CC BY
21
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
47
с контролем в нейтрофильной и мононуклеарной фракциях клеток, что может свидетельствовать об активации генов иммунной системы.
Заключение. Определение уровней экспрессии FcyRIIIa и FcyRIIIß генов, а также их отношения в мононуклеарной и нейтрофильной фракциях клеток с помощью метода ОТ-ПЦР с детекцией в реальном времени является отражением активации клеток иммунной системы. Также в некоторых случаях уровень экспрессии FcyRIIIa и FcyRIIIß генов совпадает с отношением гранулярных и негранулярных клеток. Однако для подтверждения полученных результатов необходимо увеличение объема исследуемой выборки.
М.Е. Кукушкин1, Е.К. Белоглазкина1, Н.В. Зык1, А.Г. Мажуга1, Е.М. Трещалина2 ИССЛЕДОВАНИЕ IN VIVO ПОТЕНЦИАЛЬНОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ СПИРОИНДОЛИНОНОВОГО ФРАГМЕНТА 1МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Москва, Россия;
2ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
Введение. В настоящее время актуальной является задача поиска непептидных низкомолекулярных ингибиторов белка MDM2, который, взаимодействуя с белком р53, являющимся опухолевым супрессором, подавляет его активность. В недавних исследованиях установлено, что соединения, содержащие в своей структуре спироиндолино-новое ядро, способны эффективно блокировать белок-белковое взаимодействие р53-MDM2. В нашей лаборатории разработан подход к синтезу соединений, в структуре которых имеется жесткий каркас из трех спи-ро-сочлененных гетероциклов, основой которого является спироиндолиноновое ядро, или, иначе говоря, были получены диспироиндолиноны с весьма ограниченной конфор-мационной подвижностью за счет 2 спироузлов. Таким образом, синтезирована и протестирована in vitro большая выборка соединений и определено соединение-лидер, которое исследовалось in vivo на модели мышиного лимфо-лейкоза Р-388, а также на иммунодефицитных мышах на модели колоректального рака человека HCT-116.
Цель исследования — определить максимально переносимую концентрацию при испытаниях in vivo, а также исследование ингибирующего эффекта in vivo при различных дозировках исследуемого препарата.
Материалы и методы. Структура полученного соединения-лидера однозначно подтверждена с помощью комплекса физико-химических методов (ЯМР, ИК, масс-спек-троскопия, масс-спектрометрией высокого разрешения, рентгеноструктурным анализом), а чистота подтверждена хромато-масс-спектрометрией. Биологическая активность синтезируемых соединений исследовалась стандартным МТТ-тестом на цитотоксичность на клеточных линиях LNCap, PC3, HCT-116 p53 wt и HCT p53 (-/-). Для испытаний in vivo использовались штаммы опухолей Р-388 и HCT-116.
Результаты. Определена оптимальная дозировка для испытаний in vivo в размере 1000 или 165 мг/кг в пере-
счете на действующее вещество. Торможение роста опухоли на модели мышиного лимфолейкоза наблюдалось вплоть до 92 %, а на модели колоректального рака человека HCT-116—83 %. По окончании курса лечения резкого увеличения роста опухоли не наблюдалось. На модели Р-388 зафиксировано увеличение продолжительности жизни до 20 %.
Заключение. В рамках данной работы проведено исследование свойств диспиропроизводного соединения-лидера в испытаниях in vivo, определены свойства соединения и оценена перспективность дальнейших разработок в этой области.
Работа выполена при поддержке РФФИ, грант № 16-33-60166.
Н.Ю. Кульбачевская1, О.И. Коняева1, К.В. Лобанов2, М.А. Жученко2, В.М. Бухман1 РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЭНДОТОКСИНОВ ДЛЯ ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ БИОСИНТЕТИЧЕСКОГО АКАДЕЗИНА 1ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;
2ФГБУ«ГосНИИгенетика», Москва, Россия
Введение. Препарат на основе биосинтетического ака-дезина (ПБА) признан перспективным кандидатом в препараты широкого терапевтического применения. В настоящий момент он позиционируется для ряда заболеваний, при лечении которых успех терапии зависит от повышения уровня аденозина и активации АМФ-активированной про-теинкиназы. Ограничение на использование ПБА накладывает плохая биодоступность препарата, которая обусловливает необходимость его внутривенного введения. ЛАЛ-тест считается сегодня наиболее надежным и перспективным способом проверки потенциальной пироген-ности лекарственных средств.
Цель исследования — разработать методику определения содержания бактериальных эндотоксинов (БЭ) в препарате.
Задачи исследования — определить возможность проведения анализа БЭ с помощью ЛАЛ-теста и отработать способ подготовки образца с целью проведения анализа для ПБА.
Материалы и методы. Работу осуществляли с помощью прибора Endo Scan-V Version 4.0 SP3, (Charles River, США), с использованием сертифицированных стандартных картриджей, чувствительностью 5—0,05 ЕЭ/мл в соответствии с требованиями ОФС 42-0062-07. Заявленная чувствительность и качество картриджей подтверждены путем анализа стандартной воды для ЛАЛ-теста. Все разведения испытуемого препарата готовили на воде для ЛАЛ-теста. Вспомогательные материалы, используемые при подготовке и проведении опыта, не содержали бактериальных эндотоксинов в определяемых в тесте количествах и не влияли на ход реакции. Проведены анализы 10 серий ПБА.
Результаты. Расчет предельного содержания бактериальных эндотоксинов для данного препарата проведен на основании планируемой максимальной суточной дозы
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
