CC BY
20
Иммунология. 2017; 38(6)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-292-295
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
ВРОЖДЕННЫЙ ИММУНИТЕТ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017
УДК 616.132.2-089.86-089.168.1-092:612.017.1]-048.33
Сизякина Л.П.1, Шлык И.Ф.2, Сидоров Р.В.1, Шлык С.В.1
ХАРАКТЕРИСТИКА ВРОЖДЁННОГО ИММУНИТЕТА В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ У БОЛЬНЫХ С АОРТОКОРОНАРНЫМ ШУНТИРОВАНИЕМ
1 ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Минздрава России, 344022, г Ростов-на-Дону, Россия;
2 ГБУ РО «Ростовская областная клиническая больница», 344015, г Ростов-на-Дону, Россия
Иммунная система — ключевой участник процесса воспаления, играющего важную роль в прогрессировании атеросклероза. Адекватный иммунный ответ возможен лишь при взаимодействии систем врождённого и приобретённого иммунитета. Цель настоящей статьи — определение особенностей реагирования клеточного и гуморального звеньев врождённого иммунитета у пациентов, перенёсших аортокоронарное шунтирование на работающем сердце в различные сроки послеоперационного периода. В результате проведённой работы выявлено повышение экспрессии Толл-подобных рецепторов 2-го и 4-го типов в течение всего периода наблюдения. Отмечена супрессия CD16+ и снижение концентрации Гранзима В, а также уменьшение микробицидной активности нейтрофилов и повышение синтеза микробицидных пептидов.
Ключевые слова: аортокоронарное шунтирование; Толл-подобные рецепторы; врождённый иммунитет; ми-кробицидные пептиды.
Для цитирования: Сизякина Л.П., Шлык И.Ф., Сидоров Р.В., Шлык С.В. Характеристика врожденного иммунитета в послеоперационном периоде у больных с аортокоронарным шунтированием. Иммунология. 2017; 38(6): 292-295. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-292-2295
SizyakinaL.P.1, ShlykIF.2, SidorovR.V.1, ShlykS.V.1
FEATURE INNATE IMMUNITY IN THE POSTOPERATIVE PERIOD IN PATIENTS WITH CORONARY ARTERY BYPASS GRAFTING
1 «Rostov State Medical University», 344022, 29 Nakhichevan Rostov-on-Don, Russia;
2 «Rostov Regional Hospital», 344015, 170 Blagodathnaja, Rostov-on-Don, Russia
The immune system is a key player in the process of inflammation, which plays an important role in the progression of atherosclerosis. An adequate immune response is possible only in the interaction of systems of innate and acquired immunity. The aim of this article was to determine the response characteristics of cellular and humoral innate immunity in patients undergoing coronary artery bypass surgery on a beating heart at different times of the postoperative period. As a result of this work revealed increased expression of Toll-like receptors 2 and 4 types throughout the follow-up period. There was a suppression of CD16 + and a decrease in the concentration of granzyme B, as well as a decrease in the microbicidal activity of neutrophils and increase the synthesis of microbicidal peptides.
Keywords: coronary artery bypass grafting; Toll-like receptors; innate immunity; microbicidal peptides.
For citation: Sizyakina L.P., Shlyk I.F., Sidorov R.V, Shlyk S.V Feature innate immunity in the postoperative period in patients with coronary artery bypass grafting. Immunologiya. 2017; 38(6): 292-295. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-292-295
For correspondence: Sizyakina Lyudmila Petrovna, Dr Med. Sci., Professor, Head. Department Clinical Immunology and Allergology, director of the Institute of Clinical Immunology «Rostov State Medical University», E-mail:[email protected] Sizyakina L.P. http://orcid.org/0000-0001-5716-4397 ShlykI.F., http://orcid.org/0000-0003-2193-7372 SidorovR.V., http://orcid.org/0000-0002-8411-1554 Shlyk S.V. http://orcid.org/0000-0003-3070-8424
conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Acknowledgments. The study had no sponsorship.
Received 12.04.17 Accepted 16.08.17
Для корреспонденции: Сизякина Людмила Петровна, д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой клинической иммунологии и аллергологии, директор Института клинической иммунологии Ростовского государственного медицинского университета, E-mail: [email protected]»
введение
Иммунная система характеризуется сложной высокоорганизованной иерархией. Первичная реакция на чужеродный агент определяется особенностями реагирования клеточного и гуморального компонентов врождённого иммунитета [1]. Данной системе отведена главенствующая роль с позиции ре-
Immunology. 2017; 38(6)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-292-295
ORIGINAL ARTICLE
гуляции выраженности воспаления и его исхода [2]. Известно значение иммунного воспаления в развитии атеросклероза [3—4], при этом многие аспекты по-прежнему остаются дискуссионными.
Эффективным методом лечения прогрессирующего коронарного атеросклероза служит проведение реваскуляризации миокарда, а именно стентирования или аортокоронарного шунтирования [5]. Несмотря на то что аортокоронарное шунтирование — метод, улучшающий прогноз и качество жизни пациентов, в отдалённом послеоперационном периоде возникают осложнения, прежде всего связанные с атероскле-ротическим поражением шунтов. Кроме того, в литературных источниках нет данных, комплексно характеризующих основные звенья как адаптивного, так и врожденного иммунитета. Целью настоящего исследования стало выявление особенностей как клеточного, так и гуморального компонентов врождённого иммунитета у пациентов, перенёсших аортокоронарное шунтирование на работающем сердце в различные сроки послеоперационного периода.
Материал и методы
Исследование проводили на базе кардиохирургического отделения и НИИ иммунологии Ростовского государственного медицинского университета. В исследовании приняли участие 35 пациентов, из них 24 мужского и 11 женского пола, в возрасте 59,5 ± 2 года с ишемической болезнью сердца (ИБС) и наличием показаний для проведения АКШ на работающем сердце. Критерии включения: наличие ИБС, стенокардии напряжения III—IV функциональных классов. Критерии исключения: наличие сопутствующей онкологической патологии, заболевания соединительной ткани, острый инфаркт миокарда. В 72,4% обследуемые имели III функциональный класс стенокардии напряжения, в 27,6% — IV
У всех пациентов в анамнезе был инфаркт миокарда. Средняя длительность ИБС составила 12,6 ± 3,2 лет. Все обследуемые подписали информированное согласие на участие в исследовании. Всем пациентам выполнена операция аорто-коронарного шунтирования без ИК, на работающем сердце, с использованием артериального шунта — внутренней грудной артерии (ВГА).
Оценку иммунного статуса проводили до операции, через 4, 11 и 18 дней после операции. Фенотипирова-ние CD14+CD282+ (TLR2), CD14+CD284+ (TLR4), CD14+CD289+ (TLR9) моноцитов, CD3+CD16+ и CD16+Gr+-лимфоцитов периферической крови проводили методом проточной цитофлуориме-трии с использованием моноклональных антител производства Beckman Coulter (США). Внутриклеточное содержание Гранзима В проводили на проточном лазерном цитофлюориметре FC500. Кислородзависимую метаболическую активность нейтрофилов оценивали в НСТ-тесте. Альфа-дефензин (Hycult biotech, США) и лактоферрин («Вектор Бест», Россия) определяли в сыворотке крови методом ИФА.
При проведении статистического анализа оценивали нормальность выборок с помощью критерия Колмогорова—Смирнова. Статистическая обработка полученных результатов основывалась на /-критерии Стьюдента и осуществлялась при использовании пакетов программ SPSS Statistics17.0. Различия считали достоверными при р < 0,05. Результаты представлены в виде среднего значения (M) ± стандартная ошибка (m).
Результаты и обсуждение
Анализ показателей клеточного звена врождённого иммунитета (табл. 1) у пациентов на 4-е сутки после операции АКШ свидетельствует о статисти-
чески значимом увеличении клеток, несущих CD14+CD282+ рецепторы, на 14-е и 18-е сутки их количество продолжает оставаться высоким, существенно превышая их содержание до операции как по относительным, так и по абсолютным показателям. Аналогичная ситуация отмечается и в отношении клеток, экспрессирующих CD14+CD284+, количество которых практически в 3 раза повышается на 4-е сутки после операции, оставаясь на таком же уровне на 11-е сутки, проявляя тенденцию к снижению на 18-е сутки. Количество моноцитов, экспрессирующих CD289+-рецепторы, как по относительным, так и по абсолютным значениям практически не меняется.
В то же время следует отметить динамику лимфоцитов, несущих CD16+-рецепторы, число которых существенно снижается на 4-е сутки по сравнению с их исходным значением, оставаясь сниженным как на 11-е, так и на 18-е сутки после операции. Эта закономерность прослеживается не только в отношении относительных, но и абсолютных значений. Важно отметить, что не только наблюдается супрессия количества лимфоцитов, но и снижается их цитотоксиче-ский потенциал, что верифицируется снижением содержания Гранзима В в этих клетках во все исследуемые сроки. Однако к 18-м суткам отмечается тенденция к повышению CD16+Gr+-лимфоцитов без достижения исходного доопера-ционного уровня.
В фагоцитарном звене отмечается снижение микроби-цидной активности нейтрофилов, наиболее выраженная на 4-е и 11-е сутки с постепенной тенденцией к нормализации на 18-е сутки. При этом и на 4-е, и на 11-е сутки существенно снижаются их адаптивные резервы, что документируется данными НСТ стимулированного теста. Указанная закономерность прослеживается и в исследовании коэффициента стимуляции НСТ.
При анализе показателей гуморального звена и, в частности, микробицидных пептидов необходимо отметить статистическую достоверность нарастания содержания лактофер-рина на 4-е сутки после АКШ с дальнейшим повышением на 11-е сутки и с постепенным снижением содержания лактофе-рина на 18-е сутки, хотя его содержание по прежнему в 2 раза превышало дооперационный уровень (табл. 2).
Таблица 1
Динамика показателей клеточного звена врождённого иммунитета у пациентов до и после проведения АКШ
Показатель
Сутки
До операции 4-е 11-е 18-е
CD14+CD282+,% 74,2 ± 1,6 83,7 ± 1,3* 81,5 ± 1,4* 84,7 ± 0,5*
CD14+CD282+, 109/л 0,4 ± 0,1 0,5 ± 0,01 0,7 ± 0,03* 0,6 ± 0,03*
CD14+CD284+,% 5,6 ± 1,1 14,1 ± 2,8* 12,1 ± 1,6* 7,2 ± 1,8
CD14+CD284+, 109/л 0,05 ± 0,01 0,2 ± 0,01* 0,1 ± 0,09 0,09 ± 0,04
CD14+CD289+,% 84,3 ± 2,1 87,1 ± 1,9 85,7 ± 2,2 84,8 ± 2,2
CD14+CD289+, 109/л 0,4 ± 0,2 0,5 ± 0,2 0,6 ± 0,3 0,5 ± 0,1
CD16+,% 17,1 ± 1,3 8,29 ± 0,9* 7,33 ± 0,8* 11,8 ± 0,5*
CD16+, 109/л 0,5 ± 0,1 0,2 ± 0,09* 0,1 ± 0,09* 0,3 ± 0,1*
CD16+Gr+,% 9,7 ± 1,5 5,1 ± 0,1* 5,2 ± 0,7* 8,8 ± 1,2
CD16+Gr+, 109/л 0,2 ± 0,04 0,07 ± 0,05* 0,1 ± 0,02* 0,2 ± 0,01
НСТсп, усл. ед. 105,1 ± 2,2 94,3 ± 3,1* 93,1 ± 2,4* 97,6 ± 4,5
НСТ ст, усл. ед. 170,4 ± 4,3 150,5 ± 4,5* 153,3 ± 3,5* 160,2 ± 6,6
К ст. НСТ 1,6 ± 0,1 1,7 ± 0,1* 1,6 ± 0,1 1,6 ± 0,1
Примечание. Здесь и в табл. 2: ными до оперативного лечения.
- р < 0,05 по сравнению с исходными дан-
*
Иммунология. 2017; 38(6)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-292-295
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Таблица 2
Динамика показателей гуморального звена врожденного иммунитета у пациентов до и после проведения АКШ
Показатель Сутки
До операции 4-е 11-е 18-е
Лактоферин, нг/мл 0,7 ± 0,1 1,2 ± 0,2* 3,6 ± 0,7* 1,4 ± 0,1*
Альфа-дефензин, 217 ± 56 328± 18* 722 ± 68* 378± 23*
пг/мл
Анализ содержания альфа-дефензина свидетельствует об увеличении его содержания на 4-е сутки, дальнейшем его нарастании к 11-м суткам и постепенном снижении на 18-е сутки, хотя по прежнему его содержание достоверно превышает дооперационный уровень (см. табл. 2).
Таким образом, анализируя собственные данные, мы выявили динамику показателей как клеточного, так и гуморального звеньев врождённого иммунитета у пациентов в послеоперационном периоде. При этом обращает внимание динамика Толл-подобных рецепторов, экспрессируемых на моноцитах в течение всего периода наблюдения, за исключением TLR9.
TLRs — это трансмембранные белки, которые способны распознавать антигены и активировать сигнальные пути, запускающие синтез провоспалительных цитокинов и антимикробных пептидов. Известно 11 типов TLRs с различной локализацией [2]. В большей степени данные рецепторы экс-прессируются на наружной мембране моноцитов, в то время как TLR9 — на мембране внутриклеточных органелл. При взаимодействии данных рецепторов с антигенами в моноцитах запускается процесс секреции различных провоспали-тельных цитокинов и хемокинов [3].
Выявленная в нашей работе повышенная концентрация CD14+CD282+ и CD14+CD284+ до операции, возможно, обусловлена мультифокальным атеросклерозом. Так, в работе МиШск и соавт. показано, что экспрессия TLR2 увеличивается на поверхности эндотелиальных клеток в местах, подверженных развитию атеросклероза [6]. Другие авторы выявили роль связывания TLR2 и CD 36 с окисленными ли-попротеидами, индуцирующими оксидативный стресс [7]. Кроме того, установлено влияние TLR 4 на макрофагальную инфильтрацию за счет повышения продукции ГЬ-12 и моно-цитарного хемоаттрактантного протеина — 1, имеющее значение в прогрессировании атеросклероза [8]. В нашей работе выявленная повышенная экспрессия CD289+ на моноцитах, которая не меняется в различные сроки послеоперационного периода, может свидетельствовать в пользу длительно существующего воспаления, которое связано с выраженным атеросклерозом, поскольку известно, что TLR9 способствует поддержанию хронического воспаления в местах его чрезмерной экспрессии [9].
Не менее важная роль в прогрессировании атеросклероза отводится КК клеткам (CD16+), которые обладают естественной' цитолитической активностью и способны регулировать многие иммунные процессы, в том числе и аутоиммунный, путем продукции провоспалительных цитокинов, хемокинов и факторов роста [10].
В данной работе оценивали не только содержание CD16+, но и микробицидную активность, при этом отмечено снижение количества CD16+ и Гранзима В на 4-е и 11-е сутки. Работы по изучению данной проблемы у пациентов, перенёсших АКШ на работающем сердце, немногочисленны и требуют дальнейшего изучения. Тем более, что ранее были высказаны предположения о влиянии вида анестезии и проведения антибактериальной терапии на содержание данных клеток в послеоперационном периоде [11].
Отсутствие компенсаторного увеличения синтеза Гранзи-
ма В может свидетельствовать о снижении функционального резерва данных клеток и длительно существующем аутоиммунном процессе как компоненте атеросклеротического поражения.
Интересен факт снижения фагоцитарной активности нейтрофилов, подтверждающийся спонтанному и стимулированному тесту с нитросиним тетразолием, с параллельным повышением активности лактоферина и альфа-дефензина. Известно, что активные формы кислорода вызывают окисление липидов, т. е. участвуют в одной из причин атеросклероза, а микробицидные пептиды в свою очередь утилизируют фагоциты [12].
Заключение. Таким образом, у пациентов, перенёсших аортокоронарное шунтирование, особенностью клеточного звена врождённого иммунитета является повышение экспрессии TLR2 и TLR4, супрессия лимфоцитов CD16+ и снижение их функциональной активности за счёт уменьшения содержания в них CD16+Gr+ в течение всего периода наблюдения. Микробицидная активность нейтрофилов снижается за счёт активных форм кислорода, и компенсаторно увеличивается синтез лактоферина и альфа-дефензина. В связи с этим при лечении данной категории больных необходим контроль не только общеклинических показателей, но и показателей врождённого иммунитета. Это позволит скорректировать ведение послеоперационного периода.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Сизякина Л.П., Андреева И.И. Дискордантность параметров адаптивного и врожденного иммунного ответа при заместительной терапии у больных Х-сцепленной агаммаглобулинемией. Иммунология. 2014; 35(2): 89—91.
2. Лебедева О.П., Пахомов С.П., Калуцкий П.В., Карпов П.А., Чур-носов М.И., Попов В.Н. Роль Толл-подобных рецепторов врожденного иммунитета в развитии акушерской и гинекологической патологии. Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2012; 1: 19—26.
3. Нозадзе Д.Н., Рогачева А.В., Казначеева Е.И., Сергиенко И.В. Моноциты в развитии и дестабилизации атеросклеротической бляшки. Атеросклероз и дислипидемии. 2012; 3: 25—36.
4. Сушкина И.Ф., Шлык С.В., Сизякина Л.П., Антонова Е.А., Дорофеева Н.П. Оценка маркеров воспаления у пациентов с острым инфартком миокарда на фоне нарушения углеводного обмена. Цитокины и воспаление. 2014; 13(3): 133—4.
5. Эфрос Л.А., Самородская И.В. Факторы, оказывающие влияние на отдаленную выживаемость после коронарного шунтирования. Сибирский медицинский журнал. 2013; 28(2): 7—14.
6. Mullick A.E., Soldau K., Kiosses W.B., Bell T.A., Tobias P.S., Cur-tiss L.K. Increased endothelial expression of Toll-like receptor 2 at sites of disturbed blood flow exacerbates early atherogenic events. J. Exp. Med. 2008; 205: 373—83.
7. Seimon T.A., Nadolski M.J., Liao X., Magallon J., Nguyen M., Feric N.T. et al. Atherogenic lipids and lipoproteins trigger CD36-TLR2-dependent apoptosis in macrophages undergoing endoplasmic reticu-lum stress. CellMeTable. 2010; 12: 467—82.
8. Michelsen. K.S., Wong M.H., Shah P.K., Zhang W., Yano J., Doherty T.M. et al. Lack of Toll-like receptor 4 or myeloid differentiation factor 88 reduces atherosclerosis and alters plaque phenotype in mice deficient in apolipoprotein E. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004; 101: 10679—84.
9. Falck-Hansen M., Kassiteridi C., Monaco C. Toll-Like Receptors in Atherosclerosis. Int. J. Mol. Sci. 2013; 14: 14008—23. Doi: 10.3390/ ijms140714008.
10. Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека. Иммунология. 2012; 4: 220—4.
11. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Изменение иммунитета при хирургических вмешательствах. Анналы хирургической гепатологиии. 1998; (3)2: 100—10.
Immunology. 2017; 38(6)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0206-4952-2017-38-6-295-306
ORIGINAL ARTICLE
12. Мишланов В.Ю., Суханов С.Г., Сандаков П.Я., Ронзин А.В., Владимирский В.Е., Сыромятникова Л.И. и др. Дефензины-альфа, пептиды и белки, синтезируемые и высвобождаемые ней-трофилами при атеросклерозе разной локализации. Клиническая лабораторная диагностика. 2014; 5: 13—7.
REFERENCES
1. Sizyakina L.P., Andreeva I.I. Discordant parameters of the adaptive and innate immune response in replacement therapy in patients with X-linked agammaglobulinemia. Immunologiya. 2014; 35(2): 89— 91. (in Russian)
2. Lebedeva O.P., Pakhomov S.P., Kalutskiiy P.V., Karpov P.A., Churnosov M.I., Popov V.N. Toll-like receptors of innate immunity in the development of obstetric and gynecological pathology. Immunopatologiya, Allergologiya, Infektologiya. 2012; 1: 19—26. (in Russian)
3. Nozadze D.N., Rogacheva A.V., Kaznacheeva E.I., Sergienko I.V. Monocytes in the development and destabilization of the atherosclerotic plaque. Ateroskleroz i dislipidemii. 2012; 3: 25—36. (in Russian)
4. Sushkina I.F., Shlyk S.V., Sizyakina L.P., Antonova E.A., Dorofeeva N.P. Evaluation of inflammatory markers in patients with acute myocardial infarction in the background disorders of carbohydrate metabolism. Citokiny i vospalenie. 2014; 13(3): 133—4. (in Russian)
5. Efros L.A., Samorodskaya I.V. Factors influencing the long-term survival after coronary bypass surgery. Sibirskii meditsinskii zhurnal. 2013; 28(2): 7—14. (in Russian)
6. Mullick A.E., Soldau K., Kiosses W.B., Bell T.A., Tobias P.S., Curtiss L.K. Increased endothelial expression of Toll-like receptor 2 at sites of disturbed blood flow exacerbates early atherogenic events. J. Exp. Med. 2008; 205: 373—83.
7. Seimon T.A., Nadolski M.J., Liao X., Magallon J., Nguyen M., Feric N.T. et al. Atherogenic lipids and lipoproteins trigger CD36-TLR2-dependent apoptosis in macrophages undergoing endoplasmic reticulum stress. CellMeTable. 2010; 12: 467—82.
8. Michelsen. K.S., Wong M.H., Shah P.K., Zhang W., Yano J., Doherty T.M. et al. Lack of Toll-like receptor 4 or myeloid differentiation factor 88 reduces atherosclerosis and alters plaque phenotype in mice deficient in apolipoprotein E. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004; 101: 10679—84.
9. Falck-Hansen M., Kassiteridi C., Monaco C. Toll-Like Receptors in Atherosclerosis. Int. J. Mol. Sci. 2013; 14: 14008—23. Doi: 10.3390/ ijms140714008.
10. Abakushina E.V., Kuz'mina E.G., Kovalenko E.I. Main features and functions of the human NK-cells. Immunologiya. 2012; 4: 220—4. (in Russian)
11. Khaitov R.M., Pinegin B.V. Change immunity in surgical interventions. Annaly khirurgicheskoy gepatologii. 1998; 3(2): 100—10. (in Russian)
12. Mishlanov V.Yu., Sukhanov S.G., Sandakov P.Ya., Ronzin A.V., Vladimirskii V.E., Syromyatnikova L.I. et al. Alpha-defensin peptides and proteins synthesized and released by neutrophils in atherosclerosis different localization. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2014; 5: 13—7. (in Russian)
Поступила 12.04.17 Принята в печать 16.08.17
РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2017 УДК 615.373:578.826.2].076.9
Лебедева Е.С.1, Багаев А.В.1, Чулкина М.М.1, Пичугин А.В.1, Лысенко А.А.2, Шмаров М.М.2, Логунов Д.Ю.2, Народицкий Б.С.2, Атауллаханов Р.И.1
МЕХАНИЗМЫ УСИЛЕНИЯ АГОНИСТАМИ TLR4 ЭКСПРЕССИИ ЦЕЛЕВОГО БЕЛКА В СОСТАВЕ АДЕНОВИРУСНОГО ВЕКТОРА В АНТИГЕНПРЕЗЕНТИРУЮЩИХ КЛЕТКАХ
1 ГНЦ «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства, 115478, г. Москва, Россия;
2 Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ, 123098, г. Москва, Россия
Нереплицирующиеся рекомбинантные аденовирусные векторы (rAD) — эффективные инструменты доставки вакцинных антигенов в антигенпрезентирующие клетки (АПК). Эффективность гуморальных и клеточных ответов организма на антиген, закодированный в составе зависит от эффективности его экспрессии в АПК. Ранее мы показали, что активация АПК с помощью агонистов То11-подобных рецепторов 4 (TLR4) способствует усилению экспрессии в них целевого антигена, закодированного в составе рекомбинантного аденовирусного вектора. Настоящая работа посвящена поиску механизмов, обеспечивающих усиленную экспрессию rAd в клетках-мишенях. Нами изучено влияние агонистов TLR4 на отдельные стадии жизненного цикла ^ в АПК. Установлено, что активация АПК агонистами TLR4 значительно усиливает транскрипцию мРНК белка-антигена, закодированного в составе rAd. Возрастание эффективности транскрипции целевых аденовирусных генов происходит с участием транскрипционного фактора NF-kB, имеющего сродство к промотору целевого гена. При этом агонисты TLR4 не оказывают влияния на эффективность проникновения аденовирусного вектора в АПК и на процессы трансляции целевого белка, закодированного в Кроме того, показана возможность паракринной передачи сигналов усиления экспрессии ^ от клеток, активированных агонистами TLR4, к клеткам, не подвергавшимся активации. В роли паракринных сигналов могут выступать провоспалительные цитокины, в частности, TNF-a.
Ключевые слова: агонисты То11-подобных рецепторов; генная терапия; генная иммунизация; рекомбинантные нереплицирующиеся аденовирусные векторы; экспрессия трансгенов; NF-kB; трансляция; еШ2а; ТШ-а.
Для корреспонденции: Атауллаханов Равшан Иноятович, д-р мед. наук, профессор, руководитель отдела иммунной биотехнологии ГНЦ «Институт иммунологии» ФМБА России, E-mail: [email protected].
