CC BY
53
после окончания химиолучевого лечения эндоскопически также не определялись признаки опухолевого роста, но спектры флюоресценции значительно отличались от предыдущей группы, величина Df в среднем равнялась 2,7±1,3. При морфологическом анализе выявлены клетки плоскоклеточного рака.
Выводы. При эндоскопическом обследовании в сочетании с ФД при отсутствии призна-
ков злокачественного роста у 4 пациентов при морфологическом исследовании материала из участков с пониженной флюоресценцией были выявлены комплексы плоскоклеточного рака. Изучение уровня аутофлюоресценции слизистой оболочки гортани позволило адекватно определить точки прицельной биопсии, что повысило диагностическую эффективность эндоскопического мониторинга.
иммуногистохимические маркеры и ферменты метаболизма эстрогенов при раке эндометрия
А.л. ЧЕРНЫШОВА, Н.В. БОЧкАРЕВА, л.А. кОЯОМИЕц, И.В. кОНДАкОВА
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск
Целью исследования явилось изучение экспрессии маркеров апоптоза, неоангиогенеза и р53 во взаимосвязи с экспрессией рецепторов стероидных гормонов и активностью ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов в опухолях эндометрия.
Материал и методы. В 31 опухоли эндометрия изучена экспрессия онкосупрессорного протеина р53, про- и антиапоптотических белков Bax и Bcl-2, а также рецепторов эстрогенов (ER) и прогестерона (PR). В этих же опухолях была оценена активность ферментов метаболизма эстрогенов (ароматазы, стероидсульфатазы, суммарной эстроген 2/4-гидроксилазной активности, КОМТ и ГТ). Средний возраст пациенток составил 58,1±2,1 года. Иммуногистохимиче-ские исследования и определение активности ферментов выполнено у больных РЭ, которые в основном находились в постменопаузе, около 29 % пациенток были перименопаузального возраста. Доминировали пациентки с I стадией заболевания, II стадия заболевания диагностирована у 35 % больных.
Результаты. По результатам иммуногисто-химического окрашивания срезов на протоонкоген Bcl-2 вся группа больных РЭ была разбита на 2 подгруппы - с экспрессией Bcl-2 (Bcl-2 -позитивные опухоли, n=19) и Bcl-2-негативные опухоли (n=12). Исследование показало, что в Bcl-2-позитивных и Bcl-2-негативных опухолях эндометрия примерно с одинаковой частотой выявлена умеренная и высокая экспрессия
Bax. Примерно в трети опухолей, как Bcl-2-позитивных, так и Bcl-2-негативных, выявлен мутантный р53. В Bcl-2- позитивных опухолях преимущественно выявлялась высокоразвитая сеть кровеносных сосудов (более чем в 73 % случаев). В то время как в Bcl-2- негативных опухолях эндометрия в основном выявлялась низкая плотность сосудов. Опухоли, экспрессировавшие Bcl-2, как правило, содержали PR-рецепторы в отличие от Bcl-2 негативных опухолей эндометрия. При изучении активности ферментов синтеза и метаболизма эстрогенов было выявлено, что в Bcl-2-позитивных активность стероидсульфатазы была статистически значимо выше по сравнению с Bcl-2-негативными опухолями .
При проведении корреляционного анализа были выявлены статистически значимые корреляционные взаимосвязи между экспрессией Bcl-2 и PR-рецепторами (r=0,462, p=0,009), экспрессий Bcl-2 и значением плотности микрососудов в опухоли (r=0,477, p=0,007), экспрессий Bax и возрастом больных (r=0,580, p=0,038), активностью стероидсульфатазы и экспрессий ER (r=0,464, P=0,049), активностью ГТ и экспрессий PR (r=0,589, p=0,008). Полученные данные свидетельствуют об определенной дифференциации злокачественных новообразований эндометрия в зависимости от уровня экспрессии Bcl-2. Анализируя выраженность неоангиогенеза и активность ферментов метаболизма эстрогенов в опухолях, можно отметить,
что, по-видимому, Bcl-2-позитивные опухоли являются более агрессивными по своему биологическому потенциалу, поскольку в этих опухолях наряду с высоким уровнем синтеза эстрогенов выявлялся также высокий уровень неоангиогенеза, причем в подавляющем большинстве эти опухоли несли PR. В опухолях с низким уровнем неоангиогенеза Bcl-2 экспрессировался несколько реже, чем в опухолях с умеренным и высоким ангиогенезом. При анализе активности ферментов метаболизма эстрогенов выявлено, что в опухолях эндоме-
к МЕХАНИЗМУ ЦИТОТОкСИЧЕСкОГО ДЕЙСТВИЯ ФЕРРОМАГНИТНЫХ НАНОЧАСТИЦ НА ОПУХОлЕВЫЕ клЕТкИ
В.Ф. ЧЕХУН. И.Н. ТОДОР. Н.Ю. лукЬЯНОВА, О.Р. мельников. В.Я. МОМОТ.
И.к. ХАЕЦкИЙ
Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого
НАН Украины, г. Киев
трия со слабым кровоснабжением активность стероидсульфатазы была статистически значимо ниже по сравнению с опухолями с умеренным и высоким ангиогенезом и составила 56,3±13,3 и 107± 19,0 фмоль эстрон сульфата/мг белка в час соответственно (р=0,048). Полученные данные свидетельствуют, что неоангиогенез и апоптоз в опухолях эндометрия тесно связаны с активностью фермента синтеза эстрогенов -стероидсульфатазой, а также с наличием ER и PR в опухоли.
Цель исследования. Использование нанотехнологий в области медицины создает новые перспективные возможности для улучшения диагностики и лечения различных заболеваний, в первую очередь онкологических. В предыдущих наших исследованиях было показано, что наночастицы ферромагнетиков обладают ци-тотоксической активностью по отношению к клеткам асцитного рака Эрлиха. Для выяснения механизмов, лежащих в основе этой цитотоксичности, мы исследовали поглощение кислорода опухолевыми клетками и процесс окислительного фосфорилирования в митохондриях под влиянием ферромагнитных наночастиц, а также оценили содержание в опухоли нитрозильных комплексов негемового железа и железо-серных белков.
Материал и методы. Методы экспериментальной онкологии, атомно-абсорбционная спектроскопия, лазерно-корреляционная спектрометрия, полярография, ЭПР-спектроскопия. В исследованиях использовались мыши-гибриды (C57Bl/6xDBA/2), которым внутри-брюшинно перевивали асцитную карциному Эрлиха, и крысы Wistar с перевитой подкожно карцино-саркомой Walker-256.
Результаты. В первой серии экспериментов извлеченные из брюшной полости клетки кар-
циномы Эрлиха инкубировались на протяжении 1,5 ч (среда 199, 26°С) в присутствии стабилизированных ферромагнитных наночастиц 4; 20-40 нм; ФМ), в концентрации 0,73, 1,45, 7,25 и 14,5 мкг Fe/мл. Было показано, что использование ФМ в концентрациях 1,45 мкг Fe/мл, 7,25мкг Fe/мл и 14,5мкг Fe/мл приводит к снижению скорости потребления кислорода опухолевыми клетками на 6, 51 и 68% соответственно. Затем из интактных опухолевых клеток были выделены митохондрии и исследованы показатели окислительного фосфорилирования в присутствии сукцината. Установлено, что инкубация митохондрий с ФМ в концентрации 7,25мкг Fe/мл приводит к снижению скорости потребления кислорода митохондриями в состоянии 2 (р<0,05). Но при этом данный показатель значительно снижался, когда митохондрии находились в фосфорилирующем состоянии (во время синтеза АТФ): при 1,45мкг Fe/мл на 25% (р<0,01), при 7,25мкг Fe/мл на 37% (р<0,001). Это, в свою очередь, приводило к снижению дыхательного контроля и продукции АТФ. Во второй серии опытов крысам с карцино-саркомой Walker-256 внутривенно вводили ФМ и через сутки определяли в опухоли содержание нитро-зильных комплексов негемового железа ^е-КО)
