CC BY
11
ников, Е.М Марьин, П.М Ляшенко // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2015 - № 3 (31) - С. 143-146
4. Lulich, J.P. Effects of hydrochlorothiazide and diet in dogs with calcium oxalate urolithiasis / J.P. Lulich, C.A.
Osborne, C. Lekcharoensuk // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 2001. - V. 218. - P. 1583-1586 5. Osborne, C.A. Analysis of 77,000 canine uroliths / C.A. Osborne, J.P. Lulich, D.J. Polzin // Vet. Clin. North. Am. - 1999. -V. 29. -P. 17-38
ПРИМЕНЕНИЕ КОММЕРЧЕСКОГО КОРМА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ УРОЛИТИАЗА КОШЕК
Воронцова О.А., Пудовкин Н.А., Салаутин В.В., Прохорова Т.М.
Резюме
В статье изложены результаты исследований по влиянию коммерческого корма при лечении мочекаменной болезни у кошек. Установлено, что заболеванию в наибольшей степени подвержены коты (72,3%), а в менее - кошки (28,7%). У котов наибольший процент встречаемости установлен в 5-10 лет (42%) и 1-5 лет (39%). У кошек самая высокая частота встречаемости заболевания определена в возрасте от 1 до 5 лет (41%), а наименьшая - от 10 до 15 лет (23%). После кормления Urinary High Dilution происходит снижение концентрации рН на 2 единицы. Также установлено снижение относительной плотности мочи, как после медикаментозного, так и комплексного лечения животных.
APPLICATION OF COMMERCIAL FOOD FOR TREATING UROLITASIS OF CATS
Vorontsova O.A., Pudovkin N.A, Salautin V.V., Prokhorova T.M.
Summary
The article presents the results of studies on the effect of commercial feed in the treatment of urolithiasis in cats. It was found that cats are the most affected (72.3%), and in lesser cases - cats (28.7%). Cats have the highest percentage of occurrence in 5-10 years (42%) and 1-5 years (39%). In cats, the highest incidence of the disease is defined at the age of 1 to 5 years (41%), and the smallest - from 10 to 15 years (23%). After feeding Urinary High Dilution, the pH concentration is reduced by 2 units. Also, a decrease in the relative density of urine, both after drug treatment and complex treatment of animals, has been established.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-235-3-25-29 УДК 619:579.843.95:576.809.33
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ 199 ДЛЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ КОНТАМИНИРОВАННОГО ВОЗБУДИТЕЛЕМ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА БИОМАТЕРИАЛА
Гайнутдинов Т.Р. - к.б.н., в.н.с. ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
Ключевые слова: питательная среда 199, транспортировка, возбудитель, диагностика, пастереллез.
Key words: nutrient medium 199, transportation, pathogen, diagnostics, pasteurellosis
До сегодняшнего дня остается сложной задача сохранения жизнеспособности микроорганизмов в период от момента взятия биоматериала до посева на
питательные среды. Проблема является актуальной для всех микробиологов мира, в том числе и отечественных, поскольку в большинстве случаев время от момента
взятия материала до начала исследования лимитировано. Так, по требованиям Международной ассоциации микробиологов, образцы для исследования должны быть переданы на исследования не позднее, чем через 2 часа после отбора. Если посев невозможен, то срок транспортировки и хранения, в зависимости от вида материала и микроба при соблюдении определенных условий, могут быть увеличены, но не более чем до суток. Одним из приемов, способствующих сохранению микрофлоры, причем не только при отсрочке посева, но и сразу же при взятии биоматериала, является применение специальных систем, содержащих транспортные питательные среды [1,4].
Большинство питательных сред не отвечают обязательным требованиям, которые и определяют пригодность среды именно как транспортной: 1 - транспортная среда, с одной стороны, должна обеспечивать сохранение жизнеспособности микроорганизма, причем не менее 8-12 часов при комнатной температуре и, 2 - в то же время, обязана предупредить или в значительной степени лимитировать размножение микроорганизмов [2,3].
В настоящее время в микробиологической практике в качестве транспортных сред используются композиции с разной степенью питательной и консервирующей ценности, в частности, буферные растворы, содержащие изотонический раствор натрия хлорида или фосфатно-буфер-ный раствор, а также консерванты - бу-ферно-глицериновый солевой раствор, 0,15%-ная пептонная вода и т.д. Анализ литературных и интернет-ресурсных данных свидетельствует о том, что в настоящее время наиболее применяемыми в качестве универсальных транспортных питательных сред являются среда Эймса и Кери-Блейра, первая предназначена для транспортировки и сохранения широкого круга бактерий, биологических субстратов, в том числе мокроты, вторая - для кишечных микроорганизмов [5].
В доступных литературных источниках нами не найдены ссылки на среды, применяемые для транспортировки биологического материала, содержащего возбу-
дителя пастереллеза крупного рогатого скота. Исходя из вышеизложенного, целью настоящих исследований явилось испытание среды 199 для транспортировки биоматериала, контаминированного возбудителем пастереллеза - Pasteurella multocida.
Материал и методы исследований. Работа выполнена в неблагополучных по пастереллезу хозяйств Пестречинского района РТ: СХПК «Надежда; СХПК «Заря»; СХПК «Совет»; ООО «Кобяково»; ООО «Тан». Объектом исследований служили 23 условно здоровых и 78 переболевших пастереллезом телят.
В качестве биологического субстрата для исследований использовали диски из фильтровальной бумаги, изготовленные при помощи канцелярского дырокола, которые помещали в пенициллино-вые флаконы и стерилизовали сухим жаром. Испытуемую в качестве транспортной питательной среды 199 разливали в стерильных условиях в серологические пробирки по 5 мл. Параллельно в качестве контроля нами была использована регламентированная транспортная питательная среда Эймса.
В условиях обследуемых хозяйств производили отбор биологического материала следующим образом: при помощи пинцета прикладывали бумажный фильтр к слизистой оболочке ротовой и носовой полостей. Увлажненные секретом диски переносили в пробирки со средой 199 и легким встряхиванием погружали их в жидкость.
Отобранные образцы хранили в условиях хозяйств при температуре 12-18°С в затемненном помещении в течение от 2-х до 3-х суток и отправляли по месту исследования.
В условиях лаборатории содержимое пробирки переносили в стерильную ступку и тщательно растирали диск до получения однородного гомогената из которого проводили посевы на питательные среды: МПА, МПБ и среду 199. Для определения вирулентных свойств выделенных пастерелл проводили биопробу на белых мышах, которым вводили 24-часовую культуру пастерелл подкожно по 0,2 мл.
Результаты исследований. Результаты проведенных исследований показали, что при посеве биологического материала со слизистой оболочки ротовой и носовой полостей от условно здоровых и переболевших телят, регистрируется рост, характерный для возбудителя пастереллеза -среда 199 после 24-часового культивирования в условиях термостата приобретала интенсивно красный цвет с осадком на дне пробирки (рисунок 1-а). В мясопептонном бульоне рост характеризовался в виде
умеренного равномерного помутнения среды с образованием слизистого осадка на дне пробирки, который при встряхивании поднимался облачком и расходился, создавая помутнение, в МПА культура образовывала сухой беловато-серый налет, прочно как бы враставшего в агар (рисунок 1 -б).
В мазках, приготовленных из указанных питательных сред, была выделена культура P. multocida.
а б
Рисунок 1 - Рост культур пастерелл из материала, доставленных в среде 199: а - среда
199; б - слева МПА, справа МПБ.
Таблица - Результаты лабораторных исследований материала на пастереллез от переболевших животных из неблагополучных хозяйств
п/п Название хозяйства Количество животных (гол) Кол-во взятых Кол-во выделенных штаммов пастерелл
образ- здоровых изо: перебол- х изо:
цов рта носа рта носа
Здоро вых Перебо л-х
1. СХПК «Надежда» 5 10 30 — 1 — 2
2. СХПК «Заря» 5 15 40 — 1 — 4
3. СХПК «Совет» 5 19 48 — — 1 4
4. ООО «Кобяково» 5 25 60 — 2 2 7
5. ООО «Тан» 3 9 24 — — 1 2
Всего 23 78 202 — 4 4 19
В посевах и мазках, приготовленных из контрольной транспортной пита-
тельной среды (среды Эймса) возбудителя пастереллеза не выделяли, что свидетель-
ствует о ее непригодности к использованию в качестве транспортной среды изучаемого возбудителя. Результаты исследования представлены в таблице.
Из данных таблицы видно, что при посеве первичного биоматериала из ротовой полости от условно здоровых телят ни в одном случае из 20 исследованных проб роста пастерелл не было выявлено, в то время как у 19 переболевших телят из СХПК «Совет» в одном случае (5,2%), из проб от 25 телят ООО «Кобяково» в 2 пробах (8,0%) и из 9 проб от телят ООО «Тан» в одном случае (11,1%) были выделены культуры пасте-релл. При исследовании материала, полученного из полости носовых ходов, рост пастерелл на питательных средах отмечался как из образцов, отобранных от условно здоровых, так и переболевших животных.
Так в 3 из 5 обследованных хозяйств (СХПК «Надежда», СХПК «Заря» и ООО «Кобяково») возбудитель пастерел-леза выявлялся в 20 и 40 % отобранных проб. При микробиологическом исследовании образцов из носовых ходов у переболевших телят возбудитель пастереллеза выделяли у 2 из 10 обследованных животных (20%), принадлежащих СХПК «Надежда», у 4 из 19 (20%) СХПК «Совет», у 7 из 25 (28%) ООО «Кобяково» и у 2 телят из 9 (22,2%) ООО «Тан». Результаты биологической пробы на белых мышах показали высокую патогенность выделенных от переболевших и здоровых животных штаммов пастерелл, независимо от места взятия биологического материала, во всех случаях введения взвеси микроорганизмов отмечалась 100%-ная гибель подопытных животных.
Заключение. В результате проведенных исследований отобрана транспортная питательная среда 199, которая обеспечивала сохранение таксономических свойств возбудителя пастереллеза в неиз-
менном виде после взятия проб от больных животных в течение 2-3 суток и транспортировки их на место назначения, увеличивая срок хранения и транспортировки в 2-3 раза по сравнению с регламентированными требованиями Международной ассоциацией микробиологов.
В этой связи испытанная среда может быть рекомендована в качестве транспортной при проведении
диагностических исследований на пастереллез.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Галынкин, В.А. Питательные среды для микробиологического контроля качества лекарственных средств и пищевых продуктов / В.А. Галынкин, Н.А. Заи-кина, В.И. Кочеровец, И.З. Курбанова -СПб.: Проспект науки, 2006. - 336с.
2. Муллакаев, О.Т. Пастереллез животных проблемы, пути их решения / О.Т. Муллакаев, Т.Р. Гайнутдинов, И.И. Идия-тов, М.В. Харитонов // Учебное-производственное пособие - Казань, 2013. - 103 с.
3. Патент 2640251 Российская Федерация, МПК С2, С12К 1/20, С120 1/14, С12Я 1/01. Способ получения питательной среды для транспортировки патологического материала, содержащего возбудитель некробактериоза животных / Т.Р. Гайнутдинов, М.В. Харитонов, А.Р. Га-раев, Р.М. Гайнутдинов; заявитель и патентообладатель Гайнутдинов Т.Р., Харитонов М.В., Гараев А.Р., Гайнутдинов Р.М. - № 2016122355/10; заявл. 06.06.2016; опубл. 27.12.2017, Бюлл. № 36.
4. Питательные среды для медицинской микробиологии - 2002 г. [Электронный ресурс] - Режим доступа http://flatik.ru/pitatelenie-sredi-dlya-medicinskoj-mikrobiologii-index-4.
5. Поляк, М.С. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии / М.С. Поляк, В.И. Сухаревич, М.Э. Сухаревич - СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2008. -352с.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ 199 ДЛЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ КОНТАМИНИРОВАННОГО ВОЗБУДИТЕЛЕМ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА БИОМАТЕРИАЛА
Гайнутдинов Т.Р.
Резюме
С учетом актуальности проблемы сохранения жизнеспособности микроорганизмов в период отбора биоматериала до посева, который строго лимитирован и не должен превышать 2 часов с момента взятия пробы, а при отсутствии возможности взятия проб, то время хранения и транспортировки не должны превышать 24 часов. Нами были проведены настоящие исследования, целью которых являлось выявить возможность применения питательной среды 199 для транспортировки возбудителя пастереллеза. Для достижения поставленной цели был проведен отбор биологического материала от 23 условно здоровых и 78 переболевших пастереллезом телят в 5 неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах Пестречинского района РТ. Взятие биоматериала осуществляли путем прикладывания при помощи пинцета дисков из фильтровальной бумаги к слизистым оболочкам носовых ходов и ротовой полости с последующим погружением их в заранее приготовленные пробирки со средой 199. Отобранные пробы хранили в условиях хозяйств при температуре 12-18°С в затемненном помещении в течение 2-3 суток и отправляли на исследования для идентификации возбудителя. Результаты микробиологических исследований показали, что при пересеве проб из транспортной среды 199 на МПА и МПБ выявлялся рост колоний, характерный для пастерелл, помутнение среды и образованием слизистого осадка на дне пробирки. Последующая биопроба на белых мышах показала 100%-ную гибель подопытных животных после заражения их взвесью выращенной культуры. Таким образом, испытуемая питательная среда (199) обеспечивает сохранение возбудителя в течение 2-3 суток при температуре 12-18°С после взятия пробы и транспортировки по месту назначения.
THE USE OF A NUTRIENT MEDIUM 199 FOR TRANSPORT OF CONTAMINATED CAUSATIVE AGENT OF PASTEURELLOSIS BIOMATERIAL
Gaynutdinov T.R.
Summary
Taking into account the urgency of the problem of maintaining the viability of microorganisms during the selection of biomaterials before sowing, which is strictly limited and should not exceed 2 hours from the moment of sampling, and in the absence of sampling, the storage and transportation time should not exceed 24 hours. We carried out the present researches which purpose was to reveal possibility of application of a nutrient medium 199 for transportation of the causative agent of pasteurellosis. To achieve this goal was carried out the sampling of biological material from 23 healthy and 78 survivors pasteurellosis calves in 5 affected with this disease farms Pestrechinsky district of Tatarstan. Taking biomaterial was carried out by applying with tweezers discs of filter paper to the mucous membranes of the nasal passages and the oral cavity, followed by immersion in pre-prepared test tubes with a medium 199. The sampled samples were stored in the conditions of farms at temperature 12-18 °C in a darkened room for 2-3 days and sent for research to identify the pathogen. The results of microbiological studies showed that the reseeding of the sample from transport medium 199 at MPA and MPB revealed growth of colonies characteristic of Pasteurella, a clouding of the environment and the formation of slimy sludge at the bottom of the tube. Subsequent bioassay on white mice showed 100% death of experimental animals after they were infected with a suspension grown culture. Thus, the tested nutrient medium (199) ensures the preservation of the pathogen for 2-3 days at a temperature 12-18°C after sampling and transport at destination.
