CC BY
11"BicHUK стоматологи", № 2, 2018
L
ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧНИИ РОЗД1Л
УДК 615.31:615.451
О. В. Кононова1, В. В. Вит2, д. мед. н., А. В. Борисенко1, д. мед. н.
'Национальный медицинский университет им. О. О. Богомольца Государственное учреждение «Институт глазных болезней и тканевой терапии им. В. П. Филатова НАМН Украины»
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
ДЕСНЫ КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ АДРЕНАЛИНА, АДРЕНОБЛОКАТОРОВ
И КВЕРТУЛИНА НА ФОНЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДИСБИОЗА
У крыс при экспериментальном дисбиозе в десне определяется акантоз и гиперкератоз многослойного плоского эпителия с явлениями вакуольной дегенерации эпителиоцитов. В субэпителиальном слое определяется средней выраженности диффузная лимфо-цитарная инфильтрация, а также отек стромы субэпителиального слоя. Оральные аппликации крысам с дисбиозом геля, содержащего комплекс адрнеобло-каторов (зоксон + ницерголин + сибазон), вызывают средней выраженности диффузную лимфоцитарную инфильтрацию, местами инфильтрацию субэпителиального слоя эозинофилами, появление пространств между эпителиальным слоем и стромой, заполненных жидкостью, что вызывает отслоение эпителия. Оральные аппликации крысам с дисбиозом геля, содержащего адреналин (0,18 мг/мл) оказали пародон-топротекторное действие, подобное тому, что оказал гель «Квертулин».
Ключевые слова: пародонт, дисбиоз, адреналин, ад-реноблокаторы, квертулин, гистология.
О. В. Кононова1, В. В. Вт2, А. В. Борисенко1
1Нацюнальний медичний уншерситет iм. О. О. Богомольця 2Державна установа «1нститут очних хвороб i тканево! терапи т. В. П. Фтатова Нацюнально! академп медичних наук Укра!ни»
Г1СТОЛОГ1ЧН1 ПОКАЗНИКИ ЯСЕН ЩУР1В ЗА УМОВ Д11 АДРЕНАЛ1НА, АДРЕНОБЛОКАТОР1В I КВЕРТУЛ1НА
НА ТЛ1 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДИСБ1ОЗА
У щурiв за умов експериментального дисбiозу в яснах визначаеться акатоз i гтеркератоз багатошарового плескатого епiтелiю з явищами вакуольног дегенера-цИ епiтелiоцитов. В субепiтелiальному шарi визначаеться середньовиражена дифузна лiмфоцитарна iн-фiльтрацiя, а також набряк строми субепiтелiаль-ного шару. Оральнi аплтацп щурам з дисбiозом гелю, який мiстить комплекс адреноблокаторiв (зоксон +
нгцерголгн + сибазон) викликають середньовиражену дифузну лгмфоцитарну тфшьтрацт, мгсцями 1нф1-льтрацгю субеттелгального шару еозтофшами, появу площин мгж епгтелгальним шаром i стромою, запов-нених рiдиною, що викликае вiдшаровування епiтелiю. Оральш аплiкацii щурам з дисбюзом гелю, який Mic-тить адреналт (0,18 мг/мл), здтснюють пародонто-протекторну дiю, подiбно тому, що здтснюе гель «Квертулт».
Ключов1 слова: пародонт, диcбiоз, адреналт, адрено-блокатори, квертулт, гicтологiя.
O. V. Kononova1, V. V. Vit2, A. V. Borysenko1
'National Medical University named after O. O. Bogomolets 2State Institution "V. P. Filatov Institute of Eye Diseases and Tissue Therapy NAMS Ukraine»
THE HISTOLOGICAL INDICATORS OF RAT GINGIVA AFTER ADRENALIN, ADRENOBLOCKATORS AND QUERTULIN ACTIONS ON BACKGROUND OF EXPERIMENTAL DYSBIOSIS
ABSTRACT
The aim. To determine rat gingiva state by histological methods after adrenaline and adrenoblockators actions on background of experimental dysbiosis. The materials and methods. The dysbiosis was reproduced by lincomycin introduced with water in dose 60 mg/kg in during 5 days. Adrenaline, adrenoblockators and quertulin were introduced by oral applications of the gels in during 10 days. Histological researches were made with used hematoxilyn and eosin. The findings. Acantos and hyperkeratosis multi-layer peane epithelium with vacuole degeneration of epitheliocytes were determined into rat gingiva after experimental dysbiosis.
The diffusia lymphocyte infiltration and oedema of subepithelium layer stroma was determined into subepithelium layer.
The oral application of gel with adrenoblockators made the diffusia lymphocyte and eosinophyle infiltrations of subepithelium layer, infiltrates between epitheliocytes and stroma, which call epithelium exfoliation. The oral applications gels with adrenaline (0,18 mg/kg) hasparodontoprotective action as the gel "Quertulin". Key words: parodonte, dysbiosis, adrenaline, adrenoblockators, quertulin, histology.
Трофическая роль симпатической нервной системы общеизвестна [1-3]. В то же время адреналин рассматривается как ведущий фактор развития стресса [4-6]. По данным ряда исследователей стресс может быть причиной развития генерализованного пародонтита [4]. Известно так© Кононова О. В., Вит В. В., Борисенко А. В., 2018.
"Вiсник стоматологИ", № 2, 2018
же, что слюнные железы секретируют адреналин [7, 8], однако его функция в полости рта неизвестна.
Цель настоящего исследования. Определение с помощью гистологических методов состояния десны крыс в условиях экспериментального дисбиоза при действии адреналина или комплекса адреноблокаторов.
Материалы и методы исследования. Эксперименты были проведены на 15 белых крысах линии Вистар (самки, 13 месяцев, живая маса 350±20 г), распределенных в 5 равных групп. 1-ая - контроль (интактные), 2-ая-5-ая - получали с питьевой водой в течение 5 дней антибиотик линкомицин в дозе 60 мг/кг (модель дисбиоза) [9]. 3-я группа на фоне дисбиоза получала оральные аппликации мукозо-адгезивного геля, содержащего адреналин (0,18 мг/мл), 4-ая группа на фоне дисбиоза получала гель с адреноблока-торами и 5-ая на фоне дисбиоза получала муко-зо-адгезивный фитогель «Квертулин» [16]. Все гели наносили на слизистую полости рта ежедневно в дозе 0,3 мл на крысу.
В качестве адреноблокаторов использовали зоксон (доказон модилат) в дозе 8 мг %, ницерго-
лин в дозе 40 мг% и сибазон (диазепам) в дозе 20 мг% на 4 %-ном КМЦ (№ соль) [10].
Продолжительность эксперимента составила 10 дней, после чего крыс умерщвляли под тиопе-нталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца. Иссекали десну, помещали ее в 10 %-ный нейтральный формалин и хранили до исследования при температуре плюс 4 - плюс 6 °С.
Цитологические исследования осуществляли в соответствии с указаниями [11, 12] и окрашивали срезы гематоксилин-эозином.
Результаты и их обсуждение. В десне крыс 1-й группы (контроль) каких-либо патологических изменений тканевых структур не выявлено. Десна покрыта многослойным плоским орогове-вающим эпителием с различной степенью акан-тоза эпителия в зависимости от топографического расположения. В подэпителиальном слое видны многочисленные кровеносные сосуды и незначительная диффузная лимфоидная инфильтрация. Гистологическая картина десны интакт-ных крыс представлена на рис. 1 и рис. 2.
Рис. 1. Десна крыс 1-й группы (контроль). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х40. Видны признаки незначительного акантоза эпителия. Воспалительная инфильтрация подэпителиального слоя не обнаруживается
Рис. 2. Десна экспериментального животного в норме. Окраска гематоксилин-эозином, увел. х40.
У крыс с экспериментальным дисбиозом выявляется акантоз и гиперкератоз многослойного плоского эпителия с явлениями вакуольной дегенерации эпителиоцитов. В субэпителиальном слое определяется средней выраженности диффузная лимфоцитарная инфильтрация, а также отек стромы субэпителиального слоя. Соответствующая гистологическая картина десны представлена на рис. 3.
В десне крыс 3-й группы, получавших аппликации адреналина на фоне дисбиоза, существенных изменений эпителиального и подэпите-лиального слоев не обнаружено. Нет и признаков инфильтрации подэпителиального слоя (рис. 4).
В десне крыс 4-й группы, получавшей ап-
пликации геля с адреноблокаторами, видна средней выраженности диффузная лимфоцитарная инфильтрация. Появляются пространства между эпителиальным слоем и стромой, заполненные жидкостью, что приводит к отслоению эпителия. Местами выявляется инфильтрация субэпителиального слоя эозинофилами (рис. 5).
В десне крыс 5-й группы (квертулин на фоне дисбиоза) существенных отличий от десны крыс 1-й группы (контроль) не обнаружили (рис. 6 и рис. 7).
Представленные результаты гистологического исследования в определенной степени подтверждают результаты биохимического исследования десны у крыс, получавших адреналин и
"Ысник стоматологИ", № 2, 2018
адреноблокаторы [13-15]. Четко прослеживается пародонтопротекторная активность адреналина, практически полностью устраняющего патологические изменения в десне, наблюдаемые при экспериментальном дисбиозе. Адреноблокаторы не только не устраняют патологические явления дисбиоза, но даже несколько их усиливают.
Рис. 3. Десна крыс 2-й группы (дисбиоз). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х70. Видны акантоз и гиперкератоз многослойного плоского эпителия. В субэпителиальном слое определяется диффузная инфильтрация лимфоцитами и эозинофилами. Виден отек стромы субэпителиального слоя с явлениями отслоения эпителиального пласта
Пародонтопротекторная активность адреналина не уступает аналогичному действию известного пародонтопротектора квертулина [16]. Для выяснения механизма пародонтопротекторного действия адреналина необходимы дальнейшие исследования
Рис. 4. Десна экспериментального животного после применения адреналина на фоне линкомицина (3-я группа). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х40. Структурных изменений десны не обнаружено
Рис. 5. Десна крыс 4-й группы (дисбиоз + адреноблокаторы). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х140. Видна инфильтрация субэпителиального слоя лимфоцитами и эозинофилами
Рис. 6. Десна экспериментального животного после пимене-ния линкомицина и квертулина (группа 5). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х40. Структурные изменения десны не определяются
Рис. 7. Десна экспериментального животного после применения линкомицина и квертулина (группа 5). Окраска гематоксилин-эозином, увел. х40.
"BicHUK стоматологИ", № 2, 2018
Список литературы
1. Donglas R. S. Chronic sympathetic activation: associated obesity? / R. S. Donglas, C. Bell // Diabetes. - 2004. - V. 53, № 2. - P. 276284.
2. Оцшка ролi симпато-адреналово! системи в naToreHe3i глосалгп / I. В. Ковач, €. Н. Дичко, Ю. В. Хо"пмська [та iH.] // Ме-дичш перспективи. - 2012. - т. XVII, № 3. - С. 124-127.
3. Слобода М. Т. Результати дослщження показниюв вегетативно! нервово! системи при ураженнях тканин пародонта в оаб молодого вшу з деформуючими дорсопа"пями / М. Т. Слобода // Одеський медичний журнал. - 2016. - № 1(153). - С. 54-58.
4. Тарасенко Л. М. Стресс и пародонт / Л. М. Тарасенко, Т.
A. Петрушанко. - Полтава, 1999. - 190 с.
5. Модина Т. Н. Патология тканей пародонта и вегетативный гомеостаз у школьников подросткового возраста / Т. Н. Модина, Е.
B. Мамаева // Стоматология детского возраста и профилактика. -2006. - № 3-4. - С. 3-7.
6. Подгаецкая О. Е. Коррегирующее влияние интервальных гипоксических тренировок на ультраструктуру мягких тканей па-родонта при остром иммобилизационном стрессе / О. Е. Подгаецкая, Е. В. Розова, И. Н. Маньковская // Патология. - 2008. - Т. 5, № 3. - С. 66.
7. Михайлов В. В. Роль слюнных желез в механизме удаления излишков норадреналина в плазме крови / В. В. Михайлов, М.
A. Гордеева, В. Н. Матвеева // БЭБИМ. - 1998. - т. 125, № 1. - С. 15-17.
8. Михайлов В. В. Роль слюны в снабжении катехоламинами слизистой оболочки пищевода и желудка у крыс / В. В. Михайлов,
B. Н. Матвеева, М. А. Гордеева // БЭБИМ. - 1998. - т. 125, № 2. - С. 143-145.
9. Патент на корисну модель Укра!на, № 31012. МПК (2006) А61Р 31/00. Спосiб моделювання дисбюзу (дисбактерюзу) / Леви-цький А. П., Селiванська I. О., Цисельський Ю. В. [та ш.]. Опубл. 25.03.2008. Бюл. № 6.
10. Кононова О. В. Влияние оральных гелей квертулина и адреноблокаторов на состояние пародонта у крыс с адреналовым стрессом / О. В. Кононова, А. В. Борисенко, А. П. Левицкий // Вк-ник стоматологп. - 2016. - № 4(97). - С. 8-11.
11. Меркулов Г. А. Курс патогистологической техники / Г. А. Меркулов. - Л.: Медицина, 1969. - 424 с.
12. Саркисов Д. С. Микроскопическая техника / Д. С. Сарки-сов, Ю. Л. Перов. - М., 1996. - 544 с.
13. Кононова О. В. Влияние линкомицина на состояние па-родонта у крыс с адреналовым стрессом / О. В. Кононова // Вкник стоматологп. - 2016. - № 3(96). - С. 26-28.
14. Borisenko A. V. The comparative effects of quertulin and adrenoblocators oral geles on the biochemical indices of rat serum after common action adrenaline and lincomycin / A. V. Borisenko, O. V. Kononova, A. P. Levitsky // Journal of Education, Health and Sport. -2017. - V. 7, № 8. - P. 1062-1069.
15. Levitsky A. P. The gastroprotective action of the oral gel "Quertulin" on rats which received adrenalin at background dysbiosis / A. P. Levitsky, A. A. Petrenko // Journal of Education, Health and Sport. - 2017. - V. 7, № 2. - P. 674-681.
16. Квертулин: Витамин Р, пребиотик, гепатопротектор / [А. П. Левицкий, О. О. Макаренко, И. А. Селиванская и др.]. - Одесса: КП ОГТ, 2012. - 20 с.
REFERENCES
1. Donglas R. S., Bell C. Chronic sympathetic activation: associated obesity? Diabetes. 2004; 53(2): 276-284.
2. Kovach I. V., Dychko Je. N., Hotims'ka Ju. V. ta in. The estimation of role of simpato-adrenaline system in glossalgi pathogenesis. Medychni perspektyvy. 2012; XVII(3): 124-127.
3. Sloboda M. T. The results of investigation of vegetative nervous system at parodonte lesion in young persons with deformation dorsopathy. Odes'kyj medychnyj zhurnal. 2016; 1(153): 54-58.
4. Tarasenko L. M., Petrushanko T. A. Stress i parodont [Stress and parodont]. Poltava, 1999: 190.
5. Modina T. N., Mamaeva E. V. Pathology of parodontical tissues and vegetative homeostasis in youth schoolboys. Stomatologiia detskogo vozrasta i profilaktika. 2006; 3-4: 3-7.
6. Podgaetskaia O. E., Rozova E. V., Mankovskaia I. N. The corrective influence of interval hypoxia trainings on ultrastructure of soft tissues of parodonte at acute immobilization stress. Patologiia. 2008; 5(3): 66.
7. Mikhailov V. V., Gordeeva M. A., Matveeva V. N. The role of salivary glands in mechanism of removal noradrenaline surplus in blood plasma. BEBIM. 1998; 125(1): 15-17.
8. Mikhailov V. V., Matveeva V. N., Gordeeva M. A. The role of saliva in catecholamins supply of rat ocsophasms and stomach mucosa. BEBIM. 1998; 125(2):143-145.
9. Levitsky A. P., Selivanskaya I. O., Tsiselskiy Yu. V. ta in. The method of simulation of dysbiosis (dysbacteriosis). Patent of Ukraine 31012. IPC (2006) А61Р 31/00. Publ.: 25.03.2008. Bul. № 6.
10. Kononova O. V., Borisenko A. V., Levitsky A. P. The influence of oral gels of quertulin and adrenergic blockers upon the state of periodontium in rats with adrenalin stress. Visnyk stomatologii. 2016; 4(97): 8-11.
11. Merkulov G. F. Kurs patogistologicheskoy tekhniki [The course of pathohistological technique]. Moskva, Meditsina, 1969: 424.
12. Sarkisov D. S., Perov Yu. L. Mikroskopicheskaya tekhnika [Microscopy technique]. Moskva, 1996: 544.
13. Kononova O. V. The influence of lincomycin upon the state of periodontium in rats with adrenal stress. Visnyk stomatologii. 2016; 3(96): 26-28.
14. Borisenko A. V., Kononova O. V., Levitsky A. P. The comparative effects of quertulin and adrenoblocators oral geles on the biochemical indices of rat serum after common action adrenaline and lincomycin. Journal of Education, Health and Sport. 2017; 7(8): 10621069.
15. Levitsky A. P., Petrenko A. A. The gastroprotective action of the oral gel "Quertulin" on rats which received adrenalin at background dysbiosis. Journal of Education, Health and Sport. 2017; 7(2): 674-681.
16. Levitsky A. P., Makarenko O. A., Selivanskaya I. A. i dr. Kvertulin. Vitamin P, prebiotik, gepatoprotektor ["Querthulin", Vitamin P, prebiotic, hepatoprotector]. Оdеssа, KP OGT, 2012:20.
Поступила 05.04.18
УДК 612.683.003.121+577.1+616-092.4[599.323.4]
А. А. Вишневская, к. мед. н.
Одесский национальный медицинский университет
ОЦЕНКА РЕГЕНЕРАТИВНЫХ СВОЙСТВ ПЛАЗМОГЕЛЯ ИЗ ТРОМБОЦИТАРНОЙ
АУТОПЛАЗМЫ НА ОСНОВАНИИ БИОХИМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
В данной работе проведено экспериментальное изучение эффективности плазмогеля из тромбоцитар-ной аутоплазмы, геля с высоким содержанием гиалу-роновой кислоты Implantgel perio и фитогеля «Квертгиаль» на регенерацию тканей пародонта в эксперименте у крыс.
Исследование проведено на крысах, которым с лечебной целью на десну в виде аппликаций наносили плаз-могель из тромбоцитарной аутоплазмы и гель с высоким содержанием гиалуроновой кислоты. Ключевые слова: тромбоцитарная аутоплазма, гиа-луроновая кислота, лигатурная модель пародонтита.
© Вишневская А. А., 2018.
