CC BY
30
DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2020.101.11.032
ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВ ASTERACEAE, PRIMULACEAE, GROSSULARIACEAE И ROSACEAE
Научная статья
Червонная Н.М.1*, Аджиахметова С.Л.2, Поздняков Д.И.3, Папаяни О.И.4, Туховская Н.А.5, Оганесян С.О.6
1 ORCID: 0000-0001-9685-1384;
2 ORCID: 0000-0001-9685-1384;
3 ORCID: 0000-0003-0889-7855;
4 ORCID: 0000-0001-6645-7263;
5 ORCID: 0000-0003-4163-2875;
1 - 6 Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал Волгоградского государственного медицинского университета Министерства здравоохранения Российской Федерации, Пятигорск, Россия
* Корреспондирующий автор (nadezhda.chervonnaya[at]yandex.ru)
Аннотация
Исследованы сравнительная антиоксидантная и антимикробная активности соцветий бархатцев распростертых, гайлардии красивой и рябинника рябинолистного, листьев смородины черной и ежевики сизой, травы вербейника точечного относящихся к семействам Asteraceae, Primulaceae, Grossulariaceae и Rosaceae. Проведен количественный анализ флавоноидов. Выделены полисахариды, где преобладающими являются пектиновые вещества. Наибольший выход пектинов наблюдается в шроте травы вербейника точечного, а наименьший - в шроте соцветий бархатцев распростертых, что составляет 10,7% и 2,2% соответственно. Количественное содержание основных функциональных групп в анализируемых пектиновых веществах установлено титриметрическим методом: все исследуемые пектиновые вещества характеризуются низкой степенью этерификации, вследствие чего обладают высокой комплексообразующей способностью.
Ключевые слова: антиоксидантная и антимикробная активности, флавоноиды, пектиновые вещества, бархатцы распростертые, гайлардия красивая, смородина черная, рябинник рябинолистный, ежевика сизая, вербейник точечный, комплексообразующая активность.
CHEMICAL COMPOSITION AND BIOLOGICAL ACTIVITY OF SOME MEMBERS OF THE ASTERACEAE, PRIMULACEAE, GROSSULARIACEAE AND ROSACEAE FAMILIES
Research article
Chervonnaya N.M.1' *, Adjiakhmetova S.L.2, Pozdnyakov D.I.3, Papayani O.I.4, Tukhovskaya N.A.5, Oganesyan S.O.6
1 ORCID: 0000-0001-9685-1384;
2 ORCID: 0000-0001-9685-1384;
3 ORCID: 0000-0003-0889-7855;
4 ORCID: 0000-0001-6645-7263;
5 ORCID: 0000-0003-4163-2875;
1 - 6 Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute, the branch of the Volgograd State Medical University of the Ministry of
Health of the Russian Federation, Pyatigorsk, Russia
* Corresponding author (annanagornaya69[at]yandex.ru)
Abstract
The article examines the comparative antioxidant and antimicrobial activity levels of the French marigold (Tagetes patula L.), Indian blanket, false spiraea, blackcurrant, European dewberry leaves, and large yellow loosestrife belonging to the families Asteraceae, Primulaceae, Grossulariaceae and Rosaceae. The research illustrates a quantitative analysis of flavonoids and highlights Polysaccharides where pectin substances are predominant. The highest yield of pectin is observed in the meal of the large yellow loosestrife, and the lowest is in the grist of marigold inflorescences, which is 10.7% and 2.2%, respectively. The quantitative content of the main functional groups in the analyzed pectin substances was determined via the titration method: all the studied pectin substances are characterized by a low degree of etherification, as a result of which they have a high complexing ability.
Key words: antioxidant and antimicrobial activity, flavonoids, pectin substances, marigold inflorescences, Indian blanket, blackcurrant, false spiraea, European dewberry, large yellow loosestrife, complexing activity.
Нами проанализирован химический состав, антиоксидантная и антимикробная активности ряда растений, которые широко используются в народной медицине, относящихся к семействам Asteraceae, Primulaceae, Grossulariaceae и Rosaceae [1, С. 148-150].
Основным источником пищевых пектинов в России являются жом яблочный и свекловичный, однако самым существенным недостатком при производстве пектина из названных источников являются трудоемкость подготовки сырья, заключающаяся в необходимости быстрой и эффективной сушки во избежание процессов брожения и гниения. Экспериментально доказано, что в процессе сушки количественное содержание пектиновых веществ снижается, что, вероятно, связано с ферментативными процессами в сыром сырье. Возрастающая потребность пищевого производства, безусловно, создает необходимость поиска новых источников полисахаридных комплексов [2].
Объектами исследования явились соцветия бархатцев распростертых (Tagetes patula L.), гайлардии красивой (Gaillardiapulchella Foug.) и рябинника рябинолистного (Sorbaria sorbifolia (L.) Mill.); листья смородины черной (Ribes nigrum L.) и ежевики сизой (Rubus caesius L.); а также трава вербейника точечного (Lysimachiapunctata L.).
Обоснованием для выбора перечисленных объектов явились данные, свидетельствующие о широком их использовании в народной медицине, а также отсутствии в них ядовитых и сильнодействующих компонентов. Ниже в таблице 1 представлены данные о применении перечисленных объектов в народной медицине.
Таблица 1 - Применение объектов исследования в народной медицине
Растение Применение
Соцветия гайлардии красивой противовоспалительное и гепатопротекторное действие [3, С. 244-249]
Соцветия бархатцев распростертых антимикробное, антисептическое, гипотензивное, мочегонное и противовоспалительное действия [4]
Травы вербейника точечного используется при желудочно-кишечных нарушениях, воспалениях кожи, заболеваниях легких и мигрени [5, С. 104-107]
Листья смородины черной дезинфицирующее и противовоспалительное действия [4]
Листья ежевики сизой противовоспалительное, кровоостанавливающее, ранозаживляющее, отхаркивающее, противогнилостное, противокашлевое, бактерицидное действия [6, С. 198-200]
Листья рябинника рябинолистного используется при суставном ревматизме, желудочно-кишечном расстройстве [7, С. 46-48]
Растения были собраны в период с июня по сентябрь 2017-2019 гг. на территории Кавказских Минеральных Вод (в окрестностях г. Пятигорска и г. Железноводска).
Проведенные ранее исследования их химического состава показали, что основными группами биологически активных веществ являются аминокислоты, фенольные соединения (флавоноиды, дубильные вещества) и полисахариды [5, С. 104-107]; [6, С. 198-200]; [8, С. 277-282].
При переработке растительного сырья с целью получения полисахаридных комплексов используется экстракция водой очищенной, а также водные растворы оксалата аммония, щавелевой кислоты и гидроксида натрия [2]. Как правило, с целью сохранения других важных биологически активных соединений, в частности, полифенолов, сырье предварительно обрабатывают органическими растворителями, а затем из остающегося шрота получают полисахариды.
Ранее, для пектинов из некоторых объектов была установлена комплексообразующая способность по отношению к ионам свинца [7, С. 46-48], однако не установлена взаимосвязь между степенью этерификации пектина и его комплексообразующей активностью.
Учитывая фармакологические свойства различных извлечений из изучаемых объектов, а также высокое содержание в них пектиновых веществ, мы сочли целесообразным выявить основные показатели, характеризующие физико-химические свойства пектинов. В связи с этим одной из задач нашего исследования было изучение комплексообразующей способности в зависимости от степени этерификации пектинов перечисленных растений.
Целью настоящей работы явилось изучение флавоноидного состава, основных характеристик пектиновых веществ, а также определение антиоксидантной и антимикробной активности растительных объектов.
Материалы и принципы исследования
Шми исследована антиоксидантная активность спирто-водных извлечений исследуемых объектов. Измерение проводили на жидкостном хроматографе «Цвет Яуза-01-АА» [9], [10, С. 10-14].
Содержание пектиновых веществ в изучаемых объектах определяли гравиметрически по методу Н.К. Кочеткова и M. Sinner [11]. Остающийся после выделения водорастворимых полисахаридов шрот далее экстрагировали на водяной бане при 100°С и постоянном перемешивании в течение часа смесью 0,5% раствора оксалата аммония и 0,5% раствора щавелевой кислоты (1:1). Полученное извлечение фильтровали и для осаждения пектиновых веществ к нему добавляли равный объём спирта этилового 95%. Выделяется сыпучий порошок, который в зависимости от исходного сырья окрашен от темно-розового до темно-коричневого.
Количественное содержание основных функциональных групп полученных пектиновых веществ определяли алкалиметрическим методом (раствор натрия гидроксида (0,1 моль/л)) [12, С. 110-113].
Для выявления комплексообразующей способности к водному раствору пектиновых веществ добавляли стандартный раствор ацетата свинца (0,035Н) и наблюдали выпадение аморфного осадка пектата свинца. Далее колбу с содержимым оставляли на 10 - 60 минут, после чего раствор центрифугировали, фильтровали, а затем проводили титрование надосадочной жидкости [8, С. 277-282], [11].
Количественное содержание флавоноидов проводили спектрофотометрически [13].
Определение антимикробного действия. Экстракцией сырья спиртом этиловым 40%, 70%, 95%концентрации на кипящей водяной бане в колбе с обратным холодильником продолжительностью 1 час 3 раза, получали соответствующие извлечения, которые далее исследовались на 6 штаммах грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов методом диффузии в агар. Антимикробную активность исследуемых объектов сравнивали с действием 40%, 70% и 95% спирта этилового [13].
Основные результаты
Суммарное содержание антиоксидантов. Установлено, что максимальное содержание антиоксидантов наблюдается в извлечении, полученном экстракцией соцветий гайлардии красивой спиртом этиловом 70%, а для остальных анализируемых объектов оптимальным экстрагентом явился 40% спирт этиловый.
Содержание антиоксидантов в пересчете на кверцетин и галловую кислоту (мг/г) составляет: в соцветиях бархатцев распростертых 2,77±0,002 и 1,89±0,003; в соцветиях гайлардии красивой 1,89±0,015 и 1,24±0,009; в соцветиях
рябинника рябинолистного 1,39±0,013 и 0,38±0,011; в листьях смородины черной 1,39±0,007 и 0,90±0,005; в листьях ежевики сизой 0,93±0,014 и 0,60±0,007; в траве вербейника точечного 4,03±0,026 и 2,62±0,011.
Выделение и изучение основных характеристик полисахаридного комплекса. Для удаления липофильных веществ сырье предварительно обрабатывали хлороформом, для получения суммы полифенолов использовали экстракцию спиртом этиловым 40%. Из остающегося шрота выделяли пектиновые вещества по методике.
Гравиметрическое определение указывает, что содержание пектиновых веществ составляет: в шроте соцветий бархатцев 2,2%; в шроте соцветий гайлардии красивой 5,1%; в шроте травы вербейника точечного 10,7%; в листьях рябинника рябинолистного 9,0%; в листьях смородины черной 9,9%; в листьях ежевики сизой 5,1%.
Основными показателями, характеризующими физико-химические свойства пектинов, являются свободные карбоксильные (Кс), метоксилированные карбоксильные (Км), метоксильные группы (-О-СНз), а также общее число карбоксильных групп (Ко), содержание которых определяли титриметрическим методом [12, С. 110-113].
Таблица 2 - Содержание функциональных г
рупп в пектиновых веществах в анализируемых объектах
Объекты исследования Кс Км Ко X, % -О-СН3
Соцветия гайлардии красивой 20,61 1,35 21,96 6,15 0,93
Соцветия бархатцев распростертых 8,20 4,50 12,70 35,40 3,10
Трава вербейника точечного 15,40 3,15 18,59 16,94 2,17
Листья смородины черной 9,14 4,82 13,96 34,50 3,32
Листья ежевики сизой 8,65 5,22 13,87 37,63 3,59
Листья рябинника рябинолистного 7,91 4,58 12,49 36,67 3,16
Из данных таблицы следует, что все исследуемые пектиновые вещества характеризуются невысокой степенью этерификации (X), что, возможно может свидетельствовать об их высокой комплексообразующей способности [8, С. 277-282]; [12, С. 110-113].
Для подтверждения данного предположения была определена комплексообразующая активность полученных пектиновых веществ по отношению к ионам свинца.
РиС. 1. - Зависимость комплексообразующей способности от степени этерификации: 1 - соцветия гайлардии красивой; 2 - соцветия бархатцев распростертых; 3 - трава вербейника точечного; 4 - листья смородины черной; 5 -
листья ежевики сизой; 6 - листья рябинника рябинолистного
Максимальное связывание ионов свинца наблюдается у пектина, выделенного из соцветий гайлардии красивой (95,1%), а минимальное - из соцветий бархатцев распростертых (39,2%).
Суммарное содержание флавоноидов. Результаты количественного определения флавоноидов представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Результаты количественного определения флавоноидов
№ Название сырья Сумма флавоноидов, %
1 Соцветия бархатцев распростертых 2,98±0,06%, в пересчете на патулетин*
2 Соцветия гайлардии красивой 0,32±0,01%, в пересчете на лютеолин
3 Соцветия рябинника рябинолистного 0,822±0,02%, в пересчете на кверцетин
4 Листья смородины черной 0,68±0,01%, в пересчете на рутин
5 Листья ежевики сизой 0,94±0,02%, в пересчете на рутин
6 Трава вербейника точечного 0,59±0,01%, в пересчете на кверцетин
Примечание: * суммарное содержание флавоноидов определялось в извлечении из соцветий бархатцев распростертых, полученном спиртом этиловым 40%
Антимикробная активность. Результаты определения антимикробной активности исследуемых извлечений представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Диаметры зон подавления роста тест-культур микроорганизмов
Исследуемые объекты Диаметр зоны задержки роста тест-культур микроорганизмов, мм
1* 2* 3* 4* 5* 6*
Экстрагент - спирт этиловый 40%
соцветия бархатцев распростертых 6 6 6 6 12 6
трава вербейника точечного 12 14 15 6 15 6
соцветия гайлардии красивой 6 12 6 6 12 6
листья ежевики сизой 14 6 6 6 16 12
листья смородины черной 32 6 6 6 20 6
соцветия рябинника рябинолистного 6 6 6 6 11 6
Экстрагент - спирт этиловый 70%
соцветия бархатцев распростертых 6 6 12 6 10 6
трава вербейника точечного 6 6 6 6 10 6
соцветия гайлардии красивой 12 6 17 6 6 6
листья ежевики сизой 6 6 12 6 6 11
листья смородины черной 6 15 6 13 10 6
соцветия рябинника рябинолистного 6 6 18 6 6 6
Экстрагент - спирт этиловый 95%
соцветия бархатцев распростертых 6 20 - 6 11 6
трава вербейника точечного 6 13 11 6 13 12
соцветии ягайлардии красивой 6 6 - 6 13 6
листья ежевики сизой 6 6 12 13 11 15
листья смородины черной 6 14 8 12 10 6
соцветия рябинника рябинолистного 6 20 6 6 6 6
Препараты сравнения
спирт этиловый 40% 6 6 8 6 6 6
спирт этиловый 70% 6 8 8 6 8 6
спирт этиловый 95% 6 6 6 6 6 6
Примечание: * 1 - Staphylococcus aureus (Type),2 - Escherichia coli 055,3- Escherichia coli М17,4— Bacillus anthracoides 96,5- Pseudomonas aeruginosa, 6— Proteus vulgaris
Антимикробной активностью характеризуются: извлечение, полученное экстракцией 40% спиртом этиловым, из листьев смородины черной по отношению к Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa; извлечения из соцветий бархатцев распростертых и рябинника рябинолистного, полученные экстракцией 95% спиртом этиловым, и извлечения из соцветий гайлардии красивой и рябинника рябинолистного, полученные экстракцией 70% спиртом этиловым, в отношении к Escherichia coli 055 и к Escherichia coli М17. Препараты сравнения не показали выраженной активности ни к одному из выбранных микроорганизмов.
Заключение
Исследована антиоксидантная активность отдельных представителей семейств Asteraceae, Primulaceae, Grossulariaceae и Rosaceae. Выделены полисахариды, в которых преобладают пектиновые вещества. Максимальный выход пектиновых веществ из шрота травы вербейника точечного 10,7%, из листьев рябинника рябинолистного 9,0% и из листьев смородины черной 9,9%. Полученные данные свидетельствуют о достаточно высоком содержании пектиновых веществ в соцветиях бархатцев распростертых и гайлардии красивой; листьях смородины черной, рябинника рябинолистного и ежевики сизой, а также траве вербейника точечного.
Наибольшее содержание пектиновых веществ наблюдается в траве вербейника точечного (10,7%), а наименьшее -в соцветиях бархатцев распростертых (2,2%). Пектиновые вещества исследованных растений обладают высокой комплексообразующей способностью, что связано с количественным содержанием свободных карбоксигрупп.
Количественный анализ флавоноидов свидетельствует, что их наибольшее содержание представлено в извлечении из соцветий бархатцев распростертых, полученном спиртом этиловым 40%, 2,98±0,06%, в пересчете на патулетин.
Таким образом, можно сделать вывод, что наибольшим антимикробным действием из исследуемых объектов обладают: извлечение из листьев смородины черной, полученное экстракцией 40% спиртом этиловым; извлечения из соцветий бархатцев распростертых и рябинника рябинолистного, полученные экстракцией 95% спиртом этиловым; извлечения из соцветий гайлардии красивой и рябинника рябинолистного, полученные экстракцией 70% спиртом этиловым.
Конфликт интересов Conflict of Interest
Не указан. None declared.
Список литературы / References
1. Попов И.В. Современное состояние проблемы использования лекарственного растительного сырья в СевероКавказском Федеральном округе / И.В. Попов, О.И. Попова // Научно-практическая конференция, посвященная 65-летию факультета промышленной технологии лекарств: материалы научно-практической конференции, 2010. -С. 148 - 150.
2. Донченко Л.В. Пектин основные свойства, производство и применение / Л.В. Донченко, Г.Г. Фирсов. - М.: ДеЛи принт, 2007. - 276 с.
3. Moharram Fatma A. New Apigenin Glycoside, Polyphenolic Constituents, Anti-inflammatory and Hepatoprotective Activities of Gaillardia grandiflora and Gaillardia pulchella Aerial Parts / Moharram Fatma A., Abd El Moneim El Dib R., Marzouk Mohamed S. et al. // Pharmacogn Mag. - 2017. - №13(2). - P. 244-249.
4. Кьосев П.А. Полный справочник лекарственных растений / П.А. Кьосев. - М.: ЭКСМО - Пресс, 2002. - 992 с.
5. Абрамова Е.Р. Изучение полисахаридов некоторых представителей семейств Primulaceae и Asteraceae / Е.Р. Абрамова, Д.И. Текеева, С.Л. Аджиахметова и др. // Беликовские чтения: тез. докл. Всероссийской науч.-практ. конф. -Пятигорск, 2018. - 104-107.
6. Магометова Э.Ш. Полисахаридный комплекс листьев ежевики сизой / Э.Ш. Магометова, С.Л. Аджиахметова // Беликовские чтения: тез. докл. Всероссийской науч.-практ. конф. - Пятигорск, 2017. - С. 198 - 200.
7. Гущина М.Е. Изучение полисахаридного комплекса листьев рябинника рябинолистного / М.Е. Гущина, С.Л. Аджиахметова, Э.Т. Оганесян // Фармация и фармакология. - 2015. - № 3(10). - С. 46-48.
8. Аджиахметова С.Л. Исследование сорбционной способности пектинов и водорастворимых полисахаридов крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.), листьев шелковицы черной (Morus nigra L.) и шелковицы белой (Morus alba L.) / С.Л. Аджиахметова, И.И. Селина, Л.В. Лигай, Л.П. Мыкоц, Н.А. Туховская, Э.Т. Оганесян // Науч. ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация.- 2013. - № 11. - С. 277-282.
9. Червонная Н.М. Об антиоксидантной активности спирто-водных извлечений из цветков бархатцев распростертых / Н.М. Червонная, О.А. Андреева // Современные проблемы науки и образования. - 2015 - №2 (часть 3). - [Электронный ресурс] URL: http://www.science-education.ru//ru/article/ view?id=23713 (дата обращения: 09.10.2020)
10. Яшин А.Я. Прибор для определения антиоксидантной активности растительных лекарственных экстрактов и напитков / А.Я. Яшин, Я.И. Яшин // Журн. междунар. информационная система по резонансным технологиям. - 2004. - №34. - С. 10-14.
11. Кочетков, Н.К. Химия биологически активных соединений / Н.К. Кочетков. - М., 1970. - 631 с.
12. Позднякова Т.А. Количественное определение функциональных групп пектиновых веществ травы герани сибирской (Geranium sibiricum L.) / Т.А. Позднякова, Р.А. Бубенчиков // Фундаментальные исследования. - 2014. -№ 11-1. - С. 110-113.
13. Государственная фармакопея Российской Федерации. - 13-е изд. - [Электронный ресурс] : URL: http://femb.ru/feml. (дата обращения: 09.10.2020)
Список литературы на английском языке / References in English
1. Popov I. V. Sovremennoe sostoyanie problemy ispol'zovaniya lekarstvennogo rastitel'nogo syr'ya v Severo-Kavkazskom Federal'nom okruge [The Current State of the Problem of Using Medicinal Plant Raw Materials in the North Caucasian Federal District] / I. V. Popov, O. I. Popova // Proceedings of the Scientific and Practical Conference Dedicated to the 65th Anniversary of the Faculty of Industrial Medicine Technology, 2010, pp. 148-150 [in Russian]
2. Donchenko L. V. Pektin osnovnye svojstva, proizvodstvo i primenenie [Pectin: Main Properties, Production and Application] / L.V. Donchenko, G. G. Firsov, M.: DeLi print, 2007, 276 p. [in Russian]
3. Moharram Fatma A. New Apigenin Glycoside, Polyphenolic Constituents, Anti-inflammatory and Hepatoprotective Activities of Gaillardia grandiflora and Gaillardia pulchella Aerial Parts / Moharram Fatma A., Abd El Moneim El Dib R., Marzouk Mohamed S. et al. // Pharmacogn Mag. - 2017. - №13(2). - P. 244-249.
4. Kjosev P. A. Polnyj spravochnik lekarstvennyx rastenij [Complete Guide to Medicinal Plants] / P. A. Kjosev, M.: EKSMO-Press, 2002, 992 p. [in Russian]
5. Abramova E. R. Izuchenie polisaxaridov nekotoryx predstavitelej semejstv Primulaceae i Asteraceae [Study of Polysaccharides in Some Members of the Primulaceae and Asteraceae families] / E. R. Abramova, D. I. Tekeeva, S. L. Adzhiakhmetova et al. // Belikov Readings: Proceedings of the All-Russian Scientific and Practical Conference in Pyatigorsk, 2018 - pp. 104-107 [in Russian]
6. Magometov E. S. Polysaccharide Complex of European Dewberry Leaves with Blue/ E. S. Magometov, S. L. Adzhiakhmetova // Belikov Readings: Proceedings of the All-Russian Scientific and Practical Conference in Pyatigorsk, 2017, pp. 198-200 [in Russian]
7. Gushchin, M. E. Izuchenie polisaxaridnogo kompleksa list'ev ryabinnika ryabinolistnogo [The Study of Polysaccharide Complex of the Leaves of the False Spiraea] / M. E. Gushchin, S. L. Adzhiakhmetova, E. T. Oganesyan // Farmaciya i farmakologiya [Pharmacy and Pharmacology. - 2015. - № 3(10), pp. 46-48 [in Russian]
8. Adzhiakhmetova S. L. Issledovanie sorbcionnoj sposobnosti pektinov i vodorastvorimyx polisaxaridov kryzhovnika otklonennogo (Grossularia reclinata (L.) Mill.), list'ev shelkovicy chernoj (Morus nigra L.) i shelkovicy beloj (Morus alba L.) [Research of Sorption Capacity of Pectins and Water-Soluble Polysaccharides of European gooseberry (Grossularia reclinata (L.) Mill.), of Black Mulberry (Morus nigra L.) and White Mulberry Leaves (Morus alba L.)] / S. L. Adzhiakhmetova, I. I. Selina, L. V. Ligay et al. // Nauch. vedomosti BelGU. Seriya: Medicina [Belgorod State University Scientific Journal. Medicine Series] Farmatsiya.- 2013. - No. 11, pp. 277-282 [in Russian]
9. Chervonnaya N. M. Ob antioksidantnoj aktivnosti spirto-vodnyx izvlechenij iz cvetkov barxatcev rasprostertyx [On the Antioxidant Activity of Alcohol-Water Extracts From Marigold Flowers (Tagetes patula L.)] / N. M. Chervonnaya, O. A. Andreeva // Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya [Modern Problems of Science and Education], - 2015-No. 2 (part 3), [Electronic resource] : URL: http://www.science-education.ru//ru/article/ view?id=23713 (accessed: 09.10.2020) [in Russian]
10. Yashin A. Ya. Pribor dlya opredeleniya antioksidantnoj aktivnosti rastitel'nyx lekarstvennyx e'kstraktov i napitkov [A Device for Determining the Antioxidant Activity of Herbal Medicinal Extracts and Beverages]/ A. Ya. Yashin, I Ya. Yashin // Zhurn. mezhdunar. informacionnaya sistema po rezonansnym texnologiyam [International. Information System for Resonant Technologies Journal], 2004, no. 34, pp. 10-14 [in Russian]
11. Kochetkov N. K. Ximiya biologicheski aktivnyx soedinenij [Chemistry of Biologically Active Compounds] / N. K. Kochetkov. - M., 1970, 631 p. [in Russian]
12. Pozdnyakova T. A. Kolichestvennoe opredelenie funkcional'nyx grupp pektinovyx veshhestv travy gerani sibirskoj [Quantitative Determination of Functional Groups of Pectin Substances of the Siberian Cranesbill (Geranium sibiricum L.)] / T. A. Pozdnyakova, R. A. Bubenchikov // Fundamental'nye issledovaniya [Fundamental Research]. - 2014. - no. 11-1, pp. 110-113 [in Russian]
13. Gosudarstvennaya farmakopeya Rossijskoj Federacii [State Pharmacopoeia of the Russian Federation], 13th Edition, [Electronic resource]: URL: http://femb.ru/feml (accessed: 09.10.2020) [in Russian]
