CC BY
71
УДК 616.314.17-002.3-08:615.831
Н. П. БЫЧКОВА
исследование in vitro бактерицидного эффекта бактериотоксической светотерапии
Кафедра стоматологии ФПК и ППС Кубанского государственного медицинского университета
Введение Материалы и методы исследования
Проблема лечения осложненного кариеса в современной стоматологии остается актуальной, несмотря на постоянно совершенствующийся инструментарий и расширяющийся с каждым годом арсенал лекарственных препаратов для обработки корневых каналов [1, 3, 4, 6, 7, 8, 13].
Перспективным направлением лечения хронических деструктивных форм периодонтита является использование лазерных технологий. Антибактериальное воздействие, зависящее от мощности источника и длины волны, является важным аспектом многофакторного воздействия лазера на биологические системы. Известно, что большие дозы лазерного излучения (мощность 2-20 Вт) обладают антибактериальным эффектом, но вызывают термическое разрушение тканей [2, 9]. Низкоэнергетическое лазерное излучение (10-30 мВт) не вызывает термического нагрева. В этом случае используются такие эффекты взаимодействия лазерного света с живыми тканями, как вазодилатация кровеносных и лимфатических сосудов, усиленное обогащение зоны воздействия кислородом [10]. Но антибактериальным действием низкоэнергетические лазеры не обладают, поскольку их излучение не приводит к гибели микроорганизмов.
Новым мощным инструментом антибактериальной терапии и профилактики гнойно-воспалительных процессов может стать разработанный метод селективного подавления патогенной микрофлоры, сенсибилизированной специальными препаратами и активируемой лазерным светом относительно небольшой (0,5-3,0 Вт) мощности [11]. Идея метода заключается в воздействии световой энергии на фотосенсибилизатор, предварительно введенный в зону гнойно-воспалительного процесса. Под действием световой энергии происходит активация фотосенсибилизатора с последующим образованием синг-лентного кислорода и свободных радикалов (вследствие митоза, кислой реакции среды, повышенной температуры), являющихся продуктами цепочки фотохимических реакций. Реакционные агенты разрушают мембрану микробной стенки, что ведет к ее гибели, устраняя причину развития гнойно-воспалительных процессов. Возникающий эффект селективного подавления лазерным излучением фотосенсибилизированной патогенной микрофлоры получил название бактериотоксического светового эффекта (БТС-терапии, или BTL - от Bacterio Toxic Light), а метод лечения - БТС-терапии [11].
Целью эксперимента явилось исследование действия излучения диодного лазера в сочетании с фотосенсибилизатором (фотолон, радахлорин) на патогенные бактерии, являющиеся возбудителями воспалительных заболеваний полости рта, а также определение оптимальной концентрации фотосенсибилизатора и параметров лазерного воздействия для достижения бактерицидного эффекта, необходимого для ликвидации воспаления.
Для экспериментального получения данных в работе были использованы фотосенсибилизаторы II поколения - производные хлорина Е6 Фотолон (АО «Белмедпрепараты», Беларусь, регистрационное удостоверение МЗ РФ П № 015948 от 17.09.2004) в форме лиофилизата для приготовления раствора для инфузий и радахлорин™ в форме 0,35%-ного сте-рильноговодногораствораи0,1%-ногогеля(ООО«РАДА-ФАРМА», Россия, регистрационное удостоверение № ЛС-001868 от 04.08.2006).
Для активации фотосенсибилизатора в исследовании использован лазерный диодный модуль «1^500-SP» с излучением на длине волны 662 нм и мощностью 2,5 Вт на волоконно-оптическом выходе. Модуль разработан и сконструирован в 2000 году И. Д. Залевским и С. Е. Гончаровым (Россия) и производится фирмами ЗАО «МИЛОН ЛАЗЕР» (г. Санкт-Петербург, регистрационное удостоверение № 29/01050603/5828-03. ТУ 9444-003-57906795-2003) и ООО «СИГМ ПЛЮС» (г. Москва, сертификат Минздрава РФ, Протокол № 4 от 13.06.1996 года, регистрационный № 29/10-679-96).
Чаще всего возбудителем воспалительных процессов в периодонте является Enterococcus faecalis -грамположительный факультативный анаэроб, что и послужило основанием для выбора этой культуры в качестве экспериментальной модели.
Первая серия эксперимента была проведена с целью изучения бактерицидной активности фотосенсибилизатора без лазерной активации. Во второй серии эксперимента была изучена бактерицидная активность только лазерного излучения диодного лазера. Третья серия опытов была посвящена собственно бактериотоксической светотерапии (БТС-терапии): изучению сочетанного воздействия фотосенсибилизатора и облучения лазером. Эффект оценивали, сравнивая число выживающих клеток бактерий в экспериментальной модели и контроле. Всего было подвергнуто соответствующей обработке 66 образцов с последующим анализом. В качестве фотосенсибилизатора был выбран фотолон, разведенный по инструкции.
Далее проводилось экспериментальное изучение влияния бактериотоксической светотерапии на модели воспаления в удаленных зубах крупного рогатого скота. В первой серии эксперимента была изучена бактерицидная активность традиционной методики эндодон-тического лечения (ЭДТА, гипохлорит). Вторая серия эксперимента была посвящена собственно бактериотоксической светотерапии с фотолоном.
Результаты эксперимента
При совместном действии фотосенсибилизатора и лазерного излучения существует прямая зависимость бактерицидного эффекта от вида фотосенсибилизатора,
Совместное воздействие на Enterococcus feacalis лазерного излучения и радахлорина в концентрации 0,35% (КОЕ/мл)
Плотность энергии, Дж/см2 Мощность излучения, Вт Лазерное излучение+радахлорин Контроль
Абс. P±m,%
100 0,4 108 100±3,5 108
0,8 108 100±3,5
1,1 107 10±10,6
200 0,4 108 100±3,5 108
0,8 108 100±3,5
1,1 108 100±3,5
300 0,4 107 10±10,6 108
0,8 108 100±3,5
1,1 107 10±10,6
Примечание: достоверность (р) различий по сравнению с контролем роста составляла р<0,0002.
Таблица 2
Совместное воздействие на Enterococcus feacalis лазерного излучения и фотолона (КОЕ/мл)
Плотность энергии, Дж/см2 Мощность излучения, Вт Лазерное излучение+фотолон Контроль
Абс. P±m,%
100 0,4 3x103 0,003±0,2 108
0,8 3x103 0,003±0,2
1,1 3x103 0,003±0,2
200 0,4 0 0 108
0,8 102 0,0001±0,04
1,1 0 0
300 0,4 0 0 108
0,8 0 0
1,1 0 0
Примечание: достоверность (р) различий по сравнению с контролем роста составляла р<0,0001.
плотности мощности, экспозиции облучения. Е^егосос-cus feacalis оказался устойчивым к воздействию БТС-терапии с радахлорином. Концентрация радахлорина
0,35% не оказала бактерицидного эффекта при всех исследуемых параметрах лазерного излучения (табл. 1). В серии экспериментов по исследованию бактерицидного эффекта БТС-терапии с фотолоном установлено, что совместное воздействие лазерного излучения с плотностью энергии 100 Дж/см2 и мощностью 0,4 Вт и фотолона приводит к снижению числа жизнеспособных клеток энтерококков в 3х104 раз. При плотности энергии
200 Дж/см2 и 300 Дж/см2 (мощность излучения 0,4; 0,8; 1,1 Вт) на чашках Петри рост отсутствует, т. е. происходит полная гибель бактерии во взвеси (табл. 2).
В серии экспериментов по исследованию бактерицидного действия традиционного способа лечения хронического периодонтита на модели воспаления в удаленных зубах крупного рогатого скота установлено, что гипохлорит натрия обладает бактерицидным действием только в отношении Enteroccocus feacalis, в то время как число КОЕ Streptococcus pyogenes до лечения и после достоверно не изменялось (табл. 3).
Число жизнеспособных клеток в канале бычьих зубов после обработки ЭДТА и гипохлоритом натрия (КОЕ/мл)
Микроорганизм ЭДТА+гипохлорит Контроль
Абс. P±m, %
Enteroccocus feacalis G G 1G8
G G 1G8
G G 1G8
Streptococcus pyogenes 1G8 100±3,5 1G8
1G8 100±3,5 1G8
1G8 100±3,5 1G8
Примечание: достоверность (р) различий по сравнению с контролем роста составляла р<0,0002.
Таблица 4
Число жизнеспособных клеток в канале бычьих зубов после БТС-терапии с фотолоном (КОЕ/мл)
Микроорганизм Плотность энергии, Дж/см2 Мощность излучения, Вт ЭДТА+гипохлорит Контроль
Enteroccocus feacalis 0,4 G 1G8
0,8 G 1G8
300 1,1 G 1G8
Streptococcus pyogenes 0,4 G 1G8
0,8 G 1G8
1,1 G 1G8
При изучении бактерицидного действия БТС-тера-пии с фотолоном на модели воспаления в удаленных зубах крупного рогатого скота при использовании импульсного режима лазерного излучения произошла полная гибель E. feacalis и S. рyogenes. Такой метод лечения зубов, инфицированных указанными микроорганизмами, привел к немедленной (сразу после соответствующего воздействия) полной ликвидации микробных агентов, вызвавших воспаление (табл. 4).
Выводы
1. В микробиологическом эксперименте in vitro бактерицидное действие на Enterococcus faecalis оказывают импульсный режим излучения диодного лазера при плотности энергии 200 Дж/см2 и 300 Дж/см2 (мощность излучения 0,4; 0,8; 1,1 Вт) и раствор фотолона, разведенный по инструкции.
2. При изучении бактерицидного действия БТС-те-рапии с фотолоном на модели воспаления в удален-
ных зубах крупного рогатого скота при использовании импульсного режима лазерного излучения произошла полная гибель E. feacalis и S. рyogenes.
Поступила 02.10.2007
ЛИТЕРАТУРА
1. Абрамова Н. Е., Леонова Е. В. Опыт повторного эндодонтического лечения зубов плохим прогнозом на успех // Эндодонтия today. 2003. Т. 3, № 1-2. С. 60-65.
2. Альтшулер Г. Б., Беликов А. В., Ерофеев А. В. и др. Экспериментальное изучение (in vitro) антибактериальных свойств излучения YAG:Nd и YAG:Cr; Tm; Ho лазеров // Новое в стоматологии. 1996. № 5. С. 29-31.
3. Боровский Е. В. Клиническая эндодонтия. М.: АО «Стоматология». 2003. 208 с.
4. Бургонский В. Г. Оптимизация эндодонтического лечения зубов с помощью внутриканального электрофореза // Современная стоматология. 2003. № 3. С. 12-15.
5. Зеленова Е. Г., Заславская М. И., Салина Е. В., Рассанов С. П. Микрофлора полости рта: норма и патология. Нижний Новгород: НГМА, 2004. 158 с.
6. Николаев Н. А., Недосенко В. Б. Алгоритмы эмпирической антибактериальной терапии в амбулаторной стоматологической практике // Институт стоматологии. 2003. № 4. С. 62-66.
7. Николишин А. К. Современная эндодонтия практического врача. Полтава, 2003. 208 с.
8. Овсепян А. П. Современная эндодонтия - компромисс безопасности и эффективности // Эндодонтия today. 2003. Т. 3, № 1-2. С. 47-50.
9. Прикладная лазерная медицина: Учебное и справочное пособие / Под ред. Х.-П. Берлиена, Г. И. Мюллера. Берлин: Центр лазерной и медицинской технологии; М.: Интерэкспорт, 1997.
10. Прохончуков А. А., Жижина Н. А., Васильев К. В. с соавт. Десятилетний опыт применения стоматологического аппарата «Оптодан» для лазерной и магнитолазерной терапии стоматологических заболеваний // Стоматология для всех. 2004. № 3. С. 16-20.
11. Рисованный С. И., Рисованная О. Н. Способ подготовки каналов зубов к пломбированию. Патент № 2240847 РФ, опубл. 27.11.04 // Бюл. изобр. 2004. № 33.
12. Рисованная О. Н. Изучениебактериотоксическойсветотерапии на патогенные возбудители воспалительных заболеваний полости рта // Кубанский научный медицинский вестник, 2004. С. 25-30.
13. Царев В. Н., Ушаков Р. В. Антимикробная терапия в стоматологии: Руководство. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. 144 с.
n. p. bychkova
BACTERICIDAL EFFECT OF BACTERIO-TOXICAL LIGHT THERAPY - VITRO STUDY
The aim of this study was to investigate the antibacterial effect of bacteriotoxical light-therapy on root canal dentine. The microbial colonisation of root canal dentine can lead to failures in conventional endodontic treatment if only an inadequate bacterial reduction is achieved through canal treatment and chemical disinfection. The new opportunities present the possibility of using bacteriotoxical light-therapy in treatment of periodontitis. The experimental ground for using bacteriotoxical light-therapy in the initiated influence model of extracted teeth of cattle is given.
Key words: dentistry, periodontitis, antibacterial treatment.
и. н. вакула, ю. ш. васянина, з. х. горбунова, и. ю. мальфина, Е. Ю. НИКИФОРОВА, М. В. шелудько
применение атипичных нейролептиков при реабилитации детей с аутизмом в рамках системного подхода
Кафедра психиатрии ФПК ППС Кубанского государственного медицинского университета, специализированная клиническая психиатрическая больница № 1
Введение
Проблема детского аутизма является одной из наиболее актуальных в области детской психиатрии. В нашей стране отсутствует концепция подхода к реабилитации детей с данным расстройством. Нам представляется, что для достижения положительных результатов в этом направлении необходим системный подход, который, в частности, подразумевает интеграцию всех заинтересованных ведомств, специалистов, а также родителей этих детей. В каждом конкретном случае приоритет остается за специалистом в конкретной области и семьей ребенка аутиста. Необходимость именно такого подхода обусловлена рядом факторов и сложившейся ситуацией в нашей стране:
• широкий спектр расстройств аутистического круга;
• сложности дифференциальной диагностики, особенно ранней;
• отсутствие данных о распространенности аутистических расстройств в детской популяции;
• практическое отсутствие учреждений для реабилитации аутичных детей;
• отсутствие рекомендаций по оптимальному сочетанию психофармакотерапии, психологической, педагогической, логопедической коррекции и работы с родителями.
В связи с этим нам хотелось бы поделиться опытом работы с данным контингентом больных во внебольничных условиях при тесной интеграции детских психиатрических ведомств с педагогическими.
На 01.01.07 в Краснодарском крае зарегистрировано 509 детей с аутизмом и синдромом аутизма до 15 лет включительно, что составляет 6,5 на 10 000 детского населения. Соотношение мальчиков и девочек - 3,4:1. У всех детей диагноз был верифицирован в условиях диспансерного отделения СКПБ № 1. 44% из общего числа составляют дети со значительным снижением интеллекта (Ю ниже 60 баллов).
В связи с выраженной социальной дезадаптацией до 95% детей-аутистов получают пенсионное пособие как инвалиды с детства. Относительно редко, по медицинским показаниям, дети обследуются и ведется подбор медикаментов
УДК 616.89-053.2:615.214.21
