CC BY
2
Было выявлено, что любая модификация оказывает положительное влияние на культивирование МСК, однако наибольшее влияние на культивируемые клетки оказывает модификация ПКЛ матриц в течение 24 часов 0,5М водным и 0,25М водно-спиртовым растворами аргинина, а для композитных матриц — ПКЛ/ПЭГ-21\1Н2 после инкубации. Это подтверждается подсчетом количества клеток после культивирования в течении 2, 4 и 24 часов. Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 20-03-00400 А.
Литература:
1. Nashchekina Y. et al. Int. J. Mol. Sci. J. 2020. V. 21. P. 6989.
2. Nashchekina Y. et al. Polymers. J. 2020. V. 12. P. 1969.
СВОЙСТВА НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫХ ПОКРЫТИЙ НА ОСНОВЕ ДИОКСИДА ТИТАНА, НАНЕСЕННЫХ МЕТОДОМ ALD
А.А. Чагаров
Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава России, Ставрополь, Россия
e-mail: megalowin188@mail.ru
Ключевые слова: имплантат, наноструктурирование, титан, поверхность
Современная стоматология, одним из решений проблемы потери зубов, предлагает дентальную имплантацию. В связи с этим возрос интерес врачей-стоматологов хирургов и ученных к техническим характеристикам дентальных имплантатов. Сплавы титана давно применяются в медицине для производства различных видов имплантатов. Это связано с биосовместимостью титана и процессом остеоинтеграции, открытым П.-И. Бранемарком в 1960-х годах
Успех остеоинтеграции зависит от ряда факторов: общесоматического состояние организма пациента, соблюдение протоколов оперативного вмешательства и, конечно от поверхности имплантата [1, 2]. Таким образом, модификация поверхности имплантатов может значительно влиять на процессы остеоинтеграции, тем самым способствовать достижению прогнозируемых результатов [3].
Цель исследования. Получение и исследование микроструктуры и шероховатости пленок диоксида титана, полученных методом ALD
Материалы и методы исследования. На 10 образцах прототипов дентальных имплантатов, изготовленных из титанового сплава ВТ6, были получены пленки диоксида титана (TiO2). Изготовлено 10 образцов с различной толщиной. Погрешность ±2 нм. Способ получения — метод плазмоактивированного атомно-слоевого осаждения (ALD). Нанесение покрытие происходило на установке TFS 200 (Beneq, Финляндия) с источником ёмкостно-связанной плазмы. Полученные покрытия исследовали с помощью микроскопов и спектрометров.
Результаты исследований. Осаждение пленок диоксида титана производилось на прототипы титановых имплантатов.
После нанесения пленки из диоксида титана проводили исследование микроструктуры и шероховатости нанесенных пленок.
Исследование элементного состава поверхностного слоя образца пленки показало, что с увеличением ее толщины, уменьшается концентрация алюминия и ванадия.
Заключение. Уменьшения массовой доли алюминия в поверхностных слоях свидетельствует об эффективности использования покрытий диоксида титана, выращиваемых методом ALD, в качестве барьерных слоев для снижения выхода примесей на поверхности титановых имплантатов и их негативного влияния на ткани живого организма.
Литература:
1. Козлова М.В., Мкртумян А.М., Базикян Э.А., Белякова А.С., Дзиковицкая Л.С. Хирургическая стоматология и челюстно-лицевая хирургия, 2019. С. 46-51.
2. Бутовский К.Г. и др. Электроплазменное напыление в производстве внутрикостных имплантатов. Саратов: Сарат. гос. техн. ун-т, 2006. С. 200.
3. Шубладзе Г.К. Медицинский алфавит 13/2014. С. 20-25.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТА ДЕЛЕЦИЙ ЗОН УСКОРЕННОГО РАЗВИТИЯ ЧЕЛОВЕКА В ЛОКУСЕ CNTN6 В РАННИХ ЭТАПАХ НЕЙРОГЕНЕЗА
А.С. Чвилёва1, А.М. Юнусова2, И.Е. Пристяжнюк2,
А.С. Рыжкова2, А.В. Смирнов2,
П.С. Белокопытова1, 2, Т.А. Шнайдер2
1 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
2 Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, Россия
e-mail: a.chvileva@g.nsu.ru
Ключевые слова: HAR, CNTN6, церебральные органоиды, нейрогенез, регуляторные элементы.
Наследственные интеллектуальные нарушения встречаются у 2-3% родившихся детей. Показано, что до 25% этих патологий связаны с вариабельностью числа копии генов. Одним из ярких примеров является ген CNTN6 [1]. Большинство описанных мутаций в гене представлены CNV крупных размеров, вызывающие нарушения умственного развития человека, однако точечная мутация была обнаружена только в одном клиническом случае.
По этой причине было выдвинуто предположение о наличии регуляторных элементов в локусе CNTN6, удаление которых может приводить к нарушениям ранних этапов нейрогенеза человека. С помощью биоинформационного анализа в данном локусе были выявлены две зоны ускоренного развития человека — HAR (Human Accelerated Regions) [2], которые могут выполнять энхан-серную функцию. Целью данной работы является исследование роли HAR в локусе CNTN6. С помощью системы редактирования генома CRISPR/Cas9 были получены линии индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с делециями районов, содержащих HAR. Полученные линии были дифференцированы в церебральные органоиды [3], для которых проведен морфологический анализ особенностей ранних этапов нейрогенеза.
Работа выполнена при поддержке РФФИ (проект № 19-29-04067 мк) и Министерства науки и высшего образования РФ (проект № 075-15-2021-1063). Культивирование линий ИПСК проводили на базе ЦКП «Коллекция плюрипотентных культур клеток человека и млекопитающих общебиологического и биомедицинского направления» ИЦиГ СО РАН. Микроскопический анализ проведен на базе ЦКП микроскопического анализа биологических объектов ИЦиГ СО РАН.
Литература:
1. Kashevarova A.A., Nazarenko L.P., Schultz-Pedersen S. et al. Mol Cytogenet. 2014. V. 7. Art. № 97.
2. Pollard K.S., Salama S.R., Lambertet N. et al. Nature. 2006. V. 443. P. 167.
3. Lancaster M.A., Renner M., Martinet C. et al. Nature. 2013. V. 501. P. 373.
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ТКАНЕИНЖЕНЕРНОГО ГИДРОГЕЛЯ ИЗ ПУПОВИНЫ ЧЕЛОВЕКА В ВОССТАНОВЛЕНИИ ВНУТРИСУСТАВНОГО ДЕФЕКТА ХРЯЩА
С.В. Чеботарев, Л.И. Калюжная, А.Л. Кудяшев
Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: sergeichebotarev90@gmail.com
Ключевые слова: тканевая инженерия, Вартонов студень, децеллюляризация, гидрогель.
Спонтанная регенерация повреждений хряща невозможна в силу анатомо-физиологических особенностей ткани, терапевтические методики восстановления дефектов малоэффективны, хирургические технологии проводятся в нескольких этапов и показывают краткосрочную эффективность. Тканеинженерные продукты из биоматериалов в настоящее время привлекают особое внимание специалистов.
В нашей лаборатории изготовлен и запатентован тка-неинженерный гидрогель из Вартонова студня. Целью исследования было показать эффективность гидрогеля из пуповины человека в восстановлении дефекта гиалинового хряща в эксперименте.
Формирование дефекта хряща мыщелка бедренной кости у 31 кролика производили фрезой диаметром и глубиной 3 мм. Животным контрольной группы (n=16), на 14, 21, 28 дни после операции внутрисуставно вводили 0,4 мл физиологического раствора, кроликам опытной группы (n=15) — 0,4 мл гидрогеля из пуповины. С помощью МРТ измеряли глубину и диаметр повреждения на 60-е и 90-е сутки наблюдения.
В группе контроля диаметр дефекта, в соответствии с явлениями вторичной альтерации, к 60-м суткам увеличивался, достигая 3,2 мм; в опытной группе составил 2,6 мм. К 90-м суткам размеры повреждения составляли 4,8 и 2,1 мм соответственно. Глубина дефектов на 60-е сутки составила 3,0 и 2,7 мм, на 90-е сутки — 2,2 и 1,7 мм в контрольной и опытной группах. Зарегистрировано достоверное уменьшение размеров дефекта у кроликов, леченных гидрогелем пуповины (р<0,05).
Разработанный нами тканеинженерный гидрогель, уже к 60-м суткам после моделирования дефектов способствует частичному уменьшению размеров дефекта хряща, а к 90-м суткам формирует гиалинопо-добную ткань.
Литература:
1. Калюжная-Земляная Л.И. и др. Способ изготовления бесклеточного гидрогеля из Вартонова студня пуповины человека для внутрисуставного применения. Патент
2. Калюжная Л.И., ХоминецВ.В., Чеботарев С.В. и др. Профилактическая и клиническая медицина.—2019.—№ 4.—С. 45-52.
СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТЕЛОЦИТОВ В ЗОНЕ ВЕНОЗНЫХ ТРОФИЧЕСКИХ ЯЗВ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ
И.А. Чекмарева1, Х.А. Абдувосидов2, 3, О.В. Паклина1
1 ФГБУ НМИЦхирургии им. А.В. Вишневского Минздрава России, Москва, Россия
2 ФГБОУ ВО Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия
3 ГБУЗ Московский клинический научный центр им. А.С. Логинова, Москва, Россия
e-mail: chia236@mail.ru
Ключевые слова: трофическая язва, телоциты, репаратив-ные процессы.
Одним из осложнений хронической венозной недостаточности (ХВН) нижних конечностей является образование трофических язв [1, 2]. Целью исследования было изучение структурно-функционального состояния тело-цитов (ТЦ) в зоне язвенного дефект.
Обследовано 36 больных, страдающих венозными трофическими язвами, из них 25 женщин и 11 мужчин. Средний возраст пациентов составил 66 ± 2,5 лет. Длительность ХВН в среднем составила 18 ± 1,7 лет, длительность трофической язвы 29 ± 3,4 месяцев.
ТЦ представляют собой особый тип интерстициаль-ных клеток, характеризующийся небольшим клеточным телом и чрезвычайно длинными (десятки-сотни мкм) и тонкими цитоплазматическими отростками (менее 100 нм) — телоподиями. Функционально ТЦ образуют трехмерную интерстициальную сеть за счет гомокле-точных и гетероклеточных взаимодействий. ТЦ обычно выстилают коллагеновые и эластичные волокна, находятся рядом с тучными клетками, фибробластами, адипоцитами, кровеносными сосудами, нервами и придаточными структурами кожи. ТЦ объединяют клетки в единую систему и обеспечивают поддержание гоме-остаза кожи.
В зоне трофических язв нарушена ауторегуля-ция воспалительных и репаративных процессов. Десинхронизация фаз воспаления и регенерации проявляется в ослаблении макрофагальной реакции, расстройстве системы микроциркуляции, нарушении межклеточных взаимодействий. Происходит формирование избыточной грануляционной ткани с развитием фиброза, процесс репарации тормозится. Большая часть капилляров была «замурована» в фиброзную ткань. Нет контактов между ТЦ и перицитами, эндотелиальными клетками, нервными волокнами. ТЦ деструктивно изменены, на что указывала цитоплазматическая вакуолизация, потеря органелл, резкое укорочение цитоплаз-матических отростков.
Заключение. Поскольку ТЦ могут участвовать в нескольких процессах, таких как механическая поддержка, нейротрансмиссия, межклеточная передача сигналов и регенерация соединительной ткани, потеря и деструкция этих клеток в зоне венозных трофических язв может иметь важные патогенетические последствия для процесса заживления.
Литература:
1. Chekmareva I., Paklina O., Abduvosidov H. et al. Chirurg — 2014. — No 5. — P. 51-58.
2. Абдувосидов Х.А., Снигоренко А.С., Чекмарева И.А. и др. Хирург. — 2015. — № 2. — С. 15-21.
