CC BY
83
the terms "аЬегайуе inflammation", "immune inflammation", "transudatе" and "exudate" is considered.
УДК 619:616-07:616.9-022.1:639.311:597.44
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ В УСЛОВИЯХ УСТАНОВКИ ЗАМКНУТОГО ВОДОСНАБЖЕНИЯ
Гинаятов Н.С. - аспирант; Залялов И.Н. - д.в.н., профессор; *Абсатиров Г.Г. - д.в.н., профессор Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *РГП на ПХВ «Западно-Казахстанский аграрно-технический университет имени Жангир хана»
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: осетровые, псевдомоноз, микробиологические исследования, биохимические свойства, инфекции.
Key words: sturgeon, pseudomonosis, microbiological examination, biochemical properties, infectio.
В настоящее время одним из перспективных и эффективных способов выращивания рыбы является
индустриальная аквакультура с
использованием установок замкнутого водоснабжения (УЗВ), где постоянно поддерживаются оптимальные условия для обеспечения быстрого роста и развития рыб [1].
Вместе с тем, при использовании УЗВ на организм рыб постоянно влияют неблагоприятные техногенные факторы, в том числе высокая плотность посадки, резкие перепады содержания кислорода, применение искусственных кормов, несоблюдение режимов кормления, приводящие в ряде случаев к загрязнению органическими остатками воды бассейна и накоплению в этих условия патогенной микрофлоры [2].
Их воздействие приводит к снижению общей резистентности организма рыб, ослаблению темпа роста, повышению восприимчивости к различным
заболеваниям, в том числе и инфекционного характера.
Дальнейшему распространению
инфекционных заболеваний среди рыб в условиях аквакультуры в немалой степени способствуют такие факторы передачи как рабочий инвентарь, приборы и оборудования [3, 4].
Высокая концентрация рыб на ограниченном территориальном
пространстве УЗВ таит в себе серьезную опасность в виде накопления и спонтанного
пассажирования микрофлоры через восприимчивый организм, способствующий резкой вспышке и распространению инфекционных заболеваний [5].
Среди инфекционных болезней осетровых, выращиваемых в условиях УЗВ, все чаще регистрируются псевдомоноз и аэромоноз, При сходной клинике этих заболеваний у рыб до сих пор остаются не выясненными вопросы по их дифференциальной диагностике, выбору эффективных методов лечения и профилактики больных животных.
Основной проблемой в
дифференциальной диагностике этих болезней является схожесть по клинико-морфологическому проявлению.
В связи с чем, возрастает значение микробиологических исследования с целью идентификации возбудителей этих болезней. Для идентификации и дифференциации возбудителей,
поражающие кожные покровы осетровых рыб были поставлены следующие задачи:
- изучить культуральные, морфологические, тинкториальные, биохимические свойства возбудителей данной патологии рыб;
- проведение контрольного заражения естественно восприимчивых объектов (осетровых рыб), для изучения патогенных свойств возбудителей.
Материалы и методы
исследований. Научно-производственный опыт и лабораторные исследования проводились на базе лаборатории
биотехнологии НИИ биотехнологии и природопользования Западно-
Казахстанского аграрно-технического университета имени Жангир хана и в бактериологическом отделе ГУ
«Республиканская ветеринарная
лаборатория РТ».
Объектами исследований послужили сформированные стада сибирских осетров (Acipenser baerii).
После вскрытия сибирского осетра взяты патологические материалы (внутренние органы, область поражение и т.д.) для бактериологического
исследования. Высевы произвели из асцитной жидкости, печени, сердца, селезенки, содержимого из полости раны (отдельно из каждой пробы) на скошенный МПА (рН 7,2-7,4). Инкубировали в термостате при 25°С в течении 48 часов.
Идентификация возбудителя
проведено согласно схеме, предложенной Кауэн и Стил (S.T. Cowan, K.I. Steel), которые в качестве исходного пункта идентификации бактерий производили окраску по Граму. На стадии дифференцирования бактерий учитывают форму клетки, кислотоустойчивость, спорообразование, подвижность,
продукцию каталазы, оксидазы, отношение к глюкозе [6, 7].
Изучение морфологических, и тинкториальных признаков микроба является обычно лишь первоначальной стадией его идентификации. Морфология микроорганизмов изучается путем микроскопии фиксированных и
окрашенных препаратов, а также живых неокрашенных микроорганизмов в раздавленной капле.
Изучение биохимических свойств
произведено согласно инструкции по применению набора реагентов Системы индикаторные бумажные для
идентификации микроорганизмов, набор № 2 для определения межродовой и родовой дифференциации бактерий.
На последующих стадиях
исследования, пользуясь таблицами, характеризующими бактерии, относящихся к определенному роду, находят ключ к определению видов, подвидов и типов в соответствии со сборником инструкции по борьбе с болезнями рыб, Часть I. [8]
Биологическую пробу ставили на двух клинически здоровых рыбах того же вида и возраста, от которых выделена культура возбудителя. Двухсуточную бульонную культуру ввели рыбам внутримышечно в дозе 0,5 мл. Одновременно поставили контроль на 2 рыбах, которым ввели стерильный МПБ в тех же дозах. В случае проявления заболевания или гибели рыб проводят бактериологическое исследование.
Лабораторный диагноз считает установленным при повторном выявлении культуры со свойствами, характерной для возбудителей болезни у подопытных рыб.
Результаты исследований. При изучении культуральных свойств возбудителя установлено, что после культивирования отмечен рост на МПА серовато-белых полупрозрачных, круглых выпуклых колоний с ровными краями.
Микроскопирование мазков
выросших культур с целью определения морфологических и тинкториальных свойств установило, что возбудитель -грамотрицательная палочка, подвижная, спор и капсулы не образует (рис. 1).
-V«* VyM;
/а JJ'?J*
Рис. - Результат микроскопирования культуры
Таблица 1 - Дифференциация бактерий, схожих по морфологическим свойствам
Основные признаки Pseudomonas Vibrio Aeromonas Результаты исследований
Оксидаза + + + +
Расщепление глюкозы на среде Хью-Лейфсона О/- О/Ф О/Ф -
Лизин-декарбоксилаза - + - -
Орнитин-декарбоксилаза - + - -
Аргинин-декарбоксилаза + - - Не проводилось
Обозначения:
- отсутствие продукта реакции; + наличие продукта реакции.
Результаты изучения возбудителя для определения отношения к глюкозе, продукции оксидазы и т. д. приведены в таблице 1.
Судя по таблице, исследуемый
Пользуясь таблицами,
характеризующими бактерии, относящейся к определенному роду, нашли ключ к определению вида и типа. По результатам проведенной типизации установлена принадлежность возбудителя к
Pseudomonas dermoalba, специфичной для осетровых рыб.
Биопроба, направленная на определение патогенных свойств возбудителя дала следующие результаты -на 3-4-е сутки наблюдении отмечены клинические признаки, выраженные общей слабостью, вялость в движениях, а также
объект (возбудитель инфекции) относится к бактериям рода Pseudomonas. Для дальнейшей типизации возбудителя провели биохимические исследование, результаты которых в таблице 2.
развитием характерных поражении на месте введения бактериальной суспензии. На 6-7-е сутки отмечены гибель рыб. При патологоанатомическом вскрытии этих рыб установлены изменения, свойственные псевдомонозу, тогда как у контрольных рыб, которым ввели стерильный МПБ, клинико-морфологических изменений не наблюдали.
После вскрытия больных рыб и взятия патологического материала провели повторные бактериологические
исследования, по результатам которых установили присутствие бактерий рода
Таблица 2 - Дифференциация представителей рода Pseudomonas
Основные Ps. fluo- Ps. pu- Ps. Ps. der- Ps. aure- Ps. cyp- Результаты
признаки rescens tida intes-tinalis moalba ofaciens rinisep-ticum исследований
1 2 3 4 5 6 7 8
Наличие - - - - - + -
капсулы в
мазках
Маннит - - К К К - К
Мальтоза - К К К - - К
Лактоза - К - К К - К
Сахароза К/- -/К К К К - К
* Обозначения:
- отсутствие продукта реакции; + наличие продукта реакции;
К - кислотоположительные (образование пузырьков газа в среде)
Pseudomonas.
Вывод. На основании выполненных культуральных, морфологических,
тинкториальных и биохимических исследований в пораженных органах и тканях сибирских осетров, выращиваемых в установках замкнутого водоснабжения, выявлен возбудитель псевдомоноза.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Киселев, А.Ю. Установки с замкнутым циклом водоиспользования и технологии выращивания в них объектов аквакультуры [Текст] / А.Ю. Киселев // Сер. Аквакультура: обзорная информация - М:. ВНИИПРХ, 1997. - Вып. 1. - 80 с.;
2. Мамонтов, Ю. В. Аквакультура России: состояние, приоритеты и перспективы развития [Текст]: учеб./ Ю.В. Мамонтов, - СПб.: Лань, 1998. - С.83-84;
3. Alderman, D.J., Michel, C. Chemotherapy in Aquaculture today// Symposium «Chemotherapy in Aquaculture -From theory to reality». - France, Paris, 1992. - Р. 3-22;
4. Богерук, А.К. Аквакультура России: потенциальные возможности и стратегия их реализации [Текст] / А.К. Богерук // Рибогосподарска наука Украини. - 2007. - № 2. - C. 3-11;
5. Гинаятов, Н.С., Микробный пейзаж в УЗВ и их чувствительность к антибиотикам in vitro [Текст] / Н.С. Гинаятов, Г.Г. Абсатиров, Б.Т. Сариев // Материалы международной научно-практической конференции «Наука и образование XXI века: опыт и перспективы», - Уральск: РИО ЗКАТУ им. Жангир хана, 2015, - С. 111-114;
6. Cowan, S.T. Manual for the identification of medical bacteria / S.T. Cowan, K.J. Steel // - U.K., Cambridge, 1974;
7. Gibbs, В.М. Identification methods for microbiology / В.М. Gibbs, F.A. Skinner // Vol. 1-2, - N.Y., 1966-1968;
8. Сборник инструкции по борьбе с болезнями рыб, Часть I. - М.: Отдел маркетинга АМБ-агро, 1998. - 310 с.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ В УСЛОВИЯХ УСТАНОВКИ ЗАМКНУТОГО ВОДОСНАБЖЕНИЯ
Гинаятов Н.С., Залялов И.Н., Абсатиров Г.Г.
Резюме
На основании выполненных культуральных, морфологических, тинкториальных и биохимических исследований в пораженных органах и тканях сибирских осетров, выращиваемых в установках замкнутого водоснабжения (УЗВ), выявлен возбудитель псевдомоноза.
IDENTIFICATION OF THE CAUSATIVE OF INFECTIOUS PATHOLOGY OF STURGEON FISHES IN THE CONDITIONS OF ICWS
Ginayatov N.S., Zalyalov I.N., Absatirov G.G.
Summary
Based on the completed culture, morphological, tinctorial and biochemical studies in the affected organs and tissues of the Siberian sturgeon farmed in the installation of the closed water supply (ISWS), identified pathogen pseudomonosis.
УДК619:612.1:615-092
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ ВВЕДЕНИИ «ЯНТОВЕТА»
Грачева О.А. - к.в.н., доцент; Мухутдинова Д.М. - к.в.н., доцент Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана
тел.: (843) 273-97-55
Ключевые слова: кролики, иммунологические показатели, Т-лимфоциты, фагоцитарная активность
