CC BY
12
русла печени и гепатоцитов проявляются в наибольшей степени при 30-кратном воздействии гипергравитации, что, вероятно, с кумуляцией негативных эффектов в виде нарушений микроциркуляции, тканевой гипоксии, деструктивно-дистрофических изменений клеток либо - с истощением функциональных резервов органа, что продемонстрировано снижением накопления ШИК-положительных веществ в цитоплазме гепатоцитов и подавлением адаптационных механизмов, реализующихся за счет митоза гепатоцитов и образования двуядерных форм клеток. Относительно менее выраженные гистопатологиче-ские изменения отмечали в экспериментальных группах крыс ювенильного и молодого возраста, что, вероятно, обусловлено более выраженными функциональными резервами органа.
Применение в качестве препаратов фармакологической коррекции глутаргина и липофлавона оказало ограниченный эффект на развивающиеся морфологические преобразования печени, вызванные систематическим воздействием гипергравитации. Хотя данные препараты обладают сходным механизмом действия, подавляя процессы перекисного окисления липидов и стабилизируя клеточные мембраны, при применении липофлавона у экспериментальных крыс, подвергавшихся 10-кратному воздействию гипергравитации, были выявлены выраженные дистрофические изменения гепатоцитов. В данной экспериментальной подгруппе цитоплазма гепатоцитов была обеднена гликогеном. Напротив, в цитоплазме клеток обнаруживали большое количество жировых вакуолей различного диаметра, характеризующих состояние клеток, как жировую дистрофию.
Применение глутаргина оказалось эффективным в подгруппах экспериментальных крыс, подвергавшихся 10-кратному воздействию. Вместе с тем, при увеличении кратности систематического воздействия перегрузок до 30 сеансов данные, полученные в подгруппе с применением глутаргина, практически соответствовали данными, полученным в сериях без использования защиты.
Список литературы:
1. Гафарова Э.А. Морфологические преобразования печени крыс, подвергавшихся систематическому воздействию гипергравитации на фоне применения физического и фармакологического методов защиты. Луганськ: Украшський морфолопчний альманах, 2012. - Том 10, №4. - С. 25-28.
2. Коржуев П. А. Эволюция, гравитация, невесомость. М.: Наука, 1971. - 152 с.
3. Котовская А.Р., Виль-Вильямс И.Ф., Лукьянюк
B.Ю. [и др.] Переносимость перегрузок +Gz при использовании противоперегрузочного костюма «Каркас»: Тез. докл. IX Всесоюз. конф. Космическая биология и авиакосмическая медицина: Под ред. А. И. Григорьева. - М., Калуга: ИМБП, 1990. -
C.108-109
4. Пикалюк В.С., Гафарова Э.А., Кривенцов М.А. Возрастные гисто- и цитоморфометрические преобразования печени крыс, подвергавшихся систематическому воздействию гипергравитации. Сумы: Журнал клшчних та експериментальних медичних досладжень, 2013. - Т.1, №1. - С. 28-33.
5. Пикалюк В.С., Гафарова Э.А., Кривенцов М.А.. Ультрамикроскопическое строение печени при воздействии гипергравитации в эксперименте. Чершвщ: Клшична анатомiя та оперативна хiрургiя, 2013. - Т.12, №1 - С. 36-40.
6. Lapaev E.V. Cumulative effect of Coriolis acceleration on coronary hemodynamics Kosm. Biol. Aviakosm. Med. - 1985. - Vol. 19(5). - P. 64 - 68.
7. Laughlin H.M. An analysis of the risk of human cardiac damage during + Gz stress: a review / H.M. Laughlin // Aviat. Space Environ. Med. - 1982. - Vol. 53. - P. 423 - 431.
8. Neves-Pinto R. M. A double-blind study of the effects of loratadine versus placebo on the performance of pilots / R. M. Neves-Pinto, G. M. Lima, R. da Monta Teixeira //Am J Rhinol. - 1992. - Vol. 6. - P. 23-27.
ГИСТОСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ СОСУДИСТЫХ СПЛЕТЕНИЙ ЖЕЛУДОЧКОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА ПРИ ПАРЕНТЕРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ КСЕНОГЕННОГО
ЛИКВОРА
Гасанова Илаха Халис
Канд. мед. наук, ассистент кафедры нормальной анатомии, ГУ «Крымский государственный медицинский
университет имени С.И. Георгиевского», г. Симферополь
Пикалюк Василий Степанович
Док. мед. наук, профессор кафедры нормальной анатомии, ГУ «Крымский государственный медицинский
университет имени С.И. Георгиевского», г. Симферополь Кирсанова Наталья Васильевна Канд. мед. наук, доцент кафедры нормальной анатомии человека, ГУ «Крымский государственный
медицинский университет имени С.И. Георгиевского», г. Симферополь
Латинское высказывание "Микит ш рагто" ("многое в малом") как нельзя лучше означает роль сосудистых сплетений в функционировании ЦНС. Учитывая, что сосудистые сплетения желудочков головного мозга являются основным источником образования ликвора (цереброспинальная жидкость (ЦСЖ), спинномозговая жидкость), их структурно-функциональные преобразования оказывают влияние на систему локальной гуморальной регуляции головного и спинного мозга [1, 144 с.; 3, с.
121; 4, с. 34; 10, с. 33; ]. Помимо образования ЦСЖ и секреции ряда БАВ в просвет желудочков головного мозга, сосудистые сплетения играют роль фильтра, "полупроницаемой мембраны", в направлении "кровь ^ ликвор", во многом определяя поступление микроэлементов, нутри-ентов, БАВ и ксенобиотиков в ликвор, который, в свою очередь, находится в тесной функциональной взаимосвязи с интерстициальной жидкостью ЦНС [6, с. 105-114; 7, с. 179-185; 8, 192 с.; 9, с. 82-96].
Эксперимент проведен на 96 белых крысах линии Вистар. Для оценки возрастных изменений все животные были разделены на 4 возрастные группы (по 24 крысы): I группа - животные периода новорожденности (1 сутки после рождения, средняя масса - 6-8 г); II группа - животные неполовозрелого возраста (30 дней, средняя масса - 30-40 г); III группа - животные молодого возраста (6 месяцев, средняя масса - 180-200 г); IV группа - животные пред-старческого возраста (20 месяцев, средняя масса - 250-280 г) (возраст и масса крыс указаны на момент начала эксперимента). Все животные в соотношении 1:1 были разделены на контрольную и экспериментальную серию опытов. Крысам экспериментальной серии опытов парентерально вводили ксеногенный ликвор (КЛ) из расчёта 2 мл/кг массы животного. Взятие ликвора осуществляли прижизненно путем проведения субокципитальной пункции по методу В.В. Ткача [7, с. 179-185; 11, с. 89-95]. Полученную жидкость подвергали консервации в одноразовых стерильных пластиковых пробирках путем сверхбыстрого замораживания в жидком азоте при температуре - 196°С в сосудах Дьюара, после чего фильтровали и расфасовывали в ампулы. Животным КЛ вводили трехкратно (материал забирали на 7-е сутки от начала эксперимента) и десятикратно (забор материала на 30-е сутки от начала эксперимента). Кратность введения КЛ составляла один раз в 3 дня. Крысам контрольной серии опытов с аналогичной кратностью и дозой вводили физиологический раствор.
Сосудистые сплетения желудочков головного мозга подвержены значительным возрастным инволютив-ным изменениям, которые характеризуются явлениями склерозирования, уменьшением доли эпителиального компонента ворсинок и дистрофическими/деструктивными изменениями эпителиоцитов [2, с. 16; 3, с. 121-123; 5, с. 27-31: 13, с. 325-353]. Эти преобразования, с одной стороны, ведут к снижению секретирующей функции сосудистых сплетений, а с другой - к нарушению целостности ГЛБ. При этом структурные преобразования неизменно сопровождаются изменениями функциональной активности [12, с. 47-53]. Направленность и выраженность возрастных инволютивных изменений сосудистых сплетений желудочков головного мозга была продемонстрирована в контрольной серии опытов. Так, у крыс молодого и,
в большей степени, предстарческого возрастов, описательный гистологический анализ выявил явления склерозирования периваскулярных областей сосудистого сплетения, уменьшение размеров ворсинчатой части и укорочение ворсинок, кистозные и дистрофические преобразования эпителиоцитов ворсинок и их уплощение (рис. 1).
Полученные наблюдения были подтверждены данными гистоморфометрического анализа (рис. 2). Начиная с крыс молодого возраста, отмечали постепенное уменьшение показателя относительной площади эпителиального компонента сосудистого сплетения (у крыс неполовозрелого возраста на 49,79%, у крыс молодого возраста на 43,40% (р < 0,05), у крыс предстарческого возраста на 31,37% (р < 0,05)).
Параллельно с этим, происходило увеличение доли соединительнотканной стромы (у крыс неполовозрелого возраста на 18,43% (р < 0,05), у крыс молодого возраста на 22,76% (р < 0,05), у крыс предстарческого возраста на 32,45% (р < 0,05)). Показатель относительной площади сосудов оставался относительно постоянным, что позволяет сделать вывод об отсутствии возрастных преобразований данного морфометрического показателя.
Гистологическая картина сосудистых сплетений у крыс экспериментальной серии опытов на 7-е сутки и 30-е сутки исследования соответствовала возрастным нормам (рис. 3). Среди выявленных особенностей следует отметить расширение и полнокровие сосудов микроцирку-ляторного русла, преимущественно в ворсинчатой части сплетений. Подобную сосудистую реакцию на парентеральное введение КЛ наблюдали во всех без исключения возрастных группах с большей выраженностью на 7-е сутки эксперимента. У крыс неполовозрелого и молодого возрастов на 7-е и 30-е сутки эксперимента в условиях парентерального введения КЛ гистологическая картина соответствовала наблюдениям контрольной серии опытов, тогда как у крыс предстарческого возраста были выявлены значительные изменения. В отличие от крыс периода но-ворожденности, изменения гистоархитектоники сосудистого сплетения характеризовались визуальным разрастанием ворсинок и истончением соединительнотканной стромы, особенно в ворсинках мелкого калибра.
Рис. 1. Сосудистое сплетение бокового желудочка. Контрольная серия, предстарческий возраст, 30-е сутки. Стрелками показаны кистоподобные образования. Окраска гематоксилином и эозином. Приближение:
Zoom 162. Объектив: Plan 40x ж/-.
Рис. 2. Гистоморфометрические показатели сосудистых сплетений желудочков головного мозга у крыс контрольной серии опытов (7-е сутки). Примечания: Н -новорожденный возраст, Нзр - неполовозрелый возраст, М - молодой возраст, П - предстарческий возраст. ** - достоверные различия (р < 0,05) при сравнении с крысами предыдущего возрастного периода.
Рис. 3. Сосудистое сплетение бокового желудочка. Экспериментальная серия, период новорожденности, 30-е сутки. Хорошо выраженная разветвленная ворсинчатая часть (стрелки). Окраска гематоксилином и эозином. Приближение: Zoom 162. Объектив: Plan 40x ж/-.
При гистоморфометрическом анализе сосудистых сплетений желудочков головного мозга крыс экспериментальной серии опытов. На 7-е сутки эксперимента ни в одной из возрастных групп не было отмечено статистически достоверных отклонений показателя относительной площади эпителиального компонента сосудистого сплетения от контроля (рис. 4). Вместе с тем, отклонения данного показателя от контроля у крыс периода новорожденности, неполовозрелого и молодого возрастов были незначительными, тогда как у крыс предстарческого возраста доля эпителиального компонента превышала контрольное значение на 17,98% (р < 0,05). Характерным является увеличение относительной площади сосудистых компонентов
(за исключением крыс периода новорожденности), которое у крыс неполовозрелого и молодого возрастов достигало уровня статистической достоверности.
Наиболее выраженные изменения претерпевал показатель относительной площади соединительнотканной стромы сосудистого сплетения, что подтверждало результаты описательного гистологического анализа. Отклонения от контроля носили разнонаправленный характер: у крыс периода новорожденности показатель увеличивался на 34,31% (р < 0,05), а у крыс молодого и предстарческого возрастов - уменьшался на 16,81% и 27,01%, соответственно (р < 0,05).
Рис. 4. Отклонения от контроля гистоморфометрических показателей сосудистых сплетений у крыс экспериментальной серии опытов на 7-е сутки. Примечания: Н - период новорожденности, Нзр - неполовозрелый возраст, М - молодой возраст, П - предстарческий возраст. * -р < 0,05.
Направленность изменений гистоморфометриче-ских показателей на 30-е сутки, в целом, соответствовала более короткому сроку эксперимента (рис. 5). В качестве характерной особенности выступала незначительность изменений показателя относительной площади сосудистых компонентов: во всех возрастных группах отклонения данного показателя
достоверности, за исключением крыс предстарческого возраста, у которых было отмечено статистически достоверное снижение доли сосудов на 8,99% (р < 0,05). Напротив, отклонения показателей относительной площади эпителиального компонента и соединительнотканной стромы были более выраженными в сравнении с данными 7-днев-
не достигали уровня статистическои ного эксперимента.
I Эпител ий I Сосуды
I (зр
Рис. 5. Отклонения от контроля гистоморфометрических показателей сосудистых сплетений у крыс экспериментальной серии опытов на 30-е сутки. Примечания: Н - период новорожденности, Нзр - неполовозрелый возраст, М - молодой возраст, П- предстарческий возраст. * -р < 0,05.
На 7-е и 30-е сутки эксперимента наименее выраженные изменения гистоморфометрических показателей сосудистых сплетений были отмечены у крыс неполовозрелого и молодого возрастов, что свидетельствует об отсутствии или минимальном влиянии парентерального введения КЛ на сосудистое сплетение крыс данных возрастных групп.
На основании данных проведенного гистоморфо-метрического анализа можно заключить, что выраженность структурных преобразований сосудистых сплетений экспериментальных крыс во всех изученных возрастных группах нарастает с увеличением кратности введения КЛ. Однако, это утверждение не относится к преобразованиям сосудов микроциркуляторного русла, которые приобретают наибольшую выраженность на 7-е сутки эксперимента, что, вероятно, связано со стиханием реактивности к 30-м суткам.
Структурные преобразования компонентов сосудистых сплетений желудочков головного мозга крыс экспериментальной серии опытов наблюдали не только на гистологическом и клеточном уровнях организации, но на ультраструктурном уровне. Наиболее выраженные изменения были обнаружены в группах крыс периода ново-рожденности и предстарческого возраста. Так, у крыс периода новорожденности на 7-е сутки эксперимента в рамках электронномикроскопического исследования определяли признаки функционального истощения, которые включали в себя уплощение эпителиоцитов, обеднение цитоплазмы органеллами и гиперконденсацию хроматина на кариолемме. На 30-е сутки определяли признаки повышения секреторной активности эпителиоцитов, которые включали в себя хорошее развитие гранулярной эндо-плазматической сети, комплекса Гольджи, митохондрий, базального лабиринта и апикальных микроворсинок эпи-телиоцитов, сохранение межклеточных контактов. Ультраструктура эпителиоцитов сосудистого сплетения и сосудов микроциркуляторного русла, как компонентов гематоликворного барьера, у крыс неполовозрелого и молодого возрастов соответствовала контролю и включала в себя признаки высокой функциональной активности. Наконец, ультраструктура компонентов сосудистого сплетения у крыс предстарческого возраста характеризова-
лась, наряду с атрофическими изменениями эпителиоци-тов и склерозированием периваскулярной области, признаками восстановления секреторной активности. Данные преобразования более выражены при увеличении кратности введения КЛ. Наиболее характерным наблюдением в данной возрастной группе стало обнаружение большего количества призматических и даже цилиндрических эпи-телиоцитов с умеренной или повышенной функциональной активностью и компенсаторной гипертрофией орга-нелл.
Список литературы:
1. Автандилов Г.Г. Сосудистые сплетения головного мозга. Нальчик: Кабардино-балкарское книжное изд-во, 1962. — 144 с.
2. Бабик Т.М. Ворсинки сосудистых сплетений желудочков головного мозга человека. Морфология, 2002. — Т. 121, вып. 2-3. — С. 16.
3. Гасанова И.Х. К вопросу о «старении» сосудистых сплетений желудочков головного мозга. Луганськ: Укранський морфолопчний альманах, 2012. — Том 10, № 3. — С. 121 - 123.
4. Гасанова И.Х., Пикалюк В.С. Морфологические преобразования сосудистых сплетений желудочков головного мозга крыс предстарческого возраста при введении ксеногенного ликвора. Суми: Журнал клшчних та експериментальних медичних до-сладжень, 2013. — Т.1, № 1. — С. 34 - 38.
5. Дарий А. Взаимоотношения тканевых структур в сосудистых сплетениях третьего и четвертого желудочка головного мозга. Клшчна та експеримен-тальна патолопя, 2010. — Т.1Х, №4 (34). — С. 27 -31.
6. Коржевский Д.Э. Тканевая организация и развитие сосудистого сплетения головного мозга человека. Морфология, 1998. — Т. 113, вып. 2. — С. 105 - 114.
7. Кривенцов М.А., Ткач В.В. (мл.). Регуляторная функция спинномозговой жидкости: иммунологический аспект. Симферополь: Таврический медико-биологический вестник, 2006. — Т. 9, № 3, ч. 1. — С. 179 - 185.
8. Ликвор как гуморальная среда организма / В.С. Пи-калюк, Е.Ю. Бессалова, В.В. Ткач [и др.]. Симферополь: ИТ «Ариал», 2010. — 192 с.
9. Макаров А.Ю. Роль ликвора в нейрогуморальной регуляции физиологических функций. Успехи физиологических наук, 1978. — Т. 9, № 4. — С. 82 -96.
10. Пикалюк В.С., Гасанова И.Х., Шаланин В.В. Размеры хороидных эпендимоцитов сосудистых сплетений желудочков головного мозга при введении ксеногенной спинномозговой жидкости в эксперименте. Чершвщ: Клшчна анатомiя та оперативна хiрургiя, 2013. — Том 12, № 1. — С. 33 - 35.
11. Ткач В.В., Кубышкин А.В., Ткач В.В. (мл.). Определение тератогенных и эмбриотоксических
свойств биопрепарата "Ликворин". Симферополь: Проблемы, достижения и перспективы развития медико-биологических наук и практического здравоохранения: сб. тр. Крым. мед. ун-та, 1998. — Т. 134. — С. 89-95.
12. Keep R.F., Jones H.C. A morphometric study on the development of the lateral ventricle choroid plexus, choroid plexus capillaries and ventricular ependyma in the rat. Dev. Brain Res., 1990. — Vol. 56, № 1. — P. 47 - 53.
13. Peters A., Swan R.C. The choroid plexus of the mature and aging rat: the choroidal epithelium. Anat. Rec., 1979. — Vol. 194, № 3. — P. 325 - 353.
ФИТОНУТРИТИВНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ ЛИМФОУЗЛА НА ЭТАПЕ ПОЗДНЕГО ОНТОГЕНЕЗА
Горчакова Ольга Владимировна
кандидат медицинский наук, научный сотрудник ФГБНУ «Научно-исследовательский институт клинической
и экспериментальной лимфологии», г. Новосибирск, Россия;
Горчаков Владимир Николаевич доктор медицинский наук, профессор Новосибирского государственного университета, Россия
Старение - сложный процесс, который является естественным этапом онтогенеза и проявляется в неравномерности изменений органов и систем организма [9, с. 4]. С возрастом меняется состояние не только лимфоидной (иммунной) системы, но и развивается дисмикроэлемен-тоз [2, с. 6; 6, с. 109; 10, с. 84]. В стратегии здоровьесбере-жения населения определяющим является профилактическое направление, что требует изменения представлений о методах предупреждения старения. Усиленное развитие лимфологии в интеграции с другими науками (в частности, с биоэлементологией) определяет необходимость и перспективность исследований лимфатической системы во взаимосвязи с микроэлементным статусом на этапе позднего онтогенеза.
Преодолеть сложившуюся ситуацию стало возможным с появлением научного направления - лимфо (фито) нутрициология [5, с. 6], цель которой разработка лимфо-тропных фитосредств, воздействующих на лимфатическую систему и являющимися источником микроэлементов, биоактивных нутриентов. Существующие трудности с выбором лекарственных растений диктуют необходимость их углубленного изучения в разные периоды онтогенеза, особенно в пожилом и старческом возрасте. Требуется научное обоснование для применения фитон утриционной поддержки для коррекции возрастных изменений и микроэлементного баланса лимфатического узла, обеспечивающего неспецифичекую резистентность организма.
Цель исследования - это изучить влияние фитонут-ритивной поддержки на микроэлементный профиль и морфологию брыжеечного лимфоузла на этапе позднего онтогенеза.
Материал и методы исследования. Эксперимент проведен на 160 белых крысах-самцах разного возраста (3-5 месяцев и 1,5-2 года), исходя из существующего соотношения продолжительности жизни крыс и человека и целесообразности методического характера [4, с. 125]. Животные получали при свободном доступе к воде стандартную диету, которая включала экструдированный ком-
бикорм ПК-120-1 для лабораторный крыс. В качестве объекта исследования выбран брыжеечный лимфоузел. В эксперименте использован биологически активный фитосбор (БАФ), включающий корень и лист бадана, родиолу розовую, копеечник сибирский, лист черники, брусники, смородины, шиповник майский, чабрец, пищевые волокна. Фитосбор является источником микроэлементов, биофла-воноидов и других биологически активных нутриентов, что определяет его адаптогенные и лимфотропные свойства [6, с. 43]. Фитосбор применялся в течение одного месяца, и суточная доза его составила 0,1-0,2 г/кг при добавлении в основной корм.
Проведено гистологическое исследование брыжеечных лимфоузлов. Забранные кусочки лимфоузла фиксировали в 10% нейтральном формалине. Далее следовала классическая схема проводки и заливки материала в парафин с последующим приготовлением гистологических срезов. Гистологические срезы лимфоузлов обязательно окрашивались гематоксилином и эозином и азуром и эозином. Морфометрический анализ структурных компонентов лимфоузла осуществляли с помощью морфометриче-ской сетки [1, с. 244], которая накладывали на срез лимфоузла. Подсчитывали количество пересечений сетки, приходящихся на весь срез в целом и раздельно на каждый из структурных компонентов лимфоузла (капсула, корковое плато, лимфоидные узелки, паракортекс, мякотные тяжи, синусы) с перерасчетом в проценты.
Для определения микроэлементов антиоксидант-ного ряда (Мп, Fe, Си, 2п, Se) в брыжеечном лимфоузле применен рентгенфлюоресцентный анализ с использованием синхротронного излучения (РФА СИ) на станции микроэлементного анализа ВЭПП-3 Института ядерной физики имени Г.И. Будкера (Новосибирск). Энергия монохроматического пучка составляла 17 keV. Образцы исследовались в соответствии с рекомендациями МАГАТЭ. Объекты высушивались, и сухой их остаток использовался для изготовления прессованных таблеток диаметром 6 мм и массой до 15 мг. Количественная оценка эмиссионного спектра объектов исследования была выполнена с «внешним стандартом».
