CC BY
17
Литература
1. Гречко В.В., Бодрова Л.Ф., Овчинников Д.К. Клинический случай множественной злокачественной масто-цитомы у кота (плеоморфный низкодифференцированный вариант) // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 1 (81). С. 144 - 150.
2. Патогистологическая диагностика тубулярно-солидной карциномы молочной железы у кошки / М.А. Богданова, С.Н. Хохлова, И.И. Богданов [и др.] // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2020. № 6 (86). С. 219 - 224.
3. Шульга Е.С. Внутриглазная лимфома и её проявления у мелких домашних животных // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2019. № 1 (75). С. 131 - 132.
4. Патогистологическая диагностика лейомиосарко-мы мошонки у кобеля / М.А. Богданова, С.Н. Хохлова, И.И. Богданов [и др.] // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2019. № 6(80). С. 216 - 219.
5. Морозова В.Т., Луговская С.А. Лимфатические узлы. Цитологическая диагностика. М., 2008. 70 с.
6. Нейштадт Э.Л., Маркочев А.Б. Опухоли и опухо-леподобные заболевания костей. М., 2007. 344 с.
7. Ghisleni G., Roccabianca P., Ceruti R., et al. Correlation between fine-needle aspirationcytology and histopathol-ogy in theevaluation of cutaneous and subcutaneous masses from dogs and cats // Vet. Clin.Pathol. 2006; 35(1): 24 - 30.
8. MacNeill A.L. Cytology of canine and feline cutaneous and subcutaneous lesions and lymph nodes // Top Companion Anim. Med. 2011; 26(2): 62 - 76.
9. Олисова О.Ю., Потекаев Н.С. Псевдолимфомы кожи. М., 2013. 116 с.
10. Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по им-муногистохимической диагностике опухолей человека. М., 2000. 456 с.
11. Dempsey S.M., Ewing P. J. A review of the pathophysiology, classification, and analysis of canine and feline cavitary effusions // J. Am. Anim. Hosp. Assoc. 2011; 47(1): 1 - 11.
12. Краевский Н.А., Смольянинникова А.В., Сарки-сова Д.С. Патологоанатомическая диагностика опухолей человека. М., 1993. 560 с.
13. Мяделец О.Д., Адаскевич В.П. Морфофункцио-нальная дерматология. М., 2006. 752 с.
14. Клинико-морфологическая диагностика и принципы лечения кожных болезней // М.А. Пальцев, Н.Н. Потекаев, И.А. Казанцева [и др.]. М., 2010. 512 с.
15. Родионов А.Н., Барбинов В.В., Казаков Д.В. Гистологическая диагностика лимфом кожи // Журнал дерматовенерологии и косметологи. 1997. № 1. С. 12 - 24.
16. Цветкова Г.М., Мордовцева В.В., Вавилов А.М. Патоморфология болезней кожи. М., 2003. 496 с.
17. Hirschberger J., DeNicola D.B., Hermanns W. et al. Sensitivity and specificityof cytologic evaluation in the diagnosisof neoplasia in body fluids from dogs and cats // Vet. Clin.Pathol. 1999; 28(4): 142 - 146.
18. Raskin R.E. Skin and Subcutaneous Tissues. In:Raskin R.E., Meyer D.J. Canine and Feline Cytology. A color atlas and interpretationguide. 3 ed. Elsevier, 2016.
19. Кудряшов А.А., Балабанова В.И. Патологоана-томическая диагностика болезней собак и кошек. М., 2011. 188 с.
Виктор Валентинович Гречко, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 644007, г. Омск, ул. Институтская площадь, 1, vg_1988@mail.ru
Дмитрий Константинович Овчинников, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина». Россия, 644007, г. Омск, ул. Институтская площадь, 1, biolog-ivm@mail.ru
Viktor V. Grechko, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Institutskaya square, Omsk, 644007, Russia, vg_1988@mail.ru
Dmitry K. Ovchinnikov, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin. 1, Institutskaya square, Omsk, 644007, Russia, biolog-ivm@mail.ru
-Ф-
Научная статья
УДК:619:615.371:616-084:616.981.42:636.22/.28 doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-251-255
Испытание гидроксиапатита в качестве адъюванта на лабораторных животных
Степан Юрьевич Веселовский
Саратовский государственный аграрный университет
Аннотация. В настоящее время применение инактивированных вакцин не обеспечивает достаточно продолжительного гуморального иммунного ответа, что связано с целым рядом различных факторов. С целью продления иммуногенности вакцин на организм животных рекомендуется применять различные адъюванты. В результате исследования установлено, что применение сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза с 2%-ным раствором гидроксиапатита кальция у лабораторных крыс не вызывает болевого синдрома, не оказывает токсического влияния, хорошо рассасывается и эффективно используется при подкожном депонировании. Применение сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза животных с 15%о-ным раствором гидроксиапатита кальция внутримышечно вызывает неадекватное поведение животных, интоксикацию, наблюдаются дистрофические изменения в области инокуляции препарата.
Ключевые слова: адьюванты, сплит-конъюгированная вакцина, бруцеллёз животных, гидроксиапатит кальция.
Для цитирования: Веселовский С.Ю. Испытание гидроксиапатита в качестве адьк>ванта на лабораторных животных // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. N° 6 (92). С. 251 - 255. doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-251-255.
Original article
Testing of hydroxyapatite as an adjuvant in laboratory animals
Stepan Yu. Veselovsky
Saratov State Agrarian University
Abstract. Currently, the use of inactivated vaccines does not provide a sufficiently long-lasting humoral immune response, which is associated with a number of different factors. In order to prolong the immunogenicity of vaccines on the animal organism, it is recommended to use various adjuvants. As a result of the study, it was found that the use of a split-conjugated vaccine against brucellosis with a 2 % solution of calcium hydroxyapatite in laboratory rats does not cause pain, does not have a toxic effect, is well absorbed and is effectively used for subcutaneous deposition. The use of a split-conjugated vaccine against brucellosis of animals with a 15 % solution of calcium hydroxyapatite intramuscularly causes inappropriate behavior of animals, intoxication, dystrophic changes are observed in the area of drug inoculation. Key words: adjuvants, split-conjugated vaccine, animal brucellosis, calcium hydroxyapatite.
Keywords: adjuvants, split-conjugated vaccine against brucellosis of animals, calcium hydroxyapatite, laboratory rats.
For citation: Veselovsky S.Yu. Testing of hydroxyapatite as an adjuvant in laboratory animals. Izvestia Orenburg State Agrarian University. 2021; 92(6): 251 - 255. (In Russ.). doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-251-255.
Контроль за эпизоотической ситуацией по инфекционным болезням осуществляется с применением средств специфической профилактики [1]. В состав инактивированных вакцин входят различные вещества, обладающие действием адъювантов, но имеющие различные недостатки. К таковым относят как местное реактогенное действие, так и общее токсическое действие препаратов [2, 3]. Наилучшим адъювантом до сих пор считается гидроокись алюминия, применяемая ещё с начала XX в. [4]. Отдельные адъюванты обладают выраженным местным реактогенным действием [5]. Но вышеуказанный адъювант в какой-то степени считается токсичным и, кроме того, не всегда продлевает иммунный ответ, поэтому есть смысл и необходимость создания и испытания новых адъювантов, способных пролонгировать иммунный ответ, не обладающих токсичным действием на организм животных и выраженными реактогенными свойствами [6 - 9].
Цель нашего исследования - выявление реактогенных и токсических свойств гидроок-сиапатита кальция при различных концентрациях и способах введения в организм лабораторных животных.
Материал и методы. Были сформированы две экспериментальные группы животных. В опыте использовались крысы различных половозрастных групп, период наблюдения продолжался 14 сут. с последующим патоморфологическим методом исследования [10]. Адъювант (гидроксиапатит кальция) вводили:
1) внутримышечно в составе сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза животных (15%-ный раствор гидроксиапатита кальция) - 5 гол.;
2) подкожно в составе сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза животных (2%-ный раствор гидроксиапатита кальция) - 5 гол.
Подкожно адъювант с вакциной вводили в области холки, внутримышечно - во внутреннюю поверхность бедра; предварительно место инъекции обрабатывали 70%-ным раствором спирта.
Испытания проводили на базе вивария Саратовского государственного аграрного университета имени Н.И. Вавилова.
Для оценки хронической токсичности регистрировали результаты наблюдения за экспериментальными животными два раза в день: утром и вечером в течение 14 сут. до эвтаназии. При этом учитывали проявление местной реактогенно-сти, поведенческую и двигательную активность, сохранность рефлексов по приёму корма и воды.
Получение гидроксиапатита (адъюванта) осуществлялось методом быстрого пиролиза из бедренных костей крупного рогатого скота. Подробный способ получения описан в патентной заявке № 2017110631 от 29.03.2017 г.
Для проведения эксперимента in vivo использовались порошки, полученные различными способами. В первом случае использовались сухие порошки с массой 0,75 г, полученные ротационным и ротационно-вихревым измельчением, которые представляли собой агломерат микро- и наночастиц с фракцией 0,2 - 3 мкм и максимум на кривой распределения ниже 1 мкм (рис. 1).
Приготовленную вакцину с адъювантом обрабатывали ультразвуком (УЗ) в течение 15 мин. с целью дополнительного разрушения агломерированных частиц. В обоих случаях порошки термически стерилизовали при температуре 200оС в течение 30 мин.
Рис. 1 - Порошки гидроксиапатита 0,2 - 3 мкм:
А - гранулометрический анализ; Б - электронная микроскопия
Результаты исследования. После введения адъюванта с вакциной в 15%-ной концентрации в первые часы у крыс отмечались болевые реакции. Крысы пищали, активно двигались по клетке, лезли друг на друга, сбивались в кучу или бездвижно сидели в углу. У них отмечалась вялость, снижение аппетита и слабость. Спустя 5 - 8 час. крысы успокаивались, их общее состояние стабилизировалось. Крысы вели себя не очень активно, у некоторых из них отмечались болезненность конечности и хромота опорного типа. Некоторые крысы вовсе не наступали на конечность после внутримышечной инъекции вакцины с адьювантом. Спустя сутки и через 10 сут. были зарегистрированы летальные исходы в группе опытных животных. После первых суток наблюдалось удовлетворительное общее состояние оставшихся 3 крыс, в течение 14 сут. наблюдений у них было отмечено снижение аппетита и неохотный приём воды.
После введения адъюванта с вакциной подкожно в 2%-ной концентрации никаких изменений в поведении 5 крыс в течение 14 сут. нами не зафиксировано. Крысы вели себя активно, двигались быстро по клетке, охотно принимали корм и воду.
После 14 сут. наблюдений был произведён убой крыс и проведено как визуальное, так и гистологическое исследование внутренних органов и мест введения препаратов.
Обнаружено, что при внутримышечном введении препарат не рассосался, не всасывался в кровь, а оставался в образовавшейся полости. Возникла инкапсуляция, введённая масса была отторгнута организмом. Содержимое капсулы имело жёлто-розовый оттенок. Оно было представлено как содержимым самого препарата, так и мышечными волокнами животного (рис. 2). В местах инокуляции препарата отмечались очаги некроза.
Рис. 2 - Не рассосавшийся препарат в области внутренней поверхности бедра крысы
В печени отмечали дистрофию, изменение цвета (варёная печень), увеличение объёма (рис. 3).
Рис. 3 - Изменения в печени крысы после
внутримышечного введения композиции вакцины и гидрооксиапатита
Произошло увеличение селезёнки в размере и изменение интенсивности цвета.
В то же время после подкожного введения адъюванта с вакциной в 2%-ной концентрации у лабораторных крыс не наблюдалось видимых изменений в состоянии здоровья как в первые часы после введения препарата, так и в течение всего периода наблюдения. Крысы активно передвигались, потребляли корм и воду, адекватно реагировали на внешнее раздражение (механический стук по клетке). Выраженных изменений в поведении животных не зафиксировано как в первые сутки наблюдений, так и в последующий период ухода за животными.
В результате патоморфологических исследований явно выраженных патологических изменений внутренних органов крыс не обнаружено. Отмечен тёмно-коричневый цвет печени в сравнении с цветом в обычном её состоянии, но, по нашему мнению, это связано с условиями содержания (находились в клетке с загрязнённым аммиаком воздухом) и кормления лабораторных животных.
Также было отмечено потемнение селезёнки, но острые её края свидетельствовали об отсутствии увеличения (рис. 4).
Рис. 4 - Селезёнка крысы после введения препарата
При осмотре места введения вакцины установлено отсутствие признаков местного воспаления и депонирования препарата (рис. 5).
Рис. 5 - Естественный окрас и структура мышц в месте введения препарата
Выводы
1. Применение сплит-конъюгированной вакцины против бруцеллёза животных с 15%-ным раствором гидроксиапатита кальция внутримышечно вызывает неадекватное поведение животных, интоксикацию, наблюдаются дистрофические изменения в области инокуляции препарата.
2. Подкожное применение сплит-конъюги-рованной вакцины с 2%-ным раствором гидрок-сиапатита кальция у лабораторных крыс не вызывает болевого синдрома, хорошо рассасывается и не оказывает токсического влияния.
3. Результаты экспериментальной работы свидетельствует о возможности применения ги-дроксиапатита кальция в 2%-ной концентрации в качестве адъюванта для вакцин.
Литература
1. Веселовский С.Ю., Пономарёва И.С., Гостюш-кина А.С. Эпизоотические и эпидемические аспекты бруцеллёза в условиях трансграничности // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 4 (90). С. 212 - 216.
2. Никифорова А.Н., Миронов А.Н. Вакцинопро-филактика и поиск новых адъювантов // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). 2011. № 5. С. 15 - 19.
3. Пономарёва И.С., Шамова Е.В. Динамика эпизоотической напряжённости заразной патологии в хозяйствах Оренбургской области // Современные проблемы и научное обеспечение развития животноводства: матер. Междунар. науч.-практич. конф. ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина», (г Омск, 20 апреля 2016). Омск, 2016. С. 164 - 168.
4. De Gregorio E., Tritto E., Rappuoli R. Алюминиевая адъювантность: раскрытие вековой давности. EurJIm-munol. 2008; 38: 2068 - 71.
5. Веселовский С.Ю., Частов А.А., Агольцов В.А. Изучение реактогенных и иммуногенных свойств вакцины против бруцеллёза из штамма Brucella abortus КВ 17/100, с масляным адъювантом на крупном рогатом скоте и верблюдах // Научная жизнь. 2016. № 1. С. 129 - 137.
6. Харанди А.М., Гвин Д., Олесен О.Ф. Вакцины-адъюванты: научные проблемы и стратегические
инициативы // Вакцины экспертов Rev. 2009; 8 (3): 293 - 8.
7. Структура и адсорбционные свойства промышленного адъюванта фосфата кальция / Д. Цзян, Г.С. Пре-мачандра, С. Джонстон [и др.] // Вакцины. 2004. № 23.
8. Di Pasquale A. Vaccine Adjuvants: from 1920 to 2015 and Beyond / A. Di Pasquale, S. Preiss, F. Tavares Da
Silva et al. // Vaccines (Basel). 2015. № 3 (2). С. 320 - 343.
9. Сингх М., О'Хаган Д.Т. Последние достижения в области вакцинных адъювантов. Pharm Res. 2002; 19 (6): 715 - 28.
10. Салимов В.А. Практикум по патологической анатомии животных: учеб. пособ. 2-е изд., перераб. СПб.: Издательство «Лань», 2013. 256 с.
Степан Юрьевич Веселовский, кандидат ветеринарных наук, доцент. ФГБОУ ВО «Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова». Россия, 410012, г. Саратов, Театральная площадь, 1, w527314@yandex.ru
Stepan Yu. Veselovsky, Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor. Saratov State Vavilov Agrarian
University. 1, Teatralnaya square, Saratov, 410012, Russia, w527314@yandex.ru
-♦-
Научная статья
УДК 619:611.96:636.5
doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-255-260
Морфологические аспекты роста средней бедренно-большеберцовой мышцы у кур кросса Родонит 2
Дмитрий Константинович Овчинников, Виктор Валентинович Гречко
Омский государственный аграрный университет
Аннотация. В работе описаны морфологические особенности строения средней бедренно-большеберцовой мышцы, дана функциональная характеристика. Проведены макро- и микрометрические исследования мышцы в возрастном аспекте, которые показали, что максимальных значений мышца достигает в 180-су-точном возрасте. Наиболее резкие изменения и увеличение всех морфометрических показателей приходится на возрастной отрезок от 60 до 120 суток. Длина мышцы от рождения по 360-суточный возраст увеличивается равномерно, без резких скачков. При гистологическом исследовании установлено, что мышечные волокна средней бедренно-большеберцовой мышцы крупные, имеют округлую или овальную форму, что относит её к статодинамическому типу. В 60-суточном возрасте мышечные волокна плотно прилегают друг к другу, наблюдается увеличение количества лимфатических и крупных кровеносных сосудов в мышце, ветвление которых более сложное, что говорит о повышеной функциональной нагрузке на мышцу. Крупные волокна ветвятся на более мелкие, посредством этих маленьких мышечных волокон соединяются с соседними волокнами, образуя анастомозы. В 360-суточном возрасте мышечные волокна средней бедренно-большеберцовой становятся крупнее, но максимально активный рост данной мышцы происходит в период от 60- до 120-суточного возраста.
Ключевые слова: мышцы, бедренно-большеберцовая мышца, васкуляризация, морфология, гистология, птицеводство, куры, кросс Родонит 2.
Для цитирования: Овчинников Д.К., Гречко В.В. Морфологическое аспекты роста средней бедренно-большеберцовой мышцы у кур кросса Родонит 2 // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2021. № 6 (92). С. 255 - 260. doi: 10.37670/2073-0853-2021-92-6-255-260.
Original article
Morphological aspects of the growth of the middle femoral-tibial muscle in cross-country chickens Rhodonite 2
Dmitry K. Ovchinnikov, Viktor V. Grechko,
Omsk State Agrarian University
Abstract. The paper describes the morphological features of the structure of the middle femoral-tibial muscle, gives a functional characteristic. Macro - and micrometric studies of the muscle in the age aspect were carried out, from which it can be seen that the muscle reaches its maximum indicators at 180 days of age. The most dramatic changes and increases in all morphometric indicators occur at the age interval from 60 to 120 days. The length of the muscle from the daily to 360 daily age increases evenly, without sudden jumps. When histological examination is performed on a cross-section, the muscle fibers of the middle femoral-tibial muscle are large, have a rounded or oval shape, which refers it to the statodynamic type. At the age of 60 days, the muscle fibers are tightly adjacent to each other, and the number of lymphatic and large blood vessels increases in it, the branching of which is more complex, which indicates an increased functional load on the muscle. Large fibers branch into smaller ones, through these small muscle fibers they connect with neighboring fibers, forming anastomoses. At 360 days of age, the muscle fibers of the middle femoral-tibial become larger, but the maximum active growth of this muscle occurs from 60 to 120 days of age.
