CC BY
83
2004, Т. 6, №3-5 © 2004, СПб РО РААКИ
ИММУНОКАРДИОЛОГИЯ
ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ СТАТИНОВ НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И ГЕМОСТАЗА БОЛЬНЫХ ИБС
Атаманова Т.Ю.
Клиника Челябинской государственной медицинской академии, Челябинск, Россия
В последних работах по изучению состояния иммунной системы у больных ИБС подтверждена роль клеточного и гуморального звена иммунитета в процессе атеро-генеза, показана взаимосвязь показателей иммунитета и липидного обмена, изменений в системе гемостаза. Использование статинов в настоящее время (как наиболее эффективного гиполипидемического средства) является «золотым» стандартом в лечении больных ИБС. В последние годы у статинов обнаруживается много новых терапевтических свойств, и именно эти средства более других воздействуют на различные, не только липидные механизмы ИБС.
Цель исследования. Оценить влияние гиполипиде-мической терапии (статинов) па состояние липидного обмена, иммунной системы и гемостаза у больных ИБС. Материалы и методы. Обследовано 42 больных ИБС (стабильная стенокардия напряжения II - III ФК, по-стинфарктный кардиосклероз), все пациенты - мужчины в возрасте 37 - 68 лет (средний возраст 54±2,6 лет). Из них 28 пациентов до и после терапии статипами в течение 12 недель (аторвастатин в суточной дозе 5-10 мг в сутки), и 14 пациентов до и через 12 недель без приема статинов. Изучали состояние липидного обмена и иммунной системы организма. Липидный обмен оценивали последующим показателям: общий холестерин, триглицериды, ХС ЛПВП, ХС ЛПНП, ХС ЛПОНП, ЛПНП, К-атерогенности; состояние иммунной системы анализировали по параметрам: количество лейкоцитов крови, количество лимфоцитов крови, СБ - типирование С03, С04, СО§, СВ10, СБИ, С016, СО20, С025, СОз^, СОзд, С095; НЬА-БЫ; количество нейтрофилов крови (НФ); количество моноцитов крови (Мн); фагоцитоз НФ, Мп; НСТ - Тест НФ; лизосомальпая активность НФ, Мп; уровень ^А, ^М, количество ЦИК, интерлейкинов; система гемостаза: тромбоциты крови, протромбиновый индекс, фибриноген, АЧТВ, тромбиновое время, фибри-нолитичсская активность (эуглобулиновый тест), антитромбин Ш.
Результаты. Исследование показало, что через 12 недель приема статинов у 19 пациентов (67%) были достигнуты целевые уровни ХС ЛПНП ( 2,6 ммоль/л), у остальных 9 пациентов (23%) отмечалось снижение ХС ЛПНП без достижения целевого уровня, повышение уровня ХС ЛПВП. Терапия статипами сопровождалась улучшением показателей иммунной системы, что проявилось повышением количества С03, СБ4, НЬА-Э11 лимфоцитов; снижением ЦИК и дисбаланса в системе комплемента. Анализ исследований состояния системы гемостаза показал положительные функциональные изменения, касающиеся коагуляционного потенциала крови и состояния фиб-
ринолитической системы. АДФ - индуцированная агрегация свидетельствовала о снижении агрегационной способности тромбоцитов. Наблюдалась тенденция к гипокоагуляции: удлинение АЧТВ, ПТИ, тромбинового времени, гипофибриногенемия. Отмечалась активация про-тивосвертывающей системы: увеличение AT-III и фиб-ринолитической системы крови. В то же время, в контрольной группе (без приема статинов) у некоторых пациентов (с выраженной ДЛП) усугубилась дезинтеграция в иммунной системе и не произошло сдвигов в системе гемостаза.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о благоприятном влиянии терапии статипами (аторваста-тином в дозе 5- 10 мг в сутки) на состояние как липидного обмена, так и иммунной системы и гемостаза у больных ИБС.
ТРАНСПЛАНТАЦИЯ АУТОЛОГИЧНЫХ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА КАРДИОЛОГИЧЕСКИМ БОЛЬНЫМ
Белый С.А.. Зуева Е.Е., Куртова А., Немков A.C.
СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, ГМПБ№ 2, Санкт-Петербург, Россия
Цель исследования состояла в оценке эффективности трансплантации мононуклеарной фракции костного мозга для восстановления коронарной перфузии и сократительной способности миокарда.
Материалы и методы. В исследование включены данные по 18 пациентам (17 мужчин, 1 женщина), страдающим ишемической болезнью сердца (ИБС) (п=14), и ди-латационной кардиомиопатией (ДКМП) (п=3).
Трем больным выполнена операция аорто-коронарно-го шунтирования, во время которой дополнительно вводили мононуклеарную взвесь в миокард, одному больному выполнена баллонная коронарная ангиопластика и введение мононуклеарной взвеси катетерным способом. 13 больным клеточная терапия выполнялась в качестве самостоятельного метода лечения катетерным способом во время проведения коронарографического исследования.
Количество стволовых клеток костного мозга определено методом проточной цитометрии по относительному содержанию CD34+CD45+ клеток с помощью модифицированного протокола ISHAGE.
Кровоснабжение и сократительная способность миокарда были оценены через 3 и 6 месяцев после трансплантации. Показано улучшение перфузии миокарда (сцинтиграфия) и увеличение фракции выброса левого желудочка (эхокардиография). Такой позитивный исход интрамиокардиальной трансплантации ГСК костного мозга требует проведения дальнейших исследований для определения показаний к трансплантации аутологичных стволовых клеток костного мозга при ИБС и ДКМП.
ВЛИЯНИЕ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ НА ПРОЦЕССЫ АПОПТОЗА У БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА
Болдуева С.А.. Бурбелло А.Т., Гайковая Л.Б., Иванова М.И., Быкова Е.Г., Боганькова H.A.
ГОУВПО Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова М3 РФ, Россия
Апоптоз, или программируемая клеточная гибель, существует наряду с другой формой гибели клетки - некрозом. Для клеток, имеющих терминальную дифферен-цировку, а к таковым относятся кардиомиоциты, апоптоз не является характерным. Однако при инфаркте миокарда, апоптоз играет не последнюю роль в реализации поражения. В ряде работ было показано, что изменения клеток в центральной части инфарктного очага носят некротический характер, в то время как по периферии очага преобладают апоптотические изменения. Описанные морфологические проявления апоптоза изучены в модельных опытах in vitro. Апоптотические клетки трудно выявить в тканях in situ, так как они быстро фагоцитируются различными клетками. Однако существует рецептор, для которого пока не установлено других функций, кроме передачи сигнала к развитию апоптоза - Fas-рецептор (CD95, АРО-1).
Целью настоящего исследования явилось определение содержания CD95+ лимфоцитов периферической крови у больных инфарктом миокарда и влияния на них полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК). Одним из аналогов ПНЖК является отечественный препарат полиен, состоящий из (о-З эйкозопентаеновой (С20:5) и докзогексаеновой (С20:6) ПНЖК. Особенность полнена заключается в том, что в его состав входят нативные ПНЖК. Полиен выпускается ЗАО «Мед-Кап» г. Мурманска. Препарат назначался больным с инфарктом миокарда на 11-17 дни в суточной дозе 3 грамма в течение 60 дней. Для избежания повышения оксидант-ной активности совместно с полиеном больные принимали аскорбиновую кислоту в дозе 150 мг. Лечение полиеном проводилось у 10 больных. Группа сравнения составила 13 человек, не получавших терапию ПНЖК. Средний возраст пациентов 57,4±2,2 года. Больные обеих групп получали базисную терапию, включавшую ß-блокаторы, ингибиторы АПФ, аспирин, нитраты. Группы были сопоставимы по основным клиническим характеристикам. До начала и по окончании терапии полиеном определялось содержание CD95+ лимфоцитов для оценки степени апоптоза. Иммунофе-нотипирование лимфоцитов проводили методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител.
При анализе полученных данных было выявлено снижение содержания CD95+ лимфоцитов у больных инфарктом миокарда, получавших терапию полиненасыщенны-ми жирными кислотами (11,2+1,1%), тогда как в группе сравнения содержание этих клеток достоверно увеличивалось (24,8±1,8%) при исходном содержании 16,2±1,4% и 15,Э±0,9% соответственно.
Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать предварительный вывод о положительном влиянии полиненасыщенных жирных кислот на процессы апоптоза при инфаркте миокарда. Исследование в данном направлении продолжается.
ХОЛЕСТЕРИН-СОДЕРЖАЩИЕ ИММУННЫЕ КОМПЛЕКСЫ И ЭНДОТЕЛИИ-1 В КРОВИ БОЛЬНЫХ КОРОНАРНОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
Джу сипов А. К.1. Маншарипова А.Т.1, Нургалиева Г.К.1, Богданов А.Ю. , Денисенко А.Д.3, Беляев H.H.2
2НИИ кардиологии и внутренних болезней М3 РК, Институт молекулярной биологии и биохимии tylOH РК, Алматы, Казахстан,
ИЭМРАМН, Санкт-Петербург, Россия
Известно, что атерогенность сыворотки больных коронарной болезнью сердца (КБС) зависит от концентрации холестерин-содержащих иммунных комплексов (ХИК) крови. Целью данной работы было установление связи между уровнем ХИК, показателями липидного спектра крови, а также определение уровня эндотелина 1 у больных КБС.
Нами была исследована сыворотка крови 66 мужчин, больных КБС с постинфарктным кардиосклерозом, средний возраст которых составил 48,4±2,1 лет. Контролем служила сыворотка крови 38 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу, возрасту и месту проживания. Концентрацию ХИК в сыворотке крови определяли по методу В.В.Тертова (1986). Показатели липидного спектра крови исследовали по общепринятым методикам. Уровень эндотелина-1 определяли с помощью И ФА. Корреляционный анализ проводили с помощью пакета статистических программ.
Результаты исследования показали, что у больных КБС имеется прямая корреляционная связь между уровнем ХИК сыворотки крови и содержанием общего холестерина (г=0,66, р<0,05). В данной группе обнаружена слабая положительная корреляция между содержанием ХИК и уровнем аполииопротеина В в сыворотке крови (г= 0,46, р<0,05). Уровень эндотелина-1 у больных КБС был повышен по сравнению с показателем контрольной группы, (р<0,05).
Таким образом, наличие взаимосвязи между уровнем ХИК, общим холестерином и апо-В-содержащими липоп-ротеинами, а также повышенный уровень эндотелина-1 в крови, вероятно, указывают на дисфункцию эндотелия и атсрогенный состав иммунных комплексов у больных КБС.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА К CHLAMYDIA PNEUMONIAEУ БОЛЬНЫХ ИНФАРКТОМ МИОКАРДА
Есимова Т.М.. Нургалиева Г.К., Шуратова С.Г.
НИИ кардиологии и внутренних болезней,
Алматы, Казахстан
Среди многих инфекционных агентов, изучаемых в последнее время, Chlamydia pneumoniae выступает как фактор, поддерживающий воспалительный процесс в атеросклеротической бляшке с ее последующей дестабилизацией, приводящей к развитию острого коронарного синдрома. При инфицированное™ Chlamydiae pneumoniae в организме человека запускается каскад последовательных неспецифических и специфических реакций иммунного ответа.
Цель исследования - изучить частоту выявления специфических антител к Chlamydia pneumoniae при развитии острого коронарного синдрома.
Обследовано 118 больных ишемической болезнью сердца (ИБС), первичным крупноочаговым инфарктом ми-
окарда в возрасте от 37 до 60 лет. Методом ИФА в крови обследованных изучалось содержание специфических антител к Chlamydiae pneumoniae. Установлено наличие специфических антител в диагностически значимых титрах к Chlamydiae pneumoniae у 40% обследованных. Согласно полученным результатам, у сероположительных больных отмечалось повышение уровня IgM на 8% и IgG на 35% по сравнению с донорами.
Таким образом, возможно, более высокая выявляе-мость IgG при инфаркте миокарда свидетельствует о наличии у больных инфицированное™ Chlamydia pneumoniae, предшествующей развитию острого коронарного синдрома.
ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛИ-сс И ИНТЕРФЕРОН-сх У БОЛЬНЫХ МИОКАРДИТОМ И КАРДИОСКЛЕРОЗОМ: ВЗГЛЯД КЛИНИЦИСТА
Котова А.А.. Палеев Ф.Н., Сучков С.В., Пронина О.А., Палеев Н.Р.
Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Москва, Россия
Целью исследования явилось изучение роли TNF-a и IFN-a в патогенезе инфекционно-иммунного миокардита (М) и миокардитического кардиосклероза (МКС). Обследовано 27 больных М, 19 больных МКС с симптомами СН. Уровень IFN-a и TNF-a в крови определяли с помощью иммуноферментного анализа. Средние уровни IFN-a и TNF-a у больных М составили 75±47 и 304+102 пг/мл и достоверно были выше, чем у больных МКС и здоровых доноров (ЗД) (31±14 и 83±39; 38±18 и 96+58 пг/мл соответственно, р<0,05). При этом выявлена достоверная разница уровней IFN-a и TNF-a у пациентов со злокачественным и доброкачественным течением М (99±46 и 354± 100; 39±10 и 227±42 пк/мл соответственно, р<0,05). Продукция TNF-a лейкоцитами, индуцированными ФГА у больных злокачественным М была выше, чем у ЗД (1432±515 и ЗД 255±98 пг/мл соответственно, р<0,05). В то время как у пациентов с доброкачественным течением М этот уровень был достоверно ниже, чем у ЗД (131 ±54, р<0,01) больных со злокачественным течением миокардита по сравнению с доброкачественным обнаружено более выраженное снижение ФВ (25,9± 12,1% и 42,5± 11,2% соответственно, р=0,003) и большая госпитальная летальность 16,6 и 0% соответственно. Выявленные нами изменения у больных злокачественным М указывают на их патологический характер. Вероятнее всего в механизмах озлокачествления М большое значение принадлежит факторам регуляции уровней продукции IFN-a и TNF-a.
СРП - НЕБЛАГОПРИЯТНЫЙ ПРОГНОСТИЧЕСКИЙ КРИТЕРИЙ У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА
Мишланов В.Ю.. Сидоров Д.В., Обухова О.В.
Пермская государственная медицинская академия, ЗАО - Курорт Усть-Качка, Россия
Цель исследования состояла в изучении патогенетического и клинического значения СРП в оценке течения атеросклероза.
Материал и методы. Мы обследовали 83 больных ИБС в возрасте от 41 года до 67 лет и 16 больных ревматоидным артритом (РА) в возрасте 41-60 лет. У 43 больных ИБС, наблюдавшихся в подостром периоде инфаркта миокарда (ИМ) в специализированном отделении на курорте Усть-Качка, определяли содержание СРП в сыворотке крови количественным методом ИФА. У 37 больных ИБС в форме стенокардии напряжения III ф.к. и 16 больных РА изучали липидвысвобождающую способность лейкоцитов (JIBCJI) венозной крови по методу, описанному A.B. Туевым и В.Ю. Мишлановым (2002 г.). Содержание СРП определяли в надосадочной жидкости 3-суточной культуры лейкоцитов количественным методом ИФА у 5 больных ИБС и 5 больных РА. Выполнена кристаллоскопическая оценка липопротеидиых комплексов в надосадочной жидкости 3-суточной культуры лейкоцитов. Проведены нагрузочные тесты с интерлейкином-1-бета in vitro в дозе 200 пкг/мл (коммерческий набор фирмы «Протеиновый контур» для количественного определения интерлейкина-1-бета) в реакции высвобождения лииопротеидов 3-х суточной культурой лейкоцитов у 5 больных ИБС и 5 больных РА.
Результаты показали, что 45% больных ИБС, перенесших ИМ, имели концентрации СРП более 1,5 мкмоль/ мл. В группе с высокими значениями СРП отмечалось увеличение случаев повторного ИМ и крупноочагового ИМ. У одного больного, имевшего уровень СРП крови более 1,5 мкмоль/мл (6,9 мкмоль/мл), в восстановительном периоде развился повторный ИМ.
Результаты изучения ЛВСЛ у больных ИБС в форме стенокардии напряжения III ф.к. были 0,156±0,0174, у больных РА - 0,085±0,0195 мкмоль/л (р<0,001).
Кристаллоскопическая картина липопротеидиых комплексов у больных ИБС напоминала вид ветки папоротника, геометрических фигур или крепостной стены. У больных РА кристаллы липопротеидов выглядели как мелкие веточки или мозговые извилины. Различия кристаллоскопической картины липопротеидиых комплексов у больных ИБС и РА, вероятно, обусловлены их различным составом, а именно, различиями в белковом компоненте.
Добавление интерлейкина-1 в культуральную среду лейкоцитов больных ИБС сопровождалось увеличением ЛВСЛ в 4-х из 5 случаев. У больных РА интерлейкин-1 не увеличивал ЛВСЛ.
У больных ИБС в форме стенокардии напряжения III ф.к. концентрации СРП в культурах лейкоцитов колебались от 2,7 до 7,0 нг/мл; у больных ревматоидным артритом - от 14,8 до 30,5 нг/мл. Концентрации СРП не имели взаимозависимости с количеством высвобождаемого ХС. У больных РА выявлена достоверная обратная взаимосвязь между уровнем ЛВСЛ и СОЭ.
Выводы. 1. Острофазовые реакции сопровождаются угнетением ЛВСЛ. Предположительный механизм этого явления обусловлен участием провоспалительных цитокинов. Увеличение тяжести течения РА сопровождается прогрессирующим снижением ЛВСЛ. Возникает предположение, что в состав липопротеидиых комплексов, высвобождаемых лейкоцитами больных РА в 3-суточной культуре, входит СРП. Провоспалительные цитокины обладают способностью регулировать состав липопротеидиых комплексов, высвобождаемых лейкоцитами при различных заболеваниях.
2. СРП не является составной частью липопротеидиых комплексов, высвобождаемых лейкоцитами в 3-суточной культуре больных ИБС.
3. Повышение СРП в сыворотке крови больных ИБС указывает на неблагоприятный прогноз, нестабильное течение заболевания, вероятность развития инфаркта миокарда. Механизмы участия СРП в развитии ИБС, вероятно, обусловлены острой воспалительной реакцией с вовлечением эндотелиальных клеток сосудистой стенки, лейкоцитов и системы гемостаза, но не прогрессирующим развитием атеросклероза и отложением липопротеидов в интиме сосудистой стенки.
Возможно, течение атеросклероза предусматривает чередование двух фаз воспалительной реакции сосудистой стенки - фазы продуктивного воспаления с отложением липопротеидных комплексов в интиме сосудов, а также острой воспалительной фазы, в период которой возможно поражение эндотелиальных клеток с активацией системы гемостаза и тромбообразованием. Величина концентрации СРП в сыворотке крови больных ИБС является критерием развития фазы острого воспаления.
АКТИВНОСТЬ ФАД-ЗАВИСИМЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ У ДЕТЕЙ С СИНДРОМОМ РАННЕЙ РЕПОЛЯРИЗАЦИИ ЖЕЛУДОЧКОВ
Мякишев Е.Б.. Санченко A.A., Манчук В.Т.
ГУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярск, Россия
Цель исследования: изучить активность сукцинатде-гидрогеназы (СДГ) и а-глицерофосфатдегидрогеназы ( ГФДГ) в лимфоцитах крови детей с синдромом ранней реполяризации желудочков.
Методы. Обследовано 104 ребенка в возрасте 7-12 лет. Из них 29 человек - группа контроля. Формирование групп детей с нарушениями сердечной деятельности проводилось на основании стандартного клинико-инструментального обследования в условиях стационара. Выделялись следующие клинические группы: дети с аритмиями вследствие нарушения образования импульса (НРС) (п=31), дети с синдром ранней реполяризации желудочков (СРРЖ) (п=23) и дети с сочетанием вышеуказанных нарушений сердечной деятельности (п 21). Обязательным условием включения в исследование являлось отсутствие признаков органического поражения сердца, электролитных нарушений, каких-либо заболеваний воспалительного генеза, а также иной соматической (некардиальной) патологии, сопровождающейся аритмическим синдромом. Активность СДГ и аГФДГ определяли цитохимическим методом. Для оценки активности применялся метод компьютерной мор-фоденситометрии. В этом случае, цитохимическое изображение характеризуется оптическими и геометрическими признаками: S — площадь гранул (мкм2), Р - периметр гранул (мкм), фактор формы, OD - средняя оптическая плотность (единицы оптической плотности е.о.п.), Rx - усредненное (на 1 клетку) значение расстояния между гранулами по оси X (мкм), Ry - усредненное (на 1 клетку) значение расстояния между гранулами но оси Y (мкм), интегральная оптическая плотность.
Результаты. Так, у детей с СРРЖ наименьшие из всех обследованных площадь, периметр, и усредненное расстояние между гранулами по оси X и Y, что подтверждается достоверными различиями как с группой контроля, так и с другими группами обследованных.
При НРС площадь, периметр, и усредненное расстояние между гранулами по оси X были достоверно выше та-
ковых у детей с СРРЖ, не отличаясь при этом от результатов, полученных в группе контроля.
В случаях сочетания СРРЖ и НРС показатели интегральной оптической плотности, периметра гранул имели тенденцию и достоверные различия в сравнении с детьми с СРРЖ соответственно. Также при СРРЖ из всех обследованных детей выявлены самые низкие показатели активности аГФДГ (площади, периметра, и усредненного расстояния между гранулами по оси X), что подтверждается наличием достоверных различий с таковыми в группе контроля.
Максимальная активность аГФДГ обнаружена в группе детей с сочетанием СРРЖ и НРС, что подтверждается наличием достоверных различий как с группой контроля (по OD), так и по площади, периметру и усредненному расстоянию между гранулами по оси X и Y у детей с СРРЖ. Морфоденситометрические параметры активности аГФДГ в лимфоцитах крови детей с НРС и детей контрольной группы достоверно не различались.
Анализируя полученные данные, можно отметить, что у обследованных детей снижена активность энергопродукции, происходящей в лимфоцитах крови, а энергетическая недостаточность более выражена у детей с СРРЖ. Обращает внимание то, что у детей с сочетанной патологией при снижении активности СДГ повышается активность аГФДГ. Вероятно, интенсификация а-глице-рофосфатного водородного шунта является компенсаторным механизмом при функциональной недостаточности лимонного цикла.
Выводы. У обследованных детей с различными нарушениями сердечной деятельности выявленные изменения в метаболическом статусе лимфоцитов характеризуются как универсальными, так и индивидуальными, групповыми особенностями. Установлено, что изолированный синдром ранней реполяризации желудочков является состоянием, характеризующимся не только электрокардиографическими проявлениями, но и достоверным отличием показателей биоэнергетического обмена в иммунокомпетен-тных клетках от аналогичного у здоровых детей. В дальнейшем при оценке состояния иммунной системы необходимо дифференцировать изменения, значимые с позиции этиопатогенеза, и изменения, являющиеся следствием патологического процесса, прямо не связанного с иммунной системой.
АКТИВНОСТЬ НАД(Ф)-ЗАВИСИМЫХ ДЕГИДРОГЕНАЗ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК У ДЕТЕЙ ПРИ НАРУШЕНИЯХ СЕРДЕЧНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
Мякишев Е.В.. Ермошкина А.Ю., Савченко A.A., Манчук В.Т.
ГУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, Красноярск, Россия
Цель исследования. Изучить особенности ферментативного статуса лимфоцитов крови у детей с нарушениями сердечной деятельности в отсутствие органического поражения сердца.
Материалы и методы. Обследовано 104 ребенка в возрасте 7-12 лет. Из них 31 - группа контроля. Формирование групп детей с нарушениями сердечной деятельности проводилось на основании стандартного клинико-инструментального обследования в условиях регионального на-учно-практического центра синкопальных состояний и на-
рушений ритма сердца по классификации H.A. Белоконь (1987). Выделялись следующие группы: Обследованные с нарушениями сердечного ритма - дети с аритмиями вследствие нарушения образования импульса (АНОИ), комбинированными нарушениями ритма сердца (КНРС); и пациенты с изолированным синдромом ранней реполяризации желудочков (СРРЖ). Активность НАД(Ф)-зависи-мых дегидрогеназ иммунокомпетентных клеток (ИКК) крови определяли биолюминесцентным методом.
Полученные результаты: в изменении активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ ИКК у всех обследованных относительно значений контрольного диапазона выявлены общие закономерности. Так, на фоне снижения активности одного из ключевых ферментов цикла Кребса при уменьшении оттока субстратов на синтетический обмен (НАДН-зависимая глутаматдегидрогеназа) отмечается снижение поступления продуктов катаболизма аминокислот в цикл трикарбоновых кислот (НАДФ и НАД-зависимые глу-таматдегидрогеназы). Также ферментативный статус лимфоцитов крови обследованных характеризуется уменьшением активности НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы, что свидетельствует о более низком уровне синтеза липидов в ИКК детей с нарушениями деятельности сердца.
К особенностям ферментативного статуса лимфоцитов крови у детей с КНРС можно отнести наименьшую активность ключевого и лимитирующего ферментов цикла трикарбоновых кислот (малатдегидрогеназа, НАД-за-висимая изоцитратдегидрогеназа), фермента, инициирующего пентозофосфатный путь (глюкозо-6-фосфатдегид-рогеназа) при максимально низком уровне поступления субстрата для цикла Кребса (уровни НАД-зависимой, НАДФ-зависимой глутаматдегидрогеназ, НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы), что подтверждается наличием различий как со значениями контрольного диапазона, гак и с аналогичными значениями активности в других группах обследованных. К характерным, присущим только данной группе особенностям метаболизма ИКК таких детей можно отнести понижение активности фермента челночного механизма (НАДН-зависимая малатдегидрогеназа), различия по которому с группой контроля имели тенденцию к достоверности.
При АНОИ характерных особенностей метаболической активности ИКК не выявлено.
К особенностям метаболизма лимфоцитов детей с СРРЖ можно отнести уменьшение активности глицерол-3-фосфатдегидрогеназы, характеризующее снижение поступления продуктов распада липидов в гликолиз, при тенденции к достоверности различий относительно контроля.
По состоянию антиоксидантной системы всех обследованных (глутатионредуктаза), уровню активации гликолиза (аэробная и анаэробная лактатдегидрогеназы) и уровню синтеза белка из аминокислот (НАДН-зависимая глутаматдегидрогеназа) достоверных различий не выявлено.
Таким образом, синдром ранней реполяризации желудочков, так же как и нарушения сердечного ритма в отсутствие органического поражения сердца, является состоянием, характеризующимся не только электрокардиографическими проявлениями, но и достоверным отличием показателей энзиматического статуса и энергетического обмена в лимфоцитах крови от такового у здоровых детей. Сопровождаясь снижением активности, угнетением пластических и биоэнергетических процессов в иммунокомпетентных клетках, данные изменения характеризуют состояние внутриклеточных обменных процессов у обследованных детей как универсальное. Однонаправленность этих изменений, отражая их биохимическое сходство, является следствием воздействия регуляторных механизмов реализации патологического процесса как в органе мишени, так и в других клеточных структурах организма. Полученные результаты об изменении метаболической активности лимфоцитов крови позволяют использовать показатели активности ферментов лимфоцитов периферической крови в качестве дополнительных диагностических критериев, а также для оценки эффективности терапии нарушений сердечной деятельности у детей в отсутствие органического поражения сердца.
ВЗАИМОСВЯЗЬ ДИНАМИКИ УРОВНЯ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1 -р И ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ПРИ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА
Нургалиева Г.К.
НИИ кардиологии и внутренних болезней М3 РК, Алматы, Казахстан
В последнее время получены данные о значительной роли воспаления в механизмах развития атеросклероза. Известно, что цитокины регулируют межклеточные взаимодействия, поддерживают системное и местное воспаление в атеросклеротической бляшке с ее последующей дестабилизацией и возникновением острого коронарного синдрома. В клинической практике для оценки активности воспалительных процессов широко используют определение количества лейкоцитов периферической крови.
Цель исследования - изучение динамики изменения содержания лейкоцитов в сопоставлении с концентрацией провоспалителыюго цитокина 1Ь-1-(3 в крови у больных хронической ишемической болезнью сердца (ИБС).
Методы исследования. Уровень содержания 1Ь-1-(3 определяли с помощью коммерческого ИФА-набора, выпускаемого фирмой «Протеиновый контур» (Санкт-Пе-тербург), общий анализ крови проведен стандартным методом. Нами обследовано 24 больных ИБС с нестабильной стенокардией со средним возрастом 44,0+6,0 лет и 15 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и воз-
ТАБЛИЦА. СОДЕРЖАНИЕ И-1 (3, ЧИСЛА ЛЕЙКОЦИТОВ, ЛИМФОЦИТОВ И МОНОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ИБС ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ
Показатель Доноры До лечения После лечения Р?л P«
IL-1-ß (пг/мл) 14,9+3,2 39,35± 2,31 45,06± 2,25 <0,05 <0,05 <0,05
Лейкоциты (хЮ3) 4,5-9,5 5,6+0,55 5,68+0,39 >0,05 >0,05 >0,05
Лимфоциты (хЮ3) 0,8-3,6 1,67± 0,10 2,08+0,17 >0,05 >0,05 <0,05
Моноциты (хЮ3) 0,09-0,95 2,25+ 0,32 3,31+0,38 <0,05 <0,05 <0,05
Примечание: р - знак достоверности показателей средних значений уровня содержания цитокинов в сыво ротке крови больных в разные сроки лечения по сравнению с показателями доноров.
расту. У всех больных диагностирован перенесенный крупноочаговый инфаркт миокарда. Сроки исследований: 1-е и 21-е сутки стационарного лечения.
Полученные результаты определения концентрации IL-1-ß (в пг/мл) и лейкоцитов в периферической крови в абсолютных числах представлены в таблице.
Как видно из таблицы, уровень провоспалительного цитокина IL-1-ß в момент выписки был достоверно выше, чем у доноров и на момент поступления в клинику. Известно, что основными продуцентами провоспа-лительных цитокинов являются моноциты периферической крови и макрофаги в тканях. IL-1-ß играет ключевую роль в развитии воспаления. Корреляционный анализ показал, что между содержанием IL-1-ß и количеством моноцитов в периферической крови больных с нестабильной стенокардией существует тесная взаимосвязь (г=0,7; р<0,001).
Таким образом, выявленная особенность динамики экспрессии цитокина IL-1-ß у больных хронической коронарной недостаточностью свидетельствует о наличии активности воспалительного процесса за весь период стационарного лечения, о необходимости назначения противовоспалительной терапии.
АУТОАНТИТЕЛА ПРИ ВИРУСНЫХ МИОКАРДИТАХ
Палеев Ф.Н.1. Дурова О.М.1, Габибов А.Г.3, Демкин В.Д.4, Сучков С.В.1,
\МОНИКИ; ММА им. И.М. Сеченова, 4ИБХ РАН; ИМГ РАН, Москва, Россия
Цель работы - сравнительное исследование сывороток больных с миокардитами вирусной природы на наличие аутоАТ различных уровней специфичности - (а) к специфическим антигенным маркерам миокарда (СМ -кардиомиозину и ANT - транслокатору аденин-нуклео-тида) и (б) неспецифических аутоАТ (антиДНК аутоАТ
1-го и 2-го порядков), а также ДНК- и протабзимов).
Материал и методы исследования. Сыворотки от
46 больных с вирусным миокардитом и 20 доноров исследованы с помощью ИФА на: (1) аутоАТ к СМ и ANT; (2) антиДНК аутоАТ 1-го и 2-го порядков: (3) ДНК- и протабзимы.
Результаты исследования. Из 46 пациентов с вирусным миокардитом 28 (61%) были серопозитивны на специфические аутоАТ к СМ и ANT. Еще 3 (7%) пациента содержали в крови только анти-СМ аутоАТ; один (2%) -анти-ANT аутоАТ. Остальные 14 больных были серонегативными в отношении аутоАТ к специфическим миокардиальным маркерам. Ни у одного из них не обнаружены ни анти-ДНК аутоАТ, ни абзимы.
Из 32 больных, серопозитивных в отношении аутоАТ к миокардиальным маркерам, лишь у 4 (13%) выявлены анти-ДНК аутоАТ и 1-го и 2-го порядков, из которых только в одном случае (25%) зарегистрирована (каталитическая) ДНК-гидролизующая активность. Из этих пациентов, серопозитивных по антимиокардиальным маркерам, протабзимы обнаружены в 13 (59%) случаях.
Среди пациентов, содержащих в крови аутоАТ к специфическим маркерам миокарда, преобладали тяжелые формы миокардитов продолжительностью более года с частыми рецидивами и симптомами выраженной миокар-
диодистрофии. В противоположность этому, у серонегативных по антимиокардиальным аутоАТ больных течение основного заболевания было более легким. Пациенты, содержащие в крови абзимы, отличались высокой (более полутора лет) продолжительностью заболевания и значительно более редким выявлением экстракардиаль-ных очагов инфекции, что свидетельствовало о переходе инфильтративной фазы воспаления в фазу фиброза. АнтиДНК аутоАТ обоих порядков, а также ДНК- и, в особенности, протабзимы доминировали у пациентов в фазе обострения. Более того, уровень каталитической активности абзимов при обострении заболевания возрастал в
2-12 раз, что коррелировало с динамикой клинической картины миокардита.
Не исключено, что в патогенезе миокардита существенную роль играют аутоАТ различных уровней специфичности, причем, если специфические аутоАТ к миокардиальным маркерам определяют степень тяжести миокардита и, в определенной степени, отражают продолжительность основного заболевания, то аутоАТ, широкой специфичности, в том числе каталитические аутоАТ задействованы в механизмах развития и чередования стадий обострения и ремиссии. Рассмотренная корреляция между тяжестью и фазой миокардита и уровнями аутоАТ различной специфичности может быть дополнительным иммунодиагностическим и иммунопрогностическим критерием в мониторинге пациентов с вирусными миокардитами.
ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУННОЙ ЗАЩИТЫ У БОЛЬНЫХ С НЕЙРОЦИРКУЛЯТОРНОЙ ДИСТОНИЕЙ В СОЧЕТАНИИ С ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПАРОДОНТА (ВЗП) И ХРОНИЧЕСКИМ ТОНЗИЛЛИТОМ (ХТ)
Пачкория М.Г.. Орехова Л.Ю., Косицкая Л.С.
СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова; НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия
В структуре заболеваний сердечно-сосудистой системы лиц молодого возраста 75% составляют вегетативные расстройства сердечной деятельности. При этом в 40,8% случаев у них выявляются хронические воспалительные процессы в ротовой полости и ротоглотке (Левина Л.И., Щеглова Л.В., 1996). К причинам развития вторичной НЦД относят очаги инфекции ротовой полости (ВЗП) и ротоглотки (ХТ). Однако вопрос о том, что является первичным до настоящего времени остается дискуссионным.
Целью настоящего исследования явилось сравнительное изучение иммунной защиты у больных ВЗП и ХТ в сочетании с НЦД и у больных с НЦД без хронического воспалительного процесса в ротовой полости и ротоглотке.
Всего обследовано 38 больных мужского пола в возрасте от 16 до 21 года. Всем больным проводились специальное кардиологическое, оториноларингологическое и стоматологическое обследования. Больные были разделены на две группы: 1 группа - больные с ВЗП и ХТ в сочетании с НЦД (10 чел.) и 2 группа - больные только с НЦД. Контрольную группу составили практически здоровые лица того же пола и возраста (30 чел.). В слюне и крови обследованных определяли концентрации ^ (ИФА), фагоцитарную активность клеток крови (ФИ и
ФЧ в тесте культурой с белого стафилококка), ферментативную активность лейкоцитов (тест НСТ - но общепринятой методике) и субпопуляции лимфоцитов (ИФА).
Проведенные исследования показали, что у больных как 1, так и 2 группы имеет место повышение уровня и слюны сравнительно с контролем. Так, б^А составил соответственно 50,5±9,06 и 71,2+3,58 мкг/мг против 37,9±2,0 мкг/мг (р<0,01), а ^ - 3,72±0,28 и 3,15±0,33 мкг/мг против 1,11±0,05 мкг/мг (р<0,01). слюны оказался сниженным сравнительно с контролем соответственно: 0,65±0,64 и 0,8±0,05 мкг/мг (р<0,01).
Уровни ^ слюны и крови у больных НЦД при наличии ВЗП и ХТ и при их отсутствии статистически достоверно не различались, но имели отличия только от контрольной группы (р<0,05).
Функциональная активность фагоцитирующих клеток в обеих группах по сравнению с контролем оказалась сниженной (соответственно ФЧ составило 3,8±0,1 и 3,8±0,25 против 8,8±2,5, р<0,01). Содержание в крови основных субпопуляций лимфоцитов (СОЗ+, С04+, СБ16+ и С020) не различалось между 1 и 2 группами и контролем (р<0,01).
Проведенные исследования свидетельствуют, что показатели состояния местной и системной иммунной защиты у больных с ХТ и ВЗП в сочетании с НЦД и у больных с НЦД без хронического воспаления ротовой полости и ротоглотки пе отличаются. Это позволяет заключить, что первичной в патогенезе ВЗП и ХТ является НЦД, сопровождающаяся нарушением системной иммунной защиты и местного иммунитета, что способствует развитию ВЗП и ХТ.
СВЯЗЬ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА С РАЗВИТИЕМ НЕФРОПАТИИ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМ КОРОНАРНЫМ СИНДРОМОМ И СОПУТСТВУЮЩИМ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА
Попов С.А.. Кратнов А.Е., Углов Е.С.
Ярославская государственная медицинская академия, Ярославль, Россия
Цель исследования: выявить связь между развитием нефропатии и окислительным стрессом у больных с инфарктом миокарда и нестабильной стенокардией при наличии сопутствующего сахарного диабета 2 типа.
Материалы и методы. Обследовано 94 больных с острым коронарным синдромом (ОКС), из них у 35 был сахарный диабет 2 типа. Средний стаж диабета был 10,6 года. Обследование включало биохимические анализы крови и мочи, эхокардиографию и специальные иммунологические методы (НСТ-тест с нейтрофилами и моноцитами и определение уровня малонового диальдегида в крови).
Основные результаты. У больных с сопутствующим сахарным диабетом 2 типа был достоверно более высокий уровень протеинурии (0,06±0,1>0,018±0,02 г/л, р=0,01), более высокие показатели спонтанного НСТ-те-ста с нейтрофилами (119,3±29,9>106,1±20,7 нмоль восстановленного НСТ, р = 0,03) и с моноцитами (123,7±38,2> 105,9±22,1 нмоль восстановленного НСТ, р=0,01), а также более низкая фракция выброса левого желудочка. Кроме того, в этой группе больных наблюдалась достоверная корреляция между уровнем белка в моче и спонтанным НСТ-тестом с моноцитами (г=0,56, р=0,001), а также между величиной фракции выброса и
уровнем малонового диальдегида в крови (г= -0,40, р=0,04). В группе больных без диабета таких корреляций не наблюдалось.
Заключение. Таким образом, у больных с ОКС и сопутствующим сахарным диабетом 2 типа выявлена связь окислительного стресса с развитием протеинурии и систолической дисфункции миокарда.
СОДЕРЖАНИЕ НЕКОТОРЫХ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
Сергеева Е.Г.. Красильникова Е.И., Беркович O.A., Галкина О.В., Игнатьева О.И., Порицкая B.JI.
Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Россия
Известно, что при метаболическом синдроме наблюдается наиболее быстро прогрессирующее течение атеросклеротического процесса и его клинических проявлений. Однако роль некоторых факторов иммунного воспаления при метаболическом синдроме изучена недостаточно. Цель настоящей работы - исследовать содержание про -и противовоспалительных цитокинов в плазме крови больных метаболическим синдромом.
Материал и методы исследования. Проведено клинико-иммунологическое обследование 11 мужчин и 10 женщин, страдающих метаболическим синдромом в возрасте от
47 до 74 лет. Следует отметить, что у 17 человек имелись клинические проявления ИБС, стенокардии напряжения 2-3 функционального класса стабильного течения. Диагноз метаболического синдрома устанавливали согласно рекомендациям Национального института здоровья США. Контрольную группу составили десять больных ИБС, стабильной стенокардией напряжения 2-3 функциональных классов, но без проявлений метаболического синдрома. Исследовали содержание фактора некроза опухоли-а (TNF-а), ин-терлейкина8 (IL-8) и интерлейкина 4 (IL-4) в плазме крови методом иммуноферментного анализа, а также количество циркулирующих десквамированных эндотелиоцитов как маркеров повреждения эндотелия.
В группе больных метаболическим синдромом по сравнению с группой больных ИБС без проявлений метаболического синдрома установлено достоверное повышение содержания в плазме крови провоспалительных цитокинов -TNF-a(2,67±0,21 против 1,66±0,09 пкг/мл соответственно, Р<0,05) и IL-8 (9,58±3,8 против 2.61 ± 1,31 пкг/мл соответственно, р<0,05). Известно, что TNF-a является полифунк-циональным провоспалительным цитокином, и IL-8 - это провоспалительный хемокин, продукция которого усиливается при наличии дисфункции эндотелия. Следует отметить, что концентрация противовоспалительного цитокина
- IL-4 в обеих группах больных не имела существенных различий (3,34±0,23 и 2,64±0,21 соответственно). Установлена достоверная корреляционная зависимость между содержанием TNF-a и концентрацией IL-4 - г =0,421, р<0,05. Следует отметить, что у больных метаболическим синдромом выявлено также более высокое содержание десквамированных эндотелиоцитов, чем у больных ИБС со стабильным течением стенокардии напряжения - 5,8±0,7 против 4,2+0,6, р<0,05 соответственно, что косвенно свидетельствует о более выраженной дисфункции эндотелия.
Таким образом, у обследованных больных метаболическим синдромом (следует отметить, что подавляющее
большинство из них страдало ИБС) выявлено существенное повышение содержания нровоспалительных цитоки-нов (TNF-a и IL-8) по сравнению с группой больных ИБС со стабильным течением стенокардии напряжения, у которых отсутствовали клинические проявления метаболического синдрома. В литературе последних лет обсуждается роль адипоцитов в продукции TNF-a. Полученные данные позволяют предположить значимость активации нровоспалительных цитокинов в поддержании процесса иммунного воспаления, который вносит вклад в прогрессирование атеросклероза при метаболическом синдроме.
АНАЛИЗ ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИХ И ЦИТОКИНОВЫХ ПАРАМЕТРОВ КЛЕТОЧНЫХ ТРАНСПЛАНТАТОВ АУТОЛОГИЧНОГО КОСТНОГО МОЗГА У КАРДИОХИРУРГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ
Сускова B.C.. Онищенко H.A., Емец В.И., Ермакова Л.П., Сусков С.И., Темнов A.A., Казаков Э.Н., Гуреев С.В.
НИИ трансплантологии и искусственных органов М3 РФ, Москва, Россия
Введение. В настоящее время факт стимуляции регенерации миокарда и неоваскулогенеза наиболее убедительно показан в экспериментальных исследованиях и клинических наблюдениях при трансплантации мононук-леарных клеток аутологичного костного мозга, содержащих около 2% гематопоэтических и 0,05% мезенхимальных стволовых клеток (Kamihata H. et al., 2001; Buttira В. et al., 2002; Strauer В. et al., 2002,2003; Шумаков В.И., Онищенко H.A. и соавт., 2004 и др.).
Целью проведенного исследования явился анализ им-мунофенотипических параметров клеточных трансплантатов аутологичного костного мозга (ККМ) и продукции цитокинов для оценки их функциональной активности при введении кардиохирургическим больным.
Материал и методы. Функциональное состояние 20 ККМ оценивали сразу после выделения и через 7 дней после культивирования ККМ (непосредственно перед введением больным). Иммунофенотипирование ККМ проводили па проточном цитофлюориметре (FACScan, USA, по про-граме «Simultest») с использованием моноклональных антител с двойной флюоресцентной меткой РЕ и F1TC для определения экспрессии и коэкспрессии CD-антигенов; CD3/CD19, CD4/CD8, CD3/DR, CD16, CD3/CD56, CD20/ CD23, CD3/CD4, CD3/CD8, CD8/DR, CD4/DR, CD8/ CD38, CD71, CD14/DR, в том числе CD34 - поверхностных маркеров стволовых клеток. Функциональную активность ККМ оценивали по способности спонтанной и индуцированной ФГА и ЛПС продукции цитокинов (TGF-ß2, G-CSF, IL-3, IL-7, IL-10) после выделения ККМ и перед их трансплантацией больным методом ИФА с использованием наборов фирмы «BIOSOURCE» и «Bender MedSystems».
Результаты. Жизнеспособность ККМ после выделения и культивирования, оцениваемая стандартным методом суп-рави гального окрашивания, составила 92-98%. В ККМ присутствовали все типы иммунокомпетентных клеток: Т, В, NK. Уровни экспрессии основных лимфоидных и миело-идных маркеров при фенотипировании нативных ККМ и после их культивирования варьировали в пределах нормативных значений. В 50% культур ККМ выявлено повышение CD3+mi. (71-81% при N = 46-47%%), CD16+iui. (3-29%) и СБ8+1сл. с цитотоксической активностью (11-37% при N = 15-27%). Анализ экспрессии активационных маркеров
(HLA DR+kti., CD38+kji., CD25+kji, и CD71+кл.) показал, что после культивирования активационная и пролиферативная функции ККМ сохраняются. Готовность ККМ к апоптозу (число CD95+mi. с маркером апоптоза) до культивирования колебалась от 1,2% до 40,7% (выше нормы в 60% ККМ), после культивирования - от 5,9% до 29,3% при N = 20% (выше нормы - в 5% ККМ). Содержание С034+клеток до культивирования составляло 0,8-5,7%, после культивирования ККМ - 1-2,4%%. Исходная спонтанная продукция TGF-ß2 и G-CSF превышала индуцированную, что сопряжено с вторичной иммунной недостаточностью у больных. После культивирования (перед трансплантацией) способность ККМ отвечать на стимуляцию ФГА и ЛПС восстанавливалась (TGF-ß2 до - 169 пг/мл, после - 226 пг/мл; G-CSF до - 95 пг/мл, после - 135 пг/мл). Продукция TGF-ß2 и G-CSF у больных с положительным клиническим эффектом ККМ была в 2-3 раза выше, чем при отсутствии эффекта.
Выводы. Анализ иммунофенотипических и цитоки-новых параметров ККМ подтвердил их жизнеспособность и функциональную активность, позволяющую использовать их для клеточной трансплантации у кардиохирургических больных. Для повышения направленного клинического эффекта целесообразна сортировка и трансплантация соответствующих фракций ККМ.
ЦИТОКИНЫ, ЭНДОТЕЛИАЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ И ГИПЕРТРОФИЯ МИОКАРДА ПРИ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ
Суслова Т.E.. Павлюкова Е.Н., Лихоманов К.С., Карпов P.C.
Научно-исследовательский институт кардиологии ТНЦ СО РАМН, Томск, Россия
В настоящее время обсуждается значение цитокинов в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний. Основной причиной развития гипертрофии сердца при гипертонической болезни является повышение внутрисосудистого давления, ранним маркером сердечно-сосудистых нарушений является эндотелиальная дисфункция. В передачу гипертрофирующих стимулов в клетку вовлечены многие сигнальные пути. Кардиомиоциты на ростовые факторы и гормоны отвечают увеличением размеров клеток, ведущим к гипертрофии. Нам представилось важным изучить вопросы участия цитокинов в формировании гипертрофии левого желудочка (ГЛЖ) и эндотелиальной дисфункции при гипертонической болезни.
Целью нашего исследования явилось изучение связи между содержанием фактора некроза опухоли а, интерлейкина-lß, интерлейкина-6 и трансформирующего фактора роста ß в плазме крови и супернатантах культуры моноцитов с эндотелиальной функцией, формой гипертрофии левого желудочка и суточным профилем АД у больных гипертонической болезнью.
Материал и методы исследования. Обследовано 114 больных гипертонической болезнью (ГБ) в возрасте от 35 до 55 лет. Комплекс клинико-инструментальных методов исследования включал проведение эхокардиографии, суточное мониторирование артериального давления. В зависимости от формы ГЛЖ выделены пациенты: с концентрической ГЛЖ (п=38), асимметрической ГЛЖ (п=20), эксцентрической но недилатационной ГЛЖ (п=14) и без ГЛЖ (п=42). Контрольной группой служили 17 здоровых доноров. Масса миокарда левого желудочка (ММЛЖ) оценивалась по критериям PENN и формуле
Devereux. Функцию эндотелия оценивали неивазивным ультразвуковым методом путем проведения пробы с реактивной гиперемией по Celermajer D.S. Методом имму-ноферментного анализа в плазме крови и супернатантах суточной культуры моноцитов периферической крови определяли содержание цитокинов: фактора некроза опухоли а (TNF-cc), интерлейкина-lß (IL-lß), интерлейкина 6 (IL-6) и трансформирующего фактора роста ß (TGF-ß). Моноциты получали с помощью избирательного прилипания в плоскодонных флаконах из взвеси мононук-леаров, выделенных дифференциальным центрифугированием в градиенте плотности с р=1,077 г/см3. Изучали продукцию цитокинов, спонтанную и индуцированную бактериальным липополисахаридом (ЛПС).
Эндотелиальная дисфункция у больных ГБ с ГЛЖ характеризовалась нарушением эндотелийзависимой вазоди-латации и снижением скорости кровотока плечевой артерии в фазу реактивной гиперемии. Значительно чаще при концентрической ГЛЖ отмечается констрикторный ответ. Изменение диаметра плечевой артерии на реактивную гиперемию коррелировало с уровнем IL-6 в супернатантах и плазме (г=-0,54; р=0,004), (г=0,63; р=0,002) и уровнем TNF-а в плазме (г=-0,53; р=0,020). Выявлена связь между уровнем TNF-cc в плазме и индексами периферического сопротивления и пульсации (г=0,83; р=0,04), (г=0,82; р=0,04). Содержание IL-lß в плазме было связано с индексом периферического сопротивления (г=0,90; р=0,04) и средним систолическим АД за сутки (г=0,82; р=0,045).
Установлена взаимосвязь формы ГЛЖ с содержанием TGF-ß в плазме крови (ANOVA: р=0,005; F-4,80) и с содержанием TNF-a в супернатантах стимулированных моноцитов (р=0,04; F-2,96). Наибольшие значения TNF-a в супернатантах и TGF-ß в плазме выявлены у пациентов с концентрической ГЛЖ и асимметрической ГЛЖ, наименьшие значения - у лиц без ГЛЖ, при этом, продукция TGF-ß моноцитами у пациентов с ГЛЖ была снижена. У больных с концентрической и асимметрической ГЛЖ отмечалась повышенная спонтанная продукция IL-lß по сравнению со здоровыми донорами. У пациентов с концентрической ГЛЖ была увеличена как спонтанная, так и стимулированная продукция IL-6 моноцитами. В группе больных с концентрической ГЛЖ ММЛЖ коррелировала с уровнем TNF-a в супернатантах стимулированных моноцитов (г=-0,80; р=0,045), в плазме (г=0,60; р=0,04) и с уровнем IL-lß в плазме крови (г=0,75; р=0,02). При асимметрической ГЛЖ ММЛЖ коррелировала с содержанием TGF-ß в плазме (г=-0,80; р=0,04) и с TNF-a в супернатантах нестимулированных моноцитов (г=0,80; р=0,02).
Таким образом, цитокины TNF-a, IL-lß, IL-6 вносят определенный вклад в дисфункцию эндотелия у больных гипертонической болезнью. По-видимому, цитокины TNF-a, IL-lß, IL-6 и TGF-ß участвуют в патогенезе развития гипертрофии левого желудочка при гипертонической болезни.
ВЛИЯНИЕ ДИСЛИПОПРОТЕИНЕМИИ НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ И ГЕМОСТАЗА У БОЛЬНЫХ ИБС
Трухина Н. А.. Атаманова Т. Ю.
Клиника Челябинской государственной медицинской академии, Челябинск, Россия
Основным патологическим процессом, поражающим коронарные сосуды, является атеросклероз, а среди глав-
ных факторов риска, инициирующих и способствующих его развитию - дислипопротеинемия (ДЛП). При ДЛП в крови повышается содержание липопротеидов атероген-ных классов низкой и очень низкой плотности, которые способны изменить реактивность различных популяций иммунокомпетентных клеток, усилить тромбообразова-ние. Комплекс иммуно-метаболических нарушений, в конечном счете, является тем базисом, на который в последующем наслаиваются процессы, приводящие к клинической манифестации атеросклероза - развитию ИБС, острого инфаркта миокарда.
Цель и задачи. Оценить состояние иммунной системы и гемостаза у больных ИБС с наличием и отсутствием дислинопротеинемии.
Материалы и методы. Обследовано 65 больных ИБС (стабильная стенокардия напряжения, постинфарктпый кардиосклероз). Все пациенты -мужчины в возрасте от 37 до 65 лет (средний возраст 54±2,7 лет). Изучали состояние липидного обмена, иммунной системы организма и показатели гемостаза. Липидный обмен оценивали по следующим показателям: общий холестерин, триглицериды, ХС ЛПВП, ХС ЛПНП, ХС ЛПОНП, ЛПНП, К-атерогенности; состояние иммунной системы анализировали по параметрам: количество лейкоцитов крови, количество лимфоцитов крови, СО
- типирование С03, С04, С08, СО10, СОи, С016, сЬ20, С025, С034, С056, С095; НЕА-ОЯ; количество нейтрофилов крови (НФ); количество моноцитов крови (Мн); фагоцитоз НФ, Мн; НСТ - Тест НФ; лизосомальная активность НФ, Мн; уровень ^А, ^М, количество ЦИК, интерлейкинов; система гемостаза: тромбоциты крови, протромбиновый индекс, фибриноген, АЧТВ, тромбиновое время, фибринолитичес-кая активность (эуглобулиновый тест), антитромбин III.
Результаты. Исследование показало, что у больных ИБС независимо от нарушения липидного обмена имеются нарушения иммунной системы (у всех 60 пациентов выявлены изменения иммунограмм). У 44 пациентов (68%) выявлена дислипопротеинемия (ДЛП). При этом дислипидемия приводит к выраженному угнетению Т- и В-клеточного звена иммунитета, снижению фагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов, общей гемолитической активности. При ДЛП выявлена активация кислородзависимого метаболизма, повышение СВ]0 и С095 лимфоцитов, увеличение концентрации ^А и ЦИК в кровотоке, активация С, ,С2 С4 компонентов комплемента. У 21 больного ИБС без ДЛП также отмечается снижение С03,С04,С016,С056, НЕА-ОЛ-позитивных клеток, выявлено повышение СО10, лимфоцитов и НСТ-редуцирующей активности нейтрофилов. Изменения в иммунной системе сопровождались повышением активности коагуляционной системы гемостаза: уменьшением АЧТВ, протромбинового времени, тромбинового времени; снижением активности АТ III и фибринолитической системы; а также некоторым увеличением степени агрегационной способности тромбоцитов.
Заключение. Формирование дислинопротеинемии ведет к дезинтеграции иммунной системы и гемостаза у больных ИБС. Усугубление нарушений липидного обмена влечет за собой изменения активности иммунокомпетентных клеток, и при нарастании ДЛП отмечается более глубокое изменение активности иммунной системы. Остается открытым вопрос о влиянии гиполипидемичес-кой терапии не только на состояние липидного обмена, но и на состояние иммунной системы и гемостаза таких пациентов.
ВЗАИМОСВЯЗЬ ДИНАМИКИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЛИПИДОВ КРОВИ И ЭКСПРЕССИИ ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ-ос ПРИ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА (ИБС)
Шуратова С.Г.1. Нургалиева Г.К.1,
Маншарипова А.Т.1, Тлеулиева Р. , Беляев Н.Н.2
]^ИИ кардиологии и внутренних болезней М3 РК, Институт молекулярной биологии и биохимии МОН РК, Алматы, Казахстан
Исследования в области молекулярной биологии, генетические экспериментальные исследования позволили получить убедительные доказательства воспалительной теории атеросклероза. Известно, что цитокины регулируют межклеточные взаимодействия, поддерживают системное и местное воспаление в атеросклеротической бляшке с ее последующей дестабилизацией и возникновением острого коронарного синдрома. Из самых распространенных факторов риска в процессах атерогенеза наиболее хорошо изучена роль дислипопротеинемии.
Цель работы - изучение динамики показателей липидов сыворотки крови, концентрации провоспалительного цито-кина таР-сс у больных нестабильной стенокардией.
Методы исследования. Уровень содержания ТКР-а определяли с помощью коммерческого ИФА набора фирмы «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург), содержание показателей липидов исследовали по общепринятой методике. Обследовано 24 больных ИБС с нестабильной
стенокардией со средним возрастом 44,0± 6,0 лет и 15 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту. У всех больных диагностирован перенесенный крупноочаговый инфаркт миокарда. Сроки исследований: 1-е и 21-е сутки стационарного лечения.
Полученные результаты определения концентрации ТОТ-а (в пг/мл) и показателей липидов крови (в ммоль/ л) представлены в следующей таблице.
Известно, что цитокины - медиаторы межклеточных взаимодействий. ТЫР-а - это цитокин с широким спектром действия, играет ключевую роль в развитии воспаления. Окисленные ЛПНП обладают выраженными проате-рогенными свойствами, индуцируют синтез цитокинов клетками в очаге воспаления. Как видно из таблицы, динамика экспрессии провоспалительного цитокипа ТЫР-а была несущественной, но уровень его содержания оставался достоверно выше, чем у доноров. Согласно полученным результатам, между содержанием ТОТ-а и проатерогенны-ми фракциями холестерина - триглицеридами существует прямая корреляция (г=0,45; р<0,05).
Таким образом, возможно, выявленная взаимосвязь продукции провоспалительного цитокина ТЫР-а и про-атерогенных липидов у больных хронической коронарной недостаточностью свидетельствует о наличии активности воспалительного процесса за весь период стационарного лечения и о необходимости назначения противовоспалительной противоатеросклеротической терапии.
ТАБЛИЦА. ДИНАМИКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЛИПИДОВ СЫВОРОТКИ И УРОВНЯ Ж-а У БОЛЬНЫХ ИБС ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ
Показатели Доноры До лечения После лечения Р?-а Р» Ри
ТЫР-а 27,7±8,8 54,19±9,88 50,28+ 9,53 <0,05 <0,05 >0,05
Общий холестерин 3,0-6,0 4,65+0,21 5,5±0,25 >0,05 >0,05 >0,05
Альфа-холестерин 0,9-1,1 1,20±0,10 0,99±0,08 >0,05 >0,05 <0,05
Триглицериды До 2,29 2,0+0,11 2,50±0,15 >0,05 <0,05 <0,05
Примечание:р - знак достоверности показателей средних значений уровня содержания Т№-а в сыворотке крови больных в разные сроки лечения по сравнению с показателями доноров.
