CC BY
177. Zemskov A. M., Zemskov V. M., Zemskov M. A. [i dr.]. The
problem of the nonspecific and the specific in induction and regulation of immunologic reactions. JMEI. 2005; 4: 105-109.
8. Ivashkin V. T. The basic notions and the statements of the fundamental immunology. Rossiyskiy zhurnal gastroenterologii, gepatologii, koloproktologii. 2008; 4: 4-13.
9. Shukhtina I. N., Vasyuk V. L. The influence of anti-helicobacter therapy on the state of liver in rats. Aktual'nye problemy transportnoy meditsiny. 2015; 1: 25-30.
10. Levitsky A. P. The use of antidysbiotic preparations in dentistry. Visnyk stomatologii. 2014; 4: 80-88.
11. Levitsky A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Odessa, KP OGT, 2005: 74.
12. Gavrikova L. M., Segen I. T. Urease activity of oral liquid in patients with acute odontogenic infection of maxillofacial part. Stomatologiya. 1996; The extra issue :49-50.
13. Levitsky A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. [i dr.]. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT, 2010: 16.
14. Stalnaya I. D., Garishvili T. G. Metod opredeleniya malonovogo dialdegida s pomoshchyu tiobarbiturovoy kisloty [The method of revelation of malonic dialdehyde with thiobarbituric acid]. Moskva, Meditsina, 1977: 66-68.
15. Levitsky A. P., Stefanov A. V. Metody opredeleniya aktivnosti elastazy i eye ingibitorov: metodicheskie rekomendatsii [The methods of the determination of the activity of elastase and its inhibitors: method guidelines]. Kiev, GFK, 2002: 15.
16. Levitsky A. P., Denga O. V., Selivanskaya I. A. [ta in.]. The method of estimation of the degree of dysbiosis (dysbacteriosis) of organs and tissues. Patent of Ukraine 43140. IPC (2009) G01N 33/48. Application number u 200815092. Date of filling: 26.12.2008. Publ.: 10.08.2009. Bul. № 15.
17. Lapach S. N., Chubenko A. V., Babich P. N. Statisticheskiye metody v medico-biologicheskikh issledovaniyakh s ispolzovaniem Excel [Statistical methods in medical and biological research by using Excel]. Kiev, Morion, 2000: 320.
Поступила 09.02.15
УДК 616.33+342.092
Т. В. Томилина, к. мед. н.
Харьковский национальный медицинский университет
КВЕРЦЕТИН ПОВЫШАЕТ НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУНИТЕТ И СНИЖАЕТ ДИСБИОЗ И ВОСПАЛЕНИЕ В ПАРОДОНТЕ КРЫС, ПОЛУЧАВШИХ АНТИХЕЛИКОБАКТЕРНУЮ ТЕРАПИЮ
У крыс, которые получали антихеликобактерную терапию (АХБТ), снижается в сыворотке крови и в десне активность лизоцима, повышается степень дисбиоза и воспаления в пародонте. Оральные аппликации гелей кверцетинсо-держащих препаратов (Квертулин или Квертулидон) нормализуют иммунитет, устраняют дисбиоз и воспаление в пародонте после АХБТ.
Ключевые слова: антихеликобактерная терапия, паро-донт, иммунодефицит, дисбиоз, воспаление, кверцетин.
Т. В. Томтта
Харювський нацюнальний медичний ушверситет
КВЕРЦЕТИН ЩДВИЩУС НЕСПЕЦИФ1ЧНИЙ 1МУН1ТЕТ I ЗНИЖУС ДИСБЮЗ I ЗАПАЛЕННЯ В ПАРОДОНТ1 ЩУР1В, ЯК1 ОТРИМУВАЛИ АНТИХЕЛ1КОБАКТЕРНУ ТЕРАП1Ю
У щурiв, ят отримували антихелжобактерну тератю (АХБТ), знижуеться в сироватц mpoei i в яснах активтсть лiзоцима, збыьшуеться ступть дисбюзу та запалення в па-родонтi. Оральт аплтацп гелiв кверцетинвмiсних препа-ратiв (Квертулт або Квертулiдон) нормалiзують iMymi-тет, усувають дисбюз та запалення в пародонтi тсля АХБТ.
Ключовi слова: антихелжобактерна тератя, пародонт, iмунодефiцит, дисбюз, запалення, кверцетин.
T. V. Tomilina
State Establishment «Kharkov National Medical University»
QUERCETHIN INCREASES NONSPECIFIC
IMMUNITY AND REDUCES DYSBIOSIS AND INFLAMMATION IN PERIODONTIUM OF RATS, HAVING UNDERGONE ANTI-HELICOBACTER THERAPY
ABSTRACT
The aim. To estimate the state of nonspecific immunity, dysbiosis and inflammation in periodontium of rats, having undergone anti-helicobacter therapy (AHBT) and to correct them with quercetin.
The materials and the methods. 40 white rats of Vistar line, AHBT included daily taking of the following preparations during 8 days: Omeprazole - 1.3mg/kg, Amoxil - 50 mg/kg and Clarithromycin -7.5 mg/kg. In the capacity of Quercetin the gels "Quertulin" (quercetin + inulin + calcium citrate) and "Quertulidon" (Quercetin + imudon), applied daily with 0.5ml on oral mucous membrane during 11 days. Rats' euthanasia was carried out on the 12th day. The activity of lysozyme, urease, elastase and content of MDA was revealed in serum and ho-mogenate of gum. According to the ratio of the relative activities of urease and lysozyme the degree of dysbiosis in gum was calculated.
The findings. The reduction of the activity of lysozyme (the index of nonspecific immunity) in serum and in rats gum after AHBT, growth of urease activity (marker of microbe insemination) and degree of dysbiosis, as well as the level of markers of inflammation (MDA and elastase) in gum of rats, that underwent AHBT, was determined. The applications of gels Quertulin and Quertulidon increase activity of lysozyme, decrease the degree of dysbiosis and inflammation. The considerable difference between two Quercetin preparations was not observed. The conclusion AHBT causes the development of immunodeficiency, dysbiosis and inflammation in periodontium. These phenomens are depresed with oral applications of gels of quercetin-containing preparations.
Key words: anti-helicobacter therapy, periodontium, immunodeficiency, dysbiosis, inflammation, quercetin.
© Томилина Т. В., 2015.
В состав антихеликобактерного комплекса наряду с ингибиторами протонной помпы (например, омепра-золом) входит и ряд антибиотиков [1, 2].
Как известно, длительный прием антибиотиков приводит к развитию дисбактериоза, а затем и дис-биоза [3]. Полагают, что это обусловлено способностью антибиотиков угнетать специфический иммунитет, представленный лимфоцитарной системой [4], а также угнетать рост пробиотических бактерий [5].
Проведение антихеликобактерной терапии (АХБТ) нередко сопровождается возникновением различного рода осложнений со стороны соседних органов: кишечника, печени, поджелудочной железы [6, 7].
Имеется ряд данных об осложнениях при язвенной болезни желудка и в ротовой полости [8], которую некоторые рассматривают в качестве депо H. pylori [9]. Установлено развитие дисбиоза и воспаления в пародонте крыс, получавших антибиотик линкоми-цин [10].
Неспецифический иммунитет представлен такими факторами как лизоцим, трансферрин, лактофер-рин, пероксидаза, а также нейтрофильными фагоцитами [11]. Именно неспецифический иммунитет играет решающую роль в определении резистентности организма [12].
Важнейшими стимуляторами неспецифического иммунитета являются полифенольные вещества, среди которых особенно эффективны биофлавоноиды. Ранее было показано положительное действие ряда кверце-тинсодержащих средств (кверцетин, Квертулин) при экспериментальных иммунодефицитах [13, 14].
Цель настоящего исследования. Определение состояния неспецифического иммунитета, дисбиоза и воспаления в тканях пародонта крыс, получавших АХБТ, а также кверцетинсодержащие препараты.
В настоящей работе было использовано два новых кверцетинсодержащих антидисбиотических препарата: Квертулин (кверцетин + инулин + цитрат кальция) и Квертулидон (Квертулин + Иммудон).
Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на 40 белых крысах линии Вистар (самки, 10 месяцев, средняя живая масса 300 г), распределенных в 4 равных группы: 1-ая - контрольная (интактные), 2, 3 и 4 - опытные, которым вводили per os АХБТ ежедневно в течение 8 дней в дозе: омепра-зол - 1,3 мг/мг, амоксил - 50 мг/кг и кларитромицин -7,5 мг/кг. Крысы 3-й группы получали аппликации на слизистую оболочку полости рта (СОПР) геля «Квертулин» по 0,5 мл на крысу в течение 11 дней, а крысы 4-й группы получали в течение 11 дней аппликации на СОПР по 0,5 мл геля «Квертулидон».
Таблица 1
Активность лизоцима в десне и в сыворотке крови крыс, получавших АХБТ и кверцетинсодержащие препараты (М±т, п=10)
№№ п/п Группы Десна, ед/кг Сыворотка, ед/л
1 Контроль 151±11 131±8
2 АХБТ 103±10 107±4
р<0,05 р<0,05
124±10 132±5
3 АХБТ + Квертулин р>0,01 р1>0,05 р>0,8 р1<0,05
124±11 126±4
4 АХБТ + Квертулидон р>0,05 р1>0,05 р2=1 р>0,3 р1<0,05 р2>0,3
Примечание : р - в сравнении с гр. 1; р! -в сравнении с гр. 2; р2 -в сравнении с гр. 3.
Таблица 2
Активность уреазы и степень дисбиоза в десне крыс, получавших АХБТ и кверцетинсодержащие препараты (М±т, п=10)
№№ п/п Группы Уреаза, мк-кат/кг Степень дисбиоза, ед.
1 Контроль 0,223±0,023 1,00±0,15
2 АХБТ 0,380±0,029 р<0,01 2,51±0,33 р<0,01
3 АХБТ + Квертулин 0,324±0,022 р<0,05 р1>0,05 1,77±0,21 р<0,05 р1>0,05
4 АХБТ + Квертулидон 0,339±0,024 р<0,05 р1>0,05 р2>0,4 1,85±0,24 р<0,05 р1>0,05 р2>0,5
Примечание : см. табл. 1.
Эвтаназию животных осуществляли на 12-й день опыта под тиопенталовым наркозом (20 мг/кг) путем тотального кровопускания из сердца. Получали сыворотку крови и иссекали ткань десны. В гомогенате десны (20 мг/мл 0,05 М трис-НС1 буфера, рН 7,5) определяли активность лизоцима (показатель неспецифического иммунитета) бактериолитическим методом [15], активность уреазы (маркер микробного обсеменения) [16], уровень маркеров воспаления [17]: содержание малонового диальдегида (МДА) [18] и активность эластазы [19].
По соотношению относительных активностей уреазы и лизоцима рассчитывали степень дисбиоза по Левицкому [20].
Гели «Квертулин» и «Квертулидон» были изготовлены в соответствии с ТУ У 20.4-13903778032:2012 ООО «Биохимтех» (Одесса, Украина).
Статистическую обработку результатов осуществляли в соответствии с указаниями [21].
Результаты и их обсуждение. В таблице 1 представлены результаты определения активности ли-
зоцима в десне и в сыворотке крови крыс, получавших АХБТ. Из этих данных видно, что вышеуказанная терапия достоверно снижает активность лизоцима и в десне (на 31,8 %), и в сыворотке крови (на 19,1 %). В обоих случаях р<0,05. Это свидетельствует о снижении уровня неспецифического иммунитета в организме крыс, получавших АХБТ. Аппликации на СОПР гелей с Квертулином или Квертулидоном повышают активность лизоцима в сыворотке (р<0,05) и, в меньшей степени, в десне (р>0,05), причем существенной разницы между двумя препаратами не выявлено.
В таблице 2 представлены результаты определения активности уреазы и степени дисбиоза в десне крыс, получавших АХБТ. Видно, что АХБТ достоверно (в 1,7 раза) увеличивает в десне активность уреазы (показатель микробного обсеменения), при этом в 2,5 раза возрастает степень дисбиоза. Аппликации кверцетинсодержащих препаратов снижают и активность уреазы, и степень дисбиоза (правда, р>0,05, хотя и меньше <0,1).
Таблица 3
Уровень маркеров воспаления в десне крыс, получавших АХБТ и кверцетинсодержащие препараты (М±т, п=10)
№№ п/п Группы МДА, ммоль/кг Эластаза, мк-кат/кг
1 Контроль 13,2±1,2 20±1
2 АХБТ 19,1±1,5 33±2
р<0,05 р<0,01
14,4±1,3 26±2
3 АХБТ + Квертулин р>0,3 р1<0,05 р<0,05 р1<0,05
14,1±1,5 23±2
4 АХБТ + Квертулидон р>0,3 р1<0,05 р2>0,7 р>0,05 р1<0,05 р2>0,3
Примечание : см. табл. 1
В таблице 3 представлены результаты определения биохимических маркеров воспаления: эластазы и МДА. Из этих данных видно, что оба маркера воспаления достоверно возрастают после АХБТ: на 41,7 % (МДА) и на 65 % (эластаза). Оральные аппликации кверцетинсодержащих препаратов достоверно снижают оба маркера (вплоть до нормы).
Выводы. 1. Антихеликобактерная терапия снижает уровень неспецифического иммунитета в паро-донте.
2. Следствием этого является развитие дисбиоза и воспаления.
3. Оральные аппликации кверцетинсодержащих гелей повышают неспецифический иммунитет, снижают степень дисбиоза и воспаления.
Список литературы
1. Харченко Н. В. Сучасний шдхщ до проведения протигел^ кобактерно! терапп у хворих на виразкову хворобу / Н. В. Харченко, М. А. Барчук // Журнал практикуючого лжаря. - 2001. - № 3. -С. 24-27.
2. Гриценко I. I. Антихелжобактерна терашя гастродуодена-льно! патологи: усшхи, недол^, шляхи шдвищення ефективносп /
I. I. Гриценко, Н. Б. Щербишна // Лiкування та дiагностика. - 2001. - № 4. - С. 50-52.
3. Иманова Н. И. Побочные реакции при антибактериальной терапии / Н. И. Иманова // Клиническая антибиотикотерапия. -2003. - № 5 (25). - С. 12-16.
4. Бутенко Г. М. Иммунологические проблемы лекарственной терапии / Г. М. Бутенко // Вюник фармакологи та фармацп. -2005. - № 10. - С. 2-5.
5. Новик Г. И. Продукция гидролаз и антибиотикорезистент-ность молочнокислых и бифидобактерий / Г. И. Новик, Н. И. Аста-пович, Н. Е. Рябая // Прикладная биохимия и микробиология. -2007. - т. 43, № 2. - С. 184-192.
6. Циммерман Я. С. Helicobacter pylori-инфекция: внежелу-дочные эффекты и заболевания (критический анализ) / Я. С. Циммерман // Клиническая медицина. - 2006. - № 4. - С. 63-67.
7. Исаева Г. Ш. Возможное участие бактерии рода Helicobacter в патогенезе гепатобилиарных заболеваний / Г. Ш. Исаева // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопрокто-логии. - 2008. - № 4. - С. 14-22.
8. Десятниченко К. С. О механизме взаимосвязи ротовой фазы пищеварения, состояния полости рта и желудочной секреции / К. С. Десятниченко, В. К. Леонтьев // Институт стоматологии. -2007. - № 3. - С. 102-103.
9. Цимбалистов А. В. Инфицированность полости рта Helicobacter pylori как прогностический фактор течения язвенной болезни / А. В. Цимбалистов, А. Ю. Барановский, Н. С. Робакидзе // Новое в стоматологии. - 2001. - № 4 (94). - С. 74-77.
10. Левицкий А. П. Гепато-оральный синдром / А. П. Левицкий, С. А. Демьяненко. - Симферополь, 2012. - 140 с.
11. Ивашкин В. Т. Основные понятия и положения фундаментальной иммунологии / В. Т. Ивашкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2008. - № 4. -С. 4-13.
12. Левицкий А. П. Антимикробная функция печени / Левицкий А. П., Демьяненко С. А., Цисельский Ю. В. - Одесса: КП ОГТ, 2011. - 141 с.
13. Левицкий А. П. Пародонтопротекторное действие квер-тулина при экспериментальном иммунодефиците / А. П. Левицкий, Т. В. Томилина, И. И. Соколова // Вюник стоматологи. - 2013. -№ 2. - С. 2-6.
14. Васюк В. Л. Влияние квертулина на состояние печени крыс с преднизолоновым иммунодефицитом / В. Л. Васюк, А. П. Левицкий, А. И. Гоженко // Актуальные проблемы транспортной медицины. - 2014. - № 4, т. 2 (38-II). - С. 64-68.
15. Левицкий А. П. Лизоцим вместо антибиотиков / А. П. Левицкий. - Одесса: КП ОГТ, 2005. - 74 с.
16. Гаврикова Л. М. Уреазная активность ротовой жидкости у больных с острой и хронической инфекцией челюстно-лицевой области / Л. М. Гаврикова, И. Т. Сегень // Стоматология. - 1996. -Спецвыпуск. - С. 49-50.
17. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: метод, рекомендации / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса, 2010. - 16 с.
18. Стальная И. Д. Метод определения малонового диальде-гида с помощью тиобарбитуровой кислоты. В кн.: Современные методы в биохимии / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили. - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68.
19. Левицкий А. П. Методы определения активности эласта-зы и ее ингибиторов: методические рекомендации / А. П. Левицкий, А. В. Стефанов. - К.: ГФЦ, 2002. - 15 с.
20. Патент на корисну модель, Укра1на 43140, МПК (2009) G01N 33/48. СпоЫб оцшки ступеня дисбюзу (дисбактерюзу) орга-шв i тканин / Левицький А.П., Деньга О. В., Сел1ванська 1.О. [та ш.]. - Опубл. 10.08.2009, Бюл. № 15.
21. Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ «Статистика» / О. Ю. Реброва. - М.: Медиа Сфера, 2002.
REFERENCES
1. Kharchenko N. V., Barchuk M. A. The actual approach in an-ti-helicobacter therapy in patients with ulcerous disease. Zhurnal praktykujuchogo likarja. 2001; 3: 24-27.
2. Gritsenko I. I., Shcherbinina N. B. Anti-helicobacter therapy of gastroduodenal pathology: success, drawbacks, ways effectiveness raising. Likuvannja ta diagnostyka. 2001; 4: 50-52.
3. Imanova N. I. Concurrent reactions at antibacterial therapy. Klinicheskaya antibiotikoterapiya. 2003; 5(25): 12-16.
4. Butenko G. M. Immunologic problems of medicinal therapy. Visnykfarmakologii ta farmacii. 2005; 10: 2-5.
5. Novik G. I., Astapovich N. I., Ryabaya N. E. The production of hydrolases and antibiotic resistance of lactobacilli and bifidobacilli. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya. 2007; 43 (2): 184-192.
6. Tsimmerman Ya. S. Helicobacter pylori-infection: outergastric effects and diseases (the critical analysis). Klinicheskaya meditsina. 2006; 4: 63-67.
7. Isaeva G. Sh. The possible participation of Helicobacter bacteria in pathogenesis of hepatobiliary diseases. Rossiyskiy zhurnal gastroenterologii, gepatologii, koloproktologii. 2008; 4: 14-22.
8. Desyatnichenko K. S., Leont'ev V. K. Concerning the mechanism of interrelation of oral phase of digestion, oral state and gastric secretion. Institut stomatologii. 2007; 3: 102-103.
9. Tsimbalistov A. V., Baranovskiy A. Yu., Robakidze N. S. The infection of oral cavity with Helicobacter pylori as prognostic factor of ulcerous disease course. Novoe v stomatologii. 2001; 4(94): 74-77.
10. Levitsky A. P., Demyanenko S. A. Gepato-oralny sindrom [Hepato-oral syndrome]. Simferopol, 2012: 140.
11. Ivashkin V. T. The basic notions and the statements of the fundamental immunology. Rossiyskiy zhurnal gastroenterologii, gepatologii, koloproktologii. 2008; 4: 4-13.
12. Levitsky A. P., Demyanenko S. A., Tsiselskiy Yu. V. Antimikrobnaya funktsiya pecheni [The antimicrobic function of liv-e^^ss^ KP OGT, 2011: 141.
13. Levitsky A. P., Tomilina T. V., Sokolova I. I. Parodontoprotective action of quertulin at the experimental immunodeficiency. Visnyk stomatologii. 2013; 2: 2-6.
14. Vasyuk V. L., Gozhenko A. I., Levitsky A. P. Influence of kvertulina on rats liver with prednisolone immunodeficiency. Aktual'nye problemy transportnoy meditsiny. 2014; 4(2) (38-II): 64-68.
15. Levitsky A. P. Lizotsym vmesto antibiotikov [Lysozyme instead of antibiotics]. Odessa, KP OGT, 2005: 74.
16. Gavrikova L. M., Segen I. T. Urease activity of oral liquid in patients with acute odontogenic infection of maxillo-facial part. Stomatologiya. 1996; The extra issue :49-50.
17. Levitsky A. P., Denga O. V., Makarenko O. A. [i dr.]. Biokhimicheskie markery vospaleniya tkaney rotovoy polosti: metodicheskie rekomendatsii [Biochemical markers of inflammation of oral cavity tissue: method guidelines]. Odessa, KP OGT, 2010: 16.
18. Stalnaya I. D., Garishvili T. G. Metod opredeleniya malonovogo dialdegida s pomoshchyu tiobarbiturovoy kisloty [The method of revelation of malonic dialdehyde with thiobarbituric acid]. Moskva, Meditsina, 1977: 66-68.
19. Levitsky A. P., Stefanov A. V. Metody opredeleniya aktivnosti elastazy i eye ingibitorov: metodicheskie rekomendatsii [The methods of the determination of the activity of elastase and its inhibitors: method guidelines]. Kiev, GFK, 2002: 15.
20. Levitsky A. P., Denga O. V., Selivanskaya I. A. [ta in.]. The method of estimation of the degree of dysbiosis (dysbacteriosis) of organs and tissues. Patent of Ukraine 43140. IPC (2009) G01N 33/48. Application number u 200815092. Date of filling: 26.12.2008. Publ.: 10.08.2009. Bul. № 15.
21. Rebrova O. Yu. Statisticheskiy analiz meditsynskikh dannykh. Primeneniye paketaprikladnykh program "Statistika" [Statistical analysis of medical data. Application of the software package "Statistics"]. Moskva, Media Sfera, 2002.
Поступила 10.02.15
УДК: 611.311-008.87-02:615.212.7]-092.-085.33 В. Б. ФК
Львгський нацюнальний медичний ушверситет iM. Данила Галицького
ВПЛИВ ОПЮ1ДНОГО АНАЛЬГЕТИКА НА ВМ1СТ ТА АНТИБ1ОТИКОЧУТЛИВ1СТЬ М1КРОФЛОРИ РОТОВО1 ПОРОЖНИНИ ЩУР1В
В eKcnepuMeHmi проведено мiкробiологiчнe до^дження з бютотв ротово! порожнини щурiв при ennuei отогдного анальгетика. Чутливкть до aнтибiотикiв визначалась ди-скометричним методом. При ди опШда виявляли змти ае-робноi мжрофлори: появу патогенних, умовно-патогенних бактерт. St. aureus, як основний eтiологiчний фактор гтй-но-запальних процеЫв, -найбыьш чутливий до цeфтрiaксо-ну. Умовно-патогент стрептококи чутливi до ципрофлок-сацину.
Ключовi слова: ротова порожнина, отогдний анальгетик, мiкробiологiчнi до^дження.
© ФкВ. Б., 2015.
