CC BY
53
УДК 615.076.9 Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
профилактики гипертонической болезни как на популяционном, так и на индивидуальном уровне можно избрать тактику повышения грамотности пациентов с артериальной гипертензией в плане здорового образа жизни, профилактики и лечения своего заболевания с использованием современных организационных технологий, например «Школы больных гипертонической болезнью». Такого рода «школа» была создана на базе 45-й поликлиники СКВО в 2003 г., определены ее основные задачи, разработаны программы и методика обучения пациентов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Брянцев В. И., Волков В. С., Кудрич Л. А. и др. Способ экспертной оценки физического развития подростков призывного возраста. - Патент России № 2145793. - 2000.
2. Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (третий пересмотр) // Кардиоваскул. терапия и профилактика. - 2008. - № 4. Приложение № 7 (6). - 32 с.
3. Дрейпер Н., Смит Г. Прикладной регрессионный анализ: Пер. с англ. - М.: Финансы и статистика, 1986. - Т. 1. - 366 с.
4. Кардиология: национальное руководство / Под ред. Ю. Н. Беленкова, Р. Г. Оганова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 1232 с.
5. Константинов Е. Н., Некрасова А. А., Гундаров И. А. и др. Определение порога вкусовой чувствительности к поваренной соли в популяционном исследовании // Бюл. Всесоюзного кардиологического научного центра АМН СССР. - 1983. - № 1. -С. 30-35.
6. Кушаковский М. С. Гипертоническая болезнь (эссенциаль-ная гипертензия): Причины, механизмы, клиника, лечение. - СПб, 1995. - 311 с.
7. Лютов В. В., Шанин В. Ю, Козлов К. Л. Патогенетическое обоснование способа быстрого определения высокой предрасположенности к гипертонической болезни у практически здоровых военнослужащих молодого возраста // Воен.-мед. журн. - 2005. - № 1. - С. 43-46.
8. Макарова Г. А. Спортивная медицина. - М.: Сов. спорт, 2006. - 480 с.
9. Макарова Г. А, Локтев С. А. Медицинский справочник тренера. - М.: Сов. спорт, 2006. - 587 с.
10. Цезарь А. Е. Значение некоторых факторов риска сердечнососудистых заболеваний // Воен.-мед. журн. - 2004. - № 4. - С. 76-77.
11. Carretero O. A., Oparil S. Essential Hypertension. Part I: definition and etiology // Circulation. - 2000. - Vol. 101. - P. 329.
12. Joint national committee on prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure. National high blood pressure education program. The seventh report of the Joint national committee on prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure (JNC VII) // J. A. M. A. - 2003. - Vol. 289. - P. 2560-2572.
13. Kim J.-O., Mueller Ch. W. Factor analysis: Statistical methods and practical issues. - New-York - London, 1986. - 261 p.
14. Uberla K. Faktorenanalyse. Eine systematische einfuhrung fur psychologen, mediziner, wirtschafts und Sozialwissenschaftler [Иберла К. Факторный анализ]: Пер. с нем. - М.: Статистика, 1980. - 398 с.
Поступила 30.06.2010
К. Г. ХЛЯБИЧ
ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЩЕТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВОШОКОВОГО КРОВЕЗАМЕНИТЕЛЯ НА ОСНОВЕ ОКСИЭТИЛКРАХМАЛА - ВОЛЕКАМА
ФГУ«Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов»,
Россия, 109044, г. Москва, Лавров пер., 6, тел. (495) 676-43-60. E-mail: [email protected]
В работе представлены материалы по изучению острой и подострой токсичности кровезаменителя волекама, разработанного на основе субстанции оксиэтилкрахмала.
В опытах на кроликах исследованы физические показатели, гемодинамические показатели белка, мочевины, остаточного азота, билирубина, глюкозы, кальция, трансфераз, поставлена формоловая проба, изучены показатели периферической крови и патоморфология восьми внутренних органов животных, исследовано местно-раздражающее действие препарата. Проведенные исследования не выявили общетоксического действия волекама.
Ключевые слова: волекам, декстран, оксиэтилкрахмал, гематология, морфология.
K. G. KHLJABICH
THE EXPERIMENTAL STUDY OF COMMON TOXIC ACTION OF PLASMA SUBSTITUTE BASED ON OXYEATHYLSTARCH - VOLECAM
FSI Federal institute of blood substitutes and pharmaceuticals,
Russia, 109044, Moscow, Lavrov per., 6, tel. (495) 676-43-60. E-mail: [email protected]
Toxicity of the plasma substitute volecam made from substance of oxyeathylstarch was studied. In experiments on rabbits was studied physical parameters, heamodinamic parameters of protein, urea, residue of nitrogen, bilirubin, glucose, calcium, transferase, made formalin test, studied parameters of periphery blood and pathomorthology of eight intestinal organs of animals, irritation caused by remeady. The experiments didn’t reveal common toxic action of plasma substitute volecam.
Key words: volecam, gextran, oxisiatilstarch, genatologie, morphologie.
Введение
Впервые противошоковый препарат на основе де-кстрана был разработан в 1944 году в Швеции Б. Ин-гельманом и А. Гронвальдом и получил название «мак-родекс». Позднее в разных странах был разработан целый ряд подобных препаратов.
Они являлись основными противошоковыми препаратами гемодинамического действия на протяжении нескольких десятилетий.
В нашей стране были также разработаны несколько аналогичных препаратов, но наибольшее распространение получили полиглюкин и реополиглюкин.
Известно, что кровезаменители на основе де-кстрана обладают высокой реактогенностью и способствуют появлению анафилактических реакций у больных.
По статистике, при инфузии полиглюкина и реопо-лиглюкина аллергические реакции отмечаются в 1,1% случаев, тяжелые осложнения - в 0,25% случаев; смертельные случаи составляют: один случай на 300 тыс. больных (К. в. Ципдв^оп а1., 1993).
В последние годы исследователями из Государственного института кровезаменителей и медицинских препаратов был разработан препарат декстран-1000, блокирующий рецепторы зон, стимулирующих выработку антител к декстранам, и тем самым предупреждающий развитие анафилактических реакций у больных.
Однако декстран-1000 вводится больному непосредственно перед инфузией полиглюкина или реопо-лиглюкина в объеме 20,0 мл, что, безусловно, создает определенные сложности для больного и персонала, особенно в условиях экстремальных ситуаций.
Создавшееся в мире положение с препаратами на основе декстрана побудило исследователей к поиску оптимальной субстанции с низкой анафилактоген-ностью, но обладающей высоким гемодинамическим действием. Такая субстанция была найдена: амилопектиновый оксиэтилкрахмал (ОЭК), близкий по составу к гликогену человека.
На основе оксиэтилкрахмала были разработаны новые препараты, такие как HAES-стерил - Германия; волекс и плазмотонин - США; 6-HES - Япония и воле-кам в России.
Волекам с ММ 170 000±30 000 Дальтон был разработан в Государственном институте кровезаменителей и медицинских препаратов; проведено исследование его общетоксического действия.
Материалы и методы
Острая токсичность изучалась в опытах на белых мышах массой 18-20 г, по 10 животных в каждой группе. Препарат вводили в течение 30 сек. в дозах от 19 до 29 мг/кг в хвостовую вену. Далее наблюдали за поведением и общим состояниям животных в течение 72 часов.
Для изучения подострой токсичности использовались кролики породы шиншилла массой 2,0-2,5 кг по 6 животных в каждой группе. Животные ежедневно однократно получали внутривенно волекам в дозах 10 мл/кг в течение 2 недель.
Влияние волекама на состояние крови изучалось следующим образом. Форменные элементы крови подсчитывали на гемоцитометре кондуктометрическом. Содержание гемоглобина определяли фотометрическим методом Г. В. Девиза и А. И. Воробьева, а концентрацию глюкозы - глюкометром типа «Сателлит». Биохимические анализы проводили с помощью диагностических наборов фирмы «Sigma». В плазме крови определяли содержание общего белка, мочевины, остаточного азота, билирубина, глюкозы, кальция, активность аланиновой и аспарагиновой аминотрансфераз, проводили формолгелевую пробу.
Для патоморфологического исследования у кроликов брали следующие органы: сердце, селезенку, печень, почки, желудок, двенадцатиперстную кишку, поджелудочную железу и легкие. Срезы окрашивали толуидиновым синим.
Кроме вышеизложенных исследований волека-ма по реакции на инстилляцию препаратов в глаза
Таблица 1
Динамика массы крови кроликов, получавших волекам в течение 2 недель (средние результаты)
Препарат Масса тела Аг А% t Р
Исходно Через 2 недели
Волекам 2286±43 2618±50 332±27 14,60±1,152 0,2860 >0,05
Биоконтроль 2256±34 2600±22 344±51 15,38±2,474
Таблица 2
Относительная масса органов кроликов, получавших волекам в течение 2 недель, г/100 г массы тела (средние результаты)
Группы животных Печень Селезенка Почки Сердце
Левая Правая
Волекам 3,608±0,158 0,056±0,007 0,317±0,011 0,319±0,014 0,332±0,026
t 0,0054 0,5423 0,2247 0,3363 0,9216
Р >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05
Биоконтроль 3,613±0,339 0,051 ±0,006 0,321±0,014 0,324±0,005 0,370±0,032
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
кроликов оценивалось его местно-раздражающее действие.
Кроликам массой 3,0-3,5 кг закапывали в конъюнктивальный мешок правого глаза по 1-2 капли воле-кама. В левый глаз закапывали физиологический раствор (контроль). Наблюдали за состоянием слизистых оболочек глаз в течение трех суток.
Результаты исследования
При изучении острой токсичности установлено: ЛД50 для мышей составило 23,57±0,64 мг/кг.
В субхроническом опыте на кроликах на протяжении всего опыта общее состояние животных, внешний вид, подвижность, отношение к корму были удовлетворительными и не различались в опытной и контрольных группах. Масса тела в обеих экспериментальных группах и в контрольной группе увеличивалась одинаково (табл. 1). Относительная масса внутренних органов у кроликов опытной группы соответствовала этому показателю у контрольных животных. Наблюдавшиеся колебания значений находились в пределах физиологической нормы (табл. 2).
Гематологические исследования показали, что исследуемый препарат при ежедневном внутривенном введении кроликам в течение 2 недель не оказывал влияния на содержание гемоглобина и форменных элементов крови (табл. 3). Исследованные показатели крови в опытных группах сопоставимы с аналогичными данными, полученными в группе биоконтроля, и находятся в пределах нормальных значений для этого вида животных.
О функциональном состоянии внутренних органов судили по биохимическим показателям крови кроликов: содержанию общего белка, альбумина, глобулинов, концентрации глюкозы, билирубина, креатини-на, результатам формогелевой пробы и активности аланиновой и аспарагиновой аминотрансфераз. Полученные результаты показывают, что колебания биохимических показателей плазмы крови у кроликов после многократного внутривенного введения опытного и контрольного препаратов находились в
одном и том же физиологическом диапазоне величин (табл. 4, 5, 6).
У контрольных групп кроликов макроскопическая картина была одинаковой. Шерстный покров не отличался и был гладким, блестящим. Кожа без изменений. При аутопсии расположение внутренних органов правильное. В брюшной и плевральных полостях свободная жидкость не отмечена. При вскрытии трахеи и бронхов просвет свободен. Легкие розового цвета, воздушные. Сердце обычных размеров, на разрезе темно-красного цвета. Желудок и двенадцатиперстная кишка с хорошо выраженными складками. Слизистая без признаков воспаления, кровоизлияний и изъязвлений. Печень на разрезе без признаков некроза, полнокровная. Почки и селезенка без признаков патологии.
Гистологическое строение сердца сохранено. Мышечные волокна имели поперечную исчерченность, равномерно окрашивалось эозином. Ядра хорошо прокрашивались толуидиновым синим. Сосуды полнокровные. Строма без признаков воспаления.
Исследование гистологических срезов печени кроликов показало, что она сохраняет балочное строение, паренхиматозные клетки равномерно окрашиваются толуидиновым синим и эозином, а ядра четко выделяются на фоне паренхимы.
На гистологических срезах почек отмечается сохранность гистологического строения коркового и мозгового слоев. Клубочки крупные, без признаков атрофии и воспаления. Эпителий извитых и прямых канальцев, а также собирательных трубочек без признаков дистрофии. Соединительно-тканная строма неотечна и не имеет клеточных инфильтратов. Кровеносные сосуды полнокровны.
Микроскопическое изучение препаратов селезенки показало, что красная пульпа представлена в основном эритроцитами и другими клеточными элементами крови. Лимфатические фолликулы не изменены, признаков фиброза не отмечено.
На препаратах желудка покровный эпителий не нарушен. Морфология главных и обкладочных кле-
Таблица 3
Показатели периферической крови кроликов, получавших волекам в течение 2 недель (средние результаты)
Группы животных Гемоглобин Эритроциты Лейкоциты
г% t Р млн/мм3 t Р тыс/мм3 t Р
Волекам 11,7 ±0,41 0,5412 >0,05 4,61±0,33 0,2170 >0,05 5,2±0,82 0,2127 >0,05
Биоконтроль 12,3 ±1,03 4,48±0,50 5,4±0,55
Таблица 4
Активность аспаратаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) в плазме крови кроликов, получавших волекам в течение 2 недель
Группы животных АсАТ, ЕД/л АлАТ,ЕД/л
ЕД t Р ЕД t Р
Волекам 13,30±1,94 0,1723 >0,05 13,75±2,71 0,6793 >0,05
Биоконтроль 12,67±3,10 10,67±3,68
Таблица 5
Содержание креатинина, глюкозы, билирубина и формогелевая проба в плазме крови кроликов, получавших волекам в течение 2 недель
Группы животных Глюкоза Мочевина Билирубин Формогелевая проба
г% t Р млн/мм t Р тыс/мм t Р
Волекам 11,7 ±0,41 0,5412 >0,05 4,61±0,33 0,2170 >0,05 5,2±0,82 0,2127 >0,05 Отриц.
Биоконтроль 12,3 ±1,03 4,48±0,50 5,4±0,55 Отриц.
Таблица 6
Уровень общего белка и белковых фракций в плазме крови кроликов, получавших волекам в течение 2 недель
Группы животных Общий белок Альбумин Глобулин Коэфф. А/Г
г% t Р г% t Р г% t Р г% t Р
Волекам 7,47±0,16 0,7966 >0,05 4,78±0,295 0,7672 >0,05 2,68±0,705 0,0962 >0,05 1,78±0,27 0,6340 >0,05
Био- контроль 7,22±0,27 4,43 ±0,348 2,78±0,764 1,59±0,13
ток свидетельствует об отсутствии дистрофических и некротических процессов. Васкуляризация не нарушена.
Ворсинки двенадцатиперстной кишки без признаков отека, десквамации эпителия. Собственная пластинка слизистой, как обычно, умеренно инфильтрирована эозинофилами, лимфацитами, плазмоцитами.
На гистологических препаратах поджелудочной железы, окрашенных толуидиновым синим и эозином, отмечается обычное строение. Островки Лан-герганса округлой и овальной формы. Признаков воспаления не обнаружено. Кровеносные сосуды полнокровные.
При микроскопическом исследовании легких отмечается сохранность строения бронхиального дерева. Структурно-функциональная единица отдела - ацинус имеет обычное строение. Артериовенозные сосуды без особенностей.
После инстилляций препарата в конъюнктивальный мешок с целью изучения местно-раздражающего действия в первые секунды отмечалось стремление кроликов закрыть глаза, появлялась незначительная гиперемия конъюнктивы и склеры глаза. Реакция исчезала через несколько минут. Через 1 час в глазах у подопытных животных уже не было никаких изменений. Дальнейшие наблюдения в течение 72 часов показали, что волекам не вызывал раздражения конъюнктивы глаз кроликов.
Обсуждение
Таким образом, приведенное исследование общетоксического действия препарата «волекам» не выявило токсического действия.
После однократного и многократного в течение 2 недель внутривенного введения препарата не наблюдалось изменений в общем состоянии и поведении животных. Волекам не вызывал отклонений гематоло-
гических и биохимических показателей крови. Морфологическое строение внутренних органов также соответствовало норме. Местно-раздражающим действием этот препарат не обладает.
ЛИТЕРАТУРА
1. Асскали Ф., Фестер Х. Гидроэкситилкрахмал из сырья различного происхождения: сопоставление фармакокинетики и фармакодинамики // Вестник интенсивной терапии. - 1998. - № 1. -С.42-50.
2. Афонин Н. И. Современные принципы инфузионно-транс-фузионной терапии острой кровопотери // Вестник службы крови России. - 2000. - № 2. - С. 13-16.
3. Бутров А. В., Цимбалов С. Г., Морозов В. И., Олийниченко И. А. Применение ИНФУКОЛА для коррекции гиповолемии в инт-раоперационном периоде // В сб. «Бескровная хирургия на пороге XXI века». - М., 2000. - С. 34-40.
4. Гольдина О. А, Горбачевский Ю. В. Преимущество современных препаратов гидроксиэтилированного крахмала в ряду плазмозамещающих инфузионных растворов // Вестник службы крови России. - 1998. - № 3. - С. 41-45.
5. Жибурт Е. Б., Чечеткин А. В., Баранова О. В. Плазмоза-менители на основе гидроксиэтилированного крахмала в клинической практике // TERRA MEDICA. - 1999. - № 1. - С. 16-18.
6. Суханов Ю. С., Персанова Л. В., Хлябич К. Г. и соавт. Пути профилактики анафилактических реакций на декстра-новые препараты // Вестник службы крови России. - 2006. -№ 2. - С. 24-25.
7. Laxenaire M. C., Gharpentier C., Feldman L. Anaphylactoid reaction to colloid plasma substitutes: incidence, risk factors, mechanisms // Ann. fr. anesth. reanim. - 1995. - V. 14. № 1. -P.142-143.
8. Ljungstrom K. G. Safety of dextran in relation to other colloids-ten years experience with hapten inhibition // Infusionsther transfusionsmed. - 1993. - V. 20. № 5. - P. 206-210.
Поступила 22.06.2010
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (121) 2010
