CC BY
15DOI: 10.24412/1999-6780-2022-4-89-95 УДК 528.088.3:582.282.23:615.282
ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОФИЛЕЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ КОЛЛЕКЦИОННЫХ ШТАММОВ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНВАЗИВНОГО КАН-ДИДОЗА К ПРОТИВОГРИБКОВЫМ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВАМ IN VITRO
Выборнова И.В. (н.с.)/ Ковыршин C.B. (студент, лаборант-исследователь), Чилина Г.А. (зав. лаб.), Босак И.А. (с.н.с.), Павлова И.Э. (н.с.), Игнатьева С.М. (в.н.с.), Богомолова Т.С. (зав. лаб.)*, Васильев О.Д. (доцент), Васильева Н.В. (директор института, зав. кафедрой)
НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ФГБОУ ВО «Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова», Санкт-Петербург, Россия
Изучены профили чувствительности 68 штаммов Candida spp., депонированных в Российскую коллекцию патогенных грибов и выделенных от пациентов с инва-зивным кандидозом в период с 2015 по 2022 гг. Мультире-зистентность к азолам и амфотерицину В выявлена у 4 изолятов C. krusei (РКПГ-1728, 1806, 1944, 1806). Резистентными к флуконазолу были 2 штамма C. glabrata (РКПГ-2368, 2377) и 3 штамма C. parapsilosis (РКПГ-1889, 2038, 2553). Полирезистентность к флуконазолу и ворико-назолу обнаружена у 1 штамма C. albicans (РКПГ-1997) и у 1 штамма C. parapsilosis (РКПГ-2038).
Ключевые слова: чувствительность, резистентность, противогрибковые лекарственные средства, Candida spp., инвазивный кандидоз, коллекция патогенных грибов
* Контактное лицо: Богомолова Татьяна Сергеевна, e-mail: tatiyana.bogomolova@szgmu.ru
CHARACTERIZATION OF IN VITRO ANTIFUNGAL SUSCEPTIBILITIES PROFILES OF INVASIVE CANDIDIASIS ETIOLOGICAL AGENTS STRAINS DEPOSITED IN THE COLLECTION
Vybornova I.V. (scientific researcher), Kovyrshin S.V. (student, research assistant), Chilina G.A. (head of the laboratory), Bosak I.A. (senior scientific researcher), Pavlova I.E. (scientific researcher), Ignatieva S.M. (leading scientific researcher), Bogomolova T.S. (head of the laboratory), Vasilyev O.D. (associate professor), Vasilyeva N.V. (director of the institute, head of the department)
Kashkin Research Institute of Medical Mycology of Northwestern State Medical University named after I.I. Mechnikov, St. Petersburg, Russia
Antifungal susceptibilities profiles were determined for 68 Candida spp. isolates from patients with invasive candidiasis (2015-2022) deposited in the Russian Collection of Pathogenic Fungi. Multidrug resistance to azoles and amphotericine B was revealed in 4 strains of C. krusei (RCPF-1728, 1806, 1944, 1806). Two strains of C. glabrata (RCPF-2368, 2377) and 3 strains of C. parapsilosis (RCPF -1889, 2038, 2553) were resistant to fluconazole. Poly resistance to fluconazole and voriconazole was found in 1 strain of C. albicans (RCPF-1997) and 1 strain of C. parapsilosis (RCPF-2038).
Key words: susceptibility, resistance, antifungal drugs, Candida spp., invasive candidiasis
ВВЕДЕНИЕ
Инвазивный кандидоз (ИК) - тяжелое заболевание, вызываемое условно-патогенными дрожжевыми грибами рода Candida, наиболее часто встречающееся у пациентов в отделениях реанимации и интенсивной терапии. Летальность у больных ИК составляет 40-45% [1]. Наиболее распространенным видом рода Candida, вызывающим ИК, является C. albicans, но такие виды, как C. parapsilosis, C. glabrata,C. auris, также являются возбудителями значительной части случаев этой инфекции. В научной литературе описано более 40 видов Candida spp., способных вызвать ИК, причем соотношение видов в структуре
возбудителей различается в зависимости от географического региона. Так, в многоцентровом исследовании, проведенном в Российской Федерации в период 2011-2014 гг., установлено, что возбудителями ИК были 14 видов Candida spp., причем преобладали виды C. albicans и C. parapsilosis [2].
Для лечения ИК применяют противогрибковые лекарственные средства (ПГЛС), относящиеся к разным классам химических веществ: азолы (флукона-зол, вориконазол, позаконазол), полиены (амфоте-рицин В), эхинокандины (каспофунгин, аниду-лафунгин, микафунгин). Среди возбудителей ИК имеются виды, первично резистентные к некоторым ПГЛС. Так, штаммы C. krusei природно резистентны к флуконазолу. Подавляющее большинство изолятов открытого в 2009 г. вида C. auris, получившего к настоящему времени широкое распространение в качестве возбудителя внутрибольничного ИК во всем мире, резистентны к флуконазолу и ворикона-золу. Для штаммов C. glabrata характерна промежуточная чувствительность к флуконазолу и быстрое формирование вторичной резистентности к этому препарату. Среди изолятов других видов рода Candida, в том числе C. albicans, C. parapsilosis, С. tropicalis, C. krusei, изолированных от больных ИК, также встречаются штаммы, резистентные к отдельным или нескольким ПГЛС (мультирезистентые), причем отмечается тенденция к росту частоты резистентности возбудителей кандидоза [3]. В связи с этим необходимо проводить мониторинг чувствительности штаммов Candida spp., выделенных из в норме стерильных биоматериалов, к применяемым для лечения ИК ПГЛС.
Первое в России исследование видового состава возбудителей ИК и их чувствительности к ПГЛС было проведено в период 1998-2003 гг. У пациентов отделений реанимации и интенсивной терапии ряда стационаров Санкт-Петербурга в качестве возбудителей ИК было выявлено 12 видов Candida spp. У 50 изолятов стандартизованным диско-диффузионным методом NCCLS M44-P была определена чувствительность к флуконазолу. Резистентные штаммы составили 34% и были представлены преимущественно видами C. krusei и C. glabrata [4].
В рамках международного многоцентрового исследования ARTEMIS Disk в России было изучено 335 штаммов Candida spp., выделенных из крови в период 2003-2008 гг. Резистентность к флуконазолу обнаружена у 16% возбудителей ИК [5].
При изучении чувствительности 322 штаммов Candida spp., полученных из в норме стерильных биосубстратов пациентов с ИК в 6 федеральных округах России (2011-2014 гг.), установлено, что резистентными к флуконазолу были 12%, к ворико-назолу - 1,6% [6]. В этом исследовании использова-
ли метод серийных микроразведений согласно документу CLSI M27 A3 [7].
Цель работы: определить чувствительность штаммов Candida spp. (C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata, C. krusei, С. tropicalis, С. guilliermondii), выделенных от больных ИК в период 2015-2022 гг. и депонированных в Российскую коллекцию патогенных грибов (РКПГ), к пяти ПГЛС (флуконазолу, вори-коназолу, позаконазолу, амфотерицину B и каспо-фунгину) in vitro методом серийных микроразведений согласно документу EUCAST E.Def 7.3.2 [8] и в соответствии с Российскими клиническими рекомендациями по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам [9].
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Штаммы грибов. В исследование включили 68 штаммов грибов рода Candida (C. albicans - 18, C. parapsilosis - 24, C. glabrata - 8, C. krusei - 8, C. tropi-calis - 5, С. guilliermondii - 5), выделенных из в норме стерильных биоматериалов больных ИК. Видовая идентификация культур дрожжей проведена методом MALDI-TOF-масс-спектрометрии (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass-Spectrometry). Изученные штаммы Candida spp. хранятся в «Российской коллекции патогенных грибов» на базе НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина СЗГМУ им. И.И. Мечникова.
Метод определения чувствительности к ПГЛС. Определение чувствительности микромице-тов к ПГЛС осуществляли методом серийных микроразведений в жидкой питательной среде согласно протоколу EUCAST E.DEF 7.3.2 (2020) [8] и в соответствии с Российскими клиническими рекомендациями по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам [9]. Использовали субстанции амфотерицина В (US Biological Life Sciences, США), вориконазола, позаконазо-ла, каспофунгина и флуконазола (Sigma-Aldrich, Германия), питательную среду RPMI-1640 с глута-мином, без бикарбоната, c 2% глюкозы. Учет результатов проводили с помощью измерения оптической плотности в лунках планшет для микротитрования с плоским дном, используя планшетный спектрофотометр Multiskan GO (Thermo Fisher Scientific Oy, Финляндия). Значение МПК соответствовало минимальной концентрации препарата в лунке, в которой отмечали значительное снижение оптической плотности (>90% - для амфотерицина В, >50% - для остальных ПГЛС) по сравнению с лункой, не содержащей ПГЛС.
Для контроля качества использовали штамм C. parapsilosis ATCC 22019 (РКПГ-1245).
Отнесение штаммов Candida spp. к той или иной категории чувствительности (чувствительный, уме-
ренно чувствительный, резистентный) проводили согласно клинически значимым пороговым значениям МПК в соответствии с документом EUCAST (версия 3, 2022) [10].
Статистическую обработку результатов выполняли с помощью программы STATISTICA for Windows.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Результаты определения чувствительности in vitro к амфотерицину В, вориконазолу, позаконазолу, каспофунгину и флуконазолу штаммов дрожжей рода Candida, выделенных от больных ИК, представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Минимальные подавляющие концентрации противогрибковых лекарственных средств в отношении изученных
штаммов Candida spp.
Вид гриба (количество Препарат Минимальные подавляющие концентрации (мг/л)
штаммов) Диапазон МПК50 МПК90 Среднее геометрическое
Амфотерицин В 0,06 - 0,5 0,25 0,25 0,19
Вориконазол 0,015 - 4 0,03 0,06 0,05
C. albicans (18) Позаконазол 0,007 - 0,06 0,015 0,03 0,02
Каспофунгин 0,03 - 0,25 0,06 0,25 0,05
Флуконазол 0,125 - 32 0,25 0,5 0,35
Амфотерицин В 0,25 - 2 1 2 1
Вориконазол 0,25 - 4 0,5 2 0,84
C. krusei (8) Позаконазол 0,015 - 0,5 0,125 0,5 0,1
Каспофунгин 0,03 - 0,25 0,06 0,125 0,08
Флуконазол 16 - 32 32 32 29,34
Амфотерицин В 0,06 - 0,5 0,25 0,5 0,23
Вориконазол 0,015 - 1 0,06 0,25 0,09
C. parapsilosis (24) Позаконазол 0,015 - 0,03 0,015 0,03 0,02
Каспофунгин 0,007 - 4 0,05 0,25 0,38
Флуконазол 0,125 - 32 1 8 0,89
Амфотерицин В 0,06 - 0,5 0,125 0,25 0,14
Вориконазол 0,03 - 0,125 0,06 0,06 0,06
С. guilliermondii (5) Позаконазол 0,007 - 0,03 0,015 0,03 0,02
Каспофунгин 0,06 - 1 0,125 0,5 0,19
Флуконазол 0,125 - 32 2 2 1,74
Амфотерицин В 0,125 - 2 0,5 0,5 0,44
Вориконазол 0,03 - 4 0,06 0,25 0,16
C. tropicalis (5) Позаконазол 0,015 - 0,03 0,015 0,015 0,02
Каспофунгин 0,03 - 0,06 0,06 0,06 0,05
Флуконазол 0,5 - 2 1 1 0,87
Амфотерицин В 0,125 - 0,25 0,25 0,25 0,20
Вориконазол 0,25 - 2 0,5 1 0,58
C. glabrata (8) Позаконазол 0,03 - 4 1 2 0,63
Каспофунгин 0,03 - 0,125 0,06 0,125 0,06
Флуконазол 8 - 32 16 32 18,66
Примечания: * - минимальная концентрация, подавляющая рост 50% штаммов, ** - минимальная концентрация, подавляющая рост 90% штаммов
Таблица 2
Распределение штаммов Candida spp. в зависимости от МПК амфотерицина В, вориконазола, позаконазола,
каспофунгина и флуконазола
Вид гриба (количество ПГЛС МПК (мг/мл)/количество штаммов
штаммов) <0,015 0,03 0,06 0,125 0,25 0,5 1 2 4 8 16 >32
АМВ 2 4 11 1
VOR 2 11 3 1 1
C. albicans (18) POS 14 3 1
CAS 8 6 4
FLU 3 9 5 1
АМВ 1 2 1 4
VOR 2 2 1 2 1
C. krusei (8) POS 2 1 1 2 2
CAS 1 4 2 1
FLU 1 7
АМВ 1 7 10 6
VOR 1 4 9 4 5 1
C. parapsilosis (24) POS 15 9
CAS 3 1 1 4 4 7 3 1
FLU 1 4 6 8 2 2 1
АМВ 2 1 1 1
VOR 1 3 1
С. guilliermondii (5) POS 3 2
CAS 2 1 1 1
FLU 1 1 2 1
АМВ 1 1 2 1
VOR 1 2 1 1
C. tropicalis (5) POS 3 2
CAS 2 3
FLU 2 2 1
АМВ 3 5
VOR 1 5 1 1
C. glabrata (8) POS 2 1 2 2 1
CAS 1 5 2
FLU 1 5 2
Примечание: 1) AMB - амфотерицин В, VOR - вориконазол, POS - позаконазол, CAS 2) Цветом выделены ячейки, соответствующие резистентным штаммам.
■ каспофунгин, FLU - флуконазол.
Все изученные штаммы C. albicans были чувствительны к амфотерицину В и позаконазолу. К флуконазолу были чувствительны 17 из 18 штаммов. Один изолят (РКПГ-1997), выделенный из крови недоношенного новорожденного, проявил полирезистентность к флуконазолу и вориконазолу. Еще один изолят (РКПГ-2143), выявленный из крови ВИЧ-инфицированного больного, проявил умеренную чувствительность к вориконазолу (МПК - 0,25 мг/л).
В документе EUCAST [10] не указаны клинически значимые пороговые значения МПК каспо-фунгина для грибов рода Candida, что затрудняет интерпретацию полученных результатов. Установленные значения МПК каспофунгина для изученных штаммов C. albicans не превышали 0,25 мг/л. Принимая во внимание пороговые значения МПК кас-пофунгина, указанные в документах CLSI [11],
можно допустить, что изученные штаммы C. albicans чувствительны к этому ПГЛС.
Среди штаммов C. krusei обнаружены 4 (РКПГ-1728, 1806, 2522, 1944) с резистентностью к амфотерицину В (МПК - 2 мг/л). Этот вид Candida является природно резистентным к флуконазолу: МПК для 7 штаммов составили >32 мг/л. Клинически значимые пороговые значения МПК вориконазола и позаконазола в отношении C. krusei в документе EUCAST [10] отсутствуют, но приводятся значения эпидемиологических точек отсечения (ECOFF). Нами выделены 3 штамма C. krusei - РКПГ-1728, 1806, 2397, в отношении которых МПК вориконазола превышали ECOFF и составили 2-4 мг/л. МПК позаконазола для изученных штаммов C. krusei не превышали ECOFF. Выявленные значения МПК каспофунгина для штаммов этого вида не превыша-
ли 0,125 мг/л, что соответствовало категории «чувствительные» по документу CLSI [11].
Таким образом, по результатам определения чувствительности обнаружены 4 штамма C. krusei, мультирезистентые к двум классам ПГЛС (азолам и полиенам), - РКПГ-1728, 1806, 2522, 1944.
Все исследованные штаммы вида C. parapsilosis были чувствительны к амфотерицину В и позакона-золу. Выявлены 3 изолята (РКПГ-1889, 2038, 2553), резистентные к флуконазолу. Один из этих штаммов (РКПГ-2038) был резистентным и к вориконазолу. Умеренную чувствительность к вориконазолу (МПК - 0,25 мг/л) проявили 5 штаммов C. parapsilosis. МПК каспофунгина для штаммов этого вида не превышали 2 мг/л (пороговое значение, согласно CLSI [11]), за исключением одного изолята (РКПГ-2301, МПК - 4 мг/л).
Все изученные штаммы C. tropicalis были чувствительны к флуконазолу и позаконазолу. Отмечена устойчивость к вориконазолу у 1 изолята (РКПГ-2147, МПК - 4 мг/л). При исследовании чувствительности C. tropicalis к амфотерицину В также обнаружен один изолят, резистентный к этому ПГЛС (РКПГ-2069, МПК - 2 мг/л). МПК каспофунгина для штаммов C. tropicalis не превышали 0,06 мг/л (пороговое значение, согласно CLSI [11]).
Все изоляты C. glabrata были чувствительными к амфотерицину В (МПК<0,25 мг/л). К флуконазолу резистентны 2 штамма (РКПГ- 2377, 2368), умеренно чувствительны - 6. Для вориконазола и позакона-зола клинически значимые пороговые значения МПК по отношению к C. glabrata в документе EU-CAST отсутствуют, но приведены значения ECOFF (1 мг/л) для обоих ПГЛС. Среди изученных нами штаммов C. glabrata выявлены 3 - РКПГ-2368, 2554, 1965, для которых МПК позаконазола были выше ECOFF, и один штамм (РКПГ-2368) с МПК вориконазола выше ECOFF. МПК каспофунгина для изученных штаммов C. glabrata не превышали 0,125 мг/л (пороговое значение, согласно CLSI [11]).
Клинически значимые пороговые значения МПК ПГЛС в отношении штаммов С. guilliermondii в документе EUCAST отсутствуют. Приведено лишь значение ECOFF для позаконазола - 0,25 мг/л. Установленные нами значения МПК позаконазола для изученных штаммов этого вида не превышали 0,06 мг/л. Интерпретация результатов определения МПК, полученных для других ПГЛС в отношении С. guilliermondii, затруднена. Следует отметить, что максимальные значения МПК получены для флуко-назола - до >32 мг/л.
ОБСУЖДЕНИЕ
В последнее десятилетие во всем мире наблюдается тенденция к росту резистентности возбудите-
лей инвазивного кандидоза к противогрибковым препаратам, в том числе отмечается появление мультирезистентных штаммов, устойчивых к нескольким классам ПГЛС [1, 3, 12].
Нами изучены профили чувствительности 68 штаммов Candida spp., выделенных из стерильных в норме биоматериалов пациентов с инвазивным кан-дидозом и депонированных в РКПГ, к пяти противогрибковым препаратам референсным методом микроразведений с определением МПК согласно протоколу EUCAST и Российских клинических рекомендаций по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. Установлено, что 100% штаммов C. albicans чувствительны к амфотерицину В и позаконазолу. Полирезистентность к флуконазолу и вориконазолу выявлена у одного штамма (РКПГ-1997), что согласуется с данными литературы о редкой встречаемости азол-резистентных изолятов C. albicans среди возбудителей инвазивного кандидоза (0-5%) [12].
Природной резистентностью к флуконазолу обладает вид C. krusei [12, 13], что подтверждают и полученные нами данные: для 7 штаммов МПК составили >32 мг/л. Отсутствие утвержденных клинически значимых пороговых значений МПК ворикона-зола в отношении C. krusei затрудняют оценку распространенности устойчивости к этому препарату. Однако учитывая, что у 3 штаммов МПК превышали значение ECOFF, следует заключить, что частота резистентности к вориконазолу не менее 38%, поскольку превышение ECOFF указывает на наличие механизмов резистентности. У 4 штаммов C. krusei выявлена устойчивость к амфотерицину В, что свидетельствует о мультирезистентности к двум классам ПГЛС.
Резистентность к азолам обнаружена у штаммов вида C. parapsilosis: к флуконазолу резистентны 3 изолята, к флуконазолу и вориконазолу - 1. Умеренную чувствительность к вориконазолу проявили еще 5 изолятов. О перекрестной резистентности к азолам у штаммов C. parapsilosis сообщают и исследователи из Франции, хотя доля таких изолятов составила лишь 3% [13].
Среди небольшого количества изученных нами изолятов C. tropicalis выявлены по 1 штамму, резистентному к амфотерицину В и вориконазолу. В исследовании, проведенном в Тайване, было установлено, что хотя C. tropicalis не является самым распространенным видом среди Candida non-albicans, частота резистентности у этого вида выше по сравнению с другими Candida spp. [14].
Среди штаммов C. glabrata резистентными к флуконазолу были 2. Сходные данные о распространенности резистентности к флуконазолу у штаммов вида C. glabrata приводят и зарубежные
исследователи. Кроме того, сообщается о мультире-зистентных штаммах C. glabrata, устойчивых не только к азолам, но и к эхинокандинам [15]. Так, в Национальном референсном центре по инвазивным грибковым инфекциям Германии при изучении 178 штаммов C. glabrata, выделенных от больных ИК, 38% были устойчивы к флуконазолу и 14% - устойчивы и к эхинокандинам [16].
В документе EUCAST [10] отсутствуют клинически значимые пороговые значения МПК каспо-фунгина, однако они указаны в документе CLSI [11]. Поскольку результаты определения МПК противогрибковых препаратов двумя методами (EU-CAST и CLSI) сопоставимы, можно предположить, что изученные нами изоляты грибов рода Candida, за исключением одного штамма C. parapsilosis, чувствительны к каспофунгину.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, мы изучили профили чувствительности 68 коллекционных штаммов возбудителей инвазивного кандидоза, относящихся к 6 видам рода Candida, в отношении пяти противогрибковых препаратов. Мультирезистентность к двум классам ПГЛС обнаружена у штаммов C. krusei (РКПГ-1728, 1806, 2522, 1944), полирезистентность к азолам - у
C. albicans (РКПГ-1997) и C. parapsilosis (РКПГ-2038). Резистентными к флуконазолу были 2 штамма C. glabrata (РКПГ-2368,2377) и 3 штамма C. parapsilosis (РКПГ-1889, 2038, 2553). С целью выявления устойчивости к ПГЛС критически важных грибковых патогенов в соответствии с определением ВОЗ, изучения молекулярных механизмов резистентности и разработки диагностических тест-систем по определению биомаркеров резистентности необходимо проводить мониторинг чувствительности возбудителей инвазивного кандидоза к противогрибковым лекарственным препаратам по стандартным методикам в соответствии с протоколами EUCAST и Российскими клиническими рекомендациями по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам, сохраняя их в рабочих коллекциях с последующим депонированием в РКПГ.
Исследование выполнено в рамках государственного задания Минздрава России на 2022-2024 гг. «Разработка средств быстрой диагностики тяжелых грибковых инфекций и индикации генетических маркеров устойчивости возбудителей инвазивного кандидоза к противогрибковым лекарственным средствам» (№ НИОКТР 121111000019-5).
ЛИТЕРАТУРА
1. WHO fungal priority pathogens list to guide research, development and public health action. Geneva: World Health Organization; 2022
2. Vasilyeva N.V., Raush E.R., Rudneva M.V., et al. Etiology of invasive candidosis agents in Russia: a multicenter epidemiological survey. Frontiers of Medicine. 2018; 12 (1): 84-91. doi: 10.1007/s11684-017-0612-x
3. Sanglard D. Emerging threats in antifungal-resistant fungal pathogens. Frontiers of Medicine. 2016; 3: 11. doi.org/10.3389/fmed.2016.00011
4. Пестова Л.А. Кандидемия и острый диссеминированный кандидоз у больных в отделениях интенсивной терапии. Автореф... канд. дисс. СПб, 2004; 24 с. [Pestova L.A. Candidemia and acute disseminated candidiasis in patients in intensive care units. Author's abstract... cand. diss. St. Petersburg, 2004; 24 p. (In Russ.)].
5. Веселов А.В., Климко Н.Н., Кречикова О.И. и др. In vitro активность флуконазола и вориконазола в отношении более 10000 штаммов дрожжей: результаты 5-летнего проспективного исследования ARTEMIS Disk в России. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2008; 10 (4): 345-354. [Veselov A.V., Klimko N.N., Krechikova O.I., et al. In vitro activity of fluconazole and voriconazole against more than 10000 yeast strains: results of a 5-year prospective ARTEMIS Disk study in Russia. Clinical microbiology and antimicrobial chemotherapy. 2008; 10 (4): 345-354. (In Russ.)].
6. Рауш Е.Р. Особенности возбудителей внутрибольничного инвазивного кандидоза. Автореф. канд. дисс. СПб, 2015; 24 с. [Raush E.R. Features of pathogens of nosocomial invasive candidiasis. Author's abstract... cand. diss. St. Petersburg, 2015; 24 p. (In Russ)].
7. Clinical and Laboratory Standards Institute (GLSI). Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts; Approved Standard - Third edition. ^SI document M27-A3. USA, 2008
8. Arendrup M.C., Meletiadis J., Mouton J. W., et al. EUCAST Definitive Document E.Def 7.3.2 (2020). Method for the determination of broth dilution minimum inhibitory concentrations of antifungal agents for yeasts. www.eucast.org
9. Рекомендации «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам». Версия 202101. Межрегиональная ассоциация по клинической микробиологии и антимикробной химиотерапии.
10. The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Overview of antifungal ECOFFs and clinical breakpoints for yeasts, moulds and dermatophytes using the EUCAST E.Def 7.3, E.Def 9.4 and E.Def 11.0 procedures. Version 3, 2022. www.eucast.org
11. CLS1._Performance Standards for Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts. 2nd ed. CLSI supplement M60. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2020
12. Whaley S.G., Berkow E., Rybak S.M., et al. Azole antifungal resistance in Candida albicans and emerging non-albicans Candida species. Front. Microbiol. 2017; 7: 2173. doi: 10.3389/fmicb.2016.02173
13. Desnos-Ollivier M., Lortholary O., Bretagne S., Dromier F. Azole susceptibility profiles of more than 9000 clinical yeast isolates belonging to 40 common and rare species. Antimicrob. Agents Chemother. 2021; 65 (6): e02615-20. doi: 10.1128/AAC.02615-20
14. Tseng K., Liao Y., Chen F., Lo H. A predominant genotype of azole-resistant Candida tropicalis clinical strains. Correspondence. 2022; 3 (9): E646. doi.org/10.1016/S2666-5247(22)00179-3
15. Martinez-Herrera E., Frias-de-Leon M., Hernandez-Castro R., et al. Antifungal resistance in clinical isolates of Candida glabrata in Ibero-America. J. Fungi (Basel). 2021; 8 (1): 14. doi: 10.3390/jof8010014
16. Aldejohann A., Herz M., Martinb R., et al. Emergence of resistant Candida glabrata in Germany. JAC-Antimicrobial Resistance. 2021; 3 (3). doi.org/10.1093/jacamr/dlab122
Поступила в редакцию журнала 24.11.2022
Рецензент: О.П. Козлова
