CC BY
9УДК:591.3:612.824.1:611.24:591.8:547.962.9:612-092.4
ВЛИЯНИЕ КСЕНОГЕННОЙ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ НА ПАРЕНХИМУ
ЛЁГКИХ КРЫС
Д.В. Шатов, В.С.Пикалюк
Медицинская академия имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И. Вернадского», 294006, бул. Ленина, 5/7, г. Симферополь, Республика Крым, Российская Федерация
Для корреспонденции: Шатов Дмитрий Викторович, ассистент кафедры нормальной анатомии Медицинской академии имени С.И. Георгиевского ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И. Вернадского»
E-mail: dmitrii_shatov@mail.ru
For correspondence: Dmitry V. Shatov, assistant of the department human anatomy Medical Academy named after S.I. Georgievsky of Vernadsky CFU, E- E-mail: dmitrii_shatov@mail.ru.
Information about author:
Shatov D.V. http://orcid.org/0000-0003-2248-5400
РЕЗЮМЕ
В статье приведены результаты исследования, направленного на изучение влияния парентерального введения ксеногенной цереброспинальной жидкости на паренхиму лёгких крыс линии Вистар. Исследование было выполнено на 96 крысах обоих полов, разделённых на экспериментальные и контрольные группы. В эксперимент включали животных неполовозрелого (1 месяц), зрелого (5 месяцев), престарелого (19 месяцев) возрастов. Продолжительность эксперимента составляла 7, 30 и 90 дней. Животным экспериментальной группы внутримышечно вводили трёх- (7 дней эксперимента) и десятикратно (30 и 90 дней эксперимента)ксеногенную цереброспинальную жидкость в объёме 0,002 мл/г с интервалом в 2 дня. Животным контрольной группы вводили 0,9 % раствор NaCl по аналогичной схеме. Ксеногенную цереброспинальную жидкость получали путём субокципитальной пункции у лактирующих коров. После проведения декапитации под общим эфирным обезболиванием забирали лёгкие, которые фиксировали в 10 % растворе формалина. Затем изготавливали гистологические срезы по общепринятым методикам с последующей их окраской гематоксилином и эозином. При световой микроскопии определяли процентное содержание (отношение суммарной площади исследуемого признака к общей исследуемой площади, выраженное в процентах) участков с неизмененной паренхимой, эмфиземой, дистелектазами, кровоизлияниями. Полученные данные подвергались статистической обработке. Выявлено, что введение ксеногенной цереброспинальной жидкости вызывает увеличение процентного содержания участков с неизменённой паренхимой за счёт уменьшения процентного содержания участков с эмфиземой с различной степенью выраженности этих изменений. На выраженность выявленных изменений влияют суммарная доза введённой ксеногенной цереброспинальной жидкости, исходный возраст животных, длительность эксперимента.
Ключевые слова: ликвор, онтогенез, морфометрия, паренхима лёгких.
SUMMARY
EFFECT OF XENOGENIC CEREBROSPINAL FLUID PARENCHYMA ON LUNGS OF
RATS
D.V. Shatov, V.S.Pikaluk
The article presents the results of a study aimed at investigating the effect of parenteral administration of xenogenic cerebrospinal fluid in the parenchyma of lung Wistar rats. The study was performed on 96 rats of both sexes, divided into experimental and control groups. The experiment included the animals immature (1 month), mature (5 months) and aged (19 months) ages. Duration of the experiment was 7, 30 and 90 days. The animals of experimental group were injected intramuscularly triple (7 days of the experiment) and ten (30 and 90 days of the experiment) in xenogenic cerebrospinal fluid at the dose 0,002 ml / g with an interval of 2 days. The control group received 0.9 % NaCl using the same dosage schedule. After decapitation (made under the general anesthesia) the lungs of the rats were fixed in 10 % formalin. The histological specimens were stained with hematoxylin-eosin. The microscopy was performed using the light microscope Olympus CX-41, the morphometry was performed using the program «DP Soft». During the investigation we counted the relative amount of the areas with normal parenchyma, emphysema, dystelectasises, haemorrhages.The data were subjected to statistical analysis. It was found that the administration of xenogenic cerebrospinal fluid causes an increase in the amount with unmodified parenchyma by reducing the percentage of sites with emphysema, with varying degrees of severity of these changes.On the severity of the identified changes affect the total dose of the entered xenogenic cerebrospinal fluid, the original age of the animals, the duration of the experiment.
Key words: liquor, ontogenesis, morphometry, parenchyma of lung.
Заболевания органов дыхания являются актуальной проблемой современности, обусловленной значительной распространённостью этой патологии среди населения, прогрессиро-ванием и отягчающим действием на сопутствующие поражения. По Всемирной Организации Здравоохранения в структуре заболеваемости взрослого населения лидирующее место занимает патология органов дыхания [1]. Схожие данные представлены Федеральной службой государственной статистики [2]. В связи с этим, в последнее время всё более важным является улучшение качества жизни пациентов, достигаемое применением различных методов терапии. Однако применяемые методы терапии и реабилитации не всегда достигают оптимальных результатов, что требует поиска новых способов лечения. Перспективным направлением современного лечения, основанном на понимании причин и механизмов повреждения лёгких и их восстановления, является применение биологически активных веществ различных классов. На сегодняшний день имеются данные о благоприятном влиянии на лёгкие вазопрес-сина [3], кортиколиберина [4], соматостатина [5], меланоцитстимулирующего гормона [6], мелатонина [7], грелина [8], фактора роста ге-патоцитов [9], эпидермального фактора роста [10], эндотелиального фактора роста [11], эри-тропоэтина [12] и других. Эти и многие другие биологически активные вещества выявлены в составе цереброспинальной жидкости [13].
В рамках изучения свойств ксеногенной цереброспинальной жидкости и её влияния на органы и системы организма, а также регенераторных способностей возникла необходимость изучения действия ксеногенного ликвора на лёгкие в онтогенетическом аспекте.
Цель исследования: изучить возрастные морфологические особенности строения лёгких крыс при парентеральном введении ксеноген-ной цереброспинальной жидкости (КЦСЖ).
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Эксперимент был проведён на 96 крысах линии Вистар. Для изучения возрастных особенностей действия КЦСЖ на лёгкие крыс линии Вистар животные обоих полов экспериментальной (Э) и контрольной (К) серий были разделены на три возрастные группы: неполо-возрелые(1) (1 месяц, начальная масса тела - 2530 г), зрелые (II) (5 месяцев, начальная масса тела - 180-200 г), предстарческие (III) (19 месяцев, начальная масса тела - 250-280 г). Животные экспериментальных серий внутримышечно получали КЦСЖ, а животные контрольных серий плацебо (0,9% раствор натрия хлорида). Доза и кратность введения были аналогичными. Разовая доза составляла 0,002 мл/г массы тела животного. Длительность эксперимента - 7 (3 введения), 30 и 90 (по 10 введений) дней. При-
жизненное получение КЦСЖ осуществляли от здоровых коров, находившихся под постоянным ветеринарным контролем. Непосредственны забор КЦСЖ осуществляли путём субокципи-тальной пункции по методу проф. В.В. Тка-ча[14]. Обработанную КЦСЖ разливали в ампулы и герметично запаивали. Хранение осуществляли в холодильной камере при минус 4°C.
Эксперимент на животных выполняли в соответствии с правилами Европейской конвенции защиты позвоночных животных, которые используются в экспериментальных и других научных целях. Соблюдение основных биоэтических норм при проведении исследования подтверждены заключением комитета по этике ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И. Вернадского» (протокол №10 от 11.04.2016 г.).
После завершения сроков эксперимента животных декапитировали под эфирным наркозом и проводили забор материала. Органы фиксировали в 10% растворе формалина. Левое лёгкое после фиксации промывали, обезвоживали в батарее спиртов восходящей концентрации, проводили сквозь хлороформ и заключали в парафин. На микротоме изготавливали срезы толщиной 5-7 мкм, которые впоследствии окрашивали гематоксилином и эозином. Гисто-морфометрическое исследование проводили при помощи светового микроскопа ««Olympus» - CX 41, морфометрию - в лицензионной программе «Olympus DP Soft». При исследовании определяли процентное содержание (ПС) участков с неизменённой паренхимой, эмфиземой, дистелектазами, кровоизлияниями, а также выраженность коллагеновых волокон. ПС исследуемых признаков определяли как отношение суммарной площади признака к общей площади среза, выраженное в процентах. Все полученные данные поддавали статистической обработке с использованием лицензионного программного обеспечения Open Office. При анализе полученных данных рассчитывали среднюю арифметическую для всей группы, среднеквад-ратическое отклонение, ошибку средней величины, показатели динамики (абсолютный прирост, темп роста, темп прироста, абсолютное значение одного процента прироста). При использовании метода вариативной статистики для оценивания значимости отличий полученных данных использовали t-критерий Стьюден-та. Достоверным считали результаты при значении р<0,05; перед использованием параметрического критерия проверяли их распределение на нормальность. В случае ненормального распределения использовали непараметрический метод сравнения двух независимых выборок - U-критерий Манна-Уитни.
РЕЗУЛЬТАТЫ
При трёхкратном введении КЦСЖ крысам линии Вистар неполовозрелого возраста отмечали увеличение ПС неизменённой паренхимы на 14,35% (р<0,05) и участков с кровоизлияниями на 0,69% (р<0,05) за счёт уменьшения ПС эмфизематозных участков на 15,95% (р<0,05) (таблица 1). ПС участков дистелектаза увеличилось незначительно и незначимо. У крыс зрелого возраста при трёхкратном введении КЦСЖ отмечали аналогичные изменения: уменьшение ПС эмфизематозных участков на
13,73% (р<0,05) за счёт увеличения ПС неизменённой паренхимы на 5,07% (р<0,05), участков дистелектаза - на 9,23% (р<0,05), кровоизлияний - на 0,57% (р<0,05). Трёхкратное введение КЦСЖ животным предстарческого возраста приводило к уменьшениюПС эмфизематозно-изменённых участков на 10,82% (р<0,05) и участков с кровоизлияниями на 0,38% (р<0,05), сочетаясь увеличением ПС неизменённой паренхимы и участков дистелектаза на 3,20%(р<0,05) и 7,99% (р<0,05) соответственно.
Таблица 1.
Показатели морфометрии лёгких крыс при трёхкратном введении,n=6,M±m, %
Серия Неизменённая паренхима Эмфизема Дистелектазы Кровоизлияния
I-К 59,82±1,86 33,39±1,6 6,52±0,30 0,27±0,01
I-Э 74,16±0,81* 17,43±0,75* 7,43±0,35 0,97±0,05*
II-К 63,08±1,47 32,19±1,55 4,17±0,18 0,57±0,03
II-Э 74,16±0,81* 17,43±0,75* 7,43±0,35* 0,00*
III-K 63,55±0,33 30,68±0,42 5,78±0,28 0,49±0.02
III-Э 66,25±0,41* 19,87±0,42* 13,77±0,38* 0,11±0,01*
* - р<0,05 в сравнении с контролем
для крыс неполовозрелого возраста характерны более значительные изменения показателей морфометрии лёгких, чем для крыс зрелого возраста (таблица 2).
Таблица 2.
Динамика влияния введения КЦСЖ на морфометрические показатели паренхимы лёгких
крыс при 7-дневной эксперименте
При изучении показателей динамики изменений морфометрических показателей паренхимы лёгких под влиянием трёхкратного парентерального введения КЦСЖ установлено, что
Исследуемая область Неполовозрелые Зрелые Престарелые
Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста
Неизменённая паренхима 23,97 0,598 8,04 0,631 5,08 0,630
Эмфизема 47,80 0,334 42,65 0,332 35,23 0,307
Дистелектазы 13,96 0,065 221,3 4 0,042 138, 24 0,058
Кровоизлияния 259,2 6 0,003 100,00 0,006 77,55 0,005
При десятикратном введении КЦСЖ и 30-дневной длительности эксперимента получены разнонаправленные результаты в различных возрастных группах. У крыс неполовозрелого возраста линии Вистар после десятикратного парентерального введения КЦСЖ на 30 сутки эксперимента отмечали уменьшение процентного содержания эмфизематозных участков на 3,58% (р>0,05), при увеличении процентного содержания неизменённой паренхимы на 2,71% (р>0,05), участков дистелектаза - на 0,31% (р>0,05), участков кровоизлияний - на 0,56%
(р>0,05) (таблица 3).У животных зрелого возраста на 30 сутки после десятикратного введения КЦСЖ отмечали увеличение процентного содержания эмфизематозных участков на 10,45% (р<0,05), участков дистелектаза - на 0,61% (р<0,05) за счёт уменьшения процентного содержания неизменённой паренхимы на 8,85% (р<0,05), а также участков кровоизлияний - на 2,22% (р<0,05). На 30 сутки эксперимента после десятикратного введения КЦСЖ крысам пред-старческого возраста уменьшалось процентное содержание неизменённой паренхимы на
12,22% (р<0,05) за счёт увеличения процентно- 2,04% (р<0,05). Процентное содержание участ-го содержания эмфизематозных участков на ков дистелектаза отличалось незначимо. 9,71% (р<0,05), участков кровоизлияний -
Таблица 3.
Показатели морфометрии лёгких крыс зрелого возраста, M±m, %, п=6_
Серия Неизменённая паренхима Эмфизема Дистелектазы Кровоизлияния
I-К 45,70±1,38 48,70±1,26 2,38±0,11 3,85±0,15
I-Э 48,41±1,88 44,50±2,11 2,69±0,12 4,41±0,21
II-К 83,36±0,58 11,80±0,57 2,52±0,11 2,32±0,11
II-Э 74,52±1,17* 22,25±1,05* 3, 13±0,15* 0,11±0,01*
III-K 62,55±1,4 31,71±1,47 5,73±0,19 0,00
III-Э 50,33±1,92* 41,42±2,02* 6,21±0,31 2,04±0,10*
p<0,05 в сравнении с контролем
При изучении показателей динамики влияния КЦСЖ на исследуемые морфометрические показатели паренхимы лёгких крыс при длительности эксперимента 30 дней также получены разнонаправленные данные (таблица 4). Так положительная динамика изменений процентного содержания неизменённой паренхимы при введении КЦСЖ животным неполовозрелого возраста сменялась на отрицательную с максимумом в предстарческом возрасте. При оценивании показателей динамики влияния экзогенного введения КЦСЖ на процентное
содержание эмфизематозных участков получили несколько противоположные данные, отличающиеся максимальным темпом прироста в серии животных зрелого возраста. Темп прироста процентного содержания участков дисте-лектаза уменьшался с увеличением возраста экспериментальных животных. Введение КЦСЖ сопровождалось темпом роста процентного содержания участков с кровоизлияниями у крыс неполовозрелого возраста, сменяясь темпом убыли в зрелом возрасте.
Таблица 4.
Динамика влияния введения КЦСЖ на морфометрические показатели паренхимы лёгких
крыс при 30-дневной эксперименте
Исследуемая область Неполовозрелые Зрелые Престарелые
Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста
Неизменённая паренхима 5,93 0,457 10,60 0,834 19,54 0,626
Эмфизема - 7,43 0,481 88,56 0,118 30,62 0,317
Дистелектазы 13,03 0,024 24,21 0,025 8,38 0,057
Кровоизлияния 14,55 0,039 95,26 0,023 - -
Изучая отдалённые результаты десятикратного введения КЦСЖ крысам зрелого возраста, было обнаружено увеличение процентного содержания неизменённой паренхимы на 20,93% (р<0,05) преимущественно за счёт уменьшения процентного содержания участков дистелектаза и эмфизематозных участков на 11,58% (р<0,05) и 9,35% (р<0,05) соответственно (таблица 5).У
крыс предстарческого возраста отдалённые результаты десятикратного введения КЦСЖ сопровождались возрастанием процентного содержания неизменённой паренхимы на 6,85% (р<0,05) за счёт уменьшения процентного содержания эмфизематозных участков на 5,56% (р<0,05) участков дистелектаза - на 1,23% (Р<0,05).
Таблица 5.
Показатели морфометрии лёгких крыс предстарческого возраста, M±m, %, п=6_
Серия Неизменённая Эмфизема Дистелектазы Кровоизлияния
паренхима
II-K 50,54±0,83 28,12±1,20 21,33±1,02 0,00
II-Э 71,48±0,22* 18,78±0,35* 9,75±0,27* 0,00
III-K 58,93±1,62 34,81±1,48 5,39±0,25 0,86±0,04
III-Э 65,79±1,21* 29,25±1,17* 4,16±0,13* 0,80±0,04
* - p<0,05 в сравнении с контролем
дуемых показателей морфометрии были у животных зрелого возраста, за исключением показателей динамики участков кровоизлияний (таблица 6).
Таблица 6.
Динамика влияния введения КЦСЖ на морфометрические показатели паренхимы лёгких _крыс при 90-дневной эксперименте_
Исследуемая область Зрелые Предстарческие
Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста Темп прироста, % Абсолютное значение 1% прироста
Неизменённая паренхима 41,43 0,505 11,64 0,589
Эмфизема -33,21 0,281 -15,97 0,348
Дистелектаз -54,29 0,213 -22,82 0,054
Кровоизлияния - - -6,98 0,009
Оценивая показатели динамики отдалённых результатов (90-дневный эксперимент) десятикратного введения КЦСЖ, обнаружено, что наибольшие показатели темпа прироста иссле-
ОБСУЖДЕНИЕ
В проведённом исследовании были обнаружены разнонаправленные эффекты парентерального введения КЦСЖ на паренхиму лёгких крыс. Обнаруженные биологически активные вещества в составе КЦСЖ объясняет разнообразие локальных зон приложения при парентеральном введении. Так, увеличение процентного содержания неизменённой паренхимы, происходящее за счёт уменьшение процентного содержания участков эмфиземы, обусловлено действием комплекса веществ уменьшающих деструктивные изменения в альвеолах. Эти изменения заключаются как в снижении интенсивности апоптоза альвеолоцитов, так и усилением клеточной пролиферации, приводя к восстановлению клеточного пула и их функциональной активности, проявляющееся в восстановлении синтеза сурфактанта. Помимо этого возможно возникновение ингибирующего эффекта на пролиферацию фибробластов лёгких и клеточную миграцию, что приводит к снижению образования коллагена за счёт действия трансформирующего фактора роста-01 (TGF-Р1). Другим механизмом обнаруженных изменений является системное действие КЦСЖ в виде улучшения реологических свойств крови, вазодилятации, которые улучшают кровоснабжение самой паренхимы лёгких.
Направленность и выраженность этих изменений имела возрастные особенности, связанные с тем, что у неполовозрелых крыс наблюдалась некоторая сниженная реактивность лёгких, связанная с незрелостью нейроэндок-
ринных механизмов регуляции, которые преобладают в этом возрастном периоде, и быстрым их истощением, усиленным метаболизмом и высокими мобилизационными способностями [15]. Напротив, среди животных зрелого возраста первостепенную роль начинают играть нервные механизмами регуляции с менее выраженными изменениями и достаточно долгим эффектом. В предстарческом возрасте отмечали ещё менее выраженные изменения и короткий эффект, в сравнении со зрелыми животными.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, исследование продемонстрировало разнонаправленное влияние на лёгкие крыс, оказываемое КЦСЖ при парентеральном введении. Трёхкратное введение КЦСЖ приводило к увеличению процентного содержания неизменённой паренхимы у неполовозрелых животных за счёт уменьшения процентного содержания участков эмфиземы более выраженное у неполовозрелых животных. При десятикратном введении КЦСЖ отмечено первоначальное снижение процентного содержания неизменённой паренхимы и увеличение процентного содержания эмфизематозных участков, сменяющееся последующим увеличением содержания неизменённой паренхимы.
ФИНАНСИРОВАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование проведено в соответствии с тематическим планом научных исследований ГУ «Крымского государственного медицинско-
го университета имени С.И. Георгиевского» и является фрагментом комплексного исследования по теме «Онтогенетические особенности морфофункциональных изменений и процессов регенерации отдельных органов и систем при парентеральном введении прижизненно взятой спинномозговой жидкости» кафедры нормальной анатомии (№ 0108U0020290).
Конфликт интересов.Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
1.Мировая статистика здравоохранения 2013. Всемирная организация здравоохранения. Доступно по:http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/ 81965/7/9789244564585_rus.pdf.
2. Здравоохранение в России. 2015: Статистический сборник. Федеральная служба государственной статистики. Доступно по: http://www.gks. ru/free_doc/doc_2015/zdrav15. pdf.
3. Westphal M, Rehberg S, Maybauer MO, May-bauer DM, Enkhbaatar P, Westphal-Varghese BB, Schmalstieg FC, Morita N, Cox RA, Traber LD, Hawkins H, Whorton E, Traber DL. Cardiopulmo-naryeffectsoflow-
doseargininevasopressininovineacutelunginjury. Crit Care Med. 2011; 39 (2): 357-363.
4. Bozkurt A, Ghandour S, Okboy N, Oner S, Ar-bak S, Coçkun T, Yegen BC. Inflammatory response to cold injury in remote organs is reduced by corticotropin-releasing factor. Regul Pept. 2001 ; 99 ( 2-3): 131-139.
5. Egger C, Gérard C, Vidotto N, Accart N, Cannet C, Dunbar A, Tigani B, Piaia A, Jarai G, Jarman E, Schmid HA, Beckmann N. Lung volume quantified by MRI reflects extracellular-matrix deposition and altered pulmonary function in bleomycin models of fibrosis: effects of S0M230. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2014; 306 (12): 1064-1077.
6. Yu XM, Liu XM, Qi YF, Zhang J, Tang CS. [Alterations of intermedin and its receptor system in oleic acid-induced acute lung injury of rats]. Beijing Da Xue Xue Bao. 2006; 38 (5): 496-500. [Article in Chinese].
7. Zhong M, Xue ZG, Cang J, Wu W, Huang JF, Zhu DM. Protective effect of melatonin on reexpansion pulmonary edema in rats model. Chin Med J. - 2013; 126 (3): 500-504.
8. Liu Y, Guo R, Wang F, Zhao G, Lu Z, Qiu Q. [Protective effect of ghrelin against paraquat-induced acute lung injury in mice]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi. 2014; 32 (3): 190-194. [Article in Chinese].
9. Lee YJ, Moon C, Lee SH, Park HJ, Seoh JY, Cho MS, Kang JL. Apoptotic cell instillation after bleomycin attenuates lung injury through hepato-cyte growth factor induction. Eur Respir J. 2012; 40 (2): 424-435.
10. YangB, HuangW, Han J. Study of the role of epidermal growth factor on lung fluid transport in rabbits with acute lung injury caused by endotoxin.
Experimental and therapeutic medicine. 2012; 4 (4): 611- 614.
11. Huang X, Liu Y, Lu Y, Ma C. Antiinflammatory effects of eugenol on lipopolysac-charide-induced inflammatory reaction in acute lung injuryvia regulating inflammation and redox status . Int Immunopharmacol. 2015; 26(1): 265271.
12. Sigounas G, Salleng KJ, Mehlhop PD, Sigou-nas DG. Erythropoietin ameliorates chemotherapy-induced fibrosis of the lungs in a preclinical murine model. Int. J. Cancer. 2008; 122 (12): 2851-2857.
13. Ликворкакгуморальнаясредаорганизма. Под ред.ПикалюкВ.С.:ИТ «Ариал». - 2010.
14. Патент Украина № u201106266/ 25.11.2011. Бюл. № 22. Пикалюк В.С., Ткач В.В., Кривен-цов М.А., Шаймарданова Л.Р., Бессалова Е.Ю., Киселёв В.В., Зайвый Ю.П., Лесковский А.О. Способ получениябиологическогопрепарата ликвора. Доступно по: http://uapatents.com/2-65154-sposib-otrimannya-nativnogo-biologichnogo-preparatu-likvoru.html.
15. Нестеров Ю.В.,Тёплый Д.Л. Онтогенетические особенности стресс-реактивности лёгких в связи метаболизмом липидов. Биомедицинская химия. 2003; 49 (5): 456-462.
REFERENCES
1. World Health Statistics 2013. World Health Organization. Available at:http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/ 81965/7/9789244564585_rus.pdf.
2. Public health in Russia. 2015: StatisticalYear-book.FederalStateStatisticsService. (In Russ). Available at: http://www.gks.ru/free_doc/doc_2015/ zdrav15.pdf.
3. Westphal M, Rehberg S, Maybauer MO, May-bauer DM, Enkhbaatar P, Westphal-Varghese BB, Schmalstieg FC, Morita N, Cox RA, Traber LD, Hawkins H, Whorton E, Traber DL. Cardiopulmo-naryeffectsoflow-
doseargininevasopressininovineacutelunginjury. Crit Care Med. 2011; 39 (2): 357-363.
4. Bozkurt A, Ghandour S, Okboy N, Oner S, Ar-bak S, Coçkun T, Yegen BC. Inflammatory response to cold injury in remote organs is reduced by corticotropin-releasing factor. Regul Pept. 2001 ; 99 ( 2-3): 131-139.
5. Egger C, Gérard C, Vidotto N, Accart N, Cannet C, Dunbar A, Tigani B, Piaia A, Jarai G, Jarman E, Schmid HA, Beckmann N. Lung volume quantified by MRI reflects extracellular-matrix deposition and altered pulmonary function in bleomycin models of fibrosis: effects of S0M230. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2014; 306 (12): 1064-1077.
6. Yu XM, Liu XM, Qi YF, Zhang J, Tang CS. [Alterations of intermedin and its receptor system in oleic acid-induced acute lung injury of rats]. Beijing Da Xue Xue Bao. 2006; 38 (5): 496-500. [Article in Chinese].
7. Zhong M, Xue ZG, Cang J, Wu W, Huang JF, Zhu DM. Protective effect of melatonin on reexpansion pulmonary edema in rats model. Chin Med J. - 2013; 126 (3): 500-504.
8. Liu Y, Guo R, Wang F, Zhao G, Lu Z, Qiu Q. [Protective effect of ghrelin against paraquat-induced acute lung injury in mice]. Zhonghua Lao Dong Wei Sheng Zhi Ye Bing Za Zhi. 2014; 32
(3): 190-194. [Article in Chinese].
9. Lee YJ, Moon C, Lee SH, Park HJ, Seoh JY, Cho MS, Kang JL. Apoptotic cell instillation after bleomycin attenuates lung injury through hepato-cyte growth factor induction. Eur Respir J. 2012; 40 (2): 424-435.
10. YangB, HuangW, Han J. Study of the role of epidermal growth factor on lung fluid transport in rabbits with acute lung injury caused by endotoxin. Experimental and therapeutic medicine. 2012; 4
(4): 611- 614.
11. Huang X, Liu Y, Lu Y, Ma C. Anti-inflammatory effects of eugenol on lipopolysac-charide-induced inflammatory reaction in acute 16.
lung injuryvia regulating inflammation and redox status. Int Immunopharmacol. 2015; 26(1): 265271.
12. Sigounas G, Salleng KJ, Mehlhop PD, Sigou-nas DG. Erythropoietin ameliorates chemotherapy-induced fibrosis of the lungs in a preclinical murine model. Int. J. Cancer. 2008; 122 (12): 2851-2857.
13. Pmkalyuk VS. Likvor kakgumoralnayasreda. Simseropol: IT «Arial»; 2010. (In Russ).
14. Patent Ukraine № u201106266/ 25.11.2011. Byul. № 22. Pikalyuk VS, Tkach VV, KriventsovMA, Shaymardanova LR, Bessalo-vaYeYu, Kiselyov VV, ZayviyYuP, LeskovskiyAO. Spopsibotryimannyabiologichno-gopreparatulikvoru. (In Russ). Available at: http://uapatents.com/2-65154-sposib-otrimannya-nativnogo-biologichnogo-preparatu-likvoru.html.
15. NesterovYyV, Teplii DL. [Ontogenetic particulars stress-reactive of lungs in connection of lipids metabolism]. Biomeditsinskayakhimiya, 2003, 49(5):456- 462. (In Russ).
