CC BY
71
Соктоева Туяна Эрдэмовна - кандидат фармацевтических наук, преподаватель кафедры фармации медицинского факультета Бурятского государственного университета, e-mail: [email protected], тел. 83012445582.
Тараскин Василий Владимирович - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармации медицинского факультета Бурятского государственного университета, e-mail: [email protected], тел. 83012445582.
Павлов Игорь Артурович - кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармации медицинского факультета Бурятского государственного университета, тел. 83012445582.
Nikolaeva Irina Gennadevna - doctor of pharmaceutical sciences, associate professor, department of pharmacy, medical faculty, Buryat State University, e-mail: [email protected], ph. 83012445582.
Nikolaeva Galina Grigorevna - doctor of pharmaceutical sciences, professor, department of pharmacy, medical faculty, Buryat State University, e-mail: g-g [email protected], ph. 83012445582.
Radnaeva Larisa Dorzhievna - doctor of chemical sciences, professor, head of the department of pharmacy, medical faculty, Buryat State University, e-mail: [email protected], ph. 83012445582.
Soktoeva Tuyana Erdemovna - candidate of pharmaceutical sciences, senior lecturer, medical faculty, Buryat State University, e-mail: [email protected], ph. 83012445582.
Taraskin Vasily Vladimirovich - candidate of pharmaceutical sciences, senior lecturer, medical faculty, Buryat State University, e-mail: [email protected], ph. 83012445582.
Pavlov Igor Arturovich - candidate of pharmaceutical sciences, senior lecturer, medical faculty, Buryat State University, ph. 83012445582.
УДК 619:636.4
© Е.В. Курятова
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ И МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПЕЧЕНИ ПОРОСЯТ ПРИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОМ ГАСТРОЭНТЕРИТЕ И ЕГО КОРРЕКЦИИ ПРОБИОТИЧЕСКИМИ ПРЕПАРАТАМИ
Структурно-функциональные изменения в печени при гастроэнтерите характеризуются острыми застойными процессами. Отмечаются явления атрофии и дистрофии паренхиматозных клеток, общие нарушения архитектоники органов и клеточных элементов. Максимальное влияние на восстановление структурнофункционального состояния печени отмечено при применении интестевита.
Ключевые слова: структурно-функциональные изменения печени, гастроэнтериты, пробиотические препараты.
E.V. Kuryatova
HISTOLOGICAL AND MORPHOMETRICAL CHANGES IN THE LIVER OF PIGS AT NONSPECIFIC GASTROENTERITIS AND ITS CORRECTION BY PROBIOTIC PREPARATIONS
The structural and functional changes in liver at gastroenteritis are characterized by acute congestive processes.The phenomena of atrophy and degeneration of parenchymal cells, total violation of architectonics and cellular elements are noticed. The maximum influence on restoration of structural and functional state of liver is noticed in the course of in-testevit application.
Keywords: structural and functional changes in liver, gastroenteritis, probiotic preparations.
Известно, что гастроэнтерит является постоянным спутником новорожденных в первые дни жизни и, как правило, продолжает беспокоить молодняк и в более старшем возрасте [3; 4].
Поэтому одним из важнейших направлений современной науки ветеринарной медицины является разработка и совершенствование средств и методов ранней диагностики болезней молодняка сельскохозяйственных животных и на этой основе создание надежной защиты от болезней, среди которых часто регистрируются болезни пищеварительной системы.
Цель данных исследований изучить гистологические и морфометрические изменения печени поросят, больных неспецифическим гастроэнтеритом, до и после применения пробиотических препаратов.
Материалы и методы
Исследования проводили в период с 2006 по 2010 г. в лаборатории кафедры физиологии и незаразных болезней животных, Института ветеринарной медицины и зоотехнии Дальневосточного государственного аграрного университета, а также в ФГУСП «Поляное», села Кресто-
воздвиженки Константиновского района Амурской области.
Объектом исследования были поросята-отъемыши живой массой 10-13 кг в возрасте 3540 дней. Поросята содержались в маточниках. Животных кормили 5 раз в день, в одно и то же время суток. Рацион состоял из комбикорма СПК-3 для поросят-отъемышей и овсяной каши. Поение осуществлялось при помощи автоматической поилки.
Для проведения опыта среди поросят-отъемышей отбирались животные с явной клинической картиной гастроэнтерита, из которых были сформированы четыре группы по 10 голов в каждой. Одна группа - контрольная, три -опытных. В контрольной группе лечение проводилось по схеме, принятой в хозяйстве, применяли антибиотик амоксоил-ретард (амоксицил-лин) внутримышечно по 1 мл/10 кг 1 раз в день. В опытной 1 - применяли препарат «Стрепто-бифид» на фоне лечения предприятия, в опытной 2 - «Ветом 3», в опытной 3 - применяли «Интестевит» на фоне лечения, принятого в хозяйстве.
Для установления гистологических и морфометрических изменений печени на микроскопическом уровне после лечения материал получали от вынужденно убитых и павших животных. Вскрытие проводили в ФГУСП «Поляное», села Крестовоздвиженки Константиновского района Амурской области и в прозектории ИВМЗ ДальГАУ.
Для установления микроскопических изменений брался патологический материал для гистологического исследования (печень), который фиксировали в 10%-ном водном нейтральном формалине, дегидрировали в спиртах возрастающей крепости, заливали в парафиновые блоки, делали гистосрезы на санном микротоме МС-2 толщиной 4-6 мкм и окрашивали гематоксилином и эозином. Фотографии получали с помощью микроскопа Альтами 104 и цифровой фотосъемки «8аш8и^ 8Т 50». Микрометриче-
ские исследования печени выполняли при помощи окуляр-микрометра МОВ-1-15М. По-стмортальные исследования печени проводили с учетом рекомендаций А.В. Жарова и соавт. [1]. Оценку гистологических данных проводили по методике Н.С. Кухаренко и С.Б. Стефанова [2].
Математическую обработку данных осуществляли с помощью программы Microsoft Excel 2003. Достоверность различий сравниваемых величин определяли по t- критерию Стьюдента и F- критерию Фишера.
Результаты исследований
При гистологическом исследовании печени поросят больных гастроэнтеритом нами выявлялось преобладание картины клеточной инфильтрации, дистрофии гепатоцитов. Паренхима органа полиморфна, балочное строение имело тенденцию к нарушению. Ткань печени кро-венаполнена. В отдельных дольках центральные вены и синусоидальные сосуды резко расширены и заполнены элементами крови. В отдельных случаях, в основном в центре долек, встречались участки кровоизлияния, где и отмечалось разрушение паренхимы печени.
Клетки печени, как указывалось выше, в основном в состоянии дистрофии различного характера, но с преобладанием картины мелкой и крупной зернистости. В центральной части долек печени гепатоциты подвергнуты дегенеративным изменениям. В гепатоцитах наблюдалось как уменьшение размеров ядер и стертость рисунка (кариопикноз), так и увеличение их размеров и более светлая окраска (кариолизис) (рис. 1).
Клетки периферических отделов долек печени имеют зернистую цитоплазму, а ядра их светлые. Среди гепатоцитов, подвергшихся зернистой дистрофии, располагались печеночные клетки, находящиеся в состоянии некроза и некробиоза. Купферовские клетки - в стадии пролиферации, увеличены в объеме, местами образовали скопления.
Рис. 1. Зернистая дистрофия печени. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.: ок. 15, об. 90. 1 - зернистость в цитоплазме клетки; 2 - эритроциты в синусоидном капилляре;
3 - кариолизис; 4 - плазмолизис
Также отмечалось уменьшение числа неизмененных и двухъядерных клеток, увеличение голоядерных, появление безъядерных клеток печени. Отсутствие двухъядерных печеночных клеток являлось отражением резкого снижения регенераторной способности печени. В результате цитолиза некрозы представляли собой очаги гибели отдельных гепатоцитов или небольших групп клеток. Некроз клеток преимущественно локализовался в центральных зонах долек печени. Значительное расширение портальных трактов приводило к сдавливанию желчных протоков. Явления дегенерации печеночных клеток имеют тенденцию к прогрессированию, а печеночные дольки утрачивали свое трабекулярное строение. В некоторых случаях наблюдались глыбки гемосидерина в синусоидных капиллярах и участки жировой дистрофии. При этом периферическая часть долек окрашена светлее, чем центры. В клетках периферии видны пустоты, соответствующие местам жира, растворившегося в спирте и ксилоле. Печеночные клетки, содержащие жир, круглой формы, увеличены в объеме. Ядро и протоплазма отнесены к одному из полюсов клетки и сдавлены. Ядра печеночных клеток уменьшены в объеме,
сморщены и интенсивно окрашены гематоксилином в темный цвет. Трабекулярное строение долек нарушено. Морфометрические изменения в печени подопытных поросят представлены в таблице 1. Из нее видно, что у больных поросят отмечалась резкая сосудистая реакция, выражающаяся в увеличении диаметра вен печени. Так, диаметр поддольковой вены увеличился в 2,5 раза по сравнению со здоровыми животными.
В результате венозного застоя печени диаметр центральной дольковой вены также увеличился в 2 раза. Со стороны триад печени больных поросят отмечалось увеличение диаметра междольковых вен в 2,2 раза. Венозное полнокровие сопровождалось артериальной гиперемией, что выражалось в увеличении диаметра артерий триад на 72%. Также наблюдались хо-лестатические явления, которые проявлялись расширением диаметра желчного протока на 3,8 мкм по сравнению со здоровыми животными. После проведенного лечения в контрольной группе гистологическая картина печени незначительно отличалась от той, что наблюдали до лечения.
Таблица 1
Морфометрические изменения печени подопытных поросят до лечения, n=5, M±m
Показатели Животные
Здоровые Больные
Диаметр поддольковой вены, мкм 53,2±1,82 133,9±3,50*
Диаметр центральной вены, мкм 35,4±1,37 70,8±2,18**
Триада:
Диаметр артерии, мкм 5,9±0,39 10,2±0,88**
Диаметр вены, мкм 29,5±1,61 65,1±3,04*
Диаметр желчного протока, мкм 8,9±0,72 12,7±1,18*
Примечание: * - р < 0,05, ** - р < 0,01
Балочное строение слабое, однако видны со-единительно-тканные септы долек. Дольки печени имели нечеткие границы, полиморфны, уменьшены в размерах. Синусоиды расширены, заполнены кровью. Междольковое пространство отечно, инфильтровано гистиолимфоцитарными и купферовскими клетками. Наблюдались небольшие очаги некроза гепатоцитов, гиперемия сосудов печени.
Центральные вены умеренно кровенаполне-ны, вокруг некоторых имелось разрастание
фиброзной ткани, а также инфильтрация лим-фогистиоцитарными клетками, распространяющаяся на центральные части долек.
Гепатоциты находились в стадии атрофии и дистрофии, ядра слабо окрашены. Отмечался гемосидероз. В этом случае дольки уменьшены в размерах, в центральных отделах синусоиды расширены отдельными, или в виде небольших скоплений, клетками, содержащими бурый пигмент (рис. 2).
Рис. 2. Печень поросят после лечения в контрольной группе. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.: ок. 15, об. 10. 1 - гепатоциты в стадии дистрофии, 2 - глыбки гемосидерина в просветах капилляров
На микроскопическом уровне в печени поросят опытных групп наблюдалась положительная динамика. Нормализация балочного строения, хорошо выражена дольчатость, в области триад еще наблюдались лимфоидные клетки. Признаки белковой и жировой дистрофии отсутствовали, зернистость сохранялась за счет гранул желчных пигментов. Сосуды умеренно
кровенаполнены. Наряду с этими изменениями имелись и явления регенерации, которая происходила главным образом путем митотического деления, о чем говорит наличие двухъядерных клеток (рис. 3). Гепатоциты полигональной формы, с однородно прокрашенной цитоплазмой. Ядро округлой формы с хорошо заметными ядрышками.
Рис. 3. Печень поросят в группе после лечения интестевитом. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.: Ок. І5, об. 4G. І - митоз; 2 - двухъядерные гепатоциты
Таким образом, при гистологическом анализе печени было выявлено, что в контрольной группе, где лечение проводили по схеме хозяйства, наблюдали полнокровие сосудов и синусоидальных пространств печени, нарушение балочного строения, полиморфность долек, очаговый некроз и гемосидероз. В группах, где лечение проводили препаратами стрептобифид, ветом 3 и интестевит, было заметно улучшение балочного строения, сосуды были умеренно полнокровны, дольчатое строение хорошо выражено, гепатоциты полигональной формы, имелись двухъядерные клетки.
Данные гистологического исследования показали, что в группе, где лечение проводили амоксициллином, имелись нарушения строения печени. В группах, где лечение проводили с ис-
пользованием стрептобифида, ветома 3 и инте-стевита, были выявлены структурные улучшения печени. Для подтверждения гистологических исследований был использован морфометрический метод.
Из данных таблицы 2 видно, что у поросят, получавших помимо амоксициллина стрепто-бифид, ветом 3 и интестевит, резко спала сосудистая реакция. Наблюдалось достоверное уменьшение диаметра поддольковой вены в первой опытной группе на 20,7% (р<0,001), в группе, где применяли ветом 3, влияние оказалось меньше - на 15,4% (р<0,001), этот показатель максимально снизился у животных, которым назначали интестевит - на 21,1% (р<0,001) по сравнению с контролем.
Таблица 2
Морфометрические изменения печени при неспецифическом гастроэнтерите поросят
после лечения, n=10, M±m
Показатели Группы
Контрольная Опытная 1 Опытная 2 Опытная 3
Диаметр поддольковой вены, мкм 94,2±1,60 74,7±2,24*** 79,7±2,07 *** 74,3±1,48 ***
Диаметр центральной вены, мкм 50,5±1,92 41,6±1,53* 43,9±1,09** 40,0±1,03**
Триада:
Диаметр артерии, мкм 6,8±0,64 5,7±0,34* 5,0±0,31** 5,4±0,42*
Диаметр вены, мкм 43,9±2,14 32,2±1,64** 33,5±1,60** 30,7±1,73**
Диаметр желчного протока, мкм 9,8±0,77 6,6±0,29* 7,6±0,63 5,8±0,47**
Примечание: * - p<0,05, ** - p<0,01, *** - p<0,001
личением желчного протока до 13,4±1,13 мкм (р>0,05). Отмечаются явления атрофии и дистрофии паренхиматозных клеток, общие нарушения архитектоники органов и клеточных элементов.
В группе, где применяли интестевит, снизились явления портальной гипертензии, о чем свидетельствует уменьшение диаметра под-дольковой вены до 74,7±2,24 мкм (р>0,05), центральной вены - до 43,5±3,15 мкм (р>0,05), что на 21,3% и 13,9% меньше, чем в контрольной группе.
Таким образом, более выраженные улучшения в гистологической и морфометрической картине печени после выздоровления отмечали в группе, где проводили лечение интестевитом.
Литература
1. Жаров А.В., Иванов И.В., Стрельников А.П. Вскрытие и патоморфологическая диагностика болезней животных - М., 2000. - 400 с.
2. Стефанов С.Б., Кухаренко Н.С. Ускоренные способы количественного сравнения морфологических признаков и систем : учеб. пособие. - Благовещенск: Изд-во БСХИ, 1989. - 64 с.
3. Сулейманов С.М., Шабунин С.В., Паршин П.А. Структурно-функциональные механизмы возникновения, развития патологии у молодняка животных // Материалы всерос. науч.-метод. конф. патологоанатомов ветеринарной медицины. - Омск, 2000. -С. 275-276.
4. Третьяков А. Д. Проблемы диагностики, терапии и профилактики незаразных болезней животных и пути их решения // Проблемы диагностики,
Диаметр центральной дольковой вены максимально снизился в третьей опытной группе, где применяли интестевит, - на 26,3 % (р<0,05). В первой и второй опытных группах этот показатель достоверно снизился на 16,1% (р>0,05) и 24,7% (р>0,05) соответственно. В контрольной группе все еще наблюдалась венозная гиперемия, диаметр центральной вены был на 42,7% больше показателя здоровых животных.
В триадах печени поросят после лечения отмечалось снижение диаметра междольковых вен в первой опытной группе на 26,7%, во второй -на 27,8% и в третьей - на 30,1%. В контрольной группе этот показатель был на 48,8% больше, чем у здоровых животных. Диаметр артерий триад в первой опытной группе достоверно снизился на 1,1 мкм (р<0,05), во второй и третьей -на 1,8 мкм (р<0,05) и 1,4 мкм (р>0,05) соответственно. Диаметр желчных протоков также снизился в первой опытной группе по сравнению с контрольной на 32,7%, на 22,4% - во второй и максимально (на 38,8%) - в третьей опытной группе.
Заключение
Структурно-функциональные изменения в печени при гастроэнтерите характеризуются острыми застойными процессами, что проявляется увеличением диаметра кровеносных сосудов - поддольковой вены до 142,8±2,83 мкм (р>0,05) и центральной вены до 75,8±3,01 мкм (р>0,05). Также увеличиваются показатели протоковой системы органов, что проявляется уве-
Е.В. Курятова. Биохимические показатели крови поросят-отъемышей при неспецифическом гастроэнтерите до и после лечения
терапии и профилактики незаразных болезней сель- вотноводстве: тез. докл. всесоюз. конф. Ч.1. - Воро-
скохозяйственных животных в промышленном жи- неж, 1986. - С. 3-4.
Курятова Елена Вячеславовна - кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры патологии, морфологии и физиологии, факультет ветеринарной медицины и зоотехнии ФГБОУ ВПО «Дальневосточный аграрный государственный университет», тел.531052, e-mail: [email protected]
Kuryatova Elena Vyacheslavovna - candidate of veterinary sciences, associate professor, department of pathology, morphology and physiology, faculty of veterinary medicine and animal science Far East State Agrarian University, ph. 531052, e-mail: korol2702 @ mail. ru
УДК: 611.3636.4-053.81
© Е.В. Курятова
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПОРОСЯТ-ОТЪЕМЫШЕЙ ПРИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОМ ГАСТРОЭНТЕРИТЕ ДО И ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ
При применении пробиотических препаратов происходят восстановительные процессы в печени и поджелудочной железе, на что указывает снижение количества щелочной фосфатазы, а-амилазы, нормализация коэффициента де Ритиса (АСТ/АЛТ) в сыворотке крови, а также снижение количества билирубиновых фракций и глюкозы до физиологических пределов.
Ключевые слова: пробиотические препараты, гастроэнтерит, биохимия крови.
E.V. Kuryatova
BLOOD BIOCHEMICAL PARAMETERS OF WEANED PIGLETS AT NON-SPECIFIC GASTROENTERITIS BEFORE AND AFTER TREATMENT
While application of probiotic preparations the rehabilitation processes in liver and pancreas occur, it is indicated by a reduction of the amount of alkaline phosphatase, a-amylase, normalization coefficient De Ritis (AST / ALT) levels in serum, as well as by reduction of the amount of bilirubin fractions and glucose up to physiological limits.
Keywords: probiotic preparations, gastroenteritis, blood biochemistry.
Эффективность ведения свиноводства зависит от ветеринарного благополучия свиноводческих хозяйств. Заболевания молодняка свиней продолжают оставаться одной из серьезнейших факторов, сдерживающих развитие свиноводства и наносящих ему значительный ущерб [4].
Согласно данным ежегодной статистической отчетности, представленной Департаментом ветеринарии МСХ РФ, в общей структуре заболеваний подсосных поросят болезни органов пищеварения составляют до 75%, из них до 20% занимают диспепсии, 26-35% - гастроэнтериты. Заболевания в раннем постнатальном периоде жизни животных распространены повсеместно, развиваются в первые часы жизни, сопровождаются тяжелыми токсическими явлениями, характеризуются высокой смертностью [3]. Гибель поросят от желудочно-кишечных болезней достигает 40-50% [1]. На этом фоне профилактика и лечение гастроэнтерита приобретает большую значимость.
Цель данного исследования - изучить биохимическую картину крови поросят, больных
неспецифическим гастроэнтеритом, до и после лечения пробиотическими препаратами.
Материалы и методы
Исследования проводили в период с 2006 по 2010 г. в лаборатории кафедры физиологии и незаразных болезней животных Института ветеринарной медицины и зоотехнии Дальневосточного государственного аграрного университета, а также в ФГУСП «Поляное», села Крестовоз-движенки Константиновского района Амурской области.
Объектом исследования были поросята-отъемыши живой массой 10-13 кг, в возрасте 35-40 дней. Поросята содержались в маточниках. Животных кормили 5 раз в день, в одно и то же время суток. Рацион состоял из комбикорма СПК-3 для поросят-отъемышей и овсяной каши. Поение осуществлялось при помощи автоматической поилки. Для проведения опыта среди поросят-отъемышей отбирались животные с явной клинической картиной гастроэнтерита, из которых были сформированы четыре группы по 10 голов в каждой. Схема лечения представлена в таблице 1.
