CC BY
5УДК 634.11:631.524.86
О.Ю. Урбанович1, З.А. Козловская2, В.В. Васеха2, П.В. Кузмицкая1, Н.А. Картель1
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕНА VA1 СРЕДИ СОРТОВ И ОБРАЗЦОВ ЯБЛОНИ РАЗЛИЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ, ВЫРАЩИВАЕМЫХ В БЕЛАРУСИ
1ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси» Республика Беларусь, 220072, г. Минск, Академическая, 27 2РУП «Институт плодоводства» Республика Беларусь, 223013, Минская обл. Минский р-н, пос. Самохваловичи, ул. Ковалева, 2
Введение
В условиях Республики Беларусь одним из самых вредоносных и широко распространенных заболеваний яблони является парша, которая поражает листья, плоды, цветки, молодые побеги и почечные чешуйки. Возбудителем заболевания является гриб Venturia inaequalis (Coock.) Wint. (конидиальная стадия Fusicladium dendriticum (Wallr.) Fuck.). У восприимчивых сортов в годы эпифитотий-ного развития заболевания снижение выхода первосортной продукции может достигать 90% [1]. Выделение высокоустойчивых и устойчивых сортов и их внедрение в промышленное садоводство является безопасным методом защиты яблони и эффективным способом получения продукции с улучшенными экологическими характеристиками, что, впоследствии, будет способствовать уменьшению техногенной нагрузки на садовый биоценоз.
В настоящее время известно не менее 15 генов, обеспечивающих устойчивость яблони к парше [2]. Традиционно используемые названия этих генов были даны авторами, впервые описавшими конкретный ген. В. Бас с соавторами предложили новую номенклатуру генов устойчивости к парше, соответствующую современным международным требованиям [2, 3]. Пока в литературе наряду с новым названием, в скобках приводится и традиционное название гена [2]. В данной статье мы будем придерживаться этого правила.
Известные гены устойчивости к парше различаются по происхождению. Источники генов были обнаружены как среди культурных сортов, так и у диких видов
яблони. Так, сеянец яблони, известный под названием Russian seedling R12740-7A, является источником двух генов Rvi2 (Vh2) и Rvi4 (Vh4) [4]. Ген Rvi5(Vm) присутствует у клонов диких видов M.^micromalus 245-38 и M.^atrosanguinea 804 [5]. Получивший самое большое распространение в современных сортах яблони ген Rvi6(Vf) впервые был обнаружен у дикого вида яблони с мелкими плодами M.*floribunda 821 [6]. В геноме M.^floribunda 821 позже был обнаружен второй ген Rvi7 (Vfh) [7]. Ген Rvi8 (Vh8) был идентифицирован в геноме M. xsieversii W193B [8]. Гены Rvi11(Vbj) и Rvi12(Vb) найдены у M. baccata jackii и Hansen's baccata #2 [9]. Источником гена Rvi15 (Vr2) является образец дикой яблони GMAL 2473 Rvi15 (Vr2) [10]. Интродукция генов устойчивости к парше из диких видов в культурные сорта может быть достаточно эффективной, как показывает практическое использование гена Rvi6(Vf). Как правило, этому предшествует длительный селекционный процесс, необходимый для того, чтобы избавится от нежелательного влияния, которые дикие виды яблони оказывают на качество плодов.
Среди культурных сортов известными источниками генов устойчивости к парше являются Golden Delicious (ген Rvi1 (Vg)), старый итальянский сорт Durello di Forli (Rvi13(Vd)), немецкий сорт Dülmener Rosenapfel (ген Rvi14) [11-13]. Ценным и высокоэффективным источником устойчивости к парше признан старый русский сорт Антоновка обыкновенная, происхождение которого неизвестно. Считается, что этот сорт
обладает как полигенной, так и моногенной устойчивостью [14]. В геноме разных образцов Антоновки выявлены гены ЯуИ0(¥а), ЯуИ7(Уа1) и Уа2 [15, 16]. Природа полигенной устойчивости окончательно не выяснена. Однако бесспорно, что сорт демонстрирует высокую устойчивость к парше, и что особенно важно, в полевых условиях, на протяжении длительного времени возделывания. Благодаря этим качествам он широко используется как источник устойчивости к парше во многих селекционных программах [17, 18]. Ряд современных сортов, включенных в Государственный реестр сортов и древесно-кустарниковых пород Республики Беларусь, являются потомками Антоновки обыкновенной.
Кроме этого сорта, высокой устойчивостью к парше в полевых условиях характе-
ризуются также многие сорта белорусской селекции, целенаправленная работа по созданию которых была начата в 20-х годах XX ст. В частности, сорта яблони, созданные А.Е. Сюбаровым с использованием высоко устойчивых к парше исходных форм, сохраняют свою актуальность в селекции и сегодня [19]. К сожалению, пока не удалось выявить генетический механизм, обуславливающий высокую полевую устойчивость этих сортов к заболеванию.
Данное исследование было проведено с целью выявления источников одного из генов, который несет Антоновка обыкновенная, гена ЯуИ7(¥а1), среди сортов яблони различного генетического происхождения, а также отбора гибридных сеянцев яблони с данным геном для дальнейшей селекционной работы.
Материалы и методы
Объекты исследования. Объектом изучения служили 128 сортов и видов яблони, произрастающих в саду РУП «Институт плодоводства». Сформированная выборка была представлена сортами различного генетического происхождения селекции Беларуси, России, Украины, Германии, США и других стран. В исследование были включены как современные сорта, так и старые сорта, традиционно выращиваемые в Беларуси. Для каждого сорта уточнялась родословная. Анализу подвергались также гибридные сеянцы яблони, полученные от различных комбинаций скрещивания в РУП «Институт плодоводства».
Выделение ДНК. Препараты ДНК были получены из фрагмента листа отдельного растения. Выделение ДНК проводили с помощью Genomic DNA Purification Kit фирмы Fermentas согласно рекомендованному протоколу.
Условия амплификации. Для идентификации генов Rvi6(Vf) и Rvi17(Va1) применяли молекулярные маркеры, выявляемые в ре-
зультате ПЦР. Название, последовательность и температура отжига праймеров представлена в таблице 1. Праймеры синтезированы компанией Праймтех (Беларусь).
Реакционная смесь для ПЦР объемом 20 мкл содержала 40 нг ДНК, 75 мМ трис-HCl (pH 8.8 при 25°С), 20 мМ (NH4)2SO4 0,01% Tween 20, 0,2 мМ dNTP, 200 мМ каждого праймера, 1 ед. Taq-полимеразы. Реакцию проводили в следующем режиме: 94°С - 4 мин; 40 циклов 94°С - 40 сек, Т° - 1 мин,
1 1 отж ^
72°С - 2 мин; 72°С - 8 мин.
Продукты амплификации с праймерами Vf2ARD обрабатывали рестриктазой FokI (Fermentas) в течение 2 часов при 55°С в буфере, рекомендуемом фирмой Fermentas.
Продукты амплификации разделяли в 1% агарозном геле в трис-ацетатном буфере. Гели документировали с помощью фотографирования после окрашивания этидиум бромидом. В качестве маркера молекулярного веса использовали 100 bp DNA Ladder Plus (Fermentas).
Таблица 1
Название, последовательность и температура отжига праймеров, использованных для
идентификации генов устойчивости к парше
№ Ген Название маркера Последовательность нуклеотидов отж Литература
1 Rvi6(Vf) VfC F GGT TTC CAA AGT CCA ATT CC R CGT TAG CAT TTT GAG TTG AC 58°С [20]
2 Rvi6(Vf) AL07 + AM19 F TGG AAG AGA GAT CCA GAA AGT G RCAT CCC TCC ACA AAT GCC F CGT AGA ACG GAA TTT GAC AGT G R GAC AAA GGG CTT AAG TGC TCC 60°С [21]
3 Rvi17(Va1 ) Vf2ARD F TCT TGG ACC TAA GCA ACA ATG AT R AGT TGT CCT GTA AGT TGA TTG GC 57°С [16]
Результаты
Для идентификации гена Va1 был использован молекулярный маркер Vf2ARD [16]. Маркер ограничивает последовательность VfARD, расположенную на расстоянии 3.1 сМ от гена. На основе первичной последовательности этого фрагмента разработан CAPS маркер, позволяющий идентифицировать ген Rvi17(Va1) [16]. О присутствии гена свидетельствует фрагмент длиной 343 п.н., выявляемый после разрезания продуктов амплификации рестриктазой FokI. Маркерный фрагмент был обнаружен у 12 сортов. Результаты представлены в таблице 2.
Сорта белорусской селекции Белорусский синап, Чаравница, содержащие маркерный фрагмент гена Rvi17(Va1), являются непосредственными потомками сорта Антоновка обыкновенная. Родителем сорта Пепин литовский улучшенный вероятно также является Антоновка обыкновенная, на что указывают многочисленные морфологические признаки. Сорта Коваленковское, Лошицкое, Память Пашкевича, Коробовка крупноплодная были получены в результате свободного опыления, что затрудняет поиск вероятного родителя и источника гена. Вербное и Новинка осени не являются прямыми потомками Антоновки, но, возможно, что у их исходных форм имелся общий предок с Антоновкой. Сорт Freedom селекции США также имеет в родословной
и обсуждение
Антоновку. Он был получен в результате следующей комбинации скрещивания: (Macoun х Antonovka) х (Golden Delicious х F2 26829-2-2). Проведенные ранее исследования указывали на то, что Freedom унаследовал ген устойчивости к парше от Антоновки [22]. Предположение было основано на результатах наблюдения в полевых условиях за потомством Freedom. Полученные нами результаты говорят в пользу того, что сорт содержит ген Rvi17(Va1).
Под названием Антоновка в разных коллекциях мира, в частности в Geneva apple ger-maplasm repository, встречаются различные генотипы [14]. Генетические отличия между отдельными образцами были подтверждены [23]. Изменчивость Антоновки отмечена отечественными помологами [24, 25]. В представленном исследовании мы провели тестирование 10 образцов Антоновки, собранных в разных частях Беларуси и имеющих отличия по морфологическим признакам. Результаты представлены на рисунке 1. Они показали, что из 10 образцов 9 содержат маркерный фрагмент, соответствующий гену Rvi17(Va1). У образца под номером 19 данный фрагмент не представлен. Очевидно, что этот образец отличается от других на генетическом уровне. Соответствующий гену фрагмент представлен в геноме Антоновки стаканчатой могилевской.
Таблица 2
Результаты тестирования сортов, видов и образцов яблони на присутствие гена
ЯгП7(Уа1)
Образцы, содержащие маркерный фрагмент гена Rvi17(Va1) Образцы, не содержащие маркерный фрагмент гена Rvi17(Va1)
Антоновка обыкновенная, Антоновка стаканчатая могилевская, Белорусский синап, Вербнае, Коваленковское, Коробовка крупноплодная, Лошицкое, Новинка осени, Память Пашкевича, Пепин литовский улучшенный, Freedom, Чаравница. Алеся, Alkmene, Амулет, Антей , Alamata, Ауксис, Афродита, Бабушкино, Банановое, Белорусское летнее, Белорусское малиновое, Белорусское сладкое, Белый налив, Болотовское, Боровинка, Важак, Веньяминовское, Весялина, Ветеран, Witos, Дарунак, Jonagold, Discovery, Dolgo, Edera, Елена, Geneva, Заря Алатау, Заславское, Имант, Имрус, Кандиль орловский, Kent, Коштеля, Креб ГК-1, Lawfam, Лучезарное, Mcintosh, Медуница, Melba, Мечта, Минкар, Минское, Надзейны, Народное, Несравненное, Новое сладкое, Нора, Орловим, Орловское полесье, Осеннее полосатое, Otava, Память Вавилова, Память Исаева, Память Коваленко, Память Сикоры, Память Сюбаровой, Папировка, Пепин литовский, Пепинка золотистая, Первинка, Перлына Киева, Пинова, Поспех, Ребристое, Reanda, Rewena, Reka, Relinda, Retina, Sawa, Свежесть, Серуэл, Синап орловский, Скала, Слава победителям, Солнышко, СООР-10, Старт, Стойкое, Строевсое, Сябрына, Теллисааре, Topaz, Утро, Wealthy, Fiesta, Florina, Цыганочка, Черное дерево, Чистотел, Чулановка, Щедрое, Elstar, Empire, Юбиляр, Юпитер, M.xpurpurea, F M. coronaria, M.xfloribunda К2362, M. ioensis, M. ioensis 2352,M.xprunifolia, M. xsargenti x Ренет Симиренко, 9/22 M. sieboldii, 25/170 M. sieboldii x Спартан, F2M. sieboldii, M. sylvestris, M. son-fardii x 2414, M. transitoria, M.xhybrid MA1255, M.xzumi orobs, M.xcerasifera, M.xsargentii, M.xrobusta, M. baccata.
У ряда сортов, родословная которых непосредственно связана с сортом Антоновка обыкновенная: Алеся, Антей, Белорусское малиновое, Заславское, Имант, Имрус, Над-зейны, Орловим, Память Коваленко, Память Сюбаровой, Первинка, Поспех, Свежесть, Чистотел - искомый ген выявлен не был. Тем не менее, для представленных сортов характерна полевая устойчивость к парше, что позволяет рассматривать сорт Антоновка обыкновенная и его потомков как объект для дальнейших более углубленных исследований природы устойчивости.
Сорта, несущие маркерный фрагмент гена К\117(Уа1) характеризуются высокой устойчивостью к парше. Один из этих сортов, Чаравница, был использован в качестве материнского растения при получении гибрид-
ных сеянцев. Сорт Чаравница был получен в результате скрещивания сортов Белорусский синап и Ренет Кокса (Cox's Orange Pippin) в 1963 г. Е.В. Семашко. Он обладает рядом хозяйственно ценных качеств, среди которых устойчивость к парше, мучнистой росе, тле, зимостойкость. К его преимуществам по сравнению с Антоновкой обыкновенной можно отнести более высокое качество плодов и продолжительный срок хранения.
С использованием сорта Чаравница было получено нескольких гибридных семей. Сеянцы, полученные от скрещивания Чаравницы, были подвергнуты анализу на присутствие маркера к гену Rvi17(Va1). Тестирование показало, что маркерный фрагмент унаследовало 62 сеянца из 157, что составляет 39,5% от общего числа образцов (табл. 3).
М 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 1718 19
Рис. 1. Результаты разделения методом электрофореза в 1% агарозном геле продуктов амплификации ДНК образцов яблони с маркером VÍ2ARD. М -маркер молекулярного веса GeneRulertm 100bp DNA Ladder Plus (Fermentas); 1 - Алеся, 2 - Alkmene, 3 - Антей, 4 - Антоновка стаканчатая могилевская, 5 - Ауксис, 6 - Бабушкино, 7 - Банановое, 8 - Белорусский синап, 9 - Белорусское летнее, 10-19 - образцы Антоновки обыкновенной.
Кроме того, в геноме отдельных гибридных сеянцев представлен высокоэффективный ген устойчивости к парше Rvi6(Vf). Присутствие гена было подтверждено тестированием с помощью молекулярных маркеров VfC и AL07 + AM19. При этом маркер VfC ограничивает фрагмент гомологов генов устойчивости, один из которых соответствует гену Rvi6(Vf), что позволяет с максимальной точностью определять присутствие гена. Маркер AL07 + AM19 является сцепленным. Результаты, полученные с использованием обоих маркеров, полностью совпали. Ген Rvi6(Vf) был обнаружен в геноме 34 гибридных сеянцев. Он представлен в образцах из гибридных семей, полученных от комбинации скрещивания Чаравница х Имрус, Чаравница х Сябрына. Источником гена являлись сорт Имрус и сорт белорусской селекции Сябрына, полученных в результате скрещивания Lobo х Prima. Два сеянца с геном Rvi6(Vf) были обнаружены в гибридной семье Чарав-ница св. оп. В данном случае произошло опыление неизвестным источником гена.
Среди гибридных сеянцев выявлено 13, содержащих одновременно ген Rvi6(Vf) и Rvi17(Va1), что составляет 8,3% от общего количества сеянцев. Наибольшее количество таких образцов (9) представлено в семье Ча-равница х Сябрына.
Полевая оценка анализируемых сеянцев показала, что среди гибридов, содержащих только ген Rvi17(Va1), абсолютное большинство оказалось устойчивыми (поражение паршой
1-2 балла) - 76%. Также среди данной группы 18% растений были отнесены к среднепоража-емым (поражение 3 балла), а 6% не имели признаков поражения. Среди сеянцев, у которых были выявлены оба гена ку117(у(л1 ) и яу16(у/), 8% генотипов проявили исключительно высокую стабильную полевую устойчивость к заболеванию (поражение отсутствовало), 76% анализируемых растений оказались устойчивыми к парше - поражение не более 1 балла, лишь на 8% сеянцев развитие патогена V. inaequalis достигало 2 баллов. Доля среднепоражаемых сеянцев составила только 8%, а восприимчивых к парше генотипов выявлено не было. Данные гибриды представляют собой ценные исходные формы для дальнейшей селекционной работы, особенно с учетом того, что в эпифитотийные годы поражение сортов Имрус и Сябрына, используемые в качестве источников гена ^6(V/), достигало 2 баллов.
Важно, что оба гена являются высокоэффективными. Ген Rvi6(V/ обеспечивает устойчивость к нескольким расам патогена. Считается, что на эффективность этого гена влияют гены-модификаторы, которые содержат разные сорта яблони [26]. В последнее время отмечены случаи преодоления устойчивости, обеспечиваемой геном, 6 и 7 расами патогена. Поэтому особую актуальность приобрел поиск новых источников генов устойчивости к парше. Одним из таких генов может стать Rvi17(Va1). Спектр устойчивости гена
ЯуИ7(¥а1) к различным расам V. inaequalis до стоять расам 6 и 7 [16]. Объединение в одном конца не известен. Однако имеющиеся сведе- генотипе генов Rvi6(Vf) и К\И7(Уа1) обеспе-ния демонстрируют, что он способен противо- чивает эффективную защиту яблони от парши.
Таблица 3
Результаты тестирования гибридных сеянцев яблони
Гибридная семья Количество сеянцев в семье Количество гибридов, содержащих маркер Vf2ARD (ген Rvi17(Va1)) Количество гибридов, содержащих маркеры к генам Rvi6(Vf) и Rvi17(Va1)
шт. % шт. %
Чаравница св.оп. 66 32 48,5 i 1,5
Чаравница x 35/58 M. sieboldii 2 2 100 - -
Чаравница x Сябрына 48 1б 33,3 9 18,7
(Белорусское малиновое + Чаравница) св. оп. 13 4 30,8 - -
Чаравница x Имрус 28 S 28,б 3 10,7
Всего 157 б2 39,5 13 8,3
В целом, распределение среди коллекционных образцов яблони сцепленного с геном фрагмента амплификации, выявляемого с помощью маркера Vf2ARD, говорит о том, что данный маркер может обладать достаточно высокой диагностической ценностью. Соответствующие гену фрагменты выявляются в геноме сортов, связанных с Антоновкой общим происхождением, а также у генетически близких сортов. Маркер не детектируется у диких видов и восприимчивых сортов.
Не всегда молекулярные маркеры, разработанные с помощью анализа популяции, полученной от скрещивания контрастных по данному маркеру родителей, могут быть применимы при анализе больших выборок сортов различного генетического происхождения [27]. В ряде случаев сцепленный с геном маркерный фрагмент может наблюдаться в геноме образцов, данный ген не содержащих. Так, например, для идентификации гена Rvi4 (Vh4) был предложен маркер OPB18 [28]. Однако при анализе популяции Regina х Piflora было обнаружено, что маркерный фрагмент длиной 620 п.н. не корре-
лирует с устойчивыми генотипами [29]. Для идентификации гена Rvi4 (УИ4/Уг1) позже был разработан сцепленных маркер АБ13-БСАЯ [29]. Данных о его эффективности пока не приводилось.
Бесспорными диагностическими преимуществами обладают молекулярные маркеры, ограничивающие непосредственно последовательность тестируемых генов, например маркер УГС для идентификации гена Rvi6(Vf). Однако количество таких маркеров пока значительно ниже, чем сцепленных с хозяйственно ценными генами. Сцепленные маркеры могут обеспечивать получение достаточно точных результатов. В частности, результаты, полученные в представленном исследовании при использовании маркера УГС к гену и сцепленного с ним маркера АЬ07 + АМ19, были полностью идентичны. Поэтому при использовании сцепленных маркеров необходимо опираться на знание их диагностической ценности. Молекулярные маркеры, тесно сцепленные с генами, потенциально обеспечивают получение более надежных результатов [14, 30]. Вместе с тем, молекулярные маркеры, которые могут
дать ошибочные результаты при тестиро- могут быть полезны при анализе потом-вании обширных коллекций, представлен- ства, полученного от контрастных по этому ных генетически разнородным материалом, маркеру родителей.
Заключение
В результате проведенного исследования были выявлены сорта яблони, содержащие в составе генома ген Rvi17(Va1). Среди них потомки сорта Антоновка и сорта, полученные в результате свободного опыления. Отмечена высокая диагностическая ценность маркера УЙАКО. Выявлены гибридные сеянцы, полученные
на основе сорта Чаравница, содержащие гены устойчивости к парше Rvi6(Vf) и Rvi17(Va1 ). Они отличаются высокой полевой устойчивостью к парше в эпифитотийные годы. Таким образом, объединение в одном генотипе двух высокоэффективных генов обеспечивает стабильно высокую устойчивость сеянцев к парше.
Список использованных источников
1. Биоэкологические особенности и кон -троль развития гриба Venturia inaequalis Coocke Winter в яблоневых садах интенсивного типа: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 06.01.11 / В.С. Комардина // РНДУП «Институт защиты растений». - Прилуки. -2008. - P. 14.
2. Towards improvement of marker assisted selection of apple scab resistant cultivars: Venturia inaequalis virulence surveys and standardization of molecular marker alleles associated with resistance genes / A. Patocchi [et al.] // Mol Breed. - 2009. - Vol. 24, № 4. - P. 337-347.
3. A proposal for the nomenclature of Venturia inaequalis races / V. Bus [et al.] // Acta Hor-tic. - 2009. - Vol. 814. - P. 739-746.
4. The Vh2 and Vh4 scab resistance genes in two differential hosts derived from Russian apple R12740-7A map to the same linkage group of apple / V.G.M. Bus [et al.] // Mol Breed. -2005. - Vol. 15. - P. 103-116.
5. Additional allelic genes in Malus for scab resistance of two reaction types / D.F. Dayton, E.B. Williams // J Am Soc Hort Sci. - 1970. -Vol. 95. - P. 735-736.
6. Apple scab resistance from R12740-7A, a Russian apple / D.F. Dayton, J.R. Shay, L.F. Hough // Proc Am Soc Hort Sci. - 1953. -Vol. 62. - P. 334-340.
7. Genetics of host-pathogen relationship between to Venturia inaequalis races 6 and 7 Malus species / G. Benaouf, L. Parisi // Phytopathology. - 2000. - Vol. 90. - P. 236-242.
8. The Vh8 locus of a new gene-for-gene interaction between Venturia inaequalis and
the wild apple Malus sieversii is closely linked to the Vh2 locus in Malus pumila R12740-7A / V.G.M. Bus [et al.] // New Phytol. - 2005. -Vol. 166. - P. 1035-1049.
9. Independent genes in Malus for resistance to Venturia inaequalis / D.F. Dayton, E.B. Williams // Proc Am Soc Hort Sci. - 1968. -Vol. 92. - P. 89-94.
10. Vr2: a new apple scab resistance gene / A. Patocchi [et al.] // Theor Appl Genet. -2004. - Vol. 109. - P. 1087-1092.
11. Characterisation and genetic mapping of a major scab resistance gene from the old Italian apple cultivar 'Durello Forli' / S. Tartarini [et al.] // Acta Hortic. - 2004. - Vol. 663. -P. 129-133.
12. Inheritance of Malus floribunda clone 812 resistance to Venturia inaequalis / G. Benaouf, L. Parisi, F. Laurens // IOBC/WPRS Bull. -1997. - Vol. 20. - P. 1-7.
13. Inheritance studies of apple scab resistance and identification of Rvi14, a new major gene that acts together with other broad-spectrum QTL / V. Soufflet-Freslon [et al.] // Genome. -2008. - Vol. 51. - P. 657-667.
14. Venturia inaequalis resistance in apple / C. Gessler [et al.] // Crit Rev in Plant Sc. - 2006. - Vol. 25. - P. 473-503.
15. Progress and problems in breeding apples for scab resistance / L.F. Hough [et al.] // Proc Angers Fruit Breed Symp. - 1970.
16. A major resistance gene from Russian apple 'Antonovka' conferring field immunity against apple scab is closely linked to the Vf locus / F. Dunemann, J. Egerer // Tree Genet. and
Genom. - 2010. - Vol. 6, № 5. - P. 627-633.
17. Совершенствование сортимента яблони в Беларуси / З.А. Козловская // - Минск, -2003. - P. 168.
18. Results in apple breeding at Dresden-Pillnitz / C. Fischer, M. Fischer // Gartenbauwissenschaft. - 1996. - Vol. 61. - P. 139-146.
19. Яблоня / А.Е. Сюбаров // Минск, Ураджай. - 1968. - P. 279.
20. Linkage of Vfa4 in Malus x domestica and Malus floribunda with Vf resistance to the apple scab pathogen Venturia inaequalis / M.R. Afuni-an, PH. Goodwin, D M. Hunter // Plant Pathology. - 2004. - Vol. 53. - P. 461-467.
21. Development of reliable PCR markers for the selection of the Vf gene conferring scab resistance in apple / S. Tartarini [et al.] // Plant Breeding. - 1999. - Vol. 118. - P. 183-186.
22. 'Freedom' a disease-resistant apple / R.C. Lamb, H.S. Aldwinckle, D.E. Terry // Hort. Science. - 1985. - Vol. 20. - P. 774-775.
23. Identification and mapping of markers for resistance to apple scab from "Antonovka" and "Hansen's baccata#2" / M. Hemmant [et al.] // Acta Hortic. - 2003. - Vol. 622. - P. 153-161.
24. Помология БССР. Атлас плодов ябло-
ни / Под ред. А Н. Ипатьева. - 1972. - P. 240.
25. Помология. Т. 1. Яблоня / Л.П. Сими-ренко // Из-во Украинской АСХН, Киев. -1961. - P. 580.
26. Genetics of the interaction Venturia inae-qualis-Malus: the conflict between theory and reality / C. Gessler // IOBC/WPRS Bull. - 1989. - Vol. 12. - P. 168-190.
27. Определение генов устойчивости к бурой ржавчине в сортах пшеницы (Triticum aestivum L.) с использованием молекулярных маркеров / О.Ю. Урбанович [et al.] // Генетика. - 2006. - Vol. 42, № 5. - P. 675-683.
28. Tagging and mapping scab resistance genes from R12740-7A apple / M. Hemmant, S.K. Brown, N.F. Weeden // J Am Soc Hort Sci. -2002. - Vol. 127. - P. 365-370.
29. Development of a multiallelic SCAR marker for the scab resistance gene Vrl/Vh4/Vx from R12740-7A apple and its utility for molecular breeding / A. Boudichevskaia [et al.] // Tree Genet. and Genom. - 2006. - Vol. 2, № 4. -P. 186-195.
30. Genome Mapping and Breeding in Plants. // Fruits and Nuts. / ed. C. Kole. - Springer-Verlag, Berlin Heidelberg, 2007. - P. 370.
Дата поступления статьи 2 марта 2011 г.
