CC BY
6
ГОСТ 11293-65) прородили количественное определение бактерий, дрожжей и плесневых грибов, в том числе наличие золотистого стафилококка. Кроме того, во всех пробах устанавливали коли-титр как показатель санитарно-гигиенического состояния пищевых продуктов. Высев производили непосредственно после приготовления кремов, через 7 и 21 ч хранения при различных температурных режимах: 0—2° и 6—8° (РТУ РСФСР 746-63).
Результаты опытов приведены в табл. 1 и 2.
Выявленное количество микроорганизмов в альгинате натрия не превышает норм, установленных для желатина (ГОСТ 11213-653). Коли-титр для сливок был менее 3,3 см3, желатина и альгината натрия — менее 11,1 г. Полученные результаты позволили дать удовлетворительную санитарно-гигиеническую оценку новому студнеобразователю—альгина-ту натрия.
Последующему микробиологическому исследованию были подвергнуты сливочные кремы. Количество бактерий в 1 г только что приготовленных кремов оказалось следующим: в контроле (без добавления стабилизаторов) —524, в креме с добавлением желатина — 840 и с добавлением альгината натрия — 1128. Аналогичное соотношение количества микробных клеток наблюдалось и при хранении в зависимости от сроков и температуры хранения. Наибольшее число бактерий имели кремы с альгинатом натрия, хранившиеся в течение 21 ч при 6—8°. Но даже при таком длительном хранении кремов в условиях 6—8° не отмечалось превышения допустимых пределов наличия микроорганизмов в продуктах. Среди выявленной микрофлоры патогенные стафилококки не обнаружены.
Вывод
Микробиологическая характеристика сливочных кремов не ухудшается, если в качестве стабилизатора использовать студнеобразователь альгинат натрия.
Поступила 13/Х11 1974 г.
УДК 615.285.6.01&.4в
Л. А. Ховаева, проф. А. И. Штенберг
ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ МАЛЫХ ДОЗ ХЛОРОФОСА И МЕТИЛНИТРОФОСА
Лаборатория токсикологии пестицидов Института питания АМН СССР, Москва
Целью настоящей работы было изучение состояния иммунологической реактивности организма животных при воздействии малых количеств широко применяемых в сельском хозяйстве пестицидов: хлорофоса (0,0-диметил-2,2,2-трихлор-1-оксиэтилфосфонат) и ме-тнлнитрофоса (-0,0-диметил-0-4-нитро-3-метилфенилтиофосфат). Опыт проводили на 150 растущих белых крысах-самцах линии Вистар. Препараты вводили перорально, ежедневно в дозах V10n ЛД ьо (хлорофос —7 мг/кг, метилнитрофос —5 мг/кг). Хронический эксперимент включал 7*/2 мес затравки и 3'/2 мес восстановительного периода (свободного от введения). Крыс содержали на экспериментальной диете, принятой в Институте питания АМН СССР, что позволяло ее сбалансировать по всем пищевым компонентам.
Животных двукратно с интервалами через 5 дней иммунизировали эритроцитами барана (по 0,5 мл 30% взвеси эритроцитов на крысу). Иммунизацию проводили в момент обследования через 2V2 и 71/а мес и после прекращения введения пестицидов. Показателями иммунологической реактивности служили титры гемагглютининов и гемолизинов в сыворотке крови, которые определяли через 5 и 10 дней после первичной иммунизации1.
Через 21/2 мес введения пестицидов у отдельных групп животных изучали титр антител после двукратной иммунизации. Через 10 дней после первичной иммунизации у всех животиых определяли фракционный состав белка (Г. В. Троицкий) и комплементарную активность сыворотки крови (Л. С. Резникова). Контрольным тестом, характеризующим токсичность взятых в опыт пестицидов, являлась активность ацетилхолинэстеразы в крови s.
В целях выявления возможных изменений в выработке антител и других показателей (белковые фракции крови, титр комплемента, активность ацетилхолинэстеразы) у иммунизированных крыс (отдельная группа) через 7V2 мес после начала введения пестицидов и спустя 3V2 мес от начала восстановительного периода было применено 22-дневное голодание. Такое длительное голодание ставило целью выяснить интенсивность образования антител на фоне резко нарушенного белкового обмена (двукратную иммунизацию проводили через 12 дней голодания животных, за 5 и 10 дней до обследования).
Данные о фракционном составе белка, активности комплемента в сыворотке крови и активности ацетилхолинэстеразы в крови обрабатывали статистическим методом малой выборки. Достоверность наблюдаемых изменений определяли по таблице Стьюдента
1 Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследований. Под ред. М. О. Биргера, 1967.
* Руководство по изучению питания и здоровья населения. Под ред. А. А. Покровского, 1964.
(Л. С. Каминский). При обработке данных, полученных в результате чтения реакций агглютинации и гемолиза по традиционным оценкам 4 + 3+ 2+ 1 + 0, использовали метод статистической обработки одиночных и множественных серологических реакций по многоканальной системе (Е. П. Тамбовцев и соавт.). В каждой группе было по 8—10 животных.
При введении хлорофоса титр гемагглютининов оказался наиболее стойким показателем. Его снижение было достоверным лишь после голодания в конце затравочного периода. Однако в восстановительном периоде до голодания и после него существенных изменений в титре этих антител не обнаружено.
Наиболее ранним и чувствительным показателем через 5 дней после 1-й иммунизации был титр гемолизинов. Достоверное его повышение на 17,6—14,2% отмечалось через 21/2 и 71/2 мес после затравки хлорофосом. При голодании крыс в конце затравочного периода и восстановительном периоде изменений в титре гемолизинов у подопытных крыс по сравнению с контролем не отмечено.
Изучение динамики титра антител, начатое через 272 мес после введения пестицидов, подтвердило, что изменения под влиянием хлорофоса носят фазный, нестойкий характер. Стимуляция в нарастании титра антител (гемолизинов) в начальный период, через 5 дней после 1-й иммунизации сменялась на 50-й день быстрым падением титра у подопытных крыс, и^к 60-му дню уровень титра антител у подопытных крыс был аналогичен тому, который наблюдался у контрольных крыс.
Титр комплемента (см. таблицу) у подопытных крыс при введении хлорофоса не отличался от титра комплемента контрольных животных. При иммунизации крыс активность комплемента адекватно повышалась. После длительного голодания активность.комплемента понижалась.
Количество у-глобулина через 71/2 мес от начала введения и через 31/2 мес после прекращения введения хлорофоса было незначительно увеличено, вероятно, из-за повышения защитной функции крыс при воздействии пестицида. Вместе с тем в условиях голода в те же сроки при введении хлорофоса отмечалось некоторое понижение содержания у-гло-булинов. В восстановительном периоде существенных сдвигов в содержании глобулинов не было.
Активность ацетилхолинэстеразы при этой же дозе хлорофоса оказалась нестойкой. Снижение активности на 25,9% наблюдалось лишь через 77 2 мес и в большей степени (на 53%) после голодания 3.
Титр гемолизинов через 2Чг и 71/2 мес от начала введения метилнитрофоса нарастал более интенсивно, чем в контроле, а при действии хлорофоса нарастание наблюдалось не только через 5 дней после 1-й иммунизации (на 12,85—27,1%), но и через 10 дней после 1-й
Изменение содержания у-глобулинов и титра комплемента у контрольных и подопытных крыс, получавших хлорофос и метилнитрофос, на фоне оптимальной диеты и после 22-дневного
голодания (М— т)
Сроки опыта
Показатели Группа животных через 27. ыес от начала введения пестицидов через 7'/, мес от начала введения пестицидов голодание (через 71/, мес от начала введения пестицидов) через 3'/« «ее после прекращения введения пестицидов голодание (через 37, мес после прекращения введения пестицидов)
Содержание у-гло-булинов (в%) Контрольная Крысы, получавшие хлорофос Крысы, получавшие метилнитрофос Контрольная Крысы получавшие хлорофос Крысы, получавшие метилнитрофос 5,92:0,75 5,02:1,26 5,172:1,05 11,62:1,5 12,62:0,86 11±1 ,4 122:1,93 11,62:2,36 13,72:1,27 9,62:0,43 10,62:1,07 10,12:0.86 142:1,07 13,12:1,5 15,12:1,82
Титр комплемента (в усл. ед.) 0,06—0,011 0,05^:0 0,12:0,021 0,082:0,011 0,252:0,021 0,162:0,021 0,0662:0,015 0,0752:0,014 0,12:0,017 0,092:0,014
0,052:0 0,072:0,011 0,162:0,021 0,12:0,021 0,132:0,011
3 При голодании без введения пестицидов активность ацетилхолинэстеразы у крыс через 22 дня была понижена незначительно (1,97+ 0,027 у неголодавших животных, 1,82 + 0,067 мкмоль у животных после длительного голодания).
4*
99
иммунизации, т. е. во второй период образования антител (на 10,56—14,21%). После длительного голодания и введения метилнитрофоса титр гемолизинов через 10 дней после 1-й иммунизации значительно снизился по сравнению с контрольными крысами и животными, получавшими хлорофос (на 26,82%). В восстановительном периоде до голодания титр гемолизинов был несколько выше титра, наблюдаемого у контрольной группы. Однако после длительного голодания титр гемолизинов значительно снизился по сравнению с уровнем, наблюдаемым в этом периоде у контрольных крыс и животных, получавших хлорофос (на 25—27,5%). Более стойким, как и при действии хлорофоса, был титр гемагглютининов. Однако в восстановительном периоде после длительного голодания через 5 и 10 дней после 1-й иммунизации он был значительно ниже уровня, наблюдаемого у контрольных крыс и животных, получавших хлорофос (на 25—44%).
Изучение динамики титра антител, начатое через 2'/2 мес после введения метилнитро-фоса, показало так же, как и при введении хлорофоса, более длительную стимуляцию нарастания титра гемолизинов (через 5 и 10 дней после 1-й иммунизации). Однако титр этих антител быстро снижался на 30, 37 и 50-й день (период более длительный, чем при хлорофосе). Интересно отметить, что на 30-й и 37-й день титр гемагглютининов в отличие от гемолизинов оказался выше, чем в контроле. К 60-му дню титр антител, как и при воздействии хлорофоса, был на уровне того, который наблюдался у контрольных животных.
Титр комплемента так же, как и при введении хлорофоса, на всем протяжении опыта изменялся незначительно. Содержание угло^Улинов ПРИ введении метилнитрофоса имело тенденцию к повышению через Зг/2 мес восстановительного периода после длительного голодания. Эти изменения в содержании 7'гл°бУлин0В. по нашему мнению, свидетельствуют о некоторой защитной реакции при введении в организм постороннего вещества. Изменения активности ацетилхолинэстеразы при воздействии метилнитрофоса в отличие от хлорофоса были стойкими. Через 71/2 мес отначала введения пестицидартмечалось снижение активности ацетилхолинэстеразы на 31,4%; такой уровень сохранялся и в восстановительном периоде после длительного голодания (на 39%).
В заключение можно отметить, что в наших опытах иммунные свойства организма по ряду показателей у животных, иммунизированных эритроцитами барана, были чувствительными к воздействию малых доз хлорофоса и особенно метилнитрофоса. Наиболее чувствительной была искусственная иммунизация — титр гемолизинов, в основном в начальный период образования антител, т. е. через 5 дней после иммунизации. Титр гемагглютининов был более стойким и изменялся лишь в конце опыта и только при введении метилнитрофоса.
Изменение иммунологических реакций организма подопытных животных существенно не отразилось на их общем состоянии. По-видимому, изменения иммунологических реакций находились в пределах компенсаторных возможностей организма.
Результаты сравнительного изучения влияния хлорофоса и метилнитрофоса на иммунологическое состояние теплокровных животных при введении их в дозах, равных 1/10в ЬД50, на фоне оптимального питания, позволили прийти к выводу, что применению хлорофоса в сельском хозяйстве для обработки продовольственных культур следует отдать предпочтение.
ЛИТЕРАТУРА. Каминский Л. С. Статистическая обработка лабора» торных и клинических данных. Л., 1964, — Резникова Л. С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях. М., 1967. — Тамбовцев Е. П. и др. — сЖ. микробиол.1, 1971, № 1, с. 74—79. — Троицкий Г. В. Электрофорез белков. Харьков, 1962.
Поступила 26/У1 1974 г.
УДК 615.831.4.095*4
Канд. мед. наук Ю. И. Прокопенко (Москва)
НЕКОТОРЫЕ ДАННЫЕ О МЕХАНИЗМАХ ЗАЩИТНОГО ДЕЙСТВИЯ
УФ-ИЗЛУЧЕНИЯ
Вопрос о повышении неспецифической иммунологической реактивности организма изучен хорошо. Вместе с тем появляются данные о повышении устойчивости организма и к неблагоприятным факторам внешней среды химической природы. Так, показано, что в результате УФ- облучения субэритемными дозами животных значительно возрастает устойчивость организма к действию токсических количеств фтора и свинца, а также органических соединений, таких, как метилмеркаптофос (И. Н. Мотузков и Р. Д. Габович; Р. Д. Га-бович и соавт.). Субэритемные дозы УФ-излучения проявляют выраженный защитный эффект в отношении химического канцерогена— 3,4-бензпирена, что отмечено в наших исследованиях (Н. М. Данциг и соавт.). Чувствительность организма к действию тех или иных химических факторов внешней среды во многом зависит от активности ферментов тканевого дыхания и микросомальных ферментов печени (С. Е. Манойлов; Cohney и Burns). В связи с изложенным мы сочли целесообразным изучить влияние различных доз длинноволнового УФ-излучения на активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и а-глицерск}юсфатдегидроге-
