Методы исследования
УДК 613.632 + 614.7:]:615.31:577.12/. 151-07: б 12.821-08
С. А. Арутюнян, А. Г. Акопян
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОВЕДЕНЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ РЕГУЛЯТОРОВ РОСТА РАСТЕНИЙ
Филиал ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров и пластических масс,
Ереван
Для гигиенической оценки химических соединений в последние годы применяется большой арсенал методов исследований, в том числе поведенческие реакции животных [2, 3, 6, 7].
Нами проведены экспериментальные исследования по изучению действия регуляторов роста растений па высшие отделы ЦНС с использованием методов оборонительных условных рефлексов (jumping test) [5] и угашения ориентировочной реакции на афферентные раздражители [1].
В эксперименте определяли пороги острого и хронического действия следующих препаратов: Ai (бёнзоилмуравьииая кислота), парафена (производное хлорфеноксиуксусной кислоты), ГМК-Na (натриевая соль гидразида малеиновой кислоты), алара (диметилгидразид янтарной кислоты), Mi (метиловый эфир а-нафтилуксус-ной кислоты) и КАНУ (калиевая соль а-иафтил-уксусной кислоты).
Экспериментальные данные выявили угнетение условнорефлекторной деятельности при однократном действии препаратов в наименьших из испытанных доз (на уровне 1/10—1/50 LD5o), тогда как со стороны других изученных показателей (морфологический состав периферической крови, функциональное состояние печени, отдаленные эффекты и др.) нарушений не наблюдалось.
Исследование условнорефлекторной реакции при многократном воздействии химических веществ проводили на крысах, у которых предварительно был установлен условнорефлекторный фон (100 % правильных ответов в течение 5 дней). Изучаемые препараты вводили в течение 6—8 мес согласно общепринятым требованиям [4]. Первые 2 мес опыта проводили ежедневный контроль за состоянием условнорефлекторной деятельности (животным предъявлялось по 10 сочетаний раздражителя в день), затем изучение условных рефлексов временно прекращали и возобновляли на 6—8-м месяце для определения скорости восстановления выработанных форм поведения.
Чтобы оценить продолжительность действия препаратов условные рефлексы изучались у тех же животных через 4 мес после завершения хро-
нического эксперимента. Для выявления возможных скрытых нарушений функций ЦНС применяли физиологические нагрузки с темновой адаптацией животных и воздействием световыми вспышками, что привело к глубокому и продолжительному угнетению упроченных условных рефлексов у животных, получавших препараты в дозах, превышающих пороговые.
По нашему мнению, исследования оборонительных условных рефлексов следует проводить на животных одного пола (желательно самцах) ♦ массой 180—200 г. В группе должно быть не менее 6 крыс с идентичными типологическими особенностями высшей нервной деятельности. Опыты проводили в экспериментальной камере, представляющей плексиглассовый ящик с вертикальным деревянным стержнем, прикрепленным к верхней стенке. Кам-ера приспособлена для подачи электрического подкрепления: дно выстлано металлической решеткой с расстоянием между спицами 1,5 см.
Крыс приучали к экспериментальной обстановке (камере, экспериментатору, будущему условному раздражителю) в течение 2—3 дней, после чего вырабатывался оборонительный условный рефлекс. Каждый день использовали по 10 сочетаний условного раздражителя (электрический® звонок) с безусловным (электрический ток напряжением 60—70 В) с промежутками между ними в 1—3 мин. Вначале вырабатывался совпадающий рефлекс (ток включали непосредственно после звонка), а после появления первых прыжков крыс на изолированный стержень электрическое раздражение постепенно оставалось (до 15 с). По мере выработки отставленного условного рефлекса момент прыжка на стержень постепенно приближался к моменту электрического подкрепления. После упрочения рефлекса прыжок на стержень осуществлялся непосредст-^ венно перед подкреплением. Правильными ответами считали лишь те прыжки, которые крысы совершают по истечении 15 с изолированного действия условного раздражителя. Показатели условнорефлекторной деятельности снимали через 2 и 4 ч после введения препаратов, а также на 1, 2-е и последующие сутки до восстановле-
ния исходного фона. Результаты обрабатывали статистически и представляли в виде графиков. При этом полученные данные выражали в процентах (10 правильных ответов принимали за 100%).
Другим информативным и чувствительным показателем функционального состояния ЦНС является ориентировочная реакция животных на Ф афферентные раздражители, угашеиие которой является частным случаем выработки тормозных рефлексов, а скорость угашения свидетельствует о силе внутреннего торможения и в комплексе с другими показателями может в целом охарактеризовать силу и подвижность основных нервных процессов.
Состояние ориентировочной реакции изучали на крысах, подвергшихся 6-месячному перораль-ному или 4-месячному ингаляционному воздействию препаратов. Опыты проводили в экспериментальной камере, описанной выше. В качестве афферентного раздражителя использовали электрический звонок продолжительностью 2 с, предъявляемый с промежутками в 0,5 мии. Каждый день раздражитель использовали 10 раз. Эксперименты продолжали до исчезновения проявлений ориентировочной реакции у контроль-
ных крыс. Для проверки устойчивости угаса< тельного торможения исследования продолжали еще 2 дня.
Результаты изучения влияния регуляторов роста растений на высшие отделы ЦНС позволили рекомендовать методы оборонительных условных рефлексов и угашеиия ориентировочной реакции на афферентные раздражители для применения в токсиколого-гигиенических экспериментах.
Литература
1. Арутюнян С. А., Барсельянц Г. Б. //Биол. жури Армении. — 1982. — Т. 35, № 12.— С. 958—962.
2. Красовский Г. Н. // Фармакология, химиотерапевтиче-ские средства, токсикология. — М., 1962. — Т. 5.— С. 399.
3. Красовский Г. Н„ Буденко П. Г. //Гиг. и сан.— 1981.— № 2. — С. 20—22.
4. Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов. — Киев, 1969.
5. Хелми Р. М. // Фармакол. и токсикол.— 1965. — № 2.— С. 1377.
6. Черкинский С. Н., Тугаринова В. Н. // Санитарная охрана водоемов от загрязнения промышленными сточными водами. — М., 1962. — Вып. 5. — С. 399.
7. Черкинский С. Н., Фридлянд С. А., Каган Г. 3. // Гиг. и сан.— 1974. — № 1. — С. 14—16.
Поступила 28.04/66
УДК 613.34
И. А. Русанова. В. А. Рябченко, Д. Л. Басищ М. Р. Петрановская
ПРИМЕНЕНИЕ МЕМБРАННОГО МЕТОДА ПРИ ОЦЕНКЕ КАЧЕСТВА ВОДЫ
НИИ коммунального водоснабжения и очистки воды АКХ им. К. Д. Памфилова, Москва
При оценке качества воды по бактериологическим, гидробиологическим, вирусологическим и физико-химическим показателям могут быть использованы методы, основанные на применении фильтрующих мембран. В частности, ГОСТ •"ЧвЭбЗ—73 «Вода питьевая. Методы санитарно-бактериологического анализа» предусматривает использование двух методов санитарно-бакте-риологического контроля воды: бродильного и мембранных фильтров.
Несмотря на прогрессивность мембранных методов анализа, они не нашли широкого применения в нашей стране. Причиной этого являлось отсутствие достаточного количества доступных фильтрующих мембран и фильтровального оборудования.
До 1980 г. фильтрующие мембраны производила Мытищинская экспериментальная фабрика ультрафильтров (фильтры мембранные нитро-целлюлозпые, ТУ 204-РСФСР-953—78). Невысокая производительность фабрики (5—6 млн. фильтрующих мембран в год) не могла удовлетворить потребность лабораторий коммунального хозяйства и здравоохранения (ориентировочно 200 млн. фильтрующих мембран в год). Новые
фильтрующие мембраны Владипор типа МФА-МА на ацетатцеллюлозной основе разработаны в 1980 г. в ВНИИ синтетических смол Минхим-прома СССР при участии НИИ коммунального водоснабжения и очистки воды (НИИКВОВ) Мишкилкомхоза РСФСР, НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР. Эти мембраны по размеру пор делятся на 10 номеров (см. таблицу).
Разработанные мембраны пригодны для микробиологических и ряда других анализов. Для санитарио-бактериологического контроля качества воды предназначены фильтрующие мембраны Владипор марок МФА-МА № 5—8.
Организация первого в стране промышленного производства мембран осуществлена в 1981 г. па Казанском производственном объединении «Тас-ма» им. В. В. Куйбышева (ТУ 6-05-1903—81). Более подробно о новых мембранах сообщалось ранее [1, 2].
Аппарат фильтровальный (АФ) разработан в 1984 г. НИИК.ВОВ и проектно-конструкторскнм бюро Академии коммунального хозяйства Мин-жилкомхоза РСФСР. Он представляет собой комплект оборудования, предназначенного для