CC BY
54
БЮЛЛЕТЕНЬ ВСНЦ СО РАМН, 2GG5, № В (46)__
ПРОМЫШЛБННАЯ экология
УДК 613.644:577.175.14+612.017.1
Б.А. A6paMaTeu, О.Л. ^axMaH, H.C. Дaвыдoвa, Н.Л. Кострищ
ХАРАКТЕРИСТИКА БИОХИМИЧЕСКИХ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ЛОКАЛЬНОЙ ВИБРАЦИИ
АФ - НИИ медицины труда и экологии человека ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН (Ангарск)
В работе представлены результаты обследования пациентов с вибрационной болезнью (ВБ) от воздействия локальной вибрации. Выявлено преобладание цитокинов Th-1 типа направленности с одновременно повышенной выработкой С-реактивного белка и ревмофактора у больных с ВБ I степени и цитокинов Th-2—типа у пациентов с ВБ II степени. Установлено подавление фагоцитарной и метаболической активности нейтрофилов периферической крови у больных ВБ в обеих группах.
Ключевые слова: вибрационная болезнь, ревмофактор, С-реактивный белок, цитокиновый статус, нейтрофильная активность
CHARACTER OF BIOCHEMICAL AND IMMUNOLOGICAL INDICES IN EXPOSURE TO LOCAL VIBRATION
E.A. Abramatets, O.L. Lakhman, N.S. Davydova, N.L. Kostritsa
Research Institute of Industrial Medicine and Human Ecology, Scientific Center of Medical Ecology,
Eastern-Siberian Scientific Center of RAMS, Angarsk
The examination results of the patients with, vibration-induced diseases (VID) as a result of a local vibration exposure are represented, in this paper. The prevalence of the Th-1 type cytokines with, a simultaneous higher production of C-responded. protein and a rheumatic factor has been revealed, in the I degree VID and the Th-2 type cytokines in the II degree VID. The suppression, of the phagocytic and. metabolic neutrophile activities of the peripheral blood has been noted, in the patients with VID in the both groups.
Key words: vibration-induced diseases, rheumatic factor, C-responded protein, cytokine status, neutrophile activity
Вопросам патогенеза вибрационной болезни (ВБ) посвящено значительное число публикаций [5, 6]. Особое внимание уделяется изучению нейрогуморального статуса больных ВБ и лиц, работающих в контакте с вибрацией. Последние публикации свидетельствуют о взаимодействии основных гомеостатических систем — нервной, эндокринной, иммунной в ответной реакции организма — при хроническом воздействии физических факторов [2, 4].
При длительном воздействии вибрации происходит формирование вторичной иммунологической недостаточности, которая проявляется в нарушениях клеточного, гуморального иммунного ответа, факторов неспецифической защиты [3]. В последнее время особая роль отводится изучению цитокинового статуса. Диагностическая значимость оценки цитокинов тесно связана с проблемой определения их роли в патогенезе заболеваний. По данным исследователей, занимающихся изучением ВБ [1], у больных выявлено повышенное содержание в сыворотке крови С-реактивно-го белка и ревмофактора. В связи с тем, что эти показатели являются индикаторами острого вос-
палительного процесса любого характера, по нашему мнению, данные изменения могут быть связаны с иммунными реакциями. Установление этой взаимосвязи позволит раскрыть одно из звеньев общего патологического процесса, присутствующего при ВБ.
Вместе с тем, в литературе не уделено должного внимания оценке клеточных систем, в частности, нейтрофильному звену. Нейтрофилы являются ключевыми эффекторами первичного иммунного ответа как при антигенном воздействии на организм, так и при действии физических факторов. С учетом вышесказанного, целью настоящей работы явилась сравнительная оценка иммунного статуса и биохимических показателей у больных ВБ I и II степени.
Проведено клинико-иммунологическое обследование лиц трех групп. В первую группу вошло 28 больных ВБ I в возрасте 45,4 ± 0,7 лет. Вторую группу составили 29 больных ВБ II степени в возрасте 46,3 ± 0,54 лет. Группа сравнения включала 29 практически здоровых лиц (слесари-сборщики), работающих в контакте с локальной вибрацией менее 10 лет, в возрасте
32,7 ± 1,5 лет. Проводилось исследование ревмо-фактора и С-реактивного белка в сыворотке крови латексным методом. Определение количественного содержания популяций и субпопуляций лимфоцитов проводили методом непрямой иммунофлюооресценции с использованием моноклональных антител производства «МедБиоС-пектр» (Москва). Использовали ИКО 90 (СД3 + )
— маркеры зрелых Т-лимфоцитов, ИКО 86 (СД4 + ) — маркеры Т-хелперов-индукторов, ИКО 31 (СД8 + ) — маркеры Т-супрессоров и ци-тотоксических клеток, ИКО 116 (СД16 + ) — маркеры ЫК-клеток, моноцитов, гранулоцитов, ИКО 180 (СД20 + ) — маркеры В-клеток. Исследование уровня цитокинов в сыворотке крови (ИЛ-2, ИЛ-1-Р, ИЛ-4, ФНО-а) осуществлялось методом твердофазного иммуно-ферментного анализа (ИФА) с использованием тест-систем производства ООО «Протеиновый контур». Функциональную способность лимфоцитов оценивали в реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ): хелперной субпопуляции с ФГА, супрессорной с КонА. Функциональную активность нейтрофилов изучали по активности фагоцитоза с применением латекса (определяли количество фагоцитирующих нейтрофилов и фагоцитарный индекс), метаболическую — в НСТ-тес-те. Для оценки параметров гуморального иммунитета определяли в сыворотке крови иммуноглобулины А, М, С методом ИФА. При математической обработке результатов исследования использовали метод углового преобразования Фишера.
При анализе полученных результатов выявлено наличие С-реактивного белка у 57 % и рев-мофактора у 71 % обследуемых в группе больных ВБ I степени. У больных с ВБ II степени опреде-
лялось наличие обоих показателей в 24 % случаев (р < 0,05). Необходимо отметить, что на момент обследования у пациентов с ВБ отмечалась ремиссия по сопутствующей соматической патологии, отсутствовали признаки респираторной инфекции.
В иммунном статусе отмечалось снижение содержания зрелых форм Т-лимфоцитов при ВБ I и II степени. При оценке субпопуляций Т-лим-фоцитов выявлено снижение содержания клеток как хелперного, так и супрессорного звена (табл. 1).
В отношении функциональной активности лимфоцитов с митогенами не зафиксировано достоверных различий. При оценке фагоцитарной активности нейтрофилов выявлено статистически значимое снижение числа фагоцитов у больных ВБ I и II степени (32,4 ± 2,95 и 31,92 ± 3,56 % соответственно) и у практически здоровых лиц (51,65 ± 1,84 %) (р < 0,05). Следует отметить повышение поглотительной способности фагоцитов в обеих группах больных (4,34 ± 0,26 и 4,23 ± 0,15 ед. против 3,23 ± 0,27 ед. в группе сравнения). Наряду с этим у пациентов II группы выявлено снижение активности микробицидных кислородзависимых систем нейтрофилов относительно аналогичных показателей в группе сравнения, что проявилось в уменьшении числа ди-формазанположительных нейтрофилов в спонтанном варианте НСТ-теста (17,77 ± 1,32 и 22,28 ± 1,92 % соответственно). Однако отмеченные различия не являются статистически значимыми и требуют дальнейшего расширенного изучения. Дополнительная стимуляция нейтрофилов латексом у больных ВБ II степени показала ослабление способности клеток эффективно восстанавливать нитросиний тетразолий, что может
Таблица 1
при вибрационной болезни (М ± т)
Показатели Т-клеточного иммунитета
Показатели ВБ I степени (п = 28) ВБ II степени (п = 29) Группа сравнения (п = 29)
Лейкоциты, абс. 5,58 ± 0,15 5,77 ± 0,18 5,95 ± 0,29
Лимфоциты, % 30,59 ± 1,06 33,63 ± 0,99 34,30 ± 0,87
СД 3, % 39,0 ± 2,00* 36,75 ± 1,47* 52,0 ± 1,45
СД 4, % 33,80 ± 1,49* 31,24 ± 1,87* 41,80 ± 1,73
СД 8, % 23,83 ± 1,52* 24,47 ± 1,35* 28,55 ± 1,34
ИРИ 1,41 ± 0,15 1,22 ± 0,10 1,43 ± 0,07
Примечание: * - различия достоверны при р < 0,05 относительно группы сравнения.
Таблица 2
Показатели гуморального иммунитета (М ± m)
Показатели ВБ I степени (п = 28) ВБ II степени (п = 29) Группа сравнения (п = 29)
1д А, г/л 2,54 ± 0,27 2,19 ± 0,18 2,94 ± 0,92
1д М, г/л 1,48 ± 0,13 1,20 ± 0,95 1,55 ± 0,21
1д в, г/л 11,69 ± 0,79 11,68 ± 1,25 12,08 ± 0,56
Рис. 1. Уровни цитокинов у больных ВБ I и II степени. Примечание: различия статистически достоверны между 1 и 3; 1 и 2 группами для ИЛ-1Р; между 1 и 3; 2 и 3 группами для а-ФнО; между 2 и 3; 1 и 3 группами для ИЛ-2, * - при р <0,05, ** - при р <0,01.
свидетельствовать о перенапряжении функциональной активности этих клеток. Что касается содержания иммуноглобулинов А, М, С в сыворотке крови, их уровень у большинства обследованных колебался в пределах физиологической нормы (табл. 2).
Сравнительный анализ цитокинового статуса показал, что у больных с ВБ I степени наблюдается повышенная выработка ИЛ-1Р — 640,5 ± 75,54 пкг/мл, у пациентов с ВБ II степени
— 115,37 ± 36,13пкг/мл. В группе сравнения изучаемый показатель составил 20,8 ± 2,8 пкг/мл. При исследовании уровня фактора некроза опухоли отмечена усиленная его выработка у лиц с ВБ I степени (169,5 ± 55,7 пгк/мл) и у больных с ВБ II степени (95,3 ± 22,7 пкг/мл) относительно аналогичных показателей в группе сравнения (15,21 ± 1,8 пкг/мл). При определении содержания в сыворотке крови ИЛ-4 его повышенная концентрация наблюдалась у 36 % лиц I группы (49,28 ± 216,6 пг/мл) и 42 % лиц II группы (40,1 ± 3,32 пг/мл). В группе сравнения данный показатель составил 32,0 ± 1,2 пг/мл. Выявленная повышенная выработка ИЛ-4, вероятно, может быть объяснена его антагонистическим действием в отношении ИЛ-ф. Одновременно определялась повышенная секреция ИЛ-2 у 47 % обследованных ВБ I степени и у 83 % больных ВБ II степени. Результаты исследования цитокинов представлены на рисунке 1.
Анализируя полученные данные, можно сделать вывод, что у пациентов с ВБ I степени преобладают цитокины ТЬ-1 типа направленности с одновременной повышенной выработкой С-ре-активного белка и ревмофактора, в то же время у пациентов с ВБ II степени преобладают цитокины ТЬ-2 типа направленности. С учетом отсут-
ствия изменений в гуморальном звене и отсутствия в клинике острого воспалительного процесса, можно предположить преобладание Т-клеточных реакций иммунного ответа в патогенезе развития ВБ. Полученные результаты требуют дальнейшего углубленного и расширенного изучения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гоголева О.И. Механизмы нарушения гомеостаза, индуцированного стресс-вибрационным повреждением (обзор литературы) / О.И. Гоголева, Н.Н. Малютина // Медицина труда и промышленная экология. — 2000. — № 4. — С. 20 — 24.
2. Иммунофизиология / В.А. Черешнев, Б.Г. Юшков, В.Г. Климин и др. — Екатеринбург, 2002. - С. 10-37.
3. Ляпин М.Г. Воздействие вибрации на иммунную систему (аналитический обзор) / М.Г. Ля-пин // Медицина труда и промышленная экология. - 1999. - № 12. - С. 30-33.
4. Микроангио- и висцеропатии при вибрационной болезни / Т.М. Сухаревская, А.В. Ефремова, Г.И. Непомнящих и др. - Новосибирск, 2000.
- С. 42-100.
5. Некоторые современные аспекты патогенеза вибрационной болезни / В.Г. Артамонова, Е.Б. Колесова, Л.В. Кускова и др. // Медицина труда и промышленная экология. - 1999. - №2. -С. 1-3.
6. Рукавишников В.С. Общие закономерности формирования неспецифических патогенетических механизмов при воздействии на организм физических факторов производственной среды /
B.С. Рукавишников, В.А. Панков, О.Л. Лахман // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. - 2001. - №2 (16). -
C. 79-85.
