CC BY
32
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ♦ Эпизоотология ♦
УДК 619:578.873.31
Частота выявления генома респираторно-синцитиального вируса у крупного рогатого скота при вспышках бронхопневмоний на молочных комплексах
С.В. Котенева1, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник (koteneva-sv@mail.ru), К.В. Войтова1, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник (k-vojtova@mail.ru), Т.И. Глотова1, доктор биологических наук, профессор, заведующая лабораторией вирусологии (t-glotova@mail.ru), И.Я. Строганова2, доктор биологических наук, доцент, заведующая кафедрой эпизоотологии, микробиологии, паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы (microvse@kgau.ru), А.Г. Глотов1, доктор ветеринарных наук, профессор, заведующий лабораторией биотехнологии-диагностический центр (glotov_vet@mail.ru).
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук» (630501, Новосибирская область, Новосибирский район, Краснообск, а/я 463).
2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Красноярский государственный аграрный университет» (660049, Красноярск, пр. Мира, д. 90).
Респираторные болезни — важная причина экономического ущерба в молочном скотоводстве. Одним из этиологических агентов бронхопневмоний является респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) крупного рогатого скота (КРС), широко распространенный во всем мире. Актуальным является получение новых данных об эпизоотической ситуации по респираторно-синцитиальной инфекции в молочных животноводческих хозяйствах и о распространении вируса в органах инфицированных животных во время вспышек респираторных болезней. Цель работы. Изучение частоты выявления рибонуклеиновой кислоты (РНК) РСВ в пробах биоматериала от животных разных половозрастных групп при вспышках респираторных болезней в моноварианте и в ассоциации с бактериями семейства PаsteureUаceаe.
Материалы и методы. Исследования проведены на молочных комплексах Новосибирской и Тюменской областей, Красноярского края во время вспышек массовых респираторных болезней животных. РНК РСВ выявляли при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР). Всего исследовали 273 пробы биоматериала от животных разного возраста. Бактерии сем. PasteureUaceae выделяли и идентифицировали в соответствии с методическими указаниями по лабораторной диагностике пастереллезов животных и птиц.
Заключение. Частота выявления РНК вируса в пробах биоматериала в среднем составила 15,4 % с максимумом 45,8 % в трахеальном и бронхиальном экссудатах. Установлено, что наиболее восприимчивы к инфицированию РСВ телята в возрасте до 6 месяцев. Частота выявления РНК вируса одновременно с бактериями семейства Pas-teureUaceae составила 9,9 %. РСВ может способствовать развитию легочного пастереллеза.
Ключевые слова: респираторно-синцитиальная инфекция, крупный рогатый скот, полимеразная цепная реакция, респираторно-синцитиальный вирус, Pasteurellae multocida, Mannheimia haemolytica Сокращения: РСВ — респираторно-синцитиальный вирус, ИЭВСиДВ — Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока, КРС — крупный рогатый скот, ОТ — обратная транскрипция, ПЦР — полимеразная цепная реакция, РНК — рибонуклеиновая кислота, РСИ — респираторно-синтициальная инфекция
Введение
Респираторные болезни являются важной причиной экономического ущерба в молочном скотоводстве. Они приводят к падежу животных или снижению скорости их роста, увеличению затрат на лечение, а также диагностические и профилактические мероприятия [1...2, 5, 14, 16, 18].
Одним из этиологических агентов респираторных болезней является РСВ КРС, относящийся к семейству Paramyxoviridae, роду Pneumovirus. РСИ КРС регистрируют во всех странах мира с интенсивным типом ведения животноводства [17, 21].
Первые сообщения о данной инфекции в нашей стране относятся к 1975 году [8]. Изучению болезни и разработке средств и методов диагностики посвятили свои работы многие исследователи [3.4, 6, 7, 9, 11, 12, 22.24].
В настоящее время актуальным является выяснение эпизоотической ситуации по РСИ КРС в хозяйствах по производству молока, особенно с наличием импортированного скота и, в частности, изучение тропизма вируса к органам респираторного тракта и частоты его выделения.
Цель исследования
Изучить частоту выявления РНК РСВ в пробах биоматериала от животных разных половозрастных групп при вспышках респираторных болезней в моноварианте и в ассоциации с бактериями семейства Pasteurellaceae.
Материалы и методы
Исследования проводили на молочных комплексах во время вспышек массовых респираторных болезней животных. Для выявления РСВ КРС в пробах биоматериала использовали тест-систему на основе ПЦР для диагностики РСИ КРС, разработанную в ИЭВСиДВ: Свидетельство о Госрегистрации № ПВР-1-8.9/02499.
1. Частота выявления РСВ КРС у животных разных половозрастных групп (n=273) 1. The frequency of BRSV detection on cattle of different age and sex
Половозрастная группа животных Число исследованных проб / положительных Количество положительных проб от числа исследованных, %
Телята: от 10 дней до 1 мес от 1 мес до 6 мес 66/3 137/27 4,5 19,7
Телки 3/0 0
Нетели 5/2 40,0
Коровы 62/10 16,1
Всего 273/42 15,4
2. Результаты выявления вируса РСИ КРС посредством ПЦР в пробах биоматериала различного происхождения (n=273) 2. The results of BRSV detection in different samples from cattle by PCR
Вид биоматериала Число исследованных проб / положительных Количество положительных проб от числа исследованных, %
Легкие 171/29 17,0
Легочные лимфатические узлы 10/2 20,0
Носовые выделения 45/6 13,3
Экссудат из трахеи, бронхов, носовых синусов 24/11 45,8
Слизистая оболочка трахеи и бронхов 14/2 14,3
Бронхи 9/3 33,3
Всего 273/53 19,4
Всего исследовали 273 пробы биоматериала, в том числе 45 проб носовых выделений, 24 — трахеального и бронхиального экссудатов, 10 — лимфатических узлов, 14 — слизистой оболочки бронхов и трахеи, 180 — легких и бронхов от больных и вынужденно убитых с диагностической целью животных. Пробы биоматериала транспортировали в лабораторию в замороженном состоянии или в транспортной среде в течение не более 24 ч с момента их взятия. При невозможности доставить пробы в течение указанного срока их замораживали однократно и транспортировали в лабораторию в термосе со льдом.
Пробы органов и тканей перед исследованием растирали в отдельных фарфоровых ступках со стерильным песком, гомогенизировали и готовили 10%-е суспензии на физиологическом растворе, после чего центрифугировали при 3000-1 в течение 15 мин. Полученные суспензии исследовали в ОТ-ПЦР. Смесь переносили в пластиковые пробирки на 1,5 мл, центрифугировали при 3000-1 в течение 5 мин. Для выделения РНК использовали 100 мкл осветленного супернатанта. Густые пробы носовых выделений и экссудата разводили стерильным физиологическим раствором (примерно 1:5). Полученную суспензию тщательно перемешивали и центрифугировали при 3000-1 в течение 5 минут. Для выделения РНК использовали по 100 мкл осветленного супернатанта.
Бактерии семейства Раз1еиге11асеае выделяли и идентифицировали в соответствии с методическими указаниями по лабораторной диагностике пастереллезов животных и птиц [10].
Результаты и обсуждение
Результаты исследований представлены в таблице 1.
Нередко в группе телят в возрасте от одного до 6-ти месяцев отмечали при клиническом осмотре признаки сверхострой формы РСИ: угнетение, отказ от корма, повышение температуры тела, учащенное дыхание брюшного типа с открытым ртом и высунутым языком, опущенные вниз шею и голову, выделение обильной слюны из ротовой полости (рис. 1). При патолого-ана-томическом вскрытии у них регистрировали интерсти-циальную (рис. 2) и легочную эмфиземы (рис. 3) и разрушение паренхимы легкого (рис. 4).
Наиболее часто РНК вируса выявляли у телят в возрасте до 6 мес (19,7 %), затем у коров при наличии признаков острых респираторных заболеваний, эмфизематозных поражений легких и интерстициальной бронхопневмонии (16,1 %) и телят до 10-дневного возраста (4,5 %), что свидетельствует об их восприимчивости к инфицированию вирусом.
Таким образом, к инфицированию вирусом восприимчивы все категории животных, однако его чаще выявляли у телят до 6-месячного возраста и коров. Наличие генома вируса в пробах биоматериала от телят до 10-дневного возраста свидетельствует, по нашему мнению, о вовлечении в эпизоотический процесс этой категории животных.
Вирус также обнаруживали у нетелей (40 %). Однако незначительное число проб биоматериала от них не позволяет достоверно судить о вовлечении этой категории животных в эпизоотический процесс.
Результаты исследования частоты выявления РСВ в пробах биоматериала различного происхождения приведены в таблице 2.
Вирус чаще выявляли в пробах трахеального и бронхиального экссудатов (45,8 %), бронхов (33,3 %), легочных лимфатических узлов (20 %) и легких (17,0 %), слизистой трахеи и бронхов (14,3 %), носовых выделений (13,3 %) животных с наличием признаков острых респираторных болезней. Наиболее достоверное выявление генома вируса было при условии отбора проб биоматериала на ранних стадиях развития респираторных болезней и транспортировки их в лабораторию не дольше 24 ч с однократной заморозкой и оттаиванием, либо в контейнерах с транспортной средой в охлажденном виде.
Важный аспект патогенеза болезни — подавление неспецифических механизмов иммунной защиты респираторного тракта, а также инициация и усиление бактериальной колонизации легких после первичного размножения возбудителя [15, 19]. Вирус может вызывать бронхиты, пневмонии и эмфиземы легких самостоятельно, но главное его свойство — иммуносупрессия и формирование предрасположенности к возникновению бакте-
3. Частота выявления РСВ КРС и бактерий семейства Pasteurellaceae в пробах биоматериала от животных (n= 273) 3. The frequency of BRSV detection and bacteria Pasteurellaceae family in different samples from cattle
Вид возбудителя Число положительных проб/% выявления Новосибирская область (15 хозяйств) Тюменская область (9 хозяйств) Красноярский край (3 хозяйства)
РСВ КРС в моноварианте 40/14,7 25/9,2 14/5,1 1/0,4
Pasteurellacae: 56/20,5 31/11,3 18/6,6 7/2,6
Р. multocida M. haemolytica 25/9,2 31/11,4 21/7,7 10/3,7 4/1,5 14/5,1 7/2,6
РСВ + Pasteurellacae: Р. multocida M. haemolytica 27/9,9 9/3,3 18/6,6 5/1,8 2/0,7 3/1,1 21/7,7 6/2,2 15/5,5 1/0,4 1/0,4
Всего 123/45,1 61/22,3 53/19,4 9/3,3
С.В. Котенева, К.В. Войтова, Т.И. Глотова, И.Я. Строганова, А.Г. Глотов
Рис. 1. Клинические признаки респираторно-синцитиальной инфекции у теленка черно-пестрой породы в возрасте 4 мес (фото А.Г. Глотова) Fig. 1. Clinical signs of respiratory syncytial infection in the calf of black-mottled species at the age of 4 months (photo A.G. Glotov)
Рис. 2. Интерстициальная эмфизема (фото А.Г. Глотова)
Рис. 3. Легочная эмфизема (фото А.Г. Глотова)
Fig. 2. Interstitial emphysema (photo A.G. Glotov) Fig. 3. Pulmonary emphysema (photo A.G. Glotov)
риальных пневмоний, в частности, легочного пасте-реллеза [13, 20].
Результаты изучения частоты выявления РСВ КРС и бактерий семейства Pasteurellaceae в пробах биоматериала приведены в таблице 3. РСВ КРС в моноварианте был выявлен в 40 пробах (14,7 %) от больных животных из 27 хозяйств региона Сибири. Из них 25 проб (9,2 %) по Новосибирской области, 14 (5,1 %) по Тюменской и 1 (0,4 %) по Красноярскому краю.
Выделение культур семейства Pasteurellacae в моноварианте составило 20,5 % (56 проб), из них по Новосибирской области 11,3 % (31), Тюменской — 6,6 (18) и по Красноярскому краю — 2,6 % (7 проб). Pasteurel-lae multocida и Mannheimia haemolytica в моноварианте присутствовали в 9,2 % и 11,4 % исследованных проб биоматериала, соответственно.
Выделение трех возбудителей в одной пробе биоматериала составило 9,9 % от числа исследованных. Из них по Новосибирской области этот показатель составил 1,8 %, Тюменской — 7,7 и по Красноярскому краю — 0,4 %.
Более высокая частота выделения бактерий семейства Pasteurellacae в моноварианте (20,5 %), чем РСВ КРС (14,7 %), на наш взгляд, связана с тем, что причиной возникновения вспышек «вторичного» пастереллеза в хозяйствах могли быть вирусы парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи-болезни слизистых оболочек КРС, а также другие факторы (стрессы, неудовлетворительные условия кормления и содержания), понижающие резистентность респираторного тракта животных.
Кроме того, большое значение может иметь несоблюдение правил взятия и транспортировки проб биоматериала в лабораторию, приводящие к инактивации вируса и получению ложноотрицательных результатов исследований. Поэтому истинную роль РСВ КРС в возникновении массовых вспышек респираторных болезней, в частности, пастереллеза КРС установить сложно.
Заключение
Посредством ОТ-ПЦР установлено, что к инфицированию вирусом восприимчивы все половозрастные группы животных. В среднем вирус присутствовал в 15,4 % исследованных проб биоматериала, полученных от КРС при вспышках болезни. Частота выявления генома вируса от телят до 6-месячного возраста составила 19,7 %, от коров — 16,1 % при наличии признаков острых респираторных заболеваний, эмфизематозных поражений легких и интерстициальной бронхопневмонии. Выявление генома вируса в 4,5 % проб биоматериала от телят до 10-
Рис. 4. Разрушение паренхимы легких (фото А.Г. Глотова) Fig. 4. Destruction of lung parenchyma (photo A.G. Glotov)
дневного возраста свидетельствовало о вовлечении их в эпизоотический процесс.
Вирус чаще выявляли в пробах трахеального и бронхиального экссудатов (45,8 %), бронхов (33,3 %), легочных лимфатических узлов (20,0 %), легких (17,0 %), слизистой трахеи и бронхов (14,3 %), носовых выделений (13,3 %) животных с наличием признаков острых респираторных болезней. Наиболее достоверное выявление генома вируса в пробах биоматериала происходило при их отборе на ранних стадиях развития респираторных болезней и транспортировке в лабораторию не дольше 24 ч с однократной заморозкой и оттаиванием, либо в контейнерах с транспортной средой в охлажденном виде.
РСВ КРС в моноварианте присутствовал в 14,6 %, Pas-teurella multocida — в 9,2 , а Mannheimia haemolytica — в 11,4 % проб биоматериала от больных животных. Одновременное выделение трех возбудителей в одной пробе было равным 9,9 %.
Таким образом, частота выявления РНК вируса в пробах биоматериала в среднем составила 15,4 % с максимумом 45,8 % в трахеальном и бронхиальном экссудатах. Установлено, что наиболее восприимчивы к инфицированию РСВ телята до 6 месяцев. Частота выявления РНК вируса одновременно с бактериями семейства Pasteurellaceae составила 9,9 %. РСВ может способствовать развитию легочного пастереллеза.
Библиография
1. Басова, Н.Ю. Респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота инфекционной этиологии в условиях Северного Кавказа: автореф. дис. ... д-ра вет. наук (защищена 23.07.2002) / Н.Ю. Басова. — Краснодар: Изд-во КубГАУ, 2002. — 42 с.
2. Будулов, Н.Р. Респираторные болезни крупного рогатого скота в Дагестане: автореф. дис. .. д-ра вет. наук (защищена 01.07.2009) / Н.Р. Будулов. — Краснодар: Световод, 2009. — 43 с.
3. Васильев, А.В. РНГА в серодиагностике респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота / Васильев А.В. и соавт. // Ветеринария. — 1988. — №10. — С. 33-34.
4. Войтова, К.В. Диагностика респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции: автореф. дис. ... канд. вет. наук (защищена 24.05.2011) / К.В. Войтова. — Новосибирск, ИЦ ГНУ СибНСХБ, 2011. — 20 с.
5. Глотов, А.Г. Распространение вирусных респираторных болезней крупного рогатого скота / А.Г. Глотов, Т.И. Глотова, О.Г. Петрова, А.В. Нефедченко, А.Т. Татарчук, С.В. Коте-нева, Г.В. Ветров, А.Н. Сергеев // Ветеринария. — 2002. — №3. — С. 17-21.
6. Глотов, А.Г. Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота / А.Г. Глотов, Т.И. Глотова // Ветеринария. — 2009. — № 11. — С. 18-23.
7. Глотова, Т.И. Выделение и типирование респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота при помощи ОТ-ПЦР / Т.И. Глотова, О.В. Кунгурцева, А.Г. Глотов, И.Я. Строганова // Сибирский вестник сельскохозяйственных животных. — 2010. — № 10. — C. 59-64.
8. Гуненков, В.В. Респираторно-синцитиальная вирусная инфекция / В.В. Гуненков, Г.А. Ха-ленев, В.Н. Сюрин //Животноводство и ветеринария. — 1975. — Т. 8. — С. 70-76.
9. Кочиш, Т.М. Разработка набора реагентов для определения уровня антител к респираторно-син-цитиальному вирусу крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе: автореф. дис. ... канд. биол. наук (защищена 27.10.2004) / Т.М. Кочиш. — Щелково: Мещера, — 2004.—23 с.
10. Методические указания по лабораторной диагностике пастереллезов животных и птиц. — М.: Главветупр., 1992. — 10 с.
11. Строганова, И.Я. Диагностика респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота и особенности проявления болезни в современных условиях ведения животноводства: автореф. дис. ... доктора биол. наук (защищена 29.11.2011) / И.Я. Строганова. — Красноярск: Изд-во КрасГАУ, 2011. — 39 с.
12. Халенев, Г.А. Разработка методов производства диагностикумов и усовершенствование лабораторной диагностики вирусной диареи и респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота/ Г.А. Халенев: автореф. дис. ... канд. вет. наук (защищена 1976). — М.: Типография ВАСХНИЛ, 1976. — 270 с.
13. Шегидевич, Э.А. Состояние и перспективы изучения пастереллезов сельскохозяйственных животных. / Э.А. Шегидевич // Труды ВИЭВ. — 1984. — Т. 60. — С. 58-63.
14. Юров, К.П. Этиология, диагностика и профилактика массовых респираторных болезней телят / К.П. Юров и соавт. // Материалы междунар. науч.-практ. конф «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных». — Москва, 16-17 мая, 2006. — С. 128-133.
15. Antonis, A.F.G. Vaccine-Induced Immunopathology during Bovine Respiratory Syncytial Virus Infection: Exploring the Parameters of Pathogenesis / A.F.G. Antonis et al. // Journal of Virology. — 2003. — Vol. 77. — P. 12067-12073.
16. Bryson, D.G. Respiratory syncytial virus pneumonia in young calves: clinical and pathologic findings / D.G. Bryson et al. // Am. J. Vet. Res. — 1983. — Vol. 44. — P. 1648-1655.
17. Brodersen, B.W. Bovine respiratory syncytial virus / B.W. Brodersen // Vet Clin North Am Food Anim. Pract. — 2010. — Vol. 26. — Р. 323-333.
18. Brogden, K.A. Polymicrobial Diseases / K.A. Brogden, J.M. Guthmiller. —Washington (DC): ASM Press; 2002. — P. 328.
19. Fach, S.J. Differential expression of cytokine transcripts in neonatal and adult ovine alveolar macrophages in response to respiratory syncytial virus or toll-like receptor ligation / S.J. Fach et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. — 2010. — Vol. 136. — P. 55-64.
20. Larsen, L.E. Diagnosis of enzootic pneumonia in Danish cattle: reverse transcription-polymerase chain reaction assay for detection of bovine respiratory syncytial virus in naturally and experimentally infected cattle / L.E. Larsen et al. // J. Vet. Diagn. Invest. — 1999.—Vol. 1. — P. 416-422.
21. Larsen, L.E. Extensive sequence divergence among bovine respiratory syncytial viruses isolated during recurrent outbreaks in closed herds / L.E. Larsen et al. // Journal of Clinical Microbiology — 2000. — Vol. 38. — P. 4222-4227.
22. Larsen, L.E. Bovine Respiratory Syncytial Virus (BRSV): A review / L.E. Larsen // Acta vet. scand. — 2000. — Vol. 41. — P. 1-24.
23. Valarcher, J-F. Bovine respiratory syncytial virus infection / J-F. Valarcher, T G. aylor // Vet. Res. — 2007. — Vol. 38. — Р. 153-180.
24. Vilcek, S. Development of Nested PCR Assays for Detection of Bovine Respiratory Syncytial Virus in Clinical Samples / S. Vilcek et al. // Journal of Clinical Microbiology. — 1994. — Vol. 32. — P. 2225-2231.
References
1. Basova N.Ju. Respiratornye bolezni molodnjaka krupnogo rogatogo skota infek-cionnoj jetiologii v uslovijah Severnogo Kavkaza (Respiratory disease of young cattle infectious etiology in the North Caucasus), Extended abstract of Doctor's thesis in Vet, it is protected 23.07.2002, Krasnodar, Izd-vo KubGAU, 2002, p. 42.
2. Budulov N.R. Respiratornye bolezni krupnogo rogatogo skota v Dagestane (Respiratory disease of young cattle infectious etiology in the North Caucasus), Extended abstract of Doctor's thesis in Vet., it is protected 01.07.2009, Krasnodar, Svetovod, 2009, p. 43
3. Vasil'ev A.V. et al. Veterinarija, 1988, No. 10, pp. 33-34.
4. Vojtova K.V. Diagnostika respiratorno-sincitial'noj infekcii krupnogo rogatogo skota metodom polimeraznoj cepnoj reakcii (Diagnosis of bovine respiratory syncytial virus infections using polymerase chain reaction), Extended abstract of candidate's thesis in vet., it is protected 24.05.2011, Novosibirsk, IC GNU SibNSHB, 2011, p. 20.
5. Glotov A.G., Glotova T.I., Petrova O.G., Nefedchenko A.V., Tatarchuk A.T., Kote-neva S.V., Vetrov G.V., Sergeev A.N. Veterinarija, 2002, No. 3, pp. 17-21.
6. Glotov A.G., Glotova T.I. Veterinarija, 2009, No. 11, pp. 18-23.
7. Glotova T.I., Kungurceva O.V., Glotov A.G., Stroganova I.Ja. Sibirskij vestniksel'skohozja-jstvennoinauki, 2010, No. 10, pp. 59-64.
8. Gunenkov V.V., Halenev G.A., Sjurin V.N. Zhivotnovodstvo i veterinarija, 1975, Vol. 8, pp. 70-76.
9. Kochish T.M. Razrabotka nabora reagentov dlja opredelenija urovnja antitel k res-pira-torno-sincitial'nomu virusu krupnogo rogatogo skota v immunofermentnom analize (Development a set of reagents for the determination of levels of antibodies against respiratory syncytial virus in cattle in an enzyme immunoassay), Extended abstract candidate's thesis in biol, it is protected 27.10.2004, Shhelkovo, Meshhera, 2004, p. 23.
10. Metodicheskie ukazanija po laboratornoj diagnostike pasterellezov zhivotnyh i ptic (Guidelines for the laboratory diagnosis of pasteurellosis of animals and birds), Moskow, Glavvetupr., 1992, p. 10.
11. Stroganova I.Ja. Diagnostika respiratorno-sincitial'noj infekcii krupnogo rogatogo skota i osobennosti projavlenija bolezni v sovremennyh uslovijah vedenija zhivotnovodstva (Diagnosis of respiratory syncytial virus infection in cattle and especially manifestations of the disease in the modern conditions of livestock), Extended abstract of Doctor's thesis in Biol., it is protected 29.11.2011, Krasnojarsk, Izd-vo KrasGAU, 2011, p. 39.
12. Halenev G.A. Razrabotka metodov proizvodstva diagnostikumov i usovershenstvovanie laboratornoj diagnostiki virusnoj diarei i respiratorno-sincitial'noj infekcii krupnogo rogatogo skota (The development of production methods of diagnostics and improvement of laboratory diagnosis of viral diarrhea and respiratory syncytial virus infection in cattle), Extended abstract candidate's thesis vet., it is protected 1976, Mosow, Tipografija VASHNIL, 1976, p. 27.
13. Shegidevich Je.A. Trudy VlJeV, 1984, Vol. 60, pp. 58-63.
14. Jurov K.P. et al. Aktual'nye problemy infekcionnojpatologiiiimmunologiizhivotnyh (The vital problems of infectious pathology and immunology of the animals), Proceedings of the Scientific and Practical Conference, Moskow, 2006, pp. 128-133.
15. Antonis A.F.G. et al. Journal of Virology, 2003, Vol. 77, pp. 12067-12073.
16. Bryson D.G. et al. Am. J. Vet. Res., 1983, Vol. 44, P. 1648-1655.
17. Brodersen B.W. Vet Clin North Am Food Anim. Pract., 2010, Vol. 26, pp. 323-333.
18. Brogden K.A., Guthmiller J.M. Polymicrobial Diseases, Washington (DC): ASM Press; 2002.—P. 328.
19. Fach S.J. et al. Vet. Immunol. Immunopathol., 2010, Vol. 136, pp. 55-64.
20. Larsen L.E. et al. J. Vet. Diagn. Invest, 1999, Vol. 1, pp. 416-422.
21. Larsen L.E. et al. Journal of Clinical Microbiology, 2000, Vol. 38, pp. 4222-4227.
22. Larsen L.E. Acta vet. Scand., 2000, Vol. 41, pp. 1-24.
23. Valarcher J-F., Taylor G. Vet. Res., 2007, Vol. 38, pp. 153-180.
24. Vilcek S. et al. Journal of Clinical Microbiology, 1994, Vol. 32, pp. 2225-2231.
SUMMARY
S.V. Koteneva1, K.V. Voytova1, T.I. Glotova1, I.Ya. Stroganova2, A.G. Glotov1
1 Siberian Federal Scientific Centre of Agro-BioTechnologies of the Russian Academy of Sciences (Krasnoobsk Novosibirsk region) (630501 Novosibirsk region Novosibirsk district, Krasnoobsk, post office box 463).
2 Federal State Budget Educational Institution of Higher Education Krasnoyarsk state agrarian university (660049 Krasnoyarsk City, 90 Mira Avenue).
Frequency of the Genome Detection of Bovine Respiratory Syncytial Virus from Cattle with Outbreaks of Bronchopneumonia in the Big Dairy Farms. Respiratory diseases are an important cause of economic losses in dairy farming. One of the etiologic agents of bronchopneumonia in cattle is bovine respiratory syncytial virus (BRSV) widely spread worldwide. Urgent is to obtain new data on the epizootic situation for bovine respiratory syncytial virus infection in big dairy farms and the spread of the virus in organs of infected animals during outbreaks of respiratory disease. Purpose. Studying the frequency RNA detection of bovine respiratory syncytial virus in organ samples from animals of different age and gender groups in outbreaks of respiratory diseases in mono and in association with bacteria of the Pasteurellaceae family.
Materials and methods. The studies were conducted on big dairy farms in Novosibirsk, Tyumen and Krasnoyarsk regions during outbreaks of respiratory diseases in cattle. Ribonucleic acid of bovine respiratory syncytial virus was detected by the polymerase chain reaction. Total examined 273 samples of biological material from animals of different ages. Isolation and identification of bacteria Pasteurellaceae family were carried out in accordance with the methodological guidelines for the laboratory diagnosis of pasteurellosis of animals and birds.
Conclusion. The incidence of viral RNA in biological material samples averaged 15.4% with a maximum of 45.8% in the tracheal and bronchial exudates. It was found that the most susceptible to BRSV infection were calves up to 6 months. The incidence of viral RNA simultaneously with the Pasteurellaceae family was 9.9%. BRSV can contribute to the development of pulmonary pasteurellosis.
Keywords: bovine respiratory syncytial virus infection, cattle, polymerase chain reaction, bovine respiratory syncytial virus, Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica.
