Научная статья на тему 'Характеристика люминесценции форм Trichomonas vaginalis, выявляемых в непрямой реакции иммунофлюоресценции при диагностике трихомониаза'

Характеристика люминесценции форм Trichomonas vaginalis, выявляемых в непрямой реакции иммунофлюоресценции при диагностике трихомониаза Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
320
45
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
РЕАКЦИЯ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ / ДИАГНОСТИКА / ТРИХОМОНАДЫ / ТИПИЧНЫЕ И АТИПИЧНЫЕ ФОРМЫ / СПЕКТРЫ ФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ / IMMUNOFLUORESCENCE REACTION / DIAGNOSTICS / TRICHOMONADES / TYPICAL AND ATYPICAL FORMS / FLUORESCENCE SPECTRUM

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Морева Жанна Германовна, Васильев Михаил Михайлович, Миронов Андрей Юрьевич, Алентьев Александр Николаевич

Представлены результаты исследования люминесценции различных форм Trichomonas vaginalis, выявляемых в непрямой реакции иммунофлюоресценции (нРИФ). Исследованы качественные характеристики флюоресценции трихомонад при постановке нРИФ, определяемые путем люминесцентной микроскопии. Исследованы количественные характеристики флюоресценции трихомонад в нРИФ, регистрируемые спектрофлюоресцентным методом. Проведенные исследования показали на существенные различия в интенсивности флюоресцентного свечения различных форм трихомонад, что может быть использовано для идентификации типичных и атипичных клеток T. vaginalis при диагностике трихомониаза.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Морева Жанна Германовна, Васильев Михаил Михайлович, Миронов Андрей Юрьевич, Алентьев Александр Николаевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE CHARACTERICTIC OF LUMINESCENCE FORM OF TRICHOMONAS VAGINALIS DISCOVERED IN INDIRECT RE

The article deals with the results of investigation of luminescence of different forms of Trichomonas vaginalis found out in indirect reaction of immunofluorescence (iRIF). There were analysed the characteristics of fluorescence of trichomonades in case of iRIF defined by luminescence microscopy. There were investigated the quantitative data of fluorescence trichomonades in iRIF registered by spectrofluorescence method. The investigation showed the significant differences in intensity of fluorescence lightening of various trichomonade forms, this fact may be used for identification of typical and atypical cells of T. vaginalis in diagnostics of trichomoniasis.

Текст научной работы на тему «Характеристика люминесценции форм Trichomonas vaginalis, выявляемых в непрямой реакции иммунофлюоресценции при диагностике трихомониаза»

УДК 579.851.132-618.1-022-078

© Ж.Г. Морева, М.М. Васильев, А.Ю. Миронов, А.Н. Алентьев, 2011

Ж.Г. Морева1, М.М. Васильев2, А.Ю. Миронов3, А.Н. Алентьев4

ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ ФОРМ TRICHOMONAS VAGINALIS, ВЫЯВЛЯЕМЫХ В НЕПРЯМОЙ РЕАКЦИИ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ТРИХОМОНИАЗА

1ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России 2ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии»

Минздравсоцразвития России 3ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет»

Минздравсоцразвития России 4ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный энергетический университет»

Представлены результаты исследования люминесценции различных форм Trichomonas vaginalis, выявляемых в непрямой реакции иммунофлюоресценции (нРИФ). Исследованы качественные характеристики флюоресценции трихомонад при постановке нРИФ, определяемые путем люминесцентной микроскопии. Исследованы количественные характеристики флюоресценции трихомонад в нРИФ, регистрируемые спектрофлюоресцентным методом. Проведенные исследования показали на существенные различия в интенсивности флюоресцентного свечения различных форм трихомонад, что может быть использовано для идентификации типичных и атипичных клеток T. vaginalis при диагностике трихомониаза.

Ключевые слова: реакция иммунофлюоресценции, диагностика, трихомонады, типичные и атипичные формы, спектры флюоресценции.

J.G. Moreva, M.M. Vasilyev, A.Yu. Mironov, A.N. Alentyev

THE CHARACTERICTIC OF LUMINESCENCE FORM OF TRICHOMONAS VAGINALIS DISCOVERED

IN INDIRECT REАCTION OF IMMUNOFLUORESCENCE IN DIAGNOSTICS OF TRICHOMONIASIS

The article deals with the results of investigation of luminescence of different forms of Trichomonas vaginalis found out in indirect reaction of immunofluorescence (iRIF). There were analysed the characteristics of fluorescence of trichomonades in case of iRIF defined by luminescence microscopy. There were investigated the quantitative data of fluorescence trichomonades in iRIF registered by spectrofluorescence method. The investigation showed the significant differences in intensity of fluorescence lightening of various trichomonade forms, this fact may be used for identification of typical and atypical cells of T. vaginalis in diagnostics of trichomoniasis.

Key words: immunofluorescence reaction, diagnostics, trichomonades, typical and atypical forms, fluorescence spectrum.

Лабораторная диагностика мочеполового трихомониаза, направленная на выявление типичной формы возбудителя, включает микроскопический анализ нативных и окрашенных препаратов, а также культуральное исследование [4]. Идентификация трихомонад в клиническом материале затрудняется при наличии атипичных форм возбудителя [13]. Для идентификации измененных форм трихомонад культуральным методом требуется длительное проведение пассажей на свежих питательных средах. Диагностическая ценность широко используемых в настоящее время методов индикации трихомонад, таких как ИФА и ПЦР, зависит от чувствительности тест-систем, используемых для проведения данного анализа [3, 9, 10]. Альтернативными экспресс-методами, используемыми для диагностики трихомониаза, являются методы люминесцентного анализа, в частности реакция иммунофлюоресценции (РИФ) [6].

При применении РИФ выявлено, что по обнаружению специфических антител у больных трихомониаз диагностируется в 12,7-19,18% случаев [6, 8], чувствительность РИФ с обнаружением антител класса IgG к антигенам трихомонад составляет 85-87% [12, 14].

Один из вариантов техники постановки нРИФ, которая является высоко информативной и быстрой, основан на взаимодействии искомого антигена возбудителя, взятого от больного, со специфическими антителами с образованием иммунного комплекса, который выявляется при помощи антииммуноглобулинов, меченых флюорофором, чаще всего флюоресцеином, по специфической люминесценции при воздействии ультрафиолетовых лучей. Чем больше связывается меченых антител с антигенами на поверхности трихомонад, прямым или непрямым способом, тем ярче проявляется свечение трихомонад, особенно по периферии клетки возбудителя. Данное проявление специфического взаимодействия возможно, если антигены на поверхности трихомонад не являются измененными, что наблюдается у типичных форм возбудителя. В случае изменения морфологии трихомонад поверхностные антигены могут изменяться. Ученые под руководством F.D. Bastida-Corcuera (2005), химическим воздействием получали измененные формы трихомонад, у которых изменения происходили в химическом составе оболочки. Измененные формы трихомонад теряли адгезивные свойства и, с изменением антигенов, проявляли низкую цитотоксичность [7]. Исследователи путем воздействия низких температур in vitro получали округлые формы трихомонад из типичных клеток, затем вводили их в организм лабораторных живот-

ных, моделируя инфекционный процесс, и отмечали появление повышенных инвазивных свойств у данных округлых форм, что определялось появлением новых поверхностных белков-антигенов [11].

С изменением морфологии и как следствие с изменением основных поверхностных антигенов у трихо-монад, могут изменяться и люминесцентные свойства возбудителя, выявляемые в нРИФ. Проведенные ранее исследования по диагностике урогенитального трихомониаза методом нРИФ основаны на выявлении антител у больных с подозрением на трихомониаз и включали использование стандартного диагностикума, полученного из типичных форм трихомонад [2]. Течение трихомониаза характеризуется не всегда выраженными гуморальными реакциями, что затрудняет серодиагностику, основанную на выявлении антител у больных с подозрением на трихомониаз. Trichomonas vaginalis отличается выраженным полиморфизмом, но характеристика люминесценции различных форм трихомонад с выявлением антигенов в нРИФ, наблюдаемой с помощью люминесцентной микроскопии, и особенно количественные показатели, регистрируемые с использованием спектрофлюо-ресцентного анализа, до настоящего времени являются не изученными.

Цель работы: исследование специфической люминесценции различных форм T. vaginalis, выявляемых в нРИФ, с помощью люминесцентной микроскопии и спектрофлюоресцентного анализа.

Материалы и методы. Специфическую люминесценцию типичных и атипичных форм трихомонад изучали путем постановки нРИФ по стандартной методике, используя набор для флюоресценции ТрихоСкан (ООО «ЛАБдиагностика-Центр», РФ), для выявления антигенов трихомонад использовались поливалентные куриные антитела, в качестве флюоресцентной метки использовался флюоресцеинизотиоцианат (ФИТЦ). Качественную характеристику люминесценции форм трихомонад в нРИФ оценивали при помощи люминесцентной микроскопии (Люмам И-2), применяя светофильтры СЗС 24-4, БС 8-3, ФС 1-6. Количественную характеристику люминесценции форм трихомонад в нРИФ изучали с использованием спектрофлюоресцентного анализа, в ходе которого снимали спектры флюоресценции при помощи спектрофлюориметра КСВУ-2, дооснащенного монохро-матором МДР-23 для получения монохроматического света. Проводили измерения стоксовой люминесценции в режиме синхронного сканирования флюоресценции, а также классическим способом, в котором проводили возбуждение объектов линией излучения дуговой ртутной лампы ДРШ-250 с длиной волны 365 нм. Реактив ФИТЦ дополнительно исследовали при возбуждении азотным лазером ИЛГИ 503. Спектры поглощения объектов регистрировали при помощи спектрофотометра Specord-M40. Исследование флюоресценции проводили на 35 штаммах T. vaginalis, взятых в концентрации 37*105 клеток/мл, выделенных от гинекологических больных с хроническими воспалительными заболеваниями органов малого таза (ВЗОМТ) и от больных с онкогинекологи-ей. Штаммы трихомонад выделяли из клинического материала на обогащенной питательной среде Тераса. Культуры трихомонад в количестве 15 штаммов были представлены типичной формой; 15 штаммов составили атипичные формы, полученные под действием цитостатиков и антиметаболитов; 5 штаммов, выделенных от онкологических больных, были атипичными. Для получения атипичных форм культивировали типичные клетки трихомонад на питательной среде с добавлением цитостатиков и антиметаболитов (циклофосфана, меркап-топурина, метотрексата, в концентрации 500 мкг/мл) от 2-х до 4-х недель. Зависимость флюоресценции от концентрации изучали на 32 типичных штаммах T. vaginalis, взятых в разных концентрациях. В качестве контроля при флюоресцентной микроскопии и спектрофлюориметрии служили: мазки без трихомонад, только с физиологическим раствором, обработанным иммунной и флюоресцирующей сыворотками (контроль флюоресценции антител); мазки с трихомонадами, но без обработки иммунной и флюоресцирующей сыворотками (контроль флюоресценции антигена); мазки с реактивом ФИТЦ без трихомонад; мазки с трихомонадами, без антител, обработанные флюоресцеином; мазки с трихомонадами и антителами, но без флюоресцеина. Типичные штаммы T. vaginalis представляли собой грушевидные и овальные клетки, подвижные, с выраженным ядром, оболочкой, размером 10,8*15,2 мкм, обладали хорошими тинкториальными свойствами. Атипичные штаммы трихомонад были неподвижны, округлой формы, размером 16,2 мкм, с одним или двумя ядрами. Встречались безъядерные формы с диаметром 27 мкм, с толстой оболочкой, обладающей характерными оптическими свойствами типа дифракционных колец, так называемые «блестящие» формы. «Блестящие» клетки трихомонад плохо воспринимали красители. Размеры трихомонад измеряли при помощи окулярного микрометра. Расчеты теоретической кривой флюоресценции проводили по основным математическим приемам, применяемым в области биофизических и биомедицинских исследований [1].

Результаты и обсуждение. При обследовании 140 женщин с хроническими ВЗОМТ культуральным методом в 72,14% случаев выявлены типичные формы трихомонад, в 17,14% случаев выявлялись неподвижные, округлые формы трихомонад. В результате использования нРИФ подтверждено наличие трихомонад у больных во всех случаях. При люминесцентной микроскопии мазков от больных и культур типичные формы T. vaginalis проявляли очень яркое, особенно по периферии клетки, светло-зеленое свечение, атипичные формы трихомо-над светились в зеленой области спектра менее ярко и равномерно, отдельные округлые клетки трихомонад проявляли яркую зеленую люминесценцию. Такой вид флюоресценции объясняется наличием иных биохимических и антигенных свойств у атипичных форм трихомонад.

При микроскопии микропрепаратов установлено соотношение типичных и измененных форм трихомо-над в мазке. При люминесцентной микроскопии в мазке в 73,8% встречались типичные формы T. vaginalis, а в 26,2% - трихомонады с измененной морфологией. Эпителиальные клетки и лейкоциты не проявляли флюоресценции в мазках, полученных от больных.

Проведен спектрофлюоресцентный анализ и измерена интенсивность флюоресцентного свечения трихо-монад, обработанных ФИТЦ по методу нРИФ. Перед определением области флюоресценции изучаемых объектов были исследованы спектры поглощения трихомонад, обработанных ФИТЦ по методу нРИФ. Спектры поглощения типичных форм трихомонад характеризовались выраженным максимумом в области длины волны X=629 нм (в красной части спектра), что указывало на длинноволновую область флюоресценции. На основании измерений в диапазоне длин волн X от 410 нм до 720 нм получена спектральная кривая, характеризующая интенсивность флюоресцентного свечения в зеленой X=530±5 нм и красной области спектра. При этом резко выраженный максимум интенсивности флюоресценции наблюдался в области длины волны X=670±5 нм (в красной части спектра).

Отмеченная особенность спектров флюоресценции трихомонад определяется составом флюоресцирующего красителя. Реактив под названием ФИТЦ, использующийся в качестве флюоресцентной метки при постановке нРИФ на трихомониаз, является комплексным и состоит из чистого ФИТЦ (флюоресцеина), этидиум бромида (2,7-диамино-10-этил-9-фенилфенантридиум бромида) и метиленового синего Эванса. При исследовании флюоресценции только одного реактива ФИТЦ, не связанного с трихомонадами, в виде водного раствора, проявляются два ярких максимума интенсивности флюоресценции. Первый, более выраженный максимум в области длины волны 530 нм соответствует чистому флюоресцеину, второй максимум в области длины волны 670 нм - является наложением максимумов интенсивности флюоресценции двух красителей этидиум бромида и метиленового синего. При одновременном наличии трех красителей и их ассоциативного взаимодействия друг с другом и с клеткой трихомонады в суммарных спектрах флюоресценции трихомонад, снятых с сухих мазков, наблюдается некоторое снижение флюоресценции в коротковолновой области (в зеленой) и увеличение выраженности полосы флюоресценции с максимумом в более длинноволновой области спектра (в красной). Подобная особенность спектров флюоресценции наблюдается у клеток, окрашенных одновременно флюоресцеином и хотя бы одним из красителей - либо этидиум бромидом, либо метиленовым синим, и детально описана В.Н. Карнауховым (2002) [5]. Один из предположительных механизмов данного явления заключается в сдвиге спектра флюоресценции в область более длинных волн X>600 нм за счет наличия донорно-акцепторной пары красителей [5].

Полученные спектры отражают интенсивность флюоресцентного свечения в случае типичных и атипичных форм T. vaginalis (табл. 1). Спектры флюоресценции показали, что интенсивность флюоресцентного свечения типичных форм трихомонад была в 2-4 раза выше интенсивности флюоресценции атипичных форм и составила в среднем 1=2,76 отн. ед. Интенсивность флюоресценции атипичных форм трихомонад составила в среднем 1=0,90 отн. ед. Максимум интенсивности флюоресцентного свечения типичных и атипичных форм трихомонад приходился в среднем соответственно в область длины волны X=664 нм и X=663 нм, чаще всего при X=670 нм (табл. 1).

Спектры флюоресценции типичного и атипичного штаммов T. vaginalis представлены на рисунке 1.

I - интенсивность флюоресценции (отн. ед.)

A1

<1>

A2

<1>

Д25,

X - длина волны (нм)

Рис. 1. Спектры синхронного сканирования флюоресценции штаммов Trichomonas vaginalis. А1 спектр синхронного сканирования флюоресценции типичного штамма трихомонады.

А2 _ _ спектр синхронного сканирования флюоресценции атипичного штамма трихомонады.

5

Типичный штамм T. vaginalis, полученный от больной с диагнозом хронического аднексита, проявлял в нРИФ при микроскопии ярко-зеленое свечение. Атипичный штамм T. vaginalis получен в культуре из типичных клеток трихомонад и проявлял при микроскопии в нРИФ менее яркую зеленую люминесценцию. Спектры

флюоресценции типичного и атипичного штаммов T. vaginalis имели выраженный максимум интенсивности флюоресцентного свечения, приходящийся в область длины волны ^=670 нм, но существенно отличались интенсивностью флюоресценции (рис. 1). Интенсивность флюоресценции типичного штамма была в 4,3 раза выше интенсивности флюоресценции атипичного штамма и составила 1=3,0 отн. ед. Интенсивность флюоресценции атипичного штамма T. vaginalis составила 1=0,7 отн. ед.

Спектры флюоресценции отражают адсорбционные характеристики ФИТЦ к определенной форме три-хомонад. Различие в интенсивности флюоресцентного свечения трихомонад можно объяснить различной степенью адсорбции флюорофора на поверхности типичных и измененных клеток возбудителя. Антигены типичных форм трихомонад в большей степени комплементарны антииммуноглобулинам, меченым ФИТЦ, это приводит к связыванию большего количества флюоресцеина на поверхности клеток трихомонад, что проявляется более высокой интенсивностью флюоресценции. Атипичные формы трихомонад имеют другие поверхностные антигены, вследствие этого антигены оболочки слабо взаимодействуют непрямым способом с антииммуноглобулинами, мечеными флюоресцеином, что обуславливает флюоресценцию таких форм, характеризующуюся меньшей интенсивностью флюоресцентного свечения.

Интенсивность флюоресценции при использовании флюорофоров с постоянным квантовым выходом пропорциональна концентрации флюорофора, связанного с биополимером (микробом), и как следствие - концентрации самого биополимера (микроба) [5]. Исследована зависимость интенсивности флюоресценции трихо-монад от концентрации возбудителя. Согласно экспериментально полученным данным построен график зависимости интенсивности флюоресценции трихомонад от концентрации типичных клеток T. vaginalis в культу-ральной пробе (рис. 2).

Д5,

A1

<1>

I - интенсивность флюоресценции (отн. ед.) 4 -Г

2 h

Д3, 0

0

Л

С - концентрация трихомонад (клеток / млх105)

Рис. 2. Изменение интенсивности флюоресценции в зависимости от концентрации типичных форм трихомонад в культуре. А1 ~~ кривая зависимости интенсивности флюоресценции от концентрации типичных форм трихомонад в культуре (усредненный экспериментальный вариант).

Кривая, построенная по усредненным экспериментальным данным, показывает пропорциональную зависимость интенсивности флюоресценции трихомонад от концентрации типичных клеток простейших. При незначительной концентрации типичных форм трихомонад наблюдается низкое значение интенсивности флюоресценции, в дальнейшем с увеличением концентрации типичных клеток T. vaginalis интенсивность флюоресценции увеличивается, а при увеличении концентрации трихомонад выше 5х106 клеток/мл интенсивность флюоресценции остается постоянной величиной. Полученные экспериментальные результаты описываются аналитическим соотношением вида:

I(c) = I0 х (1 - e-k х c),

где I - интенсивность флюоресценции трихомонад (отн. ед.); I0 - максимальное значение интенсивности флюоресценции штамма (отн. ед.); е - основание натурального логарифма, е=2,72; k - характерная константа, вычисленная из экспериментальных данных, k=0,029; с - концентрация штамма T. vaginalis в культуральной пробе (клеток/мл). Вычисленный по приведенной формуле график зависимости интенсивности флюоресценции трихомонад от концентрации типичных клеток представлен на рисунке 3. Данный график показывает, что с увеличением концентрации штамма T. vaginalis на различные порядки (>106 клеток/мл) кривая зависимости асимптотически стремится к своему естественному пределу - максимальному значению интенсивности флюоресценции штамма T. vaginalis. Отмеченная особенность объясняется тем, что начиная с определенного значения концентрации трихомонад (>106 клеток/мл), количество связавшегося ФИТЦ с типичными формами возбудителя достигает максимального значения и в дальнейшем практически не изменяется, что обуславливает постоянную величину интенсивности флюоресценции трихомонад при значительном увеличении их концентрации.

I - интенсивность флюоресценции (отн. ед.)

Д49

A1 2

Д38,

0

А

С - концентрация трихомонад (клеток / млх10 )

Рис. 3. Изменение интенсивности флюоресценции в зависимости от концентрации типичных форм трихомонад в культуре.

А1 —— кривая зависимости интенсивности флюоресценции от концентрации типичных форм трихомонад в культуре (теоретически вычисленный вариант).

Заключение. Индикация влагалищных трихомонад возможна методом нРИФ, которую оценивают при помощи люминесцентной микроскопии и спектрофлюоресцентного анализа. Выявление форм влагалищных трихомонад методом нРИФ происходит по специфической флюоресценции возбудителя, наблюдаемой с помощью люминесцентной микроскопии. Спектрофлюоресцентный анализ позволяет регистрировать интенсивность флюоресценции трихомонад и показывает на более высокую интенсивность флюоресцентного свечения у типичных форм возбудителя. Непрямая РИФ может использоваться как экспресс-метод в диагностике урогени-тального трихомониаза и позволяет идентифицировать различные формы возбудителя, что особенно важно при хроническом, бессимптомном течении инфекционного процесса.

0

Таблица 1

Характеристика люминесценции трихомонад в непрямой РИФ, определенная при помощи спектрофлюоресцентного анализа

Штаммы трихомонад, N=35; С=37х105 клеток/мл I (интервал) I (среднее значение) X (интервал) X (среднее значение)

Типичные штаммы, N=15 2,1-3,5 2,76 646-684 664

Атипичные штаммы, N=20 0,3-1,3 0,90 650-670 663

Примечания:

I - интенсивность флюоресценции форм трихомонад (отн. ед.) С - концентрация трихомонад (клеток/мл) N - количество штаммов X - длина волны (нм)

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Барковский В.Ф., Горелик С.М., Городенцева Т.Б. Физико-химические методы анализа. -М.: Высшая школа, 1972. - 344 с.

2. Беднова В.Н., Дмитриев Г.А., Васильев М.М. [и др.] Лабораторная диагностика мочеполового три-хомониаза. Пособие для врачей - лаборантов. - М.: ЦНИКВИ, 1997. - 24 с.

3. Дмитриев Г. А., Глазко И.И. Диагностика инфекций, передаваемых половым путем. - М.: БИНОМ, 2007. - 320 с.

4. Европейские стандарты диагностики и лечения заболеваний, передаваемых половым путем / под ред. В.П. Адаскевича. - М.: Медицинская литература, 2006. - 264 с.

5. Карнаухов В.Н. Люминесцентный анализ клеток. - Пущино: Аналитическая микроскопия, 2002. -131 с.

6. Чураков А.А., Куличенко А.Н., Суворов А.П. [и др.]. Сравнительная оценка диагностической значимости методов лабораторной диагностики трихомониаза // Мед. паразитол. и паразит. болезни. -2005. - № 3. - С. 22-25.

7. Bastida-Corcuera F.D., Okumura C.Y., Colocoussi A. [et al.]. Trichomonas vaginalis lipophosphoglycan mutants have reduced adherence and cytotoxicity to human ectocervical cells // Eukaryot. Cell. - 2005. -Vol. 4, № 11. - P. 1951-1958.

8. Bhatt R., Pandit D., Deodhar L. Detection of serum antitrichomonal antibodies in urogenital trichomoniasis by immunofluorescence // J. Postgrad. Med. - 1992. - Vol. 38, № 2. - P. 72-74.

9. Crucitti T., Jespers V., Mulenga C., Khondowe S. Trichomonas vaginalis is highly prevalent in adolescent girls, pregnant women, and commercial sex workers in Ndola, Zambia // Sex. Transm. Dis. - 2009. -Vol. 24, № 1. - P. 45-51.

10. Diaz N., Dessi D., Dessole S. [et al.]. Rapid detection of coinfections by Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis, and Ureaplasma urealyticum by a new multiplex polymerase chain reaction // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. - 2010. - Vol. 67, № 1. - P. 30-36.

11. Hussein E.M., Atwa M.M. Infectivity of Trichomonas vaginalis pseudocysts inoculated intra-vaginally in mice // J. Egypt. Soc. Parasitol. - 2008. - Vol. 38, № 3. - P. 749-762.

12. Yoon K., Kim K.M., Ahn M.H. [et al.]. Detection of IgG antibodies with immunofluorescent antibody technique in human trichomoniasis // Kisaengchunghak. Chapchi. - 1987. - Vol. 25, № 1. - P. 7-12.

13. Kummer S., Hayes G.R., Gilbert R.O. [et al.]. Induction of human host cell apoptosis by Trichomonas vaginalis cysteine proteases is modulated by parasite exposure to iron // Microb. Pathog. - 2008. - Vol. 44, № 3. - P. 197-203.

14. Patel S.R., Wiese W., Patel S.C. [et al.]. Systematic review of diagnostic tests for vaginal trichomoniasis // Infect. Dis. Obstet. Gynecol. - 2000. - Vol. 8, № 5-6. - P. 248-257.

Морева Жанна Германовна, старший преподаватель кафедры микробиологии и вирусологии ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России, Россия, 153025, г. Иваново, ул. Мальцева, 46, тел. 89092462618. e-mail: morevash@mail.ru

Васильев Михаил Михайлович, доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник отдела инфекционных урогенитальных заболеваний ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздравсоцразвития России, Россия, 107076, г. Москва, ул. Короленко, 3, стр. 6, тел. 89037230111.

Миронов Андрей Юрьевич, доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Россия, 119991, Москва, ул. Трубецкая, 8, стр. 2, тел. (495) 629-71-19, e-mail: profmironov@mmascience.ru

Алентьев Александр Николаевич, кандидат физико-математических наук, доцент кафедры общей физики ФГБОУ ВПО «Ивановский государственный энергетический университет», Россия, 153003, г. Иваново, ул. Рабфаковская, 34, тел. 89206709236.

УДК [618.33:616-053.1]-07:574.2] (470.46)

© М.В. Музыка, М.В. Штепо, С.В. Лапеко, Е.Н. Гужвина, Л.А. Бахмутова, 2011

М.В. Музыка1, М.В. Штепо2, С.В. Лапеко3, Е.Н. Гужвина2, Л.А. Бахмутова2

ПЕРИНАТАЛЬНЫЕ ФАКТОРЫ РИСКА РОЖДЕНИЯ ДЕТЕЙ С ЗАДЕРЖКОЙ ВНУТРИУТРОБНОГО РАЗВИТИЯ В ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ АСТРАХАНИ

1МУЗ «Ахтубинская центральная районная больница», г. Ахтубинск 2ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России 3МУЗ «Клинический родильный дом», г. Астрахань, Россия

Задержка внутриутробного развития (ЗВУР) - патология, приводящая к тяжелым функциональным и органическим изменениям в органах и системах плода. Она возникает вследствие воздействия патологических факторов. Частота ЗВУР, по данным различных авторов, колеблется от 4% до 17 %, при этом изучение данной патологии остается чрезвычайно актуальной проблемой педиатрии. Проведен сравнительный анализ перинатальных факторов риска рождения детей с ЗВУР за 20 лет. Установлено, что выросла сила влияния юного возраста рожениц, вредных привычек, самопроизвольных выкидышей и антенатальной гибели плода в анамнезе, угрозы прерывания и плацентарной недостаточности. Знание ситуации позволит планировать профилактические мероприятия.

Ключевые слова: задержка внутриутробного развития, перинатальные факторы риска, плацентарная недостаточность.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.