental study, the regularities of the "structure-toxicity" relationship of organic tin derivatives were revealed: the introduction of the 2,6-di-tert-butylphenol group significantly reduces toxicity compared to the corresponding initial substances; methyl derivatives are more toxic than their phenyl analogues. Compounds of GHS toxicity classes IV and V can be considered as leading candidates for promising preclinical studies in the field of experimental oncology. Conclusion. Substances of Me-3 and Me-5, which have the highest safety for intragastric use, were recommended for further study as antitumor drug agents.
Keywords: organotin compounds, acute toxicity, preclinical studies, anticancer drugs.
ВВЕДЕНИЕ
Поиск новых эффективных химиотерапевти-ческих средств для лечения злокачественных новообразований — одна из важнейших задач фармакологии и медицины. В настоящее время активно ведется разработка лекарственных субстанций с противоопухолевым действием на основе органических производных металлов, среди которых большой интерес вызывают соединения олова [1-5]. Интенсивное изучение оловоорганических соединений (ООС) началось после открытия М. Ги-леном в 1980-е годы их противоопухолевой активности. В 2004 году FDA был одобрен препарат олова «Пурлитин» (Rostaporfin, Sn(IV) этиопурпурин) для лечения возрастной макулярной дегенерации как фотосенсибилизатор. В настоящее время пурлитин прошел фазы II/III клинических испытаний для фотодинамической терапии метастазирующе-го рака молочной железы и саркомы Капоши.
В последнее время на противоопухолевую активность было протестировано большое число ООС, и многие из них проявили выраженный цито-токсический эффект по отношению к различным линиям опухолевых клеток человека [6]. Однако существенной проблемой при разработке новых кандидатов в лекарственные средства на основе ООС оказалась отмеченная в in vivo исследованиях высокая неспецифическая токсичность. ООС могут оказывать влияние на клетки различным образом: уменьшать проницаемость мембран и синтез фосфолипидов, накапливаться в аппарате Гольджи, митохондриях и эндоплазматическом ретикулуме, ингибировать синтез ДНК, РНК, бел-
ков и окислительное фосфорилирование, влиять на уровень сАМР и Са2+, влиять на пролиферацию клеток, ингибировать Ыа+, К+- АТФазы и активировать ферменты, участвующие в апоптозе, индуцировать продукцию активных метаболитов кислорода.
Особый интерес представляют гибридные оловоорганические соединения, содержащие протекторный антиоксидантный фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола [7-12]. Данные соединения рассматриваются как наиболее перспективные кандидаты в противоопухолевые средства, обладающие оптимальным соотношением «активность-токсичность» [8-11]. В связи с этим возникает задача доклинического исследования перспективных фармацевтических субстанций и оценка безопасности их применения.
Целью исследования явилась оценка безопасности применения в качестве фармацевтических субстанций оловоорганических соединений, содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола, при внутрижелудочном введении аутбредным крысам линии Wistar (самки).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектами исследования явились три оловоорганических соединения: ((3,5-ди-трет-бу-тил-4-гидроксифенилтиолат) трифенилолова (Ме-5), (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилти-олат) триметилолова (Ме-4), бис(3,5-ди-трет-бу-тил-4-гидроксифенилтиолат) диметилолова (Ме-3) (рис.).
Ме-5
Ме-4
Ме-3
Структурные формулы оловоорганических соединений Ме5, Ме4, Ме3 (обозначение радикалов: lBu - трет-бутил, Ме - метил, Ph - фенил)
Исследование острой токсичности проведено на 106 крысах Wistar (самки) весом 190-210 г методами «фиксированной дозы» и «вверх и вниз» по протоколам OECD [13, 14]. Животные получены из разведения НИЦ «Курчатовский институт» ПЛЖ «Рапполово».
Исследования выполнялись в соответствии с международными и российскими требованиями проведения научных исследований на лабораторных животных.
После окончания срока карантинного изолирования (14 суток) животные были осмотрены на отсутствие внешних признаков заболеваний, стандартизированы по полу, возрасту и весу и рандомизированы с помощью таблицы случайных чисел. Тестируемые соединения вводили однократно внутрижелудочно через зонд в виде взвеси, полученной путем суспензирования в 1%-ом водном растворе желатина, объемом не более 2 мл. Животным из контрольных групп был введен 1%-ый водный раствор желатина и вода для инъекций в аналогичных объемах.
I этап. При определении класса токсичности в предварительном и основном испытании суспензии Ме-3, Ме-4 и Ме-5 вводили однократно внутрижелудочно в дозах 5, 50, 300 и 2000 мг/кг с интервалом 48 ч между приемом доз каждого уровня. Присвоение тестируемым субстанциям класса токсичности было произведено по Согласованной на глобальном уровне системе классификации опасности и маркировки химической продукции (СГС). Дизайн исследования I этапа представлен в таблице 1.
Таблица 1
Схема введения ООС, содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола, однократно, внутрижелудочно, для определения класса токсичности по СГС
Вид Доза, мг/кг Кол-во животных
испытания Ме-5 Ме-4 Ме-3
5 1 1 1
50 1 1 1
0J о аз л ч 300 1 - 1
2000 1 - 1
т и а а 1% водный раствор желатина 1 1 1
д 0J а С вода для инъекций 1 1 1
5 - 5 -
50 - 5 -
300 5 - -
0J о Я ш о н 2000 5 - 5
1% водный раствор желатина 5 5 5
с о вода для инъекций 5 5 5
При изучении острой токсичности тестируемых объектов в предварительном испытании протестирована началь-<м° ная доза 5 мг/кг по одному животному для каждой субстанции. На протяжении периода наблюдения в течение 48 ч не отмечено гибели подопытных животных. Токсические проявления (незначительные изменения внешнего вида и поведения) наблюдались у животного, получившего субстанцию Ме-4 в течение 2 ч после введения. При введении следующего уровня доз, 50 мг/кг, признаки токсичности нарастающей интенсивности были выявлены только у особи при введении Ме-4. Животное подвергли эвтаназии по гуманным соображениям через 72 ч от момента введения и дальнейшее увеличение дозы для Ме-4 не проводилось. Для соединений Ме-3 и Ме-5 признаки токсичности были слабовыраженные и полностью исчезли через 2 и 6 ч после введения. Третий уровень доз эксперимента — 300 мг/кг — не был летальным для животных, получивших субстанции Ме-3 и Ме-5, признаки общей токсичности были умеренной интенсивности и полностью исчезли к концу первых (Ме3) и третьих (Ме5) суток после введения. Для обеих субстанций протестирована следующая доза — 2000 мг/кг. Данный уровень оказался чрезвычайно токсичным для вещества Ме-5, и животное было подвергнуто эвтаназии на 3 сутки. У особи, которой ввели субстанцию Ме-3, токсические признаки были умеренной интенсивности и полностью исчезли к концу 8 суток. При введении контрольных растворов (1% водный раствор желатина, вода для инъекций) не было зафиксировано проявлений токсичности за весь период наблюдения.
В основной эксперимент были выбраны начальные дозы для веществ: Ме-4 — 5 мг/кг, Ме-5 — 300 мг/кг и Ме-3 — 2000 мг/кг. Признаки интоксикации у животных были полностью идентичны по силе и продолжительности описанным в предыдущем испытании. Летальных случаев в течение 14 суток ни в одной группе не зарегистрировано.
Следующим уровнем вводимых доз явились для вещества Ме-4 — 50 мг/кг, для Ме-5 — 2000 мг/кг. Отмечались нарастающие по интенсивности токсические признаки у всех особей при введении данного уровня доз, в связи с чем на 3 сутки животных подвергли эвтаназии.
II этап. Оценка LD50 с доверительной вероятностью была произведена только для соединения Ме-5 с применением нестандартного коэффициента интервала дозы. Нахождение расчетных значений токсических доз (LD16, LD50 LD84) производили, используя специальный статистический метод пробит-анализа по Личфилду-Уилкоксону
[15].
Регистрацию изменения общего состояния животных и летальных исходов осуществляли в течение 30 мин. после введения дозы, затем периодически в течение первых 24 ч и впоследствии ежедневно, на протяжении 14 суток наблюдения. Взвешивание особей осуществлялось перед введением, а также на 7 и 14 сутки после введения соединений. Эвтаназия проведена декапитацией на гильотине.
Исследование одобрено локальным независимым этическим комитетом ФГБОУ ВО «РостГ-МУ» Минздрава России (Протокол № 10/20 от 28.05.2020г).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Результаты I этапа исследования. Средняя доза вещества, вызывающая гибель половины животных испытуемой группы (LD5o), для Ме-3 значительно более 2000 мг/кг, что позволяет отнести это соединение к V классу токсичности; для Ме-5, классифицированного как соединение IV класса токсичности, LD5o составило от 300 до 2000 мг/кг, наибольшую токсичность проявило соединение Ме-4 — LD5o находится в пределах от 5 до 50 мг/ кг, данные значения соответствуют II классу токсичности. Результаты проведения I этапа экспериментов позволили выявить фармацевтическую субстанцию для определения количественной характеристики токсичности LD5o, что и явилось целью второй серии экспериментов.
Результаты II этапа исследования. Вещество Ме-5 исследовали в возрастающих дозах с интервалом между дозами 100 мг/кг, начиная с дозы 550 мг/кг. При введении возрастающих доз наличие токсических признаков отмечалось во всех группах животных, однако они отличались по продолжительности. По мере пошагового увеличения вводимых доз продолжительность токсических проявлений постепенно нарастает от 3 ч в группе с начальной дозой 550 мг/кг до 168 ч в группе с дозой тестируемого вещества Ме-5 950 мг/кг. К окончанию срока наблюдения у животных, получивших дозы 850 мг/кг и 950 мг/ кг, отмечены выраженные признаки интоксикации. В дозе 850 мг/кг пало 1 животное на 3 сутки, а в дозе 950 мг/ кг — 2 животных на 2 сутки после введения, у выживших животных токсические признаки полностью исчезли к 10 суткам наблюдения.
Токсикометрические расчеты показали для субстанции Ме-5:
ЬБхб = 822,3 мг/кг; LD5o = 955,0 Мг/ кг; LD84 = 1096,5 мг/кг; LDloo = 1167,25 мг/кг. После вычисления стандартной ошибки LD5o получаем LD50 = 955,0±58,3 мг/кг.
Для соединения Ме-3 и Ме-4 определение средне летальной дозы не проводилось, так как значение LD5o Ме-3 условно (в соответствии с протоколом) принято много более 2000 мг/ кг, а Ме-4, относясь ко II классу токсичности, не может быть рассмотрено в качестве кандидата в противоопухолевые лекарственные средства.
ОБСУЖДЕНИЕ
Токсичность оловоорганических соединений определяется несколькими химическими структурными факторами: природой заместителей R, образующего ковалент-ные связи «металл-углерод»; координационной доступностью атома Sn для образования связи с мишенью; относительно стабильной связью L-Sn (например, S-Sn); медленной гидролитической деструкцией [6]. Исследованные соединения Ме-3, Ме-4, Ме-5 отличаются от известных оловооргани-ческих соединений, обладающих противоопухолевой активностью, тем, что в состав их молекул входит протекторная антиоксидантная группа 2,6-ди-трет-бутилфенола (миметика а-токофе-
рола). Данные in vitro исследований, полученные нами ранее с использованием электрохимического метода, ДФПГ теста, CUPRAC теста, а также при изучении перекисного окисления липидов, митохондриальных функций, свидетельствуют о том, что вещества обладают антирадикальной активностью. Антиоксидантная активность соединений Ме-3, Ме-4, Ме-5 с фенольной группой определяется способностью отрыва атома водорода от фенола и способностью участвовать в переносе электрона [7-11]. Кроме того, использование метода совместного культивирования злокачественных и условно нормальных клеток доказывает, что присутствие в молекулах соединений Sn 2,6-ди-трет-бутилфенольной группы снижает цитотоксичность по отношению к нормальным клеткам в ~1.2 раза [11].
Из таблицы 2 значений LDso исследуемых соединений и их более простых аналогов [16] следует, что уровень токсичности ООС определяется как природой заместителей R, так и лиганда L, связанного с атомом олова.
Метильные производные более токсичны, чем их фенильные аналоги, причем число метильных групп также сказывается на токсичности: наличие трех метильных групп обусловливает существенно более высокую токсичность, чем в случае двух метильных групп.
Важно отметить, что во всех случаях для субстанций Ме-3, Ме-4, Ме-5, содержащих антиокси-дантную 2,6-ди-трет-бутилфенольную группу, значения LD50 на порядок выше, чем для соответствующих исходных оловоорганических соединений. А при наличии двух фенольных групп в молекуле токсичность снижается на 2 порядка.
Таблица 2
Значения ЬБ50 для органических соединений олова при внутрижелудочном введении крысам
Соединения Ме-5, Ме-4, Ме-3 и их аналоги Название LD50, мг/кг
Me CI-Me с,/ дихлорид диметилолова 237
'Bu но——s- Me -S< 2 Me бис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) диметилолова(Me-3) > 2000
—<r ацетат триметилолова 9
(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) триметилолова (Me-4) 5-50
ацетат трифенилолова 125-150
'Bu /=\ Ph НО-¿ )}-S-Sn^—Rh \_'/ Ph (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат) трифенилолова (Me-5) 954
Примечание: обозначение радикалов: Ac — ацетил, tBu — трет-бу-тил, Ме — метил, Ph — фенил.
зированной системе классификации опасности и маркировки химической продукции (СГС) исследованные оловоорганические соединения следует отнести к следующим классам токсичности: Ме-5 — IV, Ме-3 — V, Ме-4 — II. Доклиническое изучение острой токсичности Ме-5 позволило выявить средне летальную дозу LD50 = 955.0 ± 58.3 мг/кг.
Рекомендованы к дальнейшему исследованию в качестве противоопухолевых лекарственных агентов субстанции Ме-3 и Ме-5, обладающие наибольшей безопасностью при внутрижелудочном применении.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Доклиническое изучение острой токсичности оловоорганических соединений, содержащих фрагмент 2,6-ди-трет-бутилфенола — Ме-5 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат)три-фенилолова, Ме-3 (бис(3,5-ди-трет-бутил-4-ги-дроксифенилтиолат)диметилолова) и Ме-4 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенилтиолат)три-метилолова при внутрижелудочном введении крысам позволило выявить класс опасности данных химических субстанций. Согласно гармони-
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Anti-cancer activity of di- and tri-organotin(IV) compounds with D-f+)-Galacturonic acid on human tumor cells / A. Attanzio, M. Ippolito, M. A. Girasolo [et al.] // Inorg Biochem. - 2018. - Vol. 188. - Р. 102-112. - Doi: 10.1016 / j.iinorgbio.2018.04.006.
2. Structure-activity relationships of new Organotin(IV) anticancer agents and their cytotoxicity profile on HL-60, MCF-7 and HeLa human cancer cell lines / H. Ullah, V. Previtali, H. B. Mihigo [et al.] // Eur J Med Chem. - 2019. - Vol. 181. - Р. 111544.
- Doi: 10.1016 / j.ejmech.2019.07.047.
3. Cytotoxic Activity of Organotin(IV) Derivatives with Triazolopyrimidine Containing Exocyclic Oxygen Atoms / A. Attanzio, S. D'Agostino, R. Busà [et al.] // Molecules. - 2020. - Vol. 25 (4). - Р. E859. - Doi: 10,3390 / молекулы25040859.
4. Gielen, M. Organotin Compounds: From Kinetics to Stereochemistry and Antitumour Activities / M. Gielen, M. Biesemans, R. Willem // Appl Organomet Chem. - 2005. - Vol. 19 (4). - Р. 440-450. - Doi: 10.1002/aoc.771.
5. Tin Chemistry Fundamentals, Frontiers, and Applications / A. G. Davies, M. Gielen, K. H. Pannell, E. R. T. Tiekink // Wiley.
- 2008. - 752 p:
6. Anti-proliferative and antitumor activity of organotin(IV) compounds. An overview of the last decade and future perspectives / C. N. Banti, S. K. Hadiikakou, T. Sismanoglu, N. Hadjiliadis // J Inorg Biochem. - 2019. - Vol. 194. - Р. 114-152.
- Doi: 10.1016 / j.jinorgbio.2019.02.003.
7. Antioxidative vs cytotoxic activities of organotin complexes bearing 2,6-di-tert-butylphenol moieties / T. A. Antonenko, D. B. Shpakovsky, M. A. Vorobyov [et al.] // Appl Organomet Chem. - 2018. - Vol. 32 (7). - P. e4381. - Doi:10.1002/aoc.4381.
8. Synthesis, antiradical activity and in vitro cytotoxicity of novel organotin complexes based on 2,6-di-tert-butyl-4-mercaptophenol / D. B. Shpakovsky, C. N. Banti, E. M. Mukhatova [et al.] // Dalton Trans. - 2014. - Vol. 43 (18). - Р. 6880-90.
- Doi: 10.1039 / c3dt53469c.
9. Some insight into the mode of cytotoxic action of organotin compounds with protective 2,6-di-tert-butylphenol fragments / E. R. Milaeva, D. B. Shpakovsky, Y. A. Gracheva [et al.] // J Organomet Chem. - 2015. - Vol. 782. - Р. 96-102. - Doi:10.1016/j. jorganchem.2014.12.013.
10. Milaeva, E. R. Hybrid metal complexes with opposed biological modes of action - promising selective drug candidates / E. R. Milaeva, V. Yu. Tyurin // Pure and Applied Chemistry. - 2017. - Vol. 89 (8). - Р. 1065-1088. - Doi:10.1515/pac-2016-1130.
11. Novel selective anticancer agents based on Sn and Au complexes. Mini-review / E. R. Milaeva, D. B. Shpakovsky, Yu A. Gracheva [et al.] // Pure and Applied Chemistry. - 2020. - Vol. 92 (8). - Р. 1201-1216. - Doi: 10.1515/pac-2019-1209.
12. Protective effect of meso-tetrakis-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxypnenyl) porphyrin on the in vivo impact of trimethyltin chloride on the antioxidative defense system / E. R. Milaeva, V. Yu. Tyurin, Y. A. Gracheva [et al.] // Bioinorg Chem Appl. -2006. - Vol. 2006. - Р. 64927. - Doi: 10.1155 / BCA/ 2006/64927.
13. OECD Guideline for testing of chemicals. Acute Oral Toxicity -Fixed Dose Procedure No. 420. OECD Publishing, Paris, 2001.
14. OECD, Test No. 425: Acute Oral Toxicity: Up-and-Down Procedure. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4, OECD Publishing, Paris, 2008. - Doi:10.1787/9789264071049-en.
15. Прозоровский, В. Б. Практическое пособие по ускоренному определению средних эффективных доз и концентраций биологически активных веществ / Общество духовной и психической культуры. - Байкальск, 1994. - 46 с. [Prozorovskiy, V. B. Practical guide for the accelerated determination of the average effective doses and concentrations of biologically active substances / Obshchestvo dukhovnoy i psikhicheskoy kul'tury. -Baykal'sk, 1994. - 46 (in Russ.)].
16. Ширяев, В. И. Оловоорганические соединения как инсектоакарициды // Агрохимия. - 2010 .- № 3. - С. 83-94 [Shiryaev, V. I. Organotin compounds as insectoacaricides / Agrokhimiya. - 2010. - № 3. - Р. 83-94 (in Russ.)].
Сведения об авторах
Додохова Маргарита Авдеевна, к.м.н., доцент ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России, г. Ростов-на-Дону, Россия ORCID: 0000-0003-3104-827X. Email: dodohova@mail.ru
Сафроненко Андрей Владимирович, д.м.н., профессор
ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России,
г. Ростов-на-Дону, Россия
ORCID: 0000-0003-4625-6186
Котиева Инга Мовлиевна, д.м.н., профессор
ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России,
г. Ростов-на-Дону, Россия
ORCID: 0000-0002-2796-9466
Комарова Екатерина Федоровна, д.б.н.
ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России,
г. Ростов-на-Дону, Россия
ORCID: 0000-0002-7553-6550
Трепель Вартан Григорьевич, к.м.н.
Филиал ФГБУ ИМЦЭУАОСМП Росздравнадзора,
г. Ростов-на-Дону, Россия
ORCID: 0000-0003-0933-6363
Алхусейн-Кулягинова Маргарита Стефановна
ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России,
г. Ростов-на-Дону, Россия
ORCID: 0000-0001-5123-5289
ШпаковскийДмитрий Борисович, к.х.н.
ФГБОУ ВО МГУ имени М.В. Ломоносова,
г. Москва, Россия
ORCID: 0000-0002-7824-3382
Милаева Елена Рудольфовна, д.х.н., профессор
ФГБОУ ВО МГУ имени М.В. Ломоносова,
г. Москва, Россия
ORCID: 0000-0002-5489-3866
Information about the authors
Margarita A. Dodokhova, MD, Associate Professor
Rostov State Medical University,
Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0003-3104-827X.
Email: dodohova@mail.ru
Andrey V.Safronenko, PhD, Professor
Rostov State Medical University,
Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0003-4625-6186
Inga M. Kotieva, PhD, Professor
Rostov State Medical University,
Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0002-2796-9466
Ekaterina F. Komarova, Ph.D. in biology
Rostov State Medical University,
Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0002-7553-6550
Vartan G. Trepel Tpene^b, MD
Branch of Informational and methodological center of
expertise, accounting and analysis of medical products
circulation, Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0003-0933-6363
Margarita S. Alkhuseyn-Kulyaginova
Rostov State Medical University,
Rostov-on-Don, Russia
ORCID: 0000-0001-5123-5289
Dmitrij B. Shpakovskiy, Candidate of Chemical Sciences M.V. Lomonosov Moscow State University, M oscow, Russia
ORCID: 0000-0002-7824-3382
Elena R. Milaeva, Ph.D. in chemistry, Professor
M.V. Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia
ORCID: 0000-0002-5489-3866
