CC BY
66
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Елена Евгеньевна Антошина1, Татьяна Георгиевна Горькова2, Валентина Петровна Дерягина3, Наталья Ильинична Рыжова4
ИНГИБИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ФЕНОЛЬНЫХ КИСЛОТ И РАЗНЫХ ФОРМ МИКРОВОДОРОСЛИ СПИРУЛИНЫ НА РОСТ КАРЦИНОМЫ ЭРЛИХА У МЫШЕЙ
1 К. м. н., старший научный сотрудник, лаборатория канцерогенных веществ НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
2 Научный сотрудник, лаборатория канцерогенных веществ НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
3 К. б. н., старший научный сотрудник, группа профилактики канцерогенных воздействий
и профессионального рака НИИ клинической онкологии РОНЦ им.. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
4 К. б. н., старший научный сотрудник, группа профилактики канцерогенных воздействий
и профессионального рака НИИ клинической онкологии РОНЦ им.. Н. Н. Блохина РАМН (115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24)
Адрес для переписки: 115478, РФ, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24, НИИ канцерогенеза РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, группа профилактики канцерогенных воздействий, Дерягина Валентина Петровна; e-mail: Derygina@inbox.ru
В эксперименте на мышах F1(C57Bl х СВА) изучено действие фенольных кислот — галловой и таниновой, а также спирулины и спирулины, обогащенной селеном, на рост подкожно перевитой карциномы Эрлиха. Показано, что продолжительное пероральное введение мышам 100 мг/кг галловой кислоты, 100 мг/кг таниновой кислоты, 1000 мг/кг спирулины и 1000 мг/кг спирулины, обогащенной селеном, достоверно увеличивало в 1,4—1,6 раза латентный период формирования опухолевых узлов и статистически значимо ингибировало рост опухолей в течение 2 нед после перевивки карциномы Эрлиха. Максимальное торможение роста опухолей на ранних сроках наблюдения составило для галловой кислоты, таниновой кислоты, спирулины и спирулины, обогащенной селеном, соответственно 91% (р < 0,05), 78% (р < 0,05), 75% (р < 0,05) и 89% (р < 0,05). Статистически значимое торможение роста опухолей поддерживалось только при действии галловой кислоты, что привело к достоверному уменьшению массы опухоли на 27% (р < 0,05). Обогащение селеном на 14% усиливало защитное действие спирулины против карциномы Эрлиха. Обнаружено, что галловая кислота подавляла эндогенное образование производных оксида азота, в то время как таниновая кислота и спирулина усиливали образование нитросоединений в организме мышей. Полученные данные нуждаются в подтверждении и углубленном изучении с целью использования галловой и таниновой кислот, а также спирулины и спирулины, обогащенной селеном, в профилактике онкологических заболеваний.
Ключевые слова: карцинома Эрлиха, галловая кислота, таниновая кислота, спирулина и спирулина, обогащенная селеном, торможение роста опухоли, мыши.
Эпидемиологические данные подтверждают превентивную роль ряда биологически активных состав-
© Антошина Е. Е., Горькова Т. Г., Дерягина В. П.,
Рыжова Н. И., 2009
УДК 616-006.6-092.9-02:615.322:582
ляющих, содержащихся в растительных продуктах, в возникновении злокачественных опухолей. На экспериментальных моделях в условиях in vitro и in vivo получены доказательства того, что овощи и фрукты, а также их компоненты, относящиеся к разным классам соединений (флавоноиды, каротиноиды, серосодержащие ор-
ганические соединения, ретиноиды, витамины, аминокислоты и др.), способны ингибировать опухолевый рост. Это защитное действие связывают прежде всего с антиоксидантной активностью, направленной против окислительного повреждения ДНК, со способностью модифицировать активность ферментов, участвующих в детоксикации химических соединений, влиять на клеточный цикл и дифференцировку, апоптоз клеток, ангиогенез и др. В то же время в ряде случаев антиоксиданты могут приводить к пролиферации опухолевых клеток или воспалительному ответу, вызванному экспрессией определенных генов [1—3].
Среди множества растительных фенольных веществ особый интерес у исследователей вызывают фенольные кислоты (ФК), которые имеют выраженные антиокси-дантные, антибактериальные и противовоспалительные свойства. Подсчитано, что ФК и их производные составляют около Уз всех полифенолов, поступающих с пищей [4; 5]. В пищевых продуктах ФК содержатся главным образом в связанной форме: в виде гликозидов и конъюгатов. Основными источниками ФК являются все виды чая, клюква, какао-бобы, клубника, брусника, черника, черная смородина, сок красного винограда, красное вино и др. [4; 6]. Среди ФК наиболее распространены галловая кислота (ГК) и таниновая кислота (ТК). В экспериментах, выполненных в основном на культурах опухолевых клеток, показано, что ГК (3,4,5-тригидроксибензойная кислота) подавляет пролиферацию клеток, модулируя активность ряда ферментов и сигнальных путей, играющих важную роль в процессе канцерогенеза [7; 8].
Не так давно свойства танинов вызывали онкологическую настороженность, но в настоящее время их роль в канцерогенезе пересматривается. Накапливается все больше научных данных, подтверждающих антиоксидантную, антибактериальную, противовирусную, анти-мутагенную и антиканцерогенную активность ТК [9—12].
Внимание исследователей привлекает также спиру-лина (Сп), которая на протяжении многих веков используется человеком в качестве пищевой водоросли. Она содержит около 62% полноценного белка, почти полный спектр каротиноидов, значительное количество витаминов В1 и В2, эссенциальную у-линолевую кислоту, целый ряд микроэлементов, а также фитопигменты [13]. В экспериментальных исследованиях in vitro и in vivo установлено, что Сп ингибировала пролиферацию опухолевых клеток печени, уменьшала образование опухолей пищевода, желудка, а также кожи, индуцированных 7,12-ди-метилбензантраценом у мышей [14; 15].
В настоящее время получают распространение новые биотехнологии выращивания растительных продуктов, а также микроводорослей с повышенным содержанием в них селена. Превентивная роль селена в онкогенезе подтверждена в эпидемиологических исследованиях, результаты которых подтвердили обратную зависимость между потреблением селена и смертностью, вызванной опухолями разной локализации [16; 17]. Незаменимый микроэлемент селен как компонент глутатионперокси-даз защищает клетки от повреждений, индуцированных перекисями, предотвращает аутоокисление липидных мембран и необходим для нормального всасывания витамина Е. Экспериментальные исследования на животных
позволили выявить, что богатые селеном растительные продукты (брокколи, чеснок и др.) обладают более выраженным противоопухолевым потенциалом, чем органические или неорганические формы селена [18]. В то же время в ряде исследований обнаружено, что обогащение продуктов селеном может способствовать снижению в них количества основных биоактивных компонентов [19].
В России налажен выпуск биологически активной добавки «Спирулина—Сочи-Селен», изготавливаемой
ООО «Агро-Виктория» (регистрационное удостоверение № 001720 р.643.06. 2000 Минздрава Российской Федерации). Результаты исследований биологической активности «Спирулина—Сочи-Селен» и Сп на крысах показали, что частичное замещение Сп селенсодержащей Сп усиливало индукцию ферментов II фазы метаболизма ксенобиотиков [19].
С учетом приведенных сведений представляется целесообразным изучить наличие онкопротекторных свойств у ГК, ТК, а также сравнить действие Сп и спирулины, обогащенной Se (Сп-Se), на опухолевый рост у мышей с перевитой карциномой Эрлиха (КЭ).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использовали ГК (> 98%, Fluka), ТК (Sigma), сухие биомассы Сп (Arthospira platensis) и Сп-Se, представленные ООО «Агро-Виктория» (Сочи).
Экспериментальное исследование проводили на 50 мышах-самцах F1(C57Bl х СВА), разделенных на 5 групп по 10 животных в каждой — одна контрольная группа и 4 опытных. Мышам опытных групп в течение 3 нед до перевивки КЭ, а также после перевивки и до окончания эксперимента 5 раз в неделю вводили перорально водную суспензию действующего вещества по 0,5 мл каждой мыши в дозах: ГК — 100 мг/кг; ТК — 100 мг/кг; Сп — 1000 мг/кг и Сп-Se — 1000 мг/кг.
Штамм КЭ получен из банка замороженных тканей РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. Этот штамм перевивали подкожно в правую паховую область из расчета 106 клеток в 0,5 мл среды Хенкса.
Относительную прибавку массы тела контролировали по результатам взвешивания мышей, которое осуществляли после 2-недельного введения активных веществ мышам до перевивки КЭ и на 5-е сутки после перевивки опухоли. Оценка изменения массы тела мышей на более поздних сроках представлялась неадекватной в связи с интенсивным ростом опухолей, что отражалось на общей массе тела животных.
После перевивки опухолей проводили ежедневную пальпацию в месте введения опухолевых клеток для определения времени появления первых опухолевых узлов. Латентный период формирования опухолевых узлов определяли по формуле:
ЛП (%) = (То - Тк) / Тк х 100%, где ЛП — латентный период формирования опухолевых узлов; То — среднее время появления опухолевых узлов в опыте; Тк — среднее время появления опухолевых узлов в контроле.
Ингибирующий эффект соединений оценивали в динамике по стандартным критериям [20; 21]: показатель торможения роста опухолей (ТРО) рассчитывали по
средним объемам в динамике или по массе опухоли после умерщвления животных высокой дозой эфирного наркоза. Минимально значимый критерий эффективности ТРО, определяемый по объему опухоли, составил 50%.
Переносимость веществ оценивали по поведению и состоянию животных, а также по возможной гибели в процессе эксперимента.
Активность индуцибельной NO-синтазы (iNOS) определяли по содержанию N02^ и N0^ (стабильных продуктов аэробного окисления N0) в моче. Известно, что около 95% экзогенно поступивших или эндогенно образовавшихся производных N0 выводятся с мочой. Определение окисленных продуктов N0 — нитритов и нитратов осуществляли методом Грисса [1]. Сбор мочи проводили на 14-й день после перевивки КЭ. Для этого мышей помещали по 5 штук в обменные клетки на сутки, лишив корма при свободном доступе к дистиллированной воде. Во избежание окисления нитритов в емкости для сбора мочи вносили 0,3 мл 30% гидроксида натрия.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием критерия Стьюдента. Различия между сравниваемыми результатами считали статистически значимыми при р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Результаты взвешивания мышей на 5-й день после перевивки КЭ свидетельствовали об увеличении массы тела животных во всех опытных группах, за исключением животных, получавших Сп. При этом статистически значимая прибавка массы тела мышей по сравнению с контролем (р < 0,05) отмечалась в группах, получавших ГК и Сп^е (табл. 1).
У мышей опытных групп по сравнению с животными контрольной группы (табл. 2) наблюдали статистически значимую задержку образования опухолевых узлов на месте перевивки. Латентный период формирования КЭ у мышей, получавших ГК и Сп^е, составил соответственно 7,5 и 7,6 сут (р < 0,01); у мышей, получавших ТК и Сп, — 7,0 и 6,7 сут (р < 0,05), в то время как у мышей контрольной группы — 4,7 сут.
Таблица 1
Относительная прибавка массы тела мышей
У мышей опытных групп, которым вводили действующие вещества (ГК, ТК, Сп и Сп^е), объем опухолей в течение всего опыта был меньше, чем в контрольной группе (табл. 3). Максимальные значения ТРО у мышей регистрировали на протяжении первых 12 дней после перевивки КЭ, в последующий период ингибирующий эффект изучаемых веществ постепенно убывал. Максимум ТРО для мышей, получавших ТК, Сп и Сп^е, зарегистрирован на 5-е сутки — 78, 75 и 89% соответственно, в то время как максимальное значение этого показателя (91%) определялось на 8-е сутки у мышей, получавших ГК. Из 4 испытанных веществ противоопухолевое действие ГК и Сп^е было наиболее выражено и устойчиво; на протяжении всего опыта средний объем опухолей у мышей, получавших ГК и Сп^е, статистически значимо отличался от контроля. Ингибирующее действие ТК и Сп было менее выражено, хотя статистическая значимость различия с контролем в большинстве контрольных сроков сохранялась и варьировала для ТК от 24 до 78%, для Сп — от 41 до 75%.
Абсолютная и относительная масса выделенных по окончании эксперимента опухолей у мышей, получавших ТК и Сп, практически не отличалась от массы опухолей в контрольной группе. У мышей, получавших ГК и Сп^е, масса опухолей была соответственно на 27 и 14% меньше, чем у мышей контрольной группы, причем для мышей, которым вводили ГК, разница была статистически значима (табл. 4).
Следует добавить, что введение веществ не вызывало гибели мышей или признаков нарушения их поведения.
Результаты исследований, проведенных нами ранее, показали, что рост КЭ сопровождается усилением эндогенного образования N0, количество которого увеличивается в линейной зависимости от объема опухоли [22]. Роль N0 в опухолевом росте неоднозначна. С одной стороны, повышенное образование N0 и его производных приводит к повреждениям структуры ДНК, которые могут наследоваться в форме мутаций и быть причиной полиморфизма опухолей. Получены доказательства по-
Группа животных Средняя масса мышей ДО ± m), г р при сравнении с контролем (критерий Стьюдента)
через 2 нед после начала введения веществ на 5-е сутки после перевивки КЭ прибавка массы (%)
Контроль 36,0 ± 1,1 38,0 ± 1,2 2,0 ± 0,3 (5,5) -
ГК 33,4 ± 1,0 36,6 ± 1,1 3,2 ± 0,3 (9,5) < 0,05
ТК 32,3 ± 1,3 35,0 ± 1,1 2,7 ± 0,6 (8,3) > 0,05
Сп 34,0 ± 0,8 34,8 ± 1,1 0,8 ± 0,8 (2,3) > 0,05
Сп^е 34,0 ± 0,8 37,3 ± 0,9 3,3 ± 0,4 (9,7) < 0,05
Таблица 2
Латентный период формирования опухолевых узлов КЭ
Группа животных Среднее время появления опухолевых узлов, сут р при сравнении с контролем (критерий Стьюдента) Задержка формирования опухолевых узлов, %
Контроль 4,7 ± 0,5 - -
ГК 7,5 ± 0,6 < 0,01 + 37,3
ТК 7,0 ± 0,6 < 0,05 + 32,9
Сп 6,7 ± 0,5 < 0,05 + 29,9
Сп^е 7,6 ± 0,5 < 0,01 + 38,2
ложительной зависимости между стадией опухоли и содержанием/активностью фермента iN0S, ответственного за гиперпродукцию N0 в организме [23]. Снижение эндогенного образования N0 и его окисленных форм у животных с опухолями часто коррелирует с торможением опухолевого роста [24]. С другой стороны, N0 является неотъемлемой частью противоопухолевой защиты с участием иммунокомпетентных клеток [23].
Учитывая выраженные антиоксидантные свойства ГК, ТК, СП и Сп^е, можно ожидать, что при введении их животным образование свободнорадикальных соединений, в том числе высокореакционного N0, будет частично подавлено.
Выделение с мочой производных N0 (в виде нитратов и нитритов) у мышей, получавших ТК и Сп, было соответственно на 27,6 и 65,4% больше, чем у контроль-
Таблица 3
Влияние ФК и Сп на рост КЭ
ных животных (табл. 5). В то же время моча мышей, получавших ГК и Сп^е, содержала нитратов и нитритов соответственно на 34,0 и 8,7% меньше, чем моча мышей в контрольной группе. Полученные неоднозначные результаты могут отражать многофакторный характер действия испытанных веществ. Подавление образования производных N0 возможно, в частности, вследствие прямого антирадикального действия ГК [25] или путем вовлечения в антирадикальную защиту содержащих селен антиоксидантных ферментов. Уместно добавить, что снижение производных N0 в моче мышей, которым вводили ГК, сопровождалось ингибированием роста опухолей до конца эксперимента. Стимулирующее действие ТК и Сп на эндогенное образование нитросоединений, возможно, явилось следствием активации iN0S. Антиоксидантный вклад поступивших соединений (ГК,
Группа живот- ных Средний объем опухоли, мм3
сутки после перевивки опухоли
3-и 5-е 8-е 10-е 12-е 15-е 17-е 19-е 23-и
Контроль 1,6 ± 0,5 9,4 ± 2,6 451,9 ± 124,8 1253,1 ± 247,6 2478,5 ± 367,3 4557,9 ± 743,7 5262,2 ± 843,1 8293,3 ± 1189, 9982,0 ± 944,1
ГК 0 (100) 1,6 ± 0,8 (83,3)а 39,2 ± 15,6 (91,3)'5 354,1 ± 98,3 (71,7^ 1182,0 ± 349,0 (52,3) 2318,5 ± 322,7 (49,1)а 3171,8 ± 332,6 (39,7)а 4961,7 ± 419, 3 (40,2)а 7249,4 ± 571,7 (27,4)а
ТК 0 (100) 2,1 ± 0,9 (77,8)а 143,0 ± 42,8 (68,3)а 684,4 ± 236,8 (45,0) 1554,4 ± 354,2 (37,3) 2225,9 ± 359,9 (51,2)а 3612,6 ± 470,2 (31,3) 4955,2 ± 487,2 (40,3)а 7592,5 ± 399,2 (23,9)а
Сп (100) 2,3 ± 0,9 (75,3)а 294,9 ± 71,1 (34,7) 525,3 ± 107,7 (58)а 1456,8 ± 249,4 (41,2)а 2397,4 ± 261,6 (47,5)а 2795,6 ± 209,3 (46,9)а 3919,9 ± 324,8 (52,7)б 5744,0 ± 378,4 (42,5)б
Сп^е 0 (100) 1,1 ± 0,7 (88,8)а 92,6 ± 24,3 (79,5)а 229,1 ± 53,2 (81,7^ 748,4 ± 91,8 (69,8)'5 1399,6 ± 220,0 (69,3)б 2497,2 ± 342,7 (52,5)а 3132,9 ± 310,2 (62,2)б 5866,5 ± 498,0 (41,2)б
а р < 0,05 при сравнении с контролем (критерий Стьюдента). б р < 0,01 при сравнении с контролем (критерий Стьюдента). В скобках указан процент ингибирования.
Таблица 4
Масса опухолей у экспериментальных мышей
Группа животных Масса опухоли
Абсолютная, г Относительная,%
Контроль 8,6 ± 0,6 21,2 ± 1,7
ГК 6,3 ± 0,6а 15,7 ± 1,3а
ТК 8,7 ± 0,4 21,6 ± 1,0
Сп 8,6 ± 0,4 22,1 ± 0,9
Сп-Se 7,4 ± 0,4 17,8 ± 1,1
а р < 0,05 при сравнении с контролем (критерий Стьюдента).
ТК, Сп, Сп^е) в общий антиоксидантный пул организма может быть недостаточным, чтобы компенсировать характерное для опухолевого роста повышенное образование высокореакционных производных азота.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Результаты исследования показали, что ГК, ТК, Сп и Сп^е при продолжительном пероральном введении мышам до перевивки и в течение роста КЭ задерживали формирование опухолевых узлов и тормозили рост опухолей. Максимальные значения ТРО, определяемые по объему, в течение первых 2 нед после перевивки КЭ составили для ГК, ТК, Сп и Сп^е соответственно 91% (р < 0,05), 78% (р < 0,05), 75% (р < 0,05) и 89% (р < 0,05). Статистически значимое ТРО поддерживалось только при получении мышами ГК, что было подтверждено в конце опыта снижением у них массы опухолей на 27% (р < 0,05).
Обогащение Сп селеном повышало эффективность действия микроводоросли в отношении КЭ. Отмечено,
что ГК подавляла эндогенное образование производных NO, в то время как ТК и Сп усиливали образование нитросоединений в организме мышей.
Выявленные свойства ингибировать опухолевый процесс позволяют рассматривать ГК, ТК, Сп и Сп-Se в качестве перспективных соединений для более полного изучения их противоопухолевых свойств с целью применения в профилактике онкологических заболеваний.
Авторы выражают, искреннюю благодарность ведущему научному сотруднику НИИ питания РАМН Л. В. Кравченко за ценную консультативную помощь при планировании исследования.
ЛИТЕРАТУРА
1. Антиоксиданты — место и роль в онкологии / Немцова Е. Р., Сергеева Т. В., Безбородова О. А., Якубовская Р. И. // Рос. онкол. журн. — 2003. — № 5. — С. 48—53.
2. The antitumor activities of flavonoids / Kandaswami C., Lee L. T., Lee P. P., Hwang J. J., Ke F. C., Huang Y. T., Lee M. T. // In Vivo. —
2005. — Vol. 19, N 5. — P. 895—909.
3. New insights on the anticancer properties of dietary polyphenols / Fresco P., Borges F., Diniz C., Marques M. P. // Med. Res. Rev. —
2006. — Vol. 26, N 6. — P. 747—766.
4. Тутельян В. А., Лашнева Н. В. Биологически активные вещества растительного происхождения. Фенольные кислоты: распространенность, пищевые источники, биодоступность // Вопр. питания. — 2008. — Т. 77, № 1. — С. 4—19.
5. Flavonoids in food and their health benefits / Yao L. H., Jiang Y. M., Shi J., Tomas-Barberan F. A., Datta N., Singanusong R., Chen S. S. // Plant Food Hum. Nutr. — 2004. — Vol. 59, N 3. — P. 113—122.
6. Polyphenols: food sources and bioavailability / Manach C., Scal-bert A., Morand C., Remesy C., Jimenez L. // Am. J. Clin. Nutr. — 2004. — Vol. 79, N 5. — P. 727—747.
7. Tomas-Barberan F. A., Clifford M. N. Dietary hydroxybenzoic acid derivatives — nature, occurrence and dietary burden // J. Scie Food Agric. — 2000. — Vol. 80, N 7. — P. 1024—1032.
8. Lee K. W., Lee H. J., Lee C. Y. Vitamins, phytochemicals, diets, and their implementation in cancer chemoprevention // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. — 2004. — Vol. 44, N 6. — Р. 437—452.
9. Tannins and human health: a review / Chung K. T., Wong T. Y., Wei C. I., Huang Y. W., Lin Y. // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. — 1998. — Vol. 38, N 6. — P. 421—464.
Таблица 5
Выделение нитритов и нитратов с мочой мышей F1 с перевитой КЭа
Группа животных Выделение нитросоединений, мкг/сут
NO-2 NO-3 в эквиваленте NO-3 по сравнению с контролем6, %
Контроль 6,7 52,3 61,4 + 0,0
ГК 7,0 31,0 40,5 - 34,0
ТК 8,2 67,3 78,4 + 27,6
Сп 10,5 87,5 101,6 + 65,4
Сп-Se 10,1 42,4 56,0 - 8,7
а Приведены данные для 5 мышей, входящих в состав каждой группы.
б Выделение нитросоединений с мочой (в эквиваленте N03) у мышей опытных групп сравнивали с этим же показателем у контрольных животных.
10. Tannic acid raises survival rate of mice bearing syngeneic tumors / Koide T., Kamei H., Hashimoto Y., Kojima T., Hasegawa M. // Cancer Biother. Radiopharm. — 1999. — Vol. 14, N 3. — P. 231—234.
11. Inhibition of cholangiocarcinoma growth by tannic acid / Marien-feld C., Tadlock L., Yamagiwa Y., Patel T. // Hepatology. — 2003. — Vol. 37, N 5. — P. 1097—1104.
12. Green tea polyphenols and tannic acid act as potent inhibitors of phorbol ester-induced nitric oxide generation in rat hepatocytes independent of their antioxidant properties / Scrivastava R. C., Husain M. M., Hasan S. K., Athar M. // Cancer Lett. — 2000. — Vol. 153, N 1—2. — P. 1—5.
13. Мазо В. К., Гмошинский И. В., Зилова И. С. Микроводоросль спирулина в питании человека // Вопр. питания. — 2004. — № 1. — С. 45—53.
14. Chen F., Zhang Q. Inhibitive effects of Spirulina on aberrant crypts in colon induced by dimethyl hydrazine // Zhonghua Yu, Fang Yi, Xue Za Zhi. — 1995. — Vol. 29, N 1. — P. 13—17.
15. Chemomodulation of carcinogen metabolizing enzymes, antioxidant profiles and skin and forestomach papillomagenesis by Spirulina platensis / Dasgupta T., Banejee S., Yadav P. K., Rao A. R. // Mol. Cell Biochem. — 2001. — Vol. 226, N 1—2. — P. 27—38.
16. Combs G. F., Clark L. C., Turnbull B. W. Reduction of cancer mortality and incidence by selenium supplementation / Med. Clin. — 1997. — Vol. 92, N 3. — P. 42—50.
17. Ip C. Lesson from basic research in selenium and cancer prevention // J. Nutr. — 1998. — Vol. 128, N 11. — P. 1845—1854.
18. Effect on an aqueous extract of selenium-enriched garlic on in vitro markers and in vivo efficacy in cancer prevention / Lu J., Pei H., Ip C., Lisk D. J., Ganther H., Thompson H. J. // Carcinogenesis. — 1996. — Vol. 17, N 9. — P. 1903—1907.
19. Влияние обогащения селеном на биологическую активность спирулины и фикоцианина / Кравченко Л. В., Гладких О. Л., Гмо-
шинский И. В., Авреньева Л. И., Гусева Г. В., Тутельян В. А. // Вопр. биол. мед. фармацевт. химии. — 2006. — № 3. — С. 17—21.
20. Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ / Трещалина Е. М., Жукова О. С., Герасимова Г. К., Андронова Н. В., Гарин А. М. // В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общ. ред. Р. У. Хабриева. — 2-е изд. — М.: Медицина, 2005. — С. 637—651.
21. Chabner B. A., Longo D. L. Cancer Chemotherapy and Biotherapy: Principles and Practice. — 3rd ed. — Philadelphia: Lippincott. Raven, 2004. — P. 678—699.
22. Дерягина В. П., Рыжова Н. И. Действие модуляторов NO-синтаз на рост перевивной аденокарциномы Эрлиха // Вестн. РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. — 2007. — Т. 18, № 1. — С. 19—26.
23. Оксид азота в неопластическом процессе / Проскуряков С. Я., Коноплянников А. Г., Иванников А. И., Скворцов В. Г., Цыб А. Ф. // Вопр. онкол. — 2001. — Т. 47, № 3. — С. 257—269.
24. Chemopreventive properties of a selective inducible nitric oxide synthase inhibitor in colon carcinogenesis, administered alone or in combination with celecoxib, a selective cyclooxygenase-2 inhibitor / Rao C. V., Indranie C., Simi B., Manning P. T., Connor J. R., Reddy B. S. // Cancer Res. — 2002. — Vol. 62, N 1. — P. 165—170.
25. Flavones and polyphenols inhibit the NO pathway during apop-tosis of leukemia B-cells / Quiney C., Dauzonne D., Kern C., Four-neron J.-D., Izard J.-C., Mohammed R. M., Kolb J.-P., Billard C. // Leuk. Res. — 2004. — Vol. 28, N 8. — P. 851—861.
Поступила 15.05.2009
Elena Evgenievna Antoshina1, Tatiana Georgievna Gorkova2, Valentina Petrovna Deryagina3, Natalia Ilyinichna Ryzhova4
INHIBITIVE EFFECTS OF PHENOLIC ACIDS AND SPIRULINA FORMS ON EHRLICH'S CARCINOMA GROWTH IN MICE
1 MD, PhD, Senior Researcher, Laboratory of Carcinogenic Agents, Carcinogenesis Research Institute,
N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoye sh., Moscow, Russian Federation, 115478)
2 Researcher, Laboratory of Carcinogenic Agents, Carcinogenesis Research Institute, N. N. Blokhin RCRC
RAMS (24, Kashirskoye sh., Moscow, Russian Federation, 115478)
3 PhD, Senior Researcher, Group of Prevention of Carcinogenic Effects and Professional Tumors,
Clinical Oncology Research Institute, N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoye sh., Moscow, Russian Federation, 115478)
4 PhD, Senior Researcher, Group of Prevention of Carcinogenic Effects and. Professional Tumors,
Clinical Oncology Research Institute, N. N. Blokhin RCRC RAMS (24, Kashirskoye sh., Moscow, Russian Federation, 115478)
Address for correspondence: Deryagina Valentina Petrovna, Carcinogenic Effects Prevention Group, Carcinogenesis Research Institute, N. N. Blokhin RCRC RAMS, 24, Kashirskoye sh., Moscow,
Russian Federation, 115478; e-mail: Derygina@inbox.ru;
Effects of phenols, i. e. gallic and tannic acids, Spirulina and selenium-enriched Spirulina on growth of subcutaneously implanted Ehrlich's carcinoma was studied in Fi(C57Bl x CBA) mice. Chronic oral administration of gallic acid, 100 mg/kg, tannic acid, 100 mg/kg, Spirulina, 1000 mg/kg and selenium-enriched Spirulina, 1000 mg/kg, to mice led to a statistically significant 1.4—1.6-fold prolongation in tumor latency and a significant inhibition of tumor growth during 2 weeks after Ehrlich's carcinoma transplantation. Maximum early-stage tumor growth inhibition was 91% (p < 0.05), 78% (p < 0.05), 75% (p < 0.05) and 89% (p < 0.05) for gallic acid, tannic acid, Spirulina and selenium-enriched Spirulina, respectively. Statistically significant tumor growth inhibition was maintained under the effect of gallic acid only and led to a significant reduction in tumor weight by 27% (p < 0.05). A 14% selenium enrichment of Spirulina enhanced its protective effects against Ehrlich's carcinoma. Gallic acid inhibited endogenous nitric oxide generation, while tannic acid and Spirulina enhanced generation of nitric compounds in mice. These findings need confirmation and a more compelling rationale for the use of gallic and tannic acids, Spirulina and selenium-enriched Spirulina in cancer prevention.
Key words: Ehrlich's carcinoma, gallic acid, tannic acid, Spirulina and selenium-enriched Spirulina, tumor growth inhibition, mice.
