CC BY
72
УДК 616.97-06:616.62-036.12:576.893.161.21
гетероморфизм trichomonas vaginalis в организме мужчин с хроническим урогенитальным трихомониазом
Е.В. Симонова, Ю.М. Землянская
Иркутский государственный медицинский университет (664003, г. Иркутск, ул. Красного восстания, 3) Ключевые слова: трихомонады, форма, размер, подвижность.
heteromorphism trichomonas vaginalis in men with chronic urogenital trichomoniasis
E.V. Simonova, Yu.M. Zemlyanskaya
Irkutsk State Medical University (3 Krasnogo Vosstaniya St. Irkutsk 664003 Russian Federation)
Background. The morphological and functional properties of the isolates of Trichomonas vaginalis, excreted from habitats urogenital of men with chronic trichomoniasis.
Methods. In 143 men with chronic urogenital trichomoniasis from scrapings of the urethra, ejaculates, and prostate secretion was allocated 205 cultures of T. vaginalis. We determined by the shape, size and structure of the nucleus and cell motility. Results. In 89.5 % of patients T. vaginalis were in only one clinical material, in the ejaculate. Trichomonas had high variability in shape, size, mobility and nuclear apparatus of the cell organization. Among the forms of the pathogen abnormal cells prevailed - mostly rounded, with a centrally located nucleus, large in size and mobility of the pendulum.
Conclusions. The nature of the variability of the pathogen is determined by biotope urogenital tract of patients. So, in scrapings from the urethra was dominated pear-shaped, multi-core, small in size, with a wave-like mobility; in the ejaculate - round, single-core, with pendulum-type movement; and in prostate secret - amoeboid and oval, large, nuclear-free and immobilized forms of the parasite. Keywords: trichomonas, shape, size, mobility.
Pacific Medical Journal, 2016, No. 1, p. 56-58.
В последние годы отмечается рост заболеваемости инфекциями, передаваемыми преимущественно половым путем [9]. Ведущее место среди них занимает урогени-тальный трихомониаз [7]. Половая инфекция, вызванная простейшим жгутиконосцем Trichomonas vaginalis, считается одним из самых трудно излечивающихся заболеваний мочеполовой сферы, особенно у мужчин [2, 4]. Во-первых, это обусловлено полиочаговостью: трихомонады инфицируют не только уретру и простату, но также куперовы железы, семенные пузырьки, яички и их придатки, мочевой пузырь и почки [1, 6]. Во-вторых, у большей части мужчин (60-70 %) урогенитальный трихомониаз протекает латентно или бессимптомно, в результате чего они вовремя не обращаются за помощью к специалисту. В таких случаях развивается хроническая форма инфекции, сопровождающаяся тяжелыми осложнениями: воспалительные заболевания органов малого таза и мошонки, бесплодие [10]. Кроме того, такие пациенты становятся резервуаром заражения здоровых женщин, у которых трихомони-аз ассоциируется с возможными неблагоприятными исходами беременности, коинфекцией различной этиологии и раком шейки матки [11]. Урогенитальный
Землянская Юлия Михайловна - ассистент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии медико-профилактического факультета ИГМУ; e-mail: [email protected]
трихомониаз остается серьезной медицинской, социальной и экономической проблемой еще и потому, что за последние десять лет участились случаи обнаружения атипичных или амастиготных форм возбудителя, роль которых в патогенезе заболевания до сих пор не установлена [3, 5, 8]. В этой связи остается актуальным анализ морфолого-функциональных свойств изолятов Т. vaginalis, выделенных из биотопов урогенитального тракта мужчин с хроническим трихомониазом.
Материал и методы. В исследовании приняли участие 143 мужчины в возрасте от 22 до 42 лет с верифицированным диагнозом хронического урогениталь-ного трихомониаза. У них забирали соскоб из уретры, эякулят и секрет простаты. С помощью культурально-го метода на селективных питательных средах Vagicult (Финляндия) в условиях анаэробиоза было выделено 205 культур Т. vaginalis. У изолятов определяли мор-фолого-функциональные свойства: форму, размер, структуру ядра и подвижность. Проводили микроскопию нативных мазков, приготовленных по методу раздавленной капли, дополнительно контрастирован-ных 1 %-ным водным раствором метиленовой синьки и мазков, окрашенных по Романовскому-Гимза. Для обработки результатов исследования использовали программные комплексы: MS Excel 2010, StatSoft 6, вероятность случайности полученных результатов оценивали с помощью критерия х2. Данные представлены в виде средней арифметической и ее средней ошибки.
Результаты исследования. У большей части обследованных (89,5 %) Т. vaginalis встречалась только в одном клиническом материале. Чаще всего она обнаруживалась в эякуляте (49,6 %), из уретры была выделена в 35 % случаев, и только у 4,9 % обследованных ее дифференцировали в секрете простаты. Выявить T. vaginalis в двух клинических образцах удалось только у 10,5 % пациентов (при этом в 7 % случаев простейших идентифицировали в соскобе из уретры и эякуляте, в 2 раза реже их можно было обнаружить в эякуляте и секрете простаты). В трех клинических образцах из биотопов урогенитального тракта выделить T. vaginalis не удалось.
Изолированные трихомонады отличались по форме, размеру, ядерной структуре и характеру движения клетки (рис. 1). При этом простейшие грушевидной формы чаще встречались в соскобе из уретры, в 3,5 раза реже их можно было типировать в эякуляте, тогда как в секрете простаты трихомонады такой формы не определялись. Округлые клетки Т. vaginalis превалировали в эякуляте, а особи овальной формы встречались преимущественно в секрете простаты. Нечасто
Оригинальные исследования
57
Рис. 1. Гетероморфизм T. vaginalis, выделенных у мужчин:
а - грушевидная; б - округлая; в - овальная; г - амебоидная. Окр. по Романовскому-Гимза, Х1000.
в исследуемом материале можно было видеть возбудителя амебоидной формы. При этом в секрете простаты частота встречаемости особей данного фенотипа составляла 13,3 %, а в соскобе из уретры и в эякуляте они выделялись, соответственно, в 2,4 и 3,1 раза реже.
У 28,7 % пациентов в одном и том же материале одновременно встречались Т. vaginalis разных мор-фотипов. При этом выраженность гетероморфизма возбудителя в биопробах различалась. Так, в соскобе из уретры и в эякуляте значительно чаще регистрировались простейшие одного фенотипа, а в секрете простаты частота их обнаружения была такой же, как и гетероморфных форм. При этом наиболее часто овальные возбудители сочетались с особями амебоидного морфотипа.
60,5±3,4 % трихомонад, выделенных из клинического материала, были подвижными. Из них 45,4±3,5 % культур имели непрогрессивную или маятникообраз-ную форму движения, а 15,1±2,5 % изолятов обладали прогрессивной или волнообразной подвижностью. Прогрессивный тип движения был присущ в основном трихомонадам грушевидной формы, полученным преимущественно из соскоба уретры, а неподвижными оказались простейшие атипичного фенотипа, идентифицированные из эякулята или секрета простаты (рис. 2).
Выделенные от больных изоляты Т. vaginalis обладали высокой вариабельностью и по организации ядерного аппарата. 59,5±3,4 % культур были одноядерными, при этом у 23,9±2,9 % особей ядро имело типичное расположение - в передней части микробной клетки. Безъядерные формы встречались значимо реже - в 20,0±5,9 % культур. Большинство изолятов грушевидной или округлой формы были одноядерными. Среди них также одинаково часто встречались многоядерные клетки. У каждой второй трихомонады амебоидного или овального фенотипа ядро отсутствовало, а многоядерные клетки среди них встречались крайне редко - в 1,8 % случаев (рис. 3).
Большая часть одноядерных Т. vaginalis регистрировалась в соскобе из уретры. В эякуляте соотношение ядерных к безъядерным формам составило 1:1, тогда как в секрете простаты преобладали безъядерные возбудители. Основная доля (17,6±4,9 %) двух- и трехъ-ядерных простейших была выделена из уретры, в два раза реже они встречались в эякуляте, в то время как в секрете простаты не регистрировались вовсе.
80
60
40
л
¡3
Волнообразная Маятникообразная | Неподвижные
шва
I II III IV
Рис. 2. Характер подвижности T. vaginalis различного морфотипа:
I - грушевидные; II - округлые; III - овальные; IV - амебоидные.
л
й
100
80
60
40
20
| Безъядерные U Одноядерные | Многоядерные
I II III IV
Рис. 3. Ядерный аппарат T. vaginalis различного морфотипа:
I - грушевидные; II - округлые; III - овальные; IV - амебоидные.
Морфометрия позволила дифференцировать изоляты на мелкие (12 мкм и меньше), средние (12-18 мкм) и крупные (более 18 мкм). У лиц, длительное время страдавших трихомониазом, преобладали особи среднего размера: частота их обнаружения составила 53,6±12,1 %. В 1,6 раза реже обнаруживались крупные клетки. Крайне редко встречались мелкие трихомонады. Распределение клеток Т. vaginalis по размеру имело правосторонний характер асимметрии, что свидетельствовало в пользу укрупнения форм паразита (рис. 4). При этом наиболее часто (45,4±15,0 %) крупными оказывались Т. vaginalis амебоидного фенотипа, незначительно реже - простейшие с овальной и округлой формой клетки: (38,9±6,7 и 31,6±4,8 %, соответственно. Реже всего (26,6±6,6 %) крупными были грушевидные особи.
Обсуждение полученных данных. В организме мужчин, страдающих хроническим урогенитальным трихомониазом, наблюдалась высокая изменчивость морфотипа Т. vaginalis. Среди выделенных культур встречались изоляты с типичной морфологией
100
80
60
40
20
| Мелкие | Средние | Крупные
mm
I II III IV
Рис. 4. Размер клеток T. vaginalis различного морфотипа:
I - грушевидные; II - округлые; III - овальные; IV - амебоидные.
клетки - грушевидной формы, с эксцентрично расположенным ядром и с характерной волнообразной подвижностью. Однако частота выделения таких форм была невысока - 8,3±0,4 % случаев. Значительно чаще (91,7±0,4 % случаев) обнаруживались атипичные мор-фотипы - с измененными формой, подвижностью, структурой ядра и размером клетки: в клиническом материале диагностировались простейшие округлой, овальной и амебоидной форм. Как правило, особи атипичного морфотипа имели центрально расположенное ядро и обладали маятникообразной подвижностью. Вместе с тем каждая третья атипичная T. vaginalis не имела ядра и была неподвижной. Кроме того, в ходе исследования было установлено, что морфотип возбудителя трихомонадной инфекции зависел от вида клинического материала, из которого его изолировали. Так, типичные формы Т. vaginalis чаще встречались в соскобе из уретры, тогда как атипичные особи превалировали в эякуляте и секрете простаты. Выраженный гетероморфизм в популяции возбудителя трихомонад-ной инфекции определяет интерес к изучению вопроса взаимосвязи морфотипа возбудителя с особенностями проявления заболевания у мужчин.
Выводы
1. В организме мужчин, страдающих хроническим урогенитальным трихомониазом, встречаются T. vaginalis грушевидной, округлой, овальной и амебоидной форм, мелких, средних и крупных размеров, имеющие одно или несколько ядер, либо безъядерные, обладающие волнообразной, маятникообразной подвижностью или полностью лишенные движения.
2. Среди всех гетероморфных форм возбудителя трихомонадной инфекции у мужчин превалируют атипичные клетки - преимущественно округлой формы, с центрально расположенным ядром, крупных размеров и с маятникообразной подвижностью.
3. Изменчивость простейших определяется биотопом урогенитального тракта. Так, лидирующей формой в соскобе из уретры были грушевидные, многоядерные и мелкие с волнообразной подвижностью трихомонады, в эякуляте - округлые, одноядерные, с маятникооб-разным характером движения, а в секрете простаты -овальные или амебоидные, преимущественно крупные, безъядерные и обездвиженные формы паразита.
Литература
1. Ильин И.И. Негонококковые уретриты у мужчин. М. : Мед. книга, 2005. 228 с.
2. Марданлы С.Г., Куляш Г.Ю. Проблемы достоверности и объективной оценки результатов лабораторной диагностики гонореи, трихомониаза и урогенитального хламидиоза: учебно-методическое пособие. Электрогорск: ЭКОлаб, 2007. 49 с.
3. Рахмотулина М.Р. Урогенитальный трихомониаз: проблемы диагностики и терапии // Вестник последипломного медицинского образования. 2008. № 1. С. 19-22.
4. Рыжих П.Г. Оптимизация лабораторной диагностики урогенитального трихомониаза на основе методов амплификации нуклеиновых кислот: автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб., 2012. 27 с.
5. Рюмин Д.В. Анатомо-физиологические особенности органов мочеполовой системы у мужчин / / Вестник последипломного медицинского образования. 2007. № 3-4. С. 65-70.
6. Сюч Н.И., Рюмин Д.Ю. Особенности морфологии и поведенческих реакций Trichomonas vaginalis в ответ на воздействие полихроматическим некогерентным поляризованным светом в эксперименте in vitro // Вестник последипломного медицинского образования. 2010. № 3-4. С. 4-6.
7. Хальфин Р. А., Кубанова А.А., Кисина В.И. [и др.]. Протокол ведения больных «Урогенитальный трихомоноз» // Проблемы стандартизации в здравоохранении. 2005. Т. 2. С. 130-145.
8. Юнусова Е.И., Юсупова Л.А., Гараева З.Ш. и др. Особенности диагностики и лечения урогенитального трихомониаза // Лечащий врач. 2014. № 5. С. 47-50.
9. Churakov A.A., Popkov V.M., Zemskov S.P. Combined physiotherapy of chronic infectious prostatitis // Urologiya. 2007. No. 1. Р. 61-65.
10. Hobbs M.M., Lapple D.M. Methods for detection of Trichomonas vaginalis in the male partners of infected women: implications for control of trichomoniasis // J. Clin. Microbiol. 2006. Vol. 44. Р. 3994-3999.
11. Oliveira F.A. Sexually transmitted infections, bacterial vaginosis, and candidiasis in women of reproductive age in rural Northeast Brazil: a population-based study // Mem. Inst. Oswaldo. Cruz. 2007. Vol. 102, No. 6. Р. 751-756.
Поступила в редакцию 02.10.2014.
Гетероморфизм Trichomonas vaginalis в организме мужчин с хроническим урогенитальным трихомониазом
Е.В. Симонова, Ю.М. Землянская
Иркутский государственный медицинский университет (664003, г. Иркутск, ул. Красного восстания, 3) Введение. Изучены морфолого-функциональные свойства изолятов Trichomonas vaginalis, выделенных из биотопов уро-генитального тракта мужчин с хроническим трихомониазом. Материал и методы. У 143 мужчин с хроническим урогенитальный трихомониазом из соскобов уретры, эякулятов и секрета простаты выделено 205 культур T. vaginalis. Определяли форму, размер, структуру ядра и подвижность клеток. Результаты исследования. У 89,5 % пациентов T. vaginalis встречалась только в одном клиническом материале, приоритетно в эякуляте. Трихомонады обладали высокой вариабельностью по форме, размеру, подвижности и организации ядерного аппарата клетки. Среди форм возбудителя превалировали атипичные клетки - преимущественно округлой формы, с центрально расположенным ядром, крупных размеров и маятни-кообразной подвижностью.
Обсуждение полученных данных. Характер изменчивости возбудителя определяется биотопом урогенитального тракта больных. Так, в соскобе из уретры преобладали грушевидные, многоядерные, мелких размеров, с волнообразной подвижностью, в эякуляте - округлые, одноядерные, с маятникооб-разным типом движения, а в секрете простаты - овальные и амебоидные, крупные, безъядерные и обездвиженные формы паразита.
Ключевые слова: трихомонады, форма, размер, подвижность.
