CC BY
34
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
из биопленок после их обработки дезсредством нельзя считать критерием утраты ими жизнеспособности. Устойчивость микроорганизмов в составе биопленок обусловлена также защитными свойствами эк-зоклеточного полисахаридного матрикса, наличие которого является основным признаком сформированной биопленки. Микробиологическими методами не представляется возможным оценить действие дезсредства на экзоклеточный матрикс биопленок.
Использование микроскопических методов существенно расширяет возможности объективизации оценки действия микробиоцидных препаратов на микроорганизмы, поскольку при использовании этих методов визуализируется процесс ориентированного действия молекул биоцидного вещества на структурные компоненты микроорганизмов и биопленок. По степени дезорганизации тех или иных структурных компонентов микроорганизмов можно судить об их жизнеспособности.
В данном исследовании методами световой и электронной микроскопии было изучено действие третичных алкиламинов (дезинфицирующее средство «Оптимакс») на структурно-функциональную организацию вегетативных форм грамотрицатель-ных и грамположительных бактерий (Escherichia coli, Pseudomonas aureginosa, Salmonella typhimurium и Staphylococcus aureus) и образуемых ими биопленок.
Показано, что под воздействием третичных ал-киаминов на вегетативные (планктонные) бактерии происходит флокуляция с образованием много -клеточных конгломератов, разрушение клеточной стенки и цитоплазматической мембраны, дезорганизация цитоплазмы и рибонуклеопротеидного комплекса. Степень выраженности повреждений бактерий зависела от концентрации препарата — чем выше концентрация, тем более были изменены клетки. Бульонные культуры бактерий, обработанные средством «Оптимакс» в концентрации 2,5% в течение 60 мин, биопленки не образовывали.
При обработке дезинфицирующим средством «Оптимакс» в концентрации 2,5% в течение 60 мин зрелых биопленок вывлены ярко выраженные изменения структуры экзополисахаридного матрикса и деструкция бактериальных клеток внутри биопленки. Разрушение бактерий внутри биопленок свидетельствует о преодолении препаратом экзополиса-харидного барьера, и является важным показателем биоцидной активности третичных алкиламинов.
Таким образом, на основании проведенного исследования можно рассматривать дезинфицирующие средства на основе третичных алкиламинов как перспективные препараты для борьбы с биологическими пленками, которые образуют наиболее эпидемиологически значимые штаммы возбудителей госпитальных инфекций.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ БАКТЕРИЙ К АНТИБИОТИКАМ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ИЗОЛИРОВАННЫХ КОЛОНИЙ СТРЕПТОКОККА
Е.В. Диц
ГБОУ ВПО ««Тюменская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, г. Тюмень
В стационарах России ежегодно регистрируется около 2,5 млн больных с внутрибольничными инфекциями (ВБИ), а ежегодный экономический ущерб, причиняемый инфекциями связанными
с оказанием медицинской помощи (ИСМП) составляет более 5 млрд рублей (Концепция. Минздрав России, 2011). Проблема снижения заболеваемости стептококковыми инфекциями остается актуальной до настоящего времени в связи со сложностью лабораторной диагностики, низкой устойчивостью возбудителей во внешней среде, селекцией и формированием госпитальных штаммов с множественной лекарственной устойчивостью. Задачей настоящих исследований явилось совершенствование методов лабораторной диагностики стрептококковых инфекций на основании изучения чувствительности к антибиотикам сопутствующей микрофлоры стрептококковым инфекциям. За период 1997—2011 гг. микробиологическими методами обследовано 5300 больных. Чувствительность выделенных бактерий к антибиотикам определяли диско-диффузионным методом. Использовали следующие антибиотики: стрептомицин, эритромицин, гентамицин, ами-кацин, линкомицин, бензилпенициллин, олеан-домицин, цефаклор, цефуроксим, цефатоксим, цефалексин. На основании проведенного анализа установлено, что сопутствующая микрофлора стрептококковым инфекциям чувствительна к ген-тамицину, а стрептококки в присутствии данного антибиотика формировали изолированные колонии. В мазках из зева сопутствующая микрофлора была чувствительна к гентамицину в 90—96% случаев, а стрептококки были резистентны к гентами-цину. Поэтому предложен способ получения изолированных колоний стрептококков с использованием дисков с гентамицином. Для накопления стрептококков, обладающих анаэробными свойствами, предварительно делали посев исследуемого материала на печеночный бульон Китта—Тароцци.
Предложенный способ позволяет сократить время проведения лабораторных исследований, уменьшить расход питательных сред и повысить процент выделения стрептококков из исследуемого материала, что позволяет в более полном объеме проводить противоэпидемические мероприятия при возникновении ИСМП, вызываемых стрептококком.
МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ
И.И. Долгушин, А.Ю. Савочкина, Ю.С. Шишкова
ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России, г. Челябинск
Открытие V. Brinkmann и соавт. в 2004 г. ней-трофильных внеклеточных ловушек и установление их антимикробного эффекта, является началом нового этапа в изучении нейтрофильных грануло-цитов. Весьма актуальной является разработка информативных и доступных методов обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек и их применения в клинической и диагностической практике.
Нейтрофильные гранулоциты, содержащиеся в крови, тканях и на поверхности слизистых оболочек, могут обладать неодинаковыми свойствами. Изначально была отработана методика определения ловушек, образованных нейтрофилами, выделенными из периферической крови. Показано, что для ней-трофилов чистой фракции, окраска: акридиновым оранжевым, Sytox Green и по Романовскому—Гимзе могут быть использованы для определения внеклеточных ловушек.
