Научная статья на тему 'ИССЛЕДОВАНИЕ АЛЛЕРГИЗИРУЮЩИХ СВОЙСТВ И ИММУНОТОКСИЧНОСТИ ГОТОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА МОЗГОВОГО НЕЙРОТРОФИЧЕСКОГО ФАКТОРА ГСБ-106'

ИССЛЕДОВАНИЕ АЛЛЕРГИЗИРУЮЩИХ СВОЙСТВ И ИММУНОТОКСИЧНОСТИ ГОТОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА МОЗГОВОГО НЕЙРОТРОФИЧЕСКОГО ФАКТОРА ГСБ-106 Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
73
14
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ГОТОВАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ГСБ-106 / ФАГОЦИТОЗ / ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ / ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ / КЛЕТОЧНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ / ИММУНОТОКСИЧНОСТЬ / РЕАКЦИЯ СИСТЕМНОЙ АНАФИЛАКСИИ / ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА / РЕАКЦИЯ ВОСПАЛЕНИЯ НА КОН А / DIPEPTIDE MIMETIC OF BRAIN-DERIVED NEUROTROPHIC FACTOR GSB-106 / PHAGOCYTOSIS / CHEMILUMINESCENCE / HUMORAL IMMUNE RESPONSE / CELLULAR IMMUNE RESPONSE / IMMUNOTOXICITY / SYSTEMIC ANAPHYLAXIS / DELAYED HYPERSENSITIVITY / CONCANAVALIN A-INDUCED INFLAMMATION

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Коваленко Лариса Петровна, Коржова Ксения Витальевна, Журиков Руслан Валерьевич, Никитин Сергей Васильевич, Дурнев Андрей Дмитриевич

Проведено исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия готовой лекарственной формы препарата ГСБ-106. Исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия ГСБ-106 выполнено на самцах морских свинок альбиносов массой 250-300 г и на самцах мышей линий СВА, C57BL/6, гибридах Р1(СВЛхС57В1_/6). При оценке иммунотоксичности ГСБ-106 вводили мышам перорально 14 дней в дозах 2,2 мг/кг и 22 мг/кг, при изучении аллергенности ГСБ-106 морским свинкам альбиносам вводили препарат в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг, согласно стандартным схемам иммунизации. Результаты проведённого исследования иммунотоксичности и аллергенности ГСБ-106 позволяют заключить, что введение готовой лекарственной формы препарата ГСБ-106 в диапазоне изученных доз не оказывает иммунотоксического действия и не обладает аллергизирующими свойствами.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Коваленко Лариса Петровна, Коржова Ксения Витальевна, Журиков Руслан Валерьевич, Никитин Сергей Васильевич, Дурнев Андрей Дмитриевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

EVALUATION OF ALLERGENIC PROPERTIES AND IMMUNOTOXICITY OF DIPEPTIDE MIMETIC OF BRAIN-DERIVED NEUROTROPHIC FACTOR GSB-106

The study of allergenic properties and immunotoxic effects of the ready-to-use drug form of GSB-106 was carried out. The study of allergenic properties and immunotoxicity of GSB-106 was performed on male albino guinea pigs weighing 250-300 g and on male CBA, C57BL / 6, F1 hybrids (CBAxC57BL / 6) mice. When assessing immunotoxicity, GSB-106 was inject to mice per os for 14 days in doses of 2.2 mg / kg and 22 mg / kg. When studying the allergenicity, GSB-106 was injected to albino guinea pigs in doses of 1 mg / kg and 10 mg / kg according to standard regimens of immunization. The results of the study of the immunotoxicity and allergenicity of GSB-106 allow us to conclude that the injection of the ready-to-use drug form of GSB-106 in the range of studied doses does not have an immunotoxic effect and does not have allergenic properties.

Текст научной работы на тему «ИССЛЕДОВАНИЕ АЛЛЕРГИЗИРУЮЩИХ СВОЙСТВ И ИММУНОТОКСИЧНОСТИ ГОТОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДИПЕПТИДНОГО МИМЕТИКА МОЗГОВОГО НЕЙРОТРОФИЧЕСКОГО ФАКТОРА ГСБ-106»

ШШМГИТОЖ ксщшм

Исследование аллергизирующих свойств и иммуно-токсичности готовой лекарственной формы дипептидного миметика мозгового нейротрофического фактора ГСБ-106

Коваленко Л. П., Коржова К. В., Журиков Р. В., Никитин С. В., Дурнев А. Д.

ФГБНУ«НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Аннотация. Проведено исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия готовой лекарственной формы препарата ГСБ-106. Исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия ГСБ-106 выполнено на самцах морских свинок альбиносов массой 250-300 г и на самцах мышей линий СВА, C57BL/6, гибридах Р1(СВЛхС57В1_/6). При оценке иммунотоксичности ГСБ-106 вводили мышам перорально 14 дней в дозах 2,2 мг/кг и 22 мг/кг, при изучении аллергенности ГСБ-106 морским свинкам альбиносам вводили препарат в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг, согласно стандартным схемам иммунизации. Результаты проведённого исследования иммунотоксичности и аллергенности ГСБ-106 позволяют заключить, что введение готовой лекарственной формы препарата ГСБ-106 в диапазоне изученных доз не оказывает иммунотоксического действия и не обладает аллергизирующими свойствами.

Ключевые слова: готовая лекарственная форма ГСБ-106; фагоцитоз; хемилюминесценция; гуморальный иммунный ответ; клеточный иммунный ответ; иммунотоксичность; реакция системной анафилаксии; гиперчувствительность замедленного типа; реакция воспаления на Кон А

Для цитирования:

Коваленко Л.П., Коржова К.В., Журиков Р.В., Никитин С.В., Дурнев А.Д. Исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксичности готовой лекарственной формы дипептидного миметика мозгового нейротрофического фактора ГСБ-106 // Фармакокинетика и фармакодинамика. - 2020. -№ 1. - С. 30-33. DOI: 10.37489/2587-7836-2020-1-30-33

Evaluation of allergenic properties and immunotoxicity of dipeptide mimetic of brain-derived neurotrophic factor GSB-106

Kovalenko LP, Korzhova KV, Zhurikov RV, Nikitin CB, Durnev AD FSBI «Zakusov Institute of Pharmacology», Moscow

Abstract. The study of allergenic properties and immunotoxic effects of the ready-to-use drug form of GSB-106 was carried out. The study of allergenic properties and immunotoxicity of GSB-106 was performed on male albino guinea pigs weighing 250-300 g and on male CBA, C57BL / 6, F1 hybrids (CBAxC57BL / 6) mice. When assessing immunotoxicity, GSB-106 was inject to mice per os for 14 days in doses of 2.2 mg / kg and 22 mg / kg. When studying the allergenicity, GSB-106 was injected to albino guinea pigs in doses of 1 mg / kg and 10 mg / kg according to standard regimens of immunization. The results of the study of the immunotoxicity and allergenicity of GSB-106 allow us to conclude that the injection of the ready-to-use drug form of GSB-106 in the range of studied doses does not have an immunotoxic effect and does not have allergenic properties.

Keywords: dipeptide mimetic of brain-derived neurotrophic factor GSB-106; phagocytosis; chemiluminescence; humoral immune response; cellular immune response; immunotoxicity; systemic anaphylaxis; delayed hypersensitivity; concanavalin A-induced inflammation

For citations:

Kovalenko LP, Korzhova KV, Zhurikov RV, Nikitin CB, Durnev AD. Evaluation of allergenic properties and immunotoxicity of dipeptide mimetic of brain-derived neurotrophic factor GSB-106. Farmakokinetika i farmakodinamika. 2020;(1):30-33. DOI: 10.37489/2587-7836-2020-1-30-33

Введение

В ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» синтезирован димерный дипептидный миметик 4-й петли BDNF ГСБ-106 (гексаметилен-диамид бис(моносукцинил-серил-лизина). ГСБ-106 обладает нейропротективной активностью и создан для лечения нейродегенеративных и психических заболеваний, включая депрессию, биполярные расстройства и шизофрению [1].

Целью данной работы являлось изучение аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия готовой лекарственной форма ГСБ-106.

Материалы и методы

Исследование аллергизирующих свойств и иммунотоксического действия готовой лекарственной формы ГСБ-106 выполнено на сертифицированных лабораторных животных,180 самцах мышей линий СВА, C57BL/6, гибридах F1(CBAхС57BL/6) массой 18—20 г, 80 самцах морских свинок альбиносов массой 250—300 г, клинически здоровых особях, полученных из питомников «Столбовая» и «Андреевка».

При оценке иммунотоксичности ГСБ-106 мышам опытных групп 14 дней перорально вводили лекарственную форму препарата в дозах 2,2 мг/кг и 22 мг/кг (активного вещества), при изучении аллергенности

30

ФАРМАКОКИНЕТИКА И ФШЩИШИКА

шсшмшташ ишщшшм

ГСБ-106 морским свинкам альбиносам вводили препарат в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг, согласно стандартным схемам иммунизации. При изучении иммуноток-сичности в качестве контроля мышам контрольных групп вводили дистиллированную воду, при изучении аллергенности — воду для инъекций. Каждая группа включала 10 животных.

При изучении иммунотоксичности ГСБ-106 использовали следующие методы:

— определение массы и клеточности органов иммунной системы мышей-гибридов F1 (СВАхC57BL/6)

— оценка фагоцитарной активности перитонеаль-ных макрофагов мышей-гибридов F1 (СВАхС57БЬ/6)

— оценка активности нейтрофилов в тесте хемилю-минесценции на мышах-гибридах (СВАхC57BL/6)

— постановка реакции гиперчувствительности замедленного типа на мышах-гибридах (СВАхС57БЬ/6);

— постановка реакции гемагглютинации на мышах линии СБА и линии С57БЬ/6 [3, 4].

При оценке аллергенности ГСБ-106 проводили постановку реакции общей системной анафилаксии и активной кожной анафилаксии на морских свинках альбиносах; при изучении реакции гиперчувствительности замедленного типа морских свинок альбиносов иммунизировали ГСБ-106 в смеси с полным адъюван-том Фрейнда. Наличие псевдоаллергических реакций на готовую лекарственную форму ГСБ-106 изучали в реакции воспаления на неиммунологический активатор конканавалин А (Кон А) на мышах линии СВА [2]. Для всех показателей иммунотоксикологи-ческих исследований с нормальным распределением проводили межгрупповые сравнения по непарному ¿-критерию Стьюдента. Для множественных сравнений показателей с распределением, отличающимся от нормального, применяли непараметрический критерий Манна—Уитни, различия считали статистически значимыми прир < 0,05.

Результаты и обсуждение

При оценке иммунотоксичности ГСБ-106 выявлено, что 14-дневное пероральное введение в дозе 2,2 мг/кг мышам-гибридам F1 (СВАхС57БЬ/6) не оказывало значимого влияния на массу тимуса, селезёнки и подколенных лимфатических узлов. Введение ГСБ-106 в дозе 22 мг/кг значимо (р < 0,05) увеличивало индекс массы селезёнки в 1,8 раза по сравнению с контрольными особями, получавшими дистиллированную воду, и не влияло на индекс массы тимуса и подколенных лимфатических узлов.

Курсовое введение ГСБ-106 в дозе 2,2 мг/кг значимо (р < 0,05) увеличивало фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов в 1,6 раза по сравнению с контрольной группой, получавшей дистиллированную воду (табл. 1). 14-дневное введение ГСБ-106 в дозе 2,2 мг/кг не приводило к значимому изменению по-

Таблица 1

Влияние препарата ГСБ-106 на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов при пероральном введении в течение 14 дней

Группы, п = 10 ФИ (усл. ед.)

Контроль 3,0 ± 0,3

ГСБ-106, 2,2 мг/кг 4,8 ± 0,3**

ГСБ-106, 22 мг/кг 3,8 ± 0,1

Примечание: п — число животных; ** — р < 0,01 — достоверность различий по сравнению с контрольной группой по непарному ¿-критерию Стьюдента.

казателей хемилюминесцентного ответа нейтрофилов на опсонизированный зимозан. Введение ГСБ-106 в дозе 22 мг/кг значимо (р < 0,05) увеличивало уровень активированной зимозаном хемилюминесценции в 8,2 раза и значимо в 6,6 раза (р < 0,01) увеличивало интегральный показатель хемилюминесценции S по сравнению с контрольной группой (табл. 2).

Таблица 2

Влияние препарата ГСБ-106 на показатели хемилюминесцентного ответа нейтрофилов на зимозан при пероральном введении в течение 14 дней

Группы, п = 10 Д1, (ту) S, (ед.) / 104 ^тах

Контроль 20 (12-35) 2,9 (2,3-4,6) 949,1 ± 96,9

ГСБ-106, 2,2 мг/кг 56 (24-72) 3,4 (3,0-4,2) 925,5 ± 102,0

ГСБ-106, 22 мг/кг 163,5* (48-320) 19,0** (6,7-36,8) 1031,3 ± 45,2

Примечание: п — число животных; А1 — показатель уровня активированной хемилюминесценции; 8 — интегральный показатель хемилюминесценции; ¿тах — время достижения максимальной интенсивности ХЛ после добавления стимула. * — р < 0,05, ** — р < 0,01 — достоверность различий по сравнению с контрольной группой.

Введение препарата ГСБ-106 перорально 14 дней в дозе 22 мг/кг мышам линии СВА значимо увеличивало антителообразование по сравнению с данными контрольной группы животных. Двухнедельное пероральное введение ГСБ-106 в дозах 2,2 мг/кг и 22 мг/кг мышам гибридам Б1 (CBAхC57BL/6) в течение 14 дней не вызывало значимой стимуляции клеточного иммунитета по сравнению с контрольной группой.

Результаты проведённого исследования иммунотоксичности ГСБ-106 позволяют заключить, что введение лекарственной формы препарата ГСБ-106 в диапазоне изученных доз не оказывает иммуноток-сического действия.

При оценке аллергенности введение ГСБ-106 по стандартной схеме иммунизации в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг (активного вещества) не вызывало у морских свинок альбиносов системной реакции анафилаксии и реакции активной кожной анафилаксии. После иммунизации морских свинок препаратом ГСБ-106 в

шшмгитож ксщшм

дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг в смеси с полным адъювантом Фрейнда (ПАФ) на 21-й день опыта у всех животных опытных групп при внутрикожном введении разрешающей дозы препарата не выявлено аллергических реакций замедленного типа. Однократное пероральное введение ГСБ-106 в доза 2,2 мг/кг и 22 мг/кг мышам линии СВА не вызывало значимого уменьшения реакции воспаления на Кон А по сравнению с данными контрольной группы.

Заключение

Результаты проведённого комплексного исследования позволяют заключить, что готовая лекарственная

форма дипептидного миметика мозгового нейротрофического фактора ГСБ-106 в диапазоне изученных доз не оказывает иммунотоксического действия, не вызывает системной реакции анафилаксии, активной кожной анафилаксии, гиперчувствительности замедленного типа и псевдоаллергических реакций.

Проведённое исследование не установило данных, препятствующих клиническому испытанию готовой лекарственной формы ГСБ-106.

Исследование выполнено в рамках Федеральной целевой программы "Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу".

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Коваленко Лариса Петровна Автор, ответственный за переписку

e-mail: kovalenko.larisa@mail.ru ORCID ID: 0000-0002-2083-0832 SPIN-код: 5185-4250

д. б. н., в. н. с. лаборатории лекарственной токсикологии ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Коржова Ксения Витальевна

ORCID ID: 0000-0002-8087-4976 SPIN-код: 3831-3782 м. н. с. лаборатории лекарственной токсикологии ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Kovalenko Larisa Corresponding author

e-mail: kovalenko.larisa@mail.ru ORCID ID: 0000-0002-2083-0832 SPIN code: 5185-4250

D. Sci. in Biology, Leading Researcher of drug toxicology department FSBI «Zakusov institute of Pharmacology», Moscow

Korzhova Ksenia

ORCID ID: 0000-0002-8087-4976

SPIN code: 3831-3782

Junior researcher of laboratory of drug toxicology FSBI «Zakusov institute of Pharmacology», Moscow

Журиков Руслан Валерьевич

ORCID ID: 0000-0003-1084-690X SPIN-код: 6648-1794 м. н. с. лаборатории лекарственной токсикологии ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Zhurikov Ruslan

ORCID ID: 0000-0003-1084-690X SPIN code: 6648-1794

Junior researcher of laboratory of drug toxicology FSBI «Zakusov institute of Pharmacology», Moscow

Никитин Сергей Васильевич

ORCID ID: 0000-0001-7630-7816 к. х. н., с. н. с. отдела химии лекарственных средств ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Дурнев Андрей Дмитриевич

ORCID ID: 0000-0003-0218-8580 SPIN-код: 8426-0380

д. м. н., профессор, член-корр. РАН, зав. отдела лекарственной токсикологии, директор ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», Москва

Nikitin Sergei

ORCID ID: 0000-0001-7630-7816 PhD Chemistry, Senior research officer of the medicinal chemistry department FSBI «Zakusov institute of Pharmacology», Moscow

Durnev Andrei

ORCID ID: 0000-0003-0218-8580 SPIN code: 8426-0380

D. Sci. in Medicine, professor, corresponding member of the RAS, Head of the department of drug toxicology, Director FSBI «Zakusov institute of Pharmacology», Moscow

32

ФШШШШ И ФШЩШМШ

шсшмшташ ишщшшм

Литература / References

1. Гудашева Т.А., Логвинов И.О., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Доклады Академии наук. — 2013. — Т. 451. — № 5. — С. 577—580. [Gudasheva TA, Logvinov IO, Antipova TA, Seredenin SB. Academy of Science Reports, 2013;451(5):577-580. (In Russ).]

2. Коваленко Л.П., Федосеева В.Н., Дурнев А.Д. и др. Методические рекомендации по оценке аллергизирующих свойств лекарственных средств. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. — М.: Гриф и К; 2012,1(2), 51—63. [Kovalenko LP, Fedoseeva VN, Durnev AD, et al. Metodicheskie recomendaciipo otsenke allergiziruushchih svoistv lekarstvennih sredstv. Rukovodstvo po provedeniu doklinicheskih issledovanii lekarstvennih sredstv. Ch.1. Moscow: Grif i K; 2012, 1(2), 51-63. (In Russ).]

3. Хаитов Р.М., Иванова А.С., Коваленко Л.П. и др. Методические рекомендации по оценке иммунотоксического действия фармакологических веществ. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. — М.: Гриф и К; Metodicheskie recomendacii po otsenke immunotoksicheskogo deistviia farmakologicheskih veshchestv. Rukovodstvo po provedeniu doklinicheskih issledovanii lekarstvennih sredstv. Ch.1. Moscow: Grif i K; 2012, 1(3), 64—79. (In Russ).]

4. Хаитов Р.М., Гущин И.С., Пинегин Б.В. и др. Методические рекомендации по доклиническому изучению иммунотропной активности фармакологических веществ «Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. — М.: Гриф и К; 2012, 1(38), 626—656. [Haitov RM, Gushchin IS, Pinegin BV, et al. Metodicheskie recomendacii po doklinicheskomu izucheniiu immunotropnoi aktivnosti farmakologicheskih veshchestv. Rukovodstvo po provedeniu doklinicheskih issledovanii lekarstvennih sredstv. Ch.1. Moscow: Grif i K; 2012, 1(38), 626—656. (In Russ).]

33

ФШКОШЕТШ И ФШЩШМШ

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.