CC BY
58
УДК 619:616-097.3:579.882.11:636.8
ИММУНОМОРФОГЕНЕЗ ВАКЦИННОГО ПРОЦЕССА У КОШЕК, ПРИВИТЫХ ПРОТИВОХЛАМИДИОЗНОЙ ВАКЦИНОЙ
Авзалов Ф.З. - д.в.н., профессор; *Хусаинов Ф.М. - д.в.н., в.н.с.;
Губайдуллина Д.Р. - ветврач Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности, г.Казань
тел.: (843) 238-25-69
Ключевые слова: иммуноморфология, вакцина, хламидиоз, кошки.
Keywords: immunomorphology, vaccine, chlamydia, cats.
Отсутствие эффективных вакцинных препаратов затрудняет осуществление иммунопрофилактики хламидиоза у плотоядных животных для успешного проведения комплекса санитарно-оздоровительных мероприятий при этой инфекции. С учетом этих обстоятельств сотрудниками ФЦТРБ (авторами данной статьи) была сконструирована вакцина, испытанию и иммуноморфологической оценке которой посвящена настоящая работа.
Материалы и методы. Исследования проводились в остром опыте на 10 серонегативных беспородных кошках 6-8 месячного возраста, разделенных на две группы. Первая (опытная) группа из четырех кошек (№ 1, 2, 3, 4) была иммунизирована экспериментальной эмульсионной вакциной против хламидиоза плотоядных, изготовленной из штамма «СК -89/I/II» путем однократной внутримышечной инъекции в области бедра в дозе 0,5 мл. Остальные 6 голов не вакцинировались и служили в качестве контроля. За животными установили клиническое наблюдение и параллельно проводили серологические, микроскопические и микробиологические исследования. Спустя 30 дней после иммунизации, все кошки как опытные, так и контрольные были заражены возбудителем хламидиоза в инфицирующей дозе. Спустя один месяц после заражения все кошки опытной и контрольной группы были убиты с целью проведения иммуноморфологических исследований. При убое были взяты кусочки внутренних органов, которые фиксировались 12 %-ным раствором нейтрального формалина, спирт-формоле (9:1) и жидкости Карнуа. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, азур-II-эозином, по Ван-Гизону, РНК выявляли окраской по Браше, жиры -суданом-III, ДНК - по Фельгену.
Результаты исследований. Клинические исследования показали, что вакцинация у кошек не вызывала температурной реакции и других заметных поведенческих изменений. На 2-й день после вакцинации на месте введения вакцины у этих животных появлялась небольшая
припухлость размером 5-6 мм, которая к концу месяца полностью рассосалась. Ответная реакция на контрольное заражение у опытных и контрольных животных была различной. У подопытных отмечались лишь небольшие колебания температуры тела около физиологической нормы в пределах 0,2-0,3 0С на 2-й день после заражения, которые уже исчезали на третьи сутки, а общее состояние и аппетит у животных оставались в пределах нормы. У кошек контрольной (невакцинированной) группы отмечалась, хотя и кратковременная (в течение 1-2 суток), но температурная реакция и клинические симптомы острого заболевания: отказ от корма, общее угнетение, нарушение координации движений, слабость, слезотечение, слюнотечение. Две головы из этой группы, кошки №7 и № 8, пали соответственно на 10 и 11 дни после заражения от инфекционно-токсического процесса. Результаты серологических исследований по ИФА показали, что у вакцинированных кошек в крови появляются гуморальные антитела в титрах 1:4 - 1:16 (в среднем по группе 1:10). После контрольного заражения титры у них заметно возрастали и доходили до 1:32 - 1:64 (в среднем по группе 1:33), в то же время у контрольных кошек титры антител были на очень низком уровне со средним показателем по группе 1:3.
При патоморфологическом исследовании в лимфатических узлах у подопытных кошек рисунок фолликулярного строения был хорошо выражен. В лимфатических фолликулах отчетливо выступали светлые центры, которые содержали бластные клетки лимфоцитарного порядка, многие из которых имели фигур митоза, среди дендритных клеток также встречались макрофаги с фагоцитированными обломками ядер распавшихся клеток. Мантийная зона фолликулов была представлена в виде умеренно выраженной каемки, состоящей из густо расположенных В-лимфоцитов. В паракортикальной зоне, среди переплетающихся ретикулярных волокон, выявлялось скопление Т-лимфоцитов, среди которых обнаруживались макрофаги со светлыми ядрами и вакуолизированной цитоплазмой. Мякотные тяжи медулы утолщались за счет инфильтрации пиронинофильными плазматическими клетками, представленными в основном зрелыми их формами. Промежуточные корковые и мозговые синусы были расширены и заполнялись, кроме клеток лимфоцитарного ряда различной степенью их дифференциации, базофилами, эозинофилами и макрофагами с фагоцитированными базофильными частицами. В селезенке у этих кошек соотношение красной и белой пульпы было изменено в пользу последней. Лимфатические узелки органа находили с расширенными герменативными центрами, часть из которых выявлялась в виде светлых центров, остальные имели базофильную окраску. Центральные артерии фолликул были расширены, эндотелий их набухший, пролиферировал, стенки артерий подвергались мукоидному, а в некоторых и фибриноидному набуханию. Вокруг этих
сосудов четко выявлялись периартериальные муфты, состоящие из густо расположенных Т-лимфоцитов. В лимфоидной ткани узелков среди многочисленных В-лимфоцитов различной степени дифференциации присутствовало множество клеток плазмоцитарного ряда в основном бластных их форм. Маргинальная зона органа состояла из дендритных ретикулярных клеток с набухшими ядрами, которые также находились в состоянии активизации и пролиферировали. Указанная зона была также насыщена пиронинофильными плазматическими, а также ретикулярными клетками. Артерии кисточки и эллипсоиды расширялись, эндотелий их набухал и пролиферировал. В просвете расширенных венозных синусоидов содержалось повышенное количество клеточных компонентов крови, клеток лимфо-плазмоцитарного рода и макрофагов, часть из которых была загружена гемосидерином. Селезеночные тяжи густо инфильтрировались обогащенными РНК клетками плазмоцитарного порядка, в основном зрелыми их формами. В миокарде у подопытных кошек обнаруживали полнокровие сосудов, стенки которых подвергались мукоидному набуханию. Кардиомиоциты подвергались слабовыраженной зернистой дистрофии. В интерстиции органа выявляли очаговые скопления лимфоидно-макрофагальных клеток. В легких установили утолщение межальвеолярных перегородок за счет инфильтрации их лимфоидно-гистиоцитарными клетками и гиперплазию перибронхиальной лимфоидной ткани. В печени и почках наблюдали умеренное полнокровие сосудов, явления зернистой дистрофии в паренхиме и очаговую пролиферацию лимфоидно-макрофагальных клеток в интерстиции. У контрольных кошек две головы пали после заражения, при вскрытии их трупов обнаруживали патологоанатомические изменения, характерные для инфекционно-токсического процесса, развивающегося при хламидиозе. Гистологическим исследованием органов и тканей выживших животных установили следующее. В печени наблюдалось умеренное полнокровие сосудов, явления выраженной зернистой, вакуольной и жировой дистрофии гепатоцитов, дискомплексации печеночных балок и отека синусоидных пространств. В миокарде обнаруживали картину продуктивного васкулита в сосудах среднего и мелкого калибра, умеренного отека интерстиция и зернистой дистрофии, частично с некробиозом кардиомиоцитов. В почках развивались серозный, местами интракапиллярный продуктивный гломерулит, зернистая и липидная дистрофия эпителия канальцев. В лимфоузлах и селезенке рисунок фолликулярного строения сохранялся. Фолликулы имели небольшие размеры, без выраженных светлых центров, которые имели, как правило, базофильную окраску, или они были редуцированы. Лимфоидная ткань в целом была умеренно гиперплазирована, а ретикулярные волокна несколько огрубевшие. Паракортикальная зона коркового слоя лимфатических узлов и лимфоидная ткань периартериальных гильз
селезенки имела разреженное расположение клеточных элементов. Синусы лимфатических узлов несколько расширялись и содержали умеренное количество лимфо- и плазмобластов, а также макрофагов, имеющих мелкозернистые гранулы буро-коричневого пигмента. Окраской азур-эозином выявлялась инфильтрация соединительнотканной основы лимфоузлов лаброцитами и их дегрануляция.
Заключение. Анализируя результаты проведенных исследований, следует отметить, что испытуемая эмульсионная противохламидиозная вакцина является безвредной, обладает антигенными свойствами, способна индуцировать выработку в организме привитых кошек достаточно напряженного иммунитета. Последнее подтверждается нарастанием титров гуморальных антител в крови подопытных животных,
иммуноморфологической перестройкой их организма, а также результатами контрольного заражения, показавшего полную защищенность этих животных от инфицирования хламидиями. В то же время параллельное заражение контрольных (не привитых) животных сопровождается инфицированием организма с проявлением клинических симптомов болезни и даже их гибелью.
Что же касается сравнительно невысоких титров гуморальных антител в крови исследованных кошек, то это мы относим к особенностям формирования иммунитета при этой инфекции. Ряд авторов, занимающихся изучением механизмов противохламидиозного иммунитета, указывает на преобладающую роль клеточных факторов иммунологической защиты при этой инфекции (1, 2, 3), и результаты заражения вакцинированных животных в наших опытах являются еще одним подтверждением этого положения.
Таким образом, результаты проведенных серологических, гисто- и иммуноморфологических исследований, полученных в лабораторных условиях, дают основание предложить указанный биопрепарат для более широких производственных испытаний.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Авзалов Ф.З. Патоморфология, патогенез и иммуноморфология хламидиоза крупного рогатого скота: автореф. дис. ...д.вет.н. - Казань, 2002. - 48 с. 2. Евстифеев В.В. Опыт
усовершенствования инактивированной эмульсионной вакцины против хламидиоза рогатого скота / В.В. Евстифеев, Ф.М. Хусаинов, Л.А. Барбарова и др. // Уч. зап. КГАВМ. - Казань, 2012. - Т. 211. - С. 61-66. 3. Курбанов И.А., Авзалов Ф.З. Иммунитет при хламидийных инфекциях // Ветеринария, 1984. - № 4. - С. 26-27. 4. Хамадеев Р.Х., Хусаинов Ф.М., Евстифеев В.В. Клинико-эпизоотологические особенности течения хламидиоза и его профилактика в промышленном свиноводстве // Ветеринарный врач. - 2001. - № 4. - С. 27-32.
