Иммунологический статус коров при лечении субклинического мастита альвесолом

Британ Мария Николаевна; Герцева Ксения Аркадьевна; Киселева Елена Владимировна; Кулаков Виталий Владиславович; Сайтханов Эльман Олегович

УДК 619:636.2:615.038

Иммунологический статус коров при лечении субклинического мастита

альвесолом

Британ Мария Николаевна, старший преподаватель e-mail: mcherepchenko@bk.ru

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева.

Герцева Ксения Аркадьевна, кандидат биологических наук, доцент e-mail: okavet@yandex.ru

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева.

Киселева Елена Владимировна, кандидат биологических наук, доцент e-mail: super.juliakiseleva2013@yandex.ru

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева.

Кулаков Виталий Владиславович, кандидат биологических наук, доцент e-mail: kulakov.vitalii@yandex.ru

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева.

Сайтханов Эльман Олегович, кандидат биологических наук, доцент e-mail: elmanrzn@gmail.com

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Рязанский государственный агротехнологический университет им. П. А. Костычева.

Аннотация. Изучена динамика показателей клеточного и гуморального иммунитета у коров при применении препарата «Альвесол» в лечении субклинического мастита. При анализе иммунного статуса коров в опытной группе, пролеченных альвесолом, по сравнению с показателями до лечения, выявлено снижение уровня лейкоцитов на 27,9 %, нейтрофилов - на 19,8 %, палочкоядерных форм нейтрофилов - на 70,7 %, повышение уровня лимфоцитов - на 33,5 %. В составе субпопуляций лимфоцитов после лечения альвесолом обнаружено достоверное снижение содержания CD3+ лимфоцитов на 25,6 %, повышение индекса CD4+/ CD8+ на 32,1 % за счет увеличения концентрации CD4+-лимфоцитов на 12,9 %, повышение CD16 - на 18,1 %. За период лечения в опытной группе, по сравнению с контрольной, отмечалось достоверное повышение сывороточного IgA в 5,5 раз. Установлено повышение спонтанного НСТ-теста в крови коров на 6 день в опытной группе и в контрольной группе в 1,43 раза и в 1,62 раза соответственно. В крови коров опытной группы после лечения было отмечено достоверное повышение ин-

дуцированного НСТ-теста на 51 %. В опытной и в контрольной группе произошло снижение индекса стимуляции нейтрофилов на 35,7 и 40,0 % соответственно по сравнению с показателями до лечения. Проведенные научные исследования показывают, что применение альвесола при лечении субклинического мастита у коров достоверно способствует активизации клеточного звена иммунитета.

Ключевые слова: крупный рогатый скот, субклинический мастит, терапия, клеточный и гуморальный иммунитет, альвесол.

Введение. Обеспечение населения продукцией молочного скотоводства отечественного производства (импортозамещение) является одной из важнейших задач агропромышленного комплекса [3, 7, 9]. Значительное повышение молочной продуктивности животных вызывает у них напряжение в работе всех органов и систем организма [11]. Это приводит к понижению сопротивляемости организма к неблагоприятным условиям внешней среды, увеличению частоты встречаемости маститов, а значит и к снижению молочной продуктивности [1, 4]. По мнению ученых и практиков в последнее время наиболее актуален вопрос «экологически безопасной ветеринарии», основанной на лечении животных с применением малотоксичных соединений, обладающих противомикробным, противовоспалительным и иммуномодулирующим действием на ранних стадиях заболевания [2, 12]. Бессистемное применение антибиотиков, повышение устойчивости патогенных и условно патогенных возбудителей к широкому кругу противомикробных средств, используемых в ветеринарии, нарушение нормального соотношения анаэробных и аэробных бактерий в желудочно-кишечном тракте животных в результате неблагопри-

V/ V/ и ^ I

ятных воздействий окружающей среды, стрессы, обусловленные интенсификацией животноводства, механизацией трудоемких процессов, ведут к снижению активности иммунной системы, к так называемой иммунодепрессии [6, 8, 10]. Большой научный и практический интерес представляет определение иммунологического статуса коров при лечении субклинического мастита малотоксичными гомеопатическими препаратами [13, 14, 15].

Цель исследований - изучить динамику показателей клеточного и гуморального иммунитета у коров при применении препарата «Альвесол» в лечении субклинического мастита.

Материалы и методы исследований. Научно-исследовательская работа была проведена на кафедре ветеринарно-санитарной экспертизы, хирургии, акушерства и внутренних болезней животных факультета ветеринарной медицины и биотехнологии ФГБОУ ВО РГАТУ, в научно-исследовательской лаборатории нанотехнологий в животноводстве и растениеводстве ФГБОУ ВО РГАТУ, ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России «Научно-клинический центр гематологии, онкологии и иммунологии» г. Рязани. Объектом исследований являлись коровы голштинизированной черно-пестрой породы, принадлежащие ООО «Агрокапитал» Рязанского района Рязанской области.

Диагноз субклинического мастита ставили при помощи диагностикума «Ке-нотест». Для подтверждения этого диагноза была использована методика определения соматических клеток в молоке на приборе «Соматос-мини» (ГОСТ Р 234532014). Мастит считали субклиническим при отсутствии клинических признаков и количестве соматических клеток в молоке свыше 400 тыс/см3. Объектом исследований были коровы с продуктивностью 5000-7500 тыс. литров за 305 дней лак-

тации. Для изучения влияния препарата «Альвесол» на иммунологический статус были созданы опытная и контрольная группы коров. Животные были подобраны по методу групп-аналогов (n=8): по возрасту (4-5 лет), периоду лактации (3-4 месяц лактации), живой массе (500-550 кг), по условиям кормления и содержания, по клиническим признакам здоровья (субклинический мастит). В опытной группе для лечения субклинического мастита был назначен гомеопатический препарат в виде инъекций «Альвесол» (в 1000 мл содержатся: Alliumsativum 0 - 0,3 мл, Lachesismutus D4 - 0,1 мл, Plantagomajor 0 - 0,2 мл, Salviaofficinalis 0 - 0,3 мл и вспомогательные вещества: метил парагидроксибензоат, натрия хлорид, натрия ацетата тригидрат, кислота соляная, спирт этиловый 95 %, полисорбат 80, вода для инъекций до 1000 мл) [16]. Терапия осуществлялась по следующей схеме: внутримышечно в среднюю треть шеи по 5 мл два раза в день в течение 5 дней. В контрольной группе лечение не проводилось.

В процессе исследования иммунологического статуса отбор крови проводили рано утром до кормления по общепринятой в ветеринарии методике из хвостовой вены двукратно: в день постановки диагноза (начала лечения) и на 6 день наблюдения за животными (период выздоровления). В качестве антикоагулянта использовался К2ЭДТА. После взятия крови пробирку с образцом медленно переворачивали 8-10 раз для перемешивания крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка проб осуществлялись при температуре 18-23°С в вертикальном положении в пределах 24 часов с момента взятия. Иммунофенотипирование лимфоцитов проводилось c использованием моноклональных антител (IO Test, Beckman Coulter, USA) к поверхностным дифференцировочным антигенам на клетках иммунной системы методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточном цитофлуориметре Cytomics FC500 (Beckman Coulter, USA). Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов классов A, M, G проводилось методом ИФА. Функционально-метаболическую активность нейтрофилов оценивали по результатам реакции восстановления нитросинеготетразолия в НСТ-позитивных нейтрофилах.

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием критерия Стьюдента. Результаты исследований обрабатывались на IBM PC с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel.

Результаты исследований. Согласно ранее проведенным нашим исследованиям, на основании изучения статистических данных ветеринарно-зоотехнической документации в ООО «Агрокапитал» за 2018 г, мы установили, что средняя молочная продуктивность коров в этом опытном хозяйстве была в пределах средних значений по РФ и составляла 6934 тыс. кг молока.

Исходя из данных таблицы 1, стоит отметить, что частота встречаемости клинического и субклинического мастита в зимне-весенний период 2018 года у коров в ООО «Агрокапитал» составляла 13,2 и 32,9 % соответственно.

Таблица 1 - Показатели молочного производства ООО «Агрокапитал»

№ Показатели

1 Поголовье, гол 808

2 Дойное стадо,гол 295

3 Средняя продуктивность, тыс. литров за 305 дней лактации 6934

4 Частота встречаемости клинического мастита, % 13,2

5 Частота встречаемости субклинического мастита, % 32,9

Эти данные говорят о завышенной доле субклинического мастита среди незаразной патологии, что создает повышенный риск развития клинической формы воспаления вымени. В предыдущих научно-исследовательских работах было проведено бактериологическое исследование проб молока от коров с субклиническим маститом и был обнаружен Staphylococcus аureus в 85,6 % случаев. Предварительно была определена терапевтическая эффективность альвесола в лечении субклинического мастита [2]. Для более тщательного изучения влияния гомеопатического препарата на организм коров при лечении субклинического мастита, было принято решение выяснить его влияние на иммунологический статус.

В ходе научных исследований мы проследили влияние альвесола на показатели клеточного и гуморального иммунитета коров с субклиническим маститом (таблица 2).

Таблица 2 - Изменение лейкоцитарного профиля у коров с субклиническим маститом до и после лечения

Показатели Группы

до лечения контроль (n=8) после лечения контроль (n=8)

опыт (n=8) опыт (n=8)

Лейкоциты, 109 г/л 11,3±0,61 11,8±0,85 8,15±0,98* 14,6±0,82*

Нейтрофилы, 109 г/л 6,78±0,56 6,42±0,48 3,92±0,65** 8,73±0,78

Нейтрофилы, % 60,0±2,42 54,0±1,95 48,1±1,46** 59,8±1,38*

Ю, % - - - -

П, % 14,0±2,24 10,3±1,56 4,1±0,96** 17,8±1,15**

С, % 46,0±2,18 43,7±2,15 44,2±2,04 42,0±1,96

Эозинофилы, % 3,8±0,29 8,2±0,65 3,6±0,45 4,4±0,32

Базофилы, % 0,7±0,06 0,8±0,12 0,6±0,09 0,8±0,09

Моноциты, % 4,8±0,56 8,6±0,95 6,7±0,34 7,0±0,86

Лимфоциты,109 г/л 3,47±0,98 3,36±0,85 3,34±1,12 3,28±0,95

Лимфоциты, % 30,7±3,18 28,4±3,12 41,0±3,22* 28,1±2,74

*- р<0,05, ** - р<0,01 - разница достоверна по сравнению с показателями до лечения.

При оценке лейкоцитарной формулы крови коров с субклиническим маститом, отобранных до лечения, во всех группах обнаружен нейтрофильный сдвиг влево за счет повышения палочкоядерных нейтрофилов и снижения количества лимфоцитов на фоне лейкоцитоза.

При анализе иммунного статуса коров в опытной группе, пролеченных альве-солом, по сравнению с первичным иммунным статусом до лечения, были отмечены: тенденция к снижению лейкоцитоза (с 11,3±0,61 до 8,15±0,98-109 г/л, р<0,05) за счет снижения уровня нейтрофилов в крови (с 60,0±2,42 % до 48,1±1,46 %, р<0,01); снижение палочкоядерных форм нейтрофилов (с 14,0±2,24 до 4,1±0,96 %, р<0,01); нормализация уровня лимфоцитов (с 30,7±3,18 % до 41,0±3,22 %, р<0,05) (рисунок).

Рисунок - Динамика содержания лейкоцитов в крови при применении альвесола до и после лечения

субклинического мастита у коров

В контрольной группе необходимо отметить достоверное повышение количества лейкоцитов (с 11,8±0,85 до 14,6±0,82-109 г/л, р<0,05), повышение числа нейтрофилов (с 54,0±1,95 до 59,8±1,38 %, р<0,05), повышение числа палочкоя-дерных нейтрофилов (с 10,3±1,56 до 17,8±1,15 %, р<0,01). Эти изменения свидетельствуют о прогрессировании воспалительного процесса в тканях вымени.

В составе субпопуляций лимфоцитов после лечения альвесолом субклинического мастита у коров опытной группы обнаружено достоверное снижение содержания CD3+ лимфоцитов (с 1,91±0,06 до 1,42±0,08-109г/л, р<0,05) (табл. 3). В тоже время отмечено достоверное повышение иммунорегуляторного индекса CD4+/CD8+ (с 1,71±0,19 до 2,26±0,31, р<0,05) за счет увеличения концентрации CD4+-лимфоцитов (с 40,3±1,65 % до 45,5±1,48 %, р<0,05) без достоверного изменения количества CD8+-клеток, что свидетельствует об активации клеточного звена иммунитета. Согласно данным таблицы, CD16 ^К-лимфоциты) в опытной группе после лечения достоверно повысился (с 8,8±0,45 до 10,4±0,38 %, р<0,05).

Таблица 3 - Определение популяций Т- и В-лимфоцитов и субпопуляций Т-лимфоцитов у коров с субклиническим маститом до и после лечения

Показатели Группы (п=8)

до лечения контроль после лечения контроль

опыт опыт

Cluster of differentiation

CD3,109r^, 1,91±0,06 1,S5±0,0S 1,42±0,1S* 1,77±0,04

--------------, % 55,0±3,46 55,1±4,12 43,5±2,72* 53,9±2,SS

CD4,109 г/л, 1,40±0,02 1,42±0,05 1,52±0,0S 1,39±0,06

--------------, % 40,3±1,65 42,3±1,72 45,5±1,4S* 42,3±2,02

CDs,109rM 0,82±0,12 0,7S±0,1S 0,67±0,16 0,95±0,12

--------------, % 23,6±1,S5 23,2±1,12 20,0±1,16 2S,9±1,12

CDi6,109r^ 0,35±0,0S 0,32±0,04 0,27±0,09 0,35±0,0S

--------------, % S,S±0,45 9,5±0,4S 10,4±0,3S* 7,6±0,2S

CD19, % 0,72±0,09 0,S6±0,0S 0,66±0,0S 0,92±0,05

CD25,109 г/л 3,2±0,1S 2,9±0,16 2,4±0,14* 3,1±0,24

Группы (п=8)

Показатели до лечения контроль после лечения контроль

опыт опыт

ИРИ (СЭ4/ сэ8) 1,71±0,15 1,82±0,18 2,26±0,16* 1,46±0,19

*- р<0,05, ** ■ - р<0,01 - разница достоверна по сравнению с показателями до лечения.

Этот факт говорит о необходимости изучения противовирусного действия изучаемого препарата. У коров опытной группы установлено достоверное понижение CD25 лимфоцитов (с 3,2±0,18 до 2,4±0,14 %, р<0,05) по сравнению с показателями до лечения. За 5 дней лечения в крови у коров опытной и контрольной групп достоверных изменений уровня CD19+- В-лимфоцитов не обнаружено.

На гуморальное звено иммунитета альвесол не оказал выраженного влияния (табл. 4). Предполагаемого изменения количества IgG и 1д М как в опытной, так и в контрольной группе не зафиксированно.

Таблица 4 - Определение концентрации сывороточных иммуноглобулинов классов А, М, G у коров с субклиническим маститом до и после лечения

Показатели Группы (п=8)

до лечения контроль после лечения контроль

опыт опыт

1д G, г/л 9,0±1,16 8,7±1,03 5,30±1,28 9,65±0,96

1д А, г/л 0,15±0,08 0,23±0,04 0,83±0,23* 0,45±0,06

1д М, г/л 0,23±0,08 0,25±0,05 0,13±0,08 0,16±0,06

*- р<0,05, ** - р<0,01 - разница достоверна по сравнению с показателями до лечения.

Эти данные говорят о том, что в опытной и контрольной группах существует повышенный риск хронизации субклинического мастита. Однако за период лечения отмечается достоверное повышение сывороточного 1дА (с 0,15±0,08 % до 0,83±0,23 %, р<0,05). Стоит отметить, что уровень 1дА не вышел за пределы ре-ференсных значений, т.е. произошла его оптимизация.

По данным таблицы 5, установлено повышение спонтанного НСТ-теста в крови коров опытной группы после проведенного лечения (с 3,16±0,18 до 7,7±1,28, р<0,05) и у коров контрольной группы (с 4,21±0,82 до 6,86±0,68, р<0,05) по сравнению с показателями до лечения.

Таблица 5 - Определение бактерицидной активности нейтрофилов (НСТ-тест) у коров с субклиническим маститом до и после лечения

Показатели Группы (п=8)

до лечения контроль после лечения контроль

опыт опыт

НСТСп0нТ. 3,16±0,18 4,21±0,82 7,7±1,28* 6,86±0,68*

НСТстим. 45,0±4,56 42,0±4,24 69,0±3,86** 44,0±3,42

Индекс стимуляции 14,0±1,72 9,98±1,12 8,96±1,45* 6,4±1,06*

*- р<0,05, ** - р<0,01 - разница достоверна по сравнению с показателями до лечения.

Мы предполагаем, что активация спонтанного НСТ-теста, вероятно, обусловлена мощной антигенной стимуляцией полиморфноядерных лейкоцитов в условиях стафилококковой антигенемии. В крови коров опытной группы после лечения

было отмечено достоверное повышение показателя индуцированного НСТ-теста (с 45,0±4,56 до 68,0±3,86, р<0,01). Согласно научным данным [1, 5], этот факт может свидетельствовать об активизации функционально-метаболической активности нейтрофилов. Однако и в опытной, и в контрольной группах произошло снижение индекса стимуляции нейтрофилов на 35,7 и 40,0 % соответственно. Вероятно, эти изменения связаны со стойким угнетением активности нейтрофильных гранулоцитов. Нейтрофилы становятся не в состоянии метаболизировать свой эф-фекторный потенциал и нарабатывать активные формы кислорода.

Таким образом, проведенные научные исследования показывают, что применение альвесола при лечении субклинического мастита у коров достоверно способствует активизации клеточного звена иммунитета. Заметных изменений в гуморальном звене иммунитета при лечении субклинического мастита альвесолом в проведенных исследованиях не зафиксировано. Эти данные могут служить поводом для коррекции дозы и длительности курса лечения субклинического мастита альвесолом с целью снижения риска хронизации изучаемой патологии.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Список литературы:

1. Бодрова, О.С. Оценка и коррекция иммунного статуса коров в зависимости от продуктивности, сезона года, физиологического состояния и генотипа: дис. ... канд. вет. наук. / О.С. Бодрова. - Екатеринбург, 2009. - 135 с.

2. Britan, M.N. Nosological profile of animal of Ryazan oblast and évaluation of the efficiency of modern médianes for treating mastitis / M.N. Britan, K.A. Gerceva, E.V. Kiseleva, V.V. Kulakov, E.O. Saytkhanov, R.S.Soshkin // International journal of pharmaceutical research / Volume 11. Issue 1, Jan - Mar, 2019. - P.1040-1048. - Режим доступа: http://ijpronline.com/ViewArticleDetail.aspx?ID=8674

3. Эффективность гомеопатического препарата «Мастометрин» при лечении мастита молочных коров / В.К. Ирхина, Н.С. Голайдо, М.Е. Остякова, Н.Н. Малкова, Е.В. Воскобойников // Вестник КрасГАУ. - 2015. - № 12. - С. 260264.

4. Каширина, Л.Г. Продуктивность и качество молока коров под влиянием препаратов «Е-селен» и «Бутофан» / Л.Г. Каширина, К.А. Иванищев, К.И. Романов // Вестник РГАТУ. - 2016. - № 4. С.15-19.

5. Логинов, С.И. Диагностическая значимость циркулирующих иммунных комплексов у крупного рогатого скота при инфекционно-воспалительных процессах: автореф. дис. ... канд. вет. наук / С.И. Логинов. - Барнаул, 1998. - 24 с.

6. Особенности иммунодефицитов у крупного рогатого скота / В.А. Мищенко, Н.А. Яременко, А.В. Мищенко, А.В. Кононов // Ветеринария. - 2006. - № 11. - C. 17-19.

7. Мударисов, Р.М. Биохимические и морфологические показатели крови и уровень естественной резистентности коров голштинской породы // Р.М. Мударисов, Г.Р. Ахметзянова, И.Н. Хакимов // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии: научно-теоретический журнал. - Ульяновск: УГСХА. - 2015. - № 2.- С.116-120.

8. Никитина, М.В. Лечебно-профилактические мероприятия при мастите крупного рогатого скота / М.В. Никитина, О.А. Столбова, Л.Н. Скосырских // Молочнохозяйственный вестник. - 2019. - № 3.- C. 31-40.

9. Петров, Р.В. Иммунология / Р. В. Петров. - М.: Медицина, 1983. - 368 с.

10. Соболева, Е.Н. Опыт применения антиагрегационной терапии при лечении клинического мастита у коров / Е.Н. Соболева, Ю.Л. Ошуркова // Молочнохозяйственный вестник. - 2013. - № 1. - С. 17-22.

11. Топурия, Г.М. Иммунный статус крупного рогатого скота при применении гамавита / Г.М. Топурия, Л.Ю. Топурия // Известия Оренбургского ГАУ.-Оренбургский ГАУ. - 2011. - Т.1. - № 21. - С. 68-71.

12. Туников, Г.М. Биологические основы продуктивности крупного рогатого скота: учебное пособие / Г.М. Туников, И.Ю. Быстрова. - СПб.: Лань, 2018. - 336 с.

13. Day, C. Clinical trials in bovine mastitis - use of nosodes for prevention / С. Day // The British Homoeopathic Journal. - 1986. - no 75. - pp.11-14. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://www.thieme-connect.com/ products/ejournals/pdf/10.1016/S0007-0785(86)80027-8.pdf

14. Dairy, Sci J. Invited review: A systematic review and qualitative analysis of treatments other than conventional antimicrobials for clinical mastitis in dairy cows / Sci J Dairy // PubMed.gov. - 2017.- 100 р. [Электронный ресурс]. -Режим доступа: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28755947

15. Ebert, F., Randomisierte, placebo-kontrollierte Studie zur Untersuchung der Effekte einer homöopathischen Mastitistherapie bei Milchkühen, PhD thesis, University of Berlin, Berlin, Germany. - 2017. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/5920

16. Vidal 2012. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. -М.: АстраФармСервис, 2019. - 1200 c.

References:

1. Bodrova O. S. Evaluation and correction of the immune status of cows depending on productivity, season, physiological state and genotype. Abstract of Candidate's thesis. Veterinary. Ekaterinburg, 2009. 135 p.

2. Britan, M.N. Nosological profile of animal of Ryazan oblast and evaluation of the efficiency of modern medicines for treating mastitis / M.N. Britan, K.A. Gerceva, E.V. Kiseleva, V.V. Kulakov, E.O. Saytkhanov, R.S.Soshkin // International journal of pharmaceutical research / Volume 11. Issue 1, Jan - Mar, 2019. - P.1040-1048. - Режим доступа: http://ijpronline.com/ViewArticleDetail.aspx?ID=8674

3. Irkhina V. K., Golaido N. S., Ostyakova M. E., Malkova N. N., Voskoboynikov E. V. Effectiveness of homeopathic preparation «Mastometrin» in the treatment of mastitis of dairy cows. Vestnik KrasGAU. [Bulletin KrasSAU], 2015, no. 12. рp. 260-264. (in Russian)

4. Kashirina L. G., Ivanishchev K. A., Romanov K. I. Productivity and quality of cow milk under the influence of drugs «E-selenium» and «Butofan. Vestnik RGATU. [Bulletin RSATU], 2016, no. 4. pp. 15-19. (in Russian)

5. Loginov S. I. Diagnostic significance of circulating immune complexes in cattle in infectious and inflammatory processes. Abstract of Candidate's thesis. Veterinary. Barnaul, 1998. 24 p.

6. Mishchenko V. A., Yaremenko N. A., Mishchenko A.V., Kononov A.V. Features of immunodeficiency in cattle. Veterinariya. [Veterinary medicine], 2006, no. 11. рp. 1719. (in Russian)

7. Mudarisov R. M., Akhmetzyanova G. R., Khakimov I. N. Biochemical and morphological indicators of blood and the level of natural resistance of Holstein cows. Vestnik Ul'yanovskoj gosudarstvennoj sel'skohozyajstvennoj akademii: nauchno-teoreticheskij zhurnal. [Bulletin of the Ulyanovsk state agricultural Academy: scientific and theoretical journal]. Ulyanovsk: UGSHA, 2015, no. 2. pp. 116-120. (in Russian)

8. Nikitina M. V., Stolbova O. A., Skosyrskikh L. N. Therapeutic and preventive measures for mastitis of cattle. Molochnohozyajstvennyj vestnik. [Dairy Bulletin], 2019, no. 3. pp. 31-40. (in Russian)

9. Petrov R. V. Immunologiya. [Immunology]. Moscow, Medicine Publ., 1983. 368

p.

10. Soboleva E. N. Oshurkova Y. L. Experience of antiplatelet therapy in the treatment of clinical mastitis in cows. Molochnohozyajstvennyj vestnik. [Dairy Bulletin], 2013, no. 1. pp. 17-22. (in Russian)

11. Topuria G. M., Topuriya L. Y. Immune status of cattle in the application of gamavit. Izvestiya Orenburgskogo GAU. [Proceedings of the Orenburg state agricultural University]. Orenburg GAU, 2011, Vol. 1. no. 21. pp. 68-71. (in Russian)

12. Tunikov G. M., Bystrova I. Y. Biologicheskie osnovy produktivnosti krupnogo rogatogo skota: uchebnoe posobie. [Biological bases of productivity of cattle]. SPb., Lan' Publ., 2018. pp.336.

13. Day,C. Clinical trials in bovine mastitis - use of nosodes for prevention. The British Homoeopathic Journal,1986. no. 75. pp.11-14. Available at: https://www. thieme-connect.com/products/ejournals/pdf/10.1016/S0007-0785(86)80027-8.pdf

14. Dairy Sci J. Invited review: A systematic review and qualitative analysis of treatments other than conventional antimicrobials for clinical mastitis in dairy cows. PubMed.gov, 2017. 100 p. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/28755947

15. Ebert, F., Randomisierte, placebo-kontrollierte Studie zur Untersuchung der Effekte einer homöopathischen Mastitistherapie bei Milchkühen, PhD thesis, University of Berlin, Berlin, Germany, 2017. Available at: https://refubium.fu-berlin.de/handle/ fub188/5920

16. Vidal 2012. Spravochnik Vidal'. Lekarstvennye preparaty v Rossii. [Vidal's Reference book. Drugs in Russia]. Moscow, Astrafarmservis Publ., 2019. 1200 p.

Immunological status of cows in the treatment of subclinical mastitis with medicine «alvesol»

Britan Maria Nikolaevna - Senior Lecturer e-mail: mcherepchenko@bk.ru