CC BY
21
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2022 - Vol. 29, № 1 - P. 63-66
УДК: 616.314.28-06:616.379-008.64:612.017.1:612.313.6 DOI: 10.24412/1609-2163-2022-1-63-66
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПЦР ДИАГНОСТИКИ У БОЛЬНЫХ С ЭНДОКРИННОЙ ПАТОЛОГИЕЙ В
ОРТОПЕДИЧЕСКОЙ СТОМАТОЛОГИИ
Н.А. ШЕВКУНОВА, Л.С. ИСАКОВА, О.В. ГОЛОВАТЕНКО
ФГБОУ ВО «Ижевская государственная медицинская академии», ул. Коммунаров, д. 281, г. Ижевск, 426034, Россия, e-mail: shevkunova.natalia@mail.ru
Аннотация. Известно, что сахарный диабет часто сопровождается заболеваниями пародонта, которые могут приводить к подвижности и необходимости удаления зубов, а пародонтальная инфекция негативно влияет на показатели гликемии. Ортопедические конструкции, являясь дополнительными ретенционными пунктами для образования зубного налета, усугубляют течение заболеваний пародонта и вызывают осложнения при зубопротезировании таких пациентов, возникает необходимость использования антибактериальной терапии направленной на пародонтопатогенные микроорганизмы. Цель исследования состояла в изучении состава пародонтопатогенной микрофлоры и ее чувствительности к антибиотикам у больных сахарным диабетом с выраженными дефектами зубных рядов методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. Материалы и методы исследования. Комплексное стоматологическое обследование 163 пациентов в возрасте от 53 до 76 лет с дефектами зубных рядов 1 и 2 классов по Кеннеди проводилось на базе Республиканской стоматологической поликлиники г. Ижевска в период с 2017 по 2020 год. Заболевания пародонта диагностированы у 109 пациентов (66,9% случаев), из которых сформирована репрезентативная выборочная совокупность - 39 больных сахарным диабетом 1 и 2 типа (22 женщин и 17 мужчин) и группа сравнения - 35 соматически сохраненных пациентов (18 женщин 17 мужчин). Исследование включало расширенное клиническое обследование с определением пародонтального индекса и лабораторное определение видового состава и чувствительности к антибиотикам анаэробов слизистой полости рта с использованием молекулярно-генетического метода -полимеразной цепной реакции с последующей обратной ДНК-гибридизацией с праймерами пародонтопатогенных бактерий. Результаты и их обсуждение. При клиническом обследовании лёгкая степень поражения пародонта диагностировалась в 2 раза чаще у больных сахарным диабетом (41,0%), чем у соматически сохраненных пациентов (22,8%), пародонтальный индекс (3,46±0,35) превышал показатели группы сравнения (2,7±0,2; р<0,05). Средняя степень наблюдалась у половины обследуемых пациентов с сахарным диабетом (51,1%), что в 4 раза больше показателей группы сравнения (11,4%; р<0,01), пародонтальный индекс был очень высокий (5,6±0,6) у больных сахарным диабетом и высокий (4,2±0,7) в группе без соматической патологии (р<0,01). При небольшом количестве пациентов с тяжёлой степенью поражения пародонта при диабете (7,9%), в группе сравнения такая степень не диагностировалась. Изучение видового состава пародонтопатогенов методом полимеразной цепной реакции - диагностики в реальном времени у пациентов с сахарным диабетом с частичным отсутствием зубов показало наличие особо агрессивных представителей с выраженным токсическим действием на ткани десны T.denticola, P.gingivalisР.intermediа, которые присутствовали значительно чаще, чем у соматически сохраненных пациентов. В отличие от группы сравнения, в которой не было выявлено каких-либо устойчивых ассоциаций пародонтопатогенов, у пациентов с сахарным диабетом они коррелировали со степенью компенсации заболевания. При определении чувствительности установлено, что пациентам с диабетом чаще требовались антибактериальные препараты широкого спектра действия. Выводы. Использование полимеразной цепной реакции является одним из диагностических критериев выбора противовоспалительной терапии при заболеваниях пародонта, осложненных дефектами зубного ряда у пациентов с эндокринной патологией, в частности сахарным диабетом.
Ключевые слова: сахарный диабет, пародонтит, дефекты зубных рядов, анализ полимеразной цепной реакции.
USE OF PCR DIAGNOSIS IN PATIENTS WITH ENDOCRINE PATHOLOGY IN ORTHOPEDIC DENTISTRY
N.A. ShEVKUNOVA, L.S. ISAKOVA, O.V. GOLOVATENKO Izhevsk State Medical Academy, st. Kommunarov, 281, Izhevsk, 426034, Russia, e-mail: shevkunova.natalia@mail.ru
Abstract. It is known that diabetes mellitus is often accompanied with periodontal diseases, which can lead to mobility and the need for tooth extraction, and periodontal infection negatively affects glycemic indicators. Orthopedic structures, being additional retention points for the formation of plaque, aggravate the course of periodontal diseases and cause complications in the dental prosthetics of such patients, while there is a need to use antibacterial therapy aimed at periodontal pathogenic microorganisms. The aim of the study was to study the composition of periodontal pathogenic microflora and its sensitivity to antibiotics of patients with diabetes mellitus with pronounced defects of the dentition by real-time PCR. Materials and methods: A comprehensive dental examination of 163 patients aged 53 to 76 years with defects in the dentition of grades 1 and 2 according to Kennedy was conducted on the basis of the Republican Dental Polyclinic of Izhevsk in the period from 2017 to 2020. Periodontal diseases were diagnosed in 109 patients (66.9% of cases), of which a representative sample was formed - 39 patients with type 1 and type 2 diabetes (22 women and 17 men) and a comparison group - 35 somatically preserved patients (18 women and 17 men). The study included an extended clinical examination with the determination of the periodontal index (PI) and laboratory determination of the species composition and antibiotic sensitivity of anaerobes of the oral mucosa using the molecular genetic method-polymerase chain reaction (PCR) followed by reverse DNA hybridization with primers of periodontal pathogenic bacteria. Results and discussion. During the clinical examination, the mild degree of periodontal lesion was diagnosed 2 times more often of patients with DM (41.0%) than in somatically preserved patients (22.8%), the periodontal index was considered high (3.46±0.35) and exceeded the indicators of the comparison group (2.7±0.2; p<0.05). The average degree of periodontal lesion was observed in half of the examined patients with DM (51.1%) and exceeded 4 times the indicators of the comparison group (11.4%; p<0.01), the periodontal index was very high (5.6±0.6) of patients with DM and high (4.2 ±0.7) in the group without somatic pathology (p<0.01). In a small number of patients with severe periodontal
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2022 - Vol. 29, № 1 - P. 63-66
disease in diabetes (7.9%), this degree was not diagnosed in the comparison group. The study of the species composition of periodontal pathogens by real-time PCR diagnostics of DM patients with partial absence of teeth showed the presence of particularly aggressive representatives with a pronounced toxic effect on the gum tissue of T. denticola, P. gingivalis and R. intermedia, which were present much more often than in somatically preserved patients. In contrast to the comparison group, in which no stable associations of periodontal pathogens were found, they correlated with the degree of disease compensation of patients with DM. When determining the sensitivity, it was found that patients with diabetes were more likely to require broad-spectrum antibacterial drugs. Conclusions. The use of polymerase chain reaction is one of the diagnostic criteria for choosing anti-inflammatory therapy for periodontal diseases complicated by dental defects of patients with endocrine pathology, in particular diabetes mellitus.
Key words: diabetes, periodontitis, dentition defects, PCR analysis.
Введение. Одним из распространенных соматических заболеваний является сахарный диабет (СД), который рассматривается как фактор риска развития тяжелых и прогрессирующих форм пародонтита, приводящих к поражению и разрушению костной ткани и потере зубодесневого прикрепления [1]. Хроническая пародонтальная инфекция может вызывать резистентность тканей к инулину и не контролируемую гликемию за счет выделения воспалительных цитокинов [7,11]. Повышение концентрации глюкозы в слюне способствует активному размножению микроорганизмов и образованию обильного над и под-десневого налета, что приводит к снижению защитных механизмов в тканях пародонта и его поражению [2]. Многочисленными исследованиями установлено, что ведущим звеном в возникновении воспалительных явлений в полости рта является резидентная облигатная анаэробная и микроаэрофильная микрофлора, особенно грамотрицательные анаэробные бактерии [5,7,8]. При СД наблюдается ухудшение и минерального обмена, что негативно отражается на состоянии зубов, костей и суставов [1]. Все это приводит к подвижности зубов, их удалению и необходимости ортопедического лечения [4].
Зубные протезы создают дополнительные ре-тенционные пункты для скопления зубного налета, вызывая активное размножение пародонтопатоген-ных микроорганизмов, которое приводит к возникновению или обострению заболеваний пародонта и требует проведения мероприятий, направленных на снятие воспалительного процесса. При составлении плана лечения необходимо учитывать индивидуальные особенности биоты полости рта, это кроме выявления клинических признаков, вызывает необходимость проведения специальных лабораторных исследований. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) - метод молекулярной биологии, позволяющий выявлять трудно определяемые пародонтопатогенные микроорганизмы путем выделения ДНК и определять чувствительность их к антибактериальным препаратам [5,6,8,12].
Установлено, что лечение заболеваний паро-донта при диабете с использованием антибиотикоте-рапии оказывает положительное влияние не только на состоянии органов полости рта, но и способствует нормализации гликогликемии [7,8].
Актуальность проведенного исследования основана на необходимости обоснования выбора лекарственного препарата, с учетом чувствительности
микроорганизмов, для проведения противовоспалительной терапии пациентам с диабетом при ортопедическом лечении.
Цель исследования - изучить состав пародон-топатогенных микроорганизмов и их чувствительности к лекарственным препаратам методом ПЦР в реальном времени у пациентов с дефектами зубного ряда, страдающих СД.
Материалы и методы исследования. Кли-нико-лабораторное наблюдение проводилось в период с 2017 по 2020 год на базе ортопедического отделения Республиканской стоматологической поликлиники г. Ижевска, оказывающей терапевтическую, ортопедическую и хирургическую стоматологическую помощь в рамках базовой программы обязательного медицинского страхования. Генеральная совокупность популяционного рандомизированного исследования обеспечивалась соблюдением принципов случайного отбора и включала 163 человека в возрасте от 53 до 76 лет с дефектами зубных рядов 1 и 2 классов по Кеннеди. Диагноз частичной вторичной адентии устанавливался на основании Протокола ведения больных с частичным отсутствием зубов [3]. При комплексном стоматологическом обследовании заболевания пародонта были выявлены у 109 респондентов (66,9% случаев) из которых была сформирована репрезентативная выборочная совокупность. В основную группу наблюдения вошли 39 пациентов с СД 1 и 2 типа (22 женщин и 17 мужчин), в группу сравнения 35 соматически сохраненных лиц (18 женщин 17 мужчин). Обе группы были сопоставимы по полу, возрасту и стоматологическому статусу. Длительность заболевания диабетом пациентов основной группы составляла 8,2±3,1 года. Степень компенсации заболевания определяли по уровню гликозиро-ванного гемоглобина, который регистрировался в HbAcl 9,04±1,73%.
Из исследования были исключены пациенты с гипертонической болезнью (27 человек), язвенной болезнью желудка и 12 перстной кишки (18), заболеваниями щитовидной железы (4), сердечно-сосудистой системы (11).
Оценка стоматологического статуса респондентов включала расширенное обследование с выяснением жалоб и анамнеза (системного, фармакологического и стоматологического). При клиническом обследовании фиксировали наличие зубных отложений, состояние слизистой оболочки полости рта, сте-
ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2022 - Т. 29, № 1 - С. 63-66 JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2022 - Vol. 29, № 1 - P. 63-66
пень подвижности зубов, данные рентгенологического исследования. Диагноз ставился на основании классификации заболеваний пародонта (1983 г.), утвержденной Российской Академией стоматологии (2001 г.).
Кроме традиционного клинического обследования регистрировали пародонтальный индекс (РГ) и определяли состав пародонтопатогенной микрофлоры полости рта молекулярно-генетическим методом - ПЦР с последующей обратной ДНК-гибридизацией с праймерами пародонтопатогенных бактерий [5,6,8]. Чувствительность к антибиотикам пяти основных «провокаторов» развития пародон-тита: Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus, Treponema denticola, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis определяли в амплификаторе ДТ-96 с помощью набора реагентов «Проба-ГС» производства ООО «НПО ДНК-Технология», Россия. Забор материала и исследование производили в «Центре новых диагностических технологий. Медицинская лаборатория» г. Ижевска. Добровольное участие пациентов в исследовании подтверждалось заполнением информированного согласия.
Полученные результаты представлены в международных единицах СИ и подвергнуты статистической обработке с помощью стандартного пакета прикладных программ «Microsoft Excel», «Statistirn 6.0». С использованием методов параметрической и непараметрической статистики была проведена проверка гипотезы о равенстве дисперсий выделенных совокупностей. Во всех случаях гипотеза была подтверждена, что дало возможность проводить дальнейший анализ. Гипотезы проверялись при уровне значимости 0,05 с помощью критериев Стьюдента (для малых выборок) и Фишера при факторном анализе.
Результаты и их обсуждение. При анализе кли-нико-рентгенологической картины больных диабетом заболевания пародонта легкой и средней степени тяжести встречались примерно с одинаковой частотой - 43,6% и 51,8%, значительно реже наблюдалась тяжёлая степень поражения пародонта - в 5,1% случаев. У соматически сохраненных пациентов паро-донтит в легкой степени диагностировался в 84,2% (р<0,01) случаев, средней - в 15,8% (р<0,01), тяжелой степени заболеваний пародонта не наблюдалось.
На ортопантомограмме наблюдался смешанный тип деструкции костной ткани с преобладанием вертикального над горизонтальным, кратерообразные и воронкообразные костные карманы.
При формировании подгрупп из числа больных диабетом в зависимости от тяжести пародонтита была установлена корреляция со степенью компенсации заболевания. В первую подгруппу вошли 17 пациентов с легкой степенью пародонтита и компенсированным диабетом (HbAcl - 6,5±1,1%), во вторую подгруппу (20 человек) - с субкомпенсированным
диабетом (HbAcl - 9,0±0,8%) при средней степени тяжести проявления заболеваний пародонта и третью подгруппу (2 человека) с тяжелым пародонтитом и субкомпенсированным диабетом (HbAcl -11,9±1,9%).
Сравнительный анализ результатов PI при диабете показал, что у пациентов с легкой степенью па-родонтита он расценивался как высокий (3,5±0,4), со средней и тяжелой - как очень высокий (5,6±0,6). Полученные показатели значительно превышали аналогичные в группах сравнения, которые составляли 1,8±0,6 (р<0,05) и 2,9±0,9 (р<0,05) соответственно.
При изучении видового состава пародонтопато-генов установлено, что у пациентов с диабетом такие микроорганизмы встречались значительно чаще, чем у соматически сохраненных лиц Так T.denticola определялась у 54,4% по сравнению с 14,9% (р<0,01), P.gin-givalis у 47,7% по сравнению с 21,2% и P.intermedia -28,2% по сравнению с 14,6% (р<0,05). A. Actinomy-cetemcommita определялась с одинаковой частотой и составляла 36,4±2,9% и 31,7±1,7% (р>0,05). Отличие наблюдалось в присутствии Bfo^thus у лиц контрольной группы (26,3%), что превышало показатели больных диабетом - 12,5% (р<0,05).
У пациентов без соматической патологии не было выявлено каких-либо устойчивых ассоциаций паро-донтопатогенов, в то время как у больных диабетом они коррелировали с уровнем гликемии. В первой подгруппе наблюдались пародонтопатогенные микроога-низмы первого порядка P.gingivalis, P.intermedia и A. Actinomycetemcomitans, образуя ди- и триформные ассоциации. Во второй подгруппе, помимо представителей первой подгруппы, в трех случаях присоединялись T.denticola и Bfo^thus, образуя пятиформную ассоциацию. В третьей подгруппе преобладали ассоциации из четырех микроорганизмов - 60,1%, но встречались ассоциации и из трех пародонтопатогенов - 33,3%. В трех-, четырех- и пятиформных ассоциациях во всех случаях обнаруживался генетический материал Staphylococcus spp. и Fusobacterium spp.
При анализе антибиотикограмм у большинства обследованных пациентов наибольшая чувствительность наблюдалась к цефотаксиму: в 92,3% случаев в группе пациентов с диабетом и в 91,7% группе соматически сохраненных лиц. На втором месте по антибактериальной активности был препарат цефтриак-сон, чувствительность к которому в группах наблюдения была одинаковой - 91,4% и 88,5%. Бензилпени-циллин - третий препарат, который в 79,9% случаев эффективно влиял на пародонтопатогенную микрофлору пациентов с диабетом и офлоксацин в 85,7% случаев у соматически здоровых респондентов. На четвертом месте клиндамицин - 79,5% и бензилпе-нициллин - 62,9% соответственно (р<0,05).
Выводы. Изучение видового состава пародонто-патогенов методом ПЦР «в реальном времени» у больных СД с частичным отсутствием зубов показало нали-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2022 - Vol. 29, № 1 - P. 63-66
чие особо агрессивных представителей с наиболее выраженным токсическим действием таких как T.denti-cola, которая присутствовала в 3 раза, P.gingivalis и Р. intermedia в 2 раза чаще, чем у соматически сохраненных респондентов и вызывало необходимость применения антибиотиков широкого спектра действия.
Использование современного диагностического метода - ПЦР в «реальном времени» является актуальным при ортопедической стоматологической реабилитации больных с эндокринной патологией, в частности с СД, так как позволяет проводить лечение с учетом индивидуальной чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам снижая риск возможных осложнений ортопедического лечения.
Литература / References
1. Аль Зоман Х. Сахарный диабет и заболевания пародонта -изучая взаимосвязь // Лечащий врач. 2014. №3. С. 6-10 / Al' Zoman H. Sakharnyy diabet i zabolevaniya parodonta - izuchaya vzaimosvyaz' [Diabetes and periodontal disease - by studying the relationship]. Lechash-chij vrach. 2014;3:6-10. Russian.
2. Богомолов М.В. Пародонтит как неспецифическое осложнение сахарного диабета. Подходы к профилактике // Эндокринология. 2011. Т. 19, №13. С. 828-831 / Bogomolov MV. Parodontit kak nespetsi-ficheskoe oslozhnenie sakharnogo diabeta. Podkhody k profilaktike [Periodontitis as a nonspecific complication of diabetes. Approaches to prevention]. EHndokrinologiya. 2011;19(13):828-31. Russian.
3. ГОСТ Р 52600.7-2008. Протокол ведения больных. Частичное отсутствие зубов (частичная.вторичная адентия). М.: Изд-во стандартов, 2008 / GOST R 52600.7-2008. M.: Izdatel'stvo standartov; 2008.
4. Жирнова А.И., Щербаков А.С., Червинец Ю.В. Клинические особенности тканей полости рта у пациентов с сахарным диабетом, проходящих ортопедическое стоматологическое лечение протезами из различных конструкционных материалов // Современные проблемы науки и образования. 2015. № 4. С. 34-37 / Zhirnova IA, Scher-bakov SA, Chervinets YuV. Klinicheskie osobennosti tkaney polosti rta u patsientov s sakharnym diabetom, prokhodyashchikh ortopedicheskoe stomatologicheskoe lechenie protezami iz razlichnykh kon-struktsionnykh materi-alov [Clinical features of the oral tissues in patients with diabetes mellitus undergoing orthopedic treatment of dental prostheses of various structural materials]. Modern problems of science and education. 2015;4:34-7. Russian.
5. Зорина О.А., Кулаков А.А., Борискина О.А. Метод ПЦР «в реальном времени» для анализа количественного и качественного соотношений микробиоценоза пародонтального кармана // Стоматология. 2011. № 3. С. 31-33 / Zorina OA, Kulakov AA, Boriskina OA. Metod
PTsR «v real'nom vremeni» dlya analiza kolichestvennogo i kachestven-nogo sootnosheniy mikrobiotsenoza parodontal'nogo karmana [PCR "real-time" for analysis of quantitative and qualitative ratios of microbi-ocenosis of gingival pocket]. Stomatologiya. 2011;3:31-3. Russian.
6. Иванюшко Т.П., Тумбинская Л.В., Донников А.Е. Исследование условно-патогенных микроорганизмов методом ПЦР в реальном времени у больных пародонтитом // Стоматология. 2011. № 5. С. 22-26 / Ivanyushko TP, Tumbinskaya LV, Donnikov AE. Issledovanie uslovno-patogennykh mikroorganizmov metodom PTsR v real'nom vremeni u bol'nykh parodontitom [The study of conditionally pathogenic microorganisms by PCR in real time in patients with periodontitis]. Stomatologiya. 2011;5:22-6. Russian.
7. Румянцева Е.В., Наумова Я.Л., Кубрушко Т.В. Стоматологическое здоровье у больных сахарным диабетом 2 типа // Успехи современного естествознания. 2014. № 6. С. 58-59 / Rumyanceva EV, Naumova YAL, Kubrushko TV. Stomatologicheskoe zdorov'e u bol'nykh sakharnym diabetom 2 tipa [Dental health in patients with diabetes mellitus type 2]. Uspekhi sovremennogo estestvoznaniya. 2014;6:58-9. Russian.
8. Тамарова Э.Р., Масагутова Н.Р. Молекулярно-генетическая характеристика микрофлоры полости рта при пародонтите // Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). С. 70-71 / Tamarova EHR, Masagutova NR. Molekulyarno-geneticheskaya kharakteristika mikroflory polosti rta pri parodontite [Molecular genetic characterization of the microflora of the oral cavity with periodontitis]. Vestnik CHelyabinskogo gosudarstvennogo universiteta. 2013;7(298):70-1. Russian.
9. Шевкунова Н.А. Использование антибактериальных препаратов при ортопедическом лечении съемными пластиночными протезами больных сахарным диабетом 2 типа на основании ПЦР диагностики // Фарматека. 2017. №6. С. 61-64 / Shevkunova NA. Ispol'zovanie antibakterial'nykh preparatov pri ortopedicheskom lechenii s"emnymi plastinochnymi protezami bol'nykh sakharnym diabetom 2 tipa na osnovanii PTsR diagnostiki [The use of antibacterial drugs in the orthopedic treatment of removable plate prostheses in patients with type 2 diabetes mellitus based on PCR diagnostics. Pharmateka. 2017;6:61-4. Russian.
10. Al Mubarak S., Rass M. A., Alsuwyed A., Al Zoman K., Al So-hail A., Sobki A. A new paradigm between mechanical scaling and root planing combined with adjunctive chemotherapy for glycated hemoglobin improvement in diabetics // Intern J Diabetes Mellitus. 2010. № 2. P. 158-164 / Al Mubarak S, Rass MA, Alsuwyed A, Al Zoman K, Al So-hail A, Sobki A. A new paradigm between mechanical scaling and root planing combined with adjunctive chemotherapy for glycated hemoglobin improvement in diabetics. Intern J Diabetes Mellitus. 2010;2:158-64.
11. Lalla E. Periodontal infections and diabetes mellitus: When will the puzzle be complete? // J Clin Periodontol. 2007. №34. С. 913-916 / Lalla E. Periodontal infections and diabetes mellitus: When will the puzzle be complete? J Clin Periodontol. 2007;34:913-6.
12. Van Winkelhoff A.J., Winkel E.G. Antibiotics in periodontics: right or wrong? // J. Periodontol. 2009. Vol. 80, N.10. P. 1555-1558 / Van Winkelhoff AJ, Winkel EG. Antibiotics in periodontics: right or wrong? J. Periodontol. 2009;80(10):1555-8.
Библиографическая ссылка:
Шевкунова Н.А., Исакова Л.С., Головатенко О.В. Использование ПЦР диагностики у больных с эндокринной патологией в ортопедической стоматологии // Вестник новых медицинских технологий. 2022. №1. С. 63-66. DOI: 10.24412/1609-2163-2022-1-63-66.
Bibliographic reference:
Shevkunova NA, Isakova LS, Golovatenko OV. Ispol'zovanie PTsR diagnostiki u bol'nykh s endokrinnoy patologiey v ortopedicheskoy stomatologii [Use of PCR diagnosis in patients with endocrine pathology in orthopedic dentistry]. Journal of New Medical Technologies. 2022;1:63-66. DOI: 10.24412/1609-2163-2022-1-63-66. Russian.
