CC BY
30
THE USE OF MICROORGANISMS FOR ACCELERATION OF WASTE WATER TREATMENT
IN A SWINE FARM
Tukhbatullin I.Z., Alimov A.M. Summary
In this research the technology of using the microorganisms for acceleration of waste water treatment in a swine farm was investigated. The outcomes show the effectiveness of isolated cultures to accelerate the maturation of slurry.
УДК 619:576.807.3:612.321:636.2
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ РУБЦА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Хамидуллин И.Р. - аспирант; Галиуллин А.К. - д.в.н., профессор, зав. кафедрой;
Тамимдаров Б.Ф. - к.в.н.; *Шакиров Ш.К. - д.с.-х.н., профессор Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *Татарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства, г.Казань
тел. (843) 273-97-34
Ключевые слова: микроорганизмы, рубцовая жидкость, идентификация, питательная
среда.
Key words: micrооrgaшsm, rumenfluid, identification, nutrient medium.
Актуальность. Микроорганизмы, пищеварительного тракта у разных видов животных разнообразны и неоднородны. У хищников они в большей степени представлены видами, перерабатывающими белковую пищу, у травоядных углеводистую, целлюлозолитическими, у всеядных и теми и другими. Однако есть и общие для многих видов животных, как например микроорганизмы рода энтеробактерий (кишечная палочка). Среди сельскохозяйственных животных
наибольший интерес представляет пищеварительная система жвачных животных (мелкого и крупного рогатого скота), которая представлена сложным многокамерным желудком, состоящим из 4 отделов. Конечно же, такая система пищеварения требует более тщательного и качественного состава симбиотной микрофлоры заселяющей ее и участвующей во всех биологических процессах, происходящих в ней. Ранняя идентификация микроорганизмов
находящихся в преджелудках, в частности рубце, способствует ранней диагностике и профилактике многих патологий пищеварительной системы связанных с неправильным кормлением и
размножением патогенных и условно-
патогенных бактерий.
Цель исследования: идентификация микроорганизмов рубца крупного рогатого скота.
Материалы и методы. Работу проводили в ООО «Бахетле-Агро» Нижнекамского района РТ на крупном рогатом скоте в количестве 9 голов: группа раздоя, разгара, спад и сухостоя. Рубцовое содержимое получали путем зондирования через ротовую полость носопищеводным зондом для лошадей. Так же брали мазки из ротовой полости для посева на наличие микроорганизмов. Эти исследования проводили в Республиканской
ветеринарной лаборатории КМ РТ. Выросшие колонии микроорганизмов идентифицировали при помощи масс-спектрометрического анализа на приборе Maldi Bюtyper на базе
Междисциплинарного центра
коллективного пользования Казанского федерального университета.
Изолированные колонии микроорганизмов наносили на мишень прибора microflex Maldi Bюtyper (BrukerDaltonics, Германия). После высыхания, мишень с образцами помещали в прибор - настольную MALDI-TOF систему microflex Maldi Biotyper. Масс-спектрометрический анализ
проводили с использованием программного обеспечения MALDI Bюtyper 3.1 (ВгикеЮаЬоп^, Германия). Получали спектры константных белков неизвестных микроорганизмов. Программное
обеспечение полученных результатов проводили путем анализа масс-пик листов белковых спектров. Достоверным считали видовую (родовую) идентификацию микроорганизмов, при которой уровень совпадения полученного ряда константных
В посевах на питательных средах обнаружены бактерии принадлежащие аэробам, анаэробам и факультативным анаэробам. В микробиоценозе рубца созданы условия для бактерий, тип существования которых протекает в анаэробных условиях, однако это не исключает наличие аэробов и
факультативных анаэробов, которые могут обитать, как в самом содержимом, так и на стенках рубца. Наличие в образцах бактерий, живущих в условиях присутствия кислорода, мы связываем с занесением их в образцы во время зондирования через ротовую полость и пищевод, где они содержаться в большом количестве. Обнаруженные аэробы совпадали с таковыми в мазках из ротовой полости. Идентифицированные анаэробы разных родов являются обитателями рубца крупного рогатого скота, среди которых присутствуют и условно патогенные виды. Так же обнаруженные бактерии при
белков (Score идентификация) неизвестных микроорганизмов с базой данных, который находился в пределах 1.7-3.0. При этом, значения 1.70 - 2.29 свидетельствовали о положительном определении рода, значения 2.30 - 3.00 - о надёжном определении вида.
Результаты исследований.
Идентификация микроорганизмов на приборе Maldi Biotyper представлены в таблице.
помощи Maldi Biotyper коэффициенты, которых были ниже 1.7, не брались в учет, так как они считаются не достоверными.
Заключение. Использование системы microflex Maldi Bюtyper позволяет идентифицировать анаэробов в рубцовом содержимом крупного рогатого скота. Методика идентификации
микроорганизмов рубцового содержимого обнаруживает как факультативные, так и транзиторные.
Достоверность полученных
результатов подтверждается
бактериологическими методами. Наличие аэробов в исследованных образцах не исключает их присутствие в самом рубце, помимо того, что они совпадали с таковыми из ротовой полости. Идентификация микроорганизмов содержимого рубца при помощи системы тюгойех Maldi Biotyper позволяет выявить на ранней стадии возникновение субкленических патологий, вызываемых условно-патогенными и
Таблица - Идентифицированные виды микроорганизмов в содержимом рубца крупного
рогатого скота
Название хозяйства Виды микроорганизмов
ООО «Бахетле-Агро» Анаэробы Аэробы
Klebsiella pneumoniae Acinetobacter baumannii
Citrobacterfarmeri Pseudomonas koreensis
Enterobacter cloacae Pseudomonas aeruginosa
Enterobacter asburiae Acinetobacter guillouiae
Enterobacter kobei Chryseobacteriumgleum
Proteus mirabilis Lysinibacillussphaericus
Hafnia alvei Bacillus subtilis
Lysinibacillusboronitolerans Bacillus licheniformis
Raoultellaplanticola Stenotrophomonasmaltophilia
Corynebacterium flavescens
Escherichia coli
Alcaligenesfaecalis
Acinetobacter lwoffii
патогенными бактериями, обитающими или заносящимися в рубец при поедании недоброкачественного или загрязненного корма.
ЛИТЕРАТУРА:
1. ГрушкинА.Г., ШевелевН.С. О морфофункциональных особенностях микробиоты рубца жвачных животных и роли целлюлозолитических бактерий в рубцовом пищеварении. С.-х. биол., 2008, № 2, с. 12-19;
2. Тараканов Б.В. Нормальная микрофлора преджелудков жвачных. В кн.: Сельскохозяйственные животные: физиологические и биохимические
параметры организма. Справ.пос. /Под ред. В.Б. Решетова. Боровск, 2002: 259-334;
3. Гертман А.М., Кирсанова Т.С., Федин А.Ю. Ацидоз рубца - как фактор, сдерживающий молочную продуктивность. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им.Н.Э.Баумана.2010,т.203,с.83-87;
4. Брауде А.Г., Гудкова А.Ю. Состав биоценоза рубца крупного рогатого скота в возрастном аспекте в пастбищный период. Российский паразитологический журнал. 2013, №4. С.14-17.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ РУБЦА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Хамидуллин И.Р., Галиуллин А.К., Тамимдаров Б.Ф., Шакиров Ш.К.
Резюме
Методика анализа на приборе microflex Maldi Biotyper позволяет идентифицировать анаэробов от аэробов в рубцовом содержимом крупного рогатого скота. Использованная методика идентификации обнаруживает как факультативные так и транзиторные микроорганизмы.
Идентификация микроорганизмов рубцового содержимого крупного рогатого скота по данной методике выявляет на ранней стадии возникновение субкленических патологий, заболеваний вызываемых условно-патогенными и патогенными бактериями.
THE IDENTIFICATION OF THE RUMEN MICROORGANISMS IN CATTLE
Khamidullin I.R., Galiullin A.K., Tamimdarov B.F., ShakirovSh.K.
Summary
The assay technique on the microflex Maldi Biotyper device allows to identify anaerobes from aerobes in rumen contents of the cattle. The identification procedure used detects both facultative and transitory microorganisms.
The identification of rumen contents according this methodology reveals on early stages the occurrence of subclinical abnormalities, diseases caused by opportunistic and pathogenic bacteria in the rumen of cattle.
