CC BY
10
DOI 10.31588/2413-4201-1883-244-4-81-86
УДК 636.5.087.8
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИОКАРДА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ НУКЛЕОСТИМА
Долинин И.Р.1 - аспирант, Базекин Г.В.1 - к.б.н., доцент, Сковородин Е.Н1 - д.в.н., профессор, Лебедева А.И.2 - д.б.н., ст.н.с. отдела морфологии
1ФГБОУ ВО «Башкирский государственный аграрный университет» 2ФГБУ «Всероссийский центр глазной и пластической хирургии» МЗ РФ
Ключевые слова: цыплята-бройлеры, нуклеостим, гистологические исследования, мышечные волокна, миокардиоциты
Keywords: broiler chickens, nucleostim, histological studies, muscle fibers, myocardiocytes
В последние годы на птицеводческих предприятиях России, в производстве мясной продукции широко используются бройлеры, но их морфология и возрастная динамика не изучены. Наибольшей популярностью пользуются бройлеры кросса «РОСС 308», позволяющие набрать максимальную массу и развитие к 40 суткам постинкубационного онтогенеза. Сердце является одним из самых важных органов животных, что связано с ролью этого органа в процессе кровообращения, передвижение крови с питательными веществами и кислородом, и регуляцией нормального функционирования и роста всех органов и организма в целом. Изучение морфологии сердца позволяет не только раскрыть вопрос об особенностях возрастной морфологии, топографии развития данного органа у домашних птиц и животных, но и до настоящего времени остается актуальным. Раскрытие закономерностей морфофунк-циональной адаптации сердечнососудистой системы и всего организма к воздействию гиподинамии при клеточном содержании - физиологически значимых стрессоров и применение иммуномодули-ющих, иммуностимлирующих и противовирусных препаратов, является актуальной и для разработки обоснованных методов профилактики повреждения миокарда, а также для поиска наиболее эффективных методов, обеспечивающих структурную стабилизацию сердечно-сосудистой системы, и повышение резистентности организма в целом. Актуальность исследования обуславливается не только определением
возрастных особенностей постинкубационного развития сердца бройлеров, но и влияния нового биологического стимулятора Нуклеостим при выращивании бройлеров.
Материал и методы исследований. В данной работе мы представили описания материала и методов исследований, использованных для более глубокого изучения влияния биопрепарата Нукле-остим на организм цыплят-бройлеров. Для проведения исследований было использовано 50 цыплят-бройлеров кросса «РОСС 308». Опытные и контрольная группы животных содержались в одинаковых условиях на специальном, сбалансированном пищевом рационе со свободным доступом к воде. В работе использованы: биологический стимулятор Нуклеостим. Данный препарат вводили в рацион птиц в нужных концентрациях и задавали вместе с кормом согласно инструкции по применению. Биологический материал фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заливали в парафин по общепринятой методике. Срезы готовили на микротоме LEICA RM 2145 (Германия), которые окрашивали гематоксилином и эозином по Ван-Гизону.
Результаты исследований. В целом миокард цыплят-бройлеров был представлен мышечными волокнами, состоящими из кардиомиоцитов, которые контактировали между собой посредством характерных для миокарда вставочных дисков. Клетки были расположены в одновек-
торном порядке и имели достаточно высокую клеточную плотность. Межволоконные промежутки и периваскулярные пространства были несколько расширены, ве-
В миокарде обнаруживались признаки воспаления. Встречались обширные скопления псевдоэозинофилов, геморрагическое пропитывание эритроцитами межволоконных промежутков. В кровеносных сосудах признаков стаза и сладжа форменных элементов крови не выявлено.
Эндомизий при окраске по Ван-Гизону обнаруживался в виде тонких прослоек коллагеновых волокон, как между мышечными волокнами, так и возле кровеносных сосудов, в основном, артериального бассейна. После применения нукле-остима, при исследовании, было выявлено, что инфильтрация воспалительными клетками была значительно снижена. В интер-стициальных пространствах выявлялись единичные лимфоциты и эритроциты. Скоплений эозинофилов не обнаружива-
роятно, вследствие межуточного отека. В них располагались лимфоциты, макрофаги, эритроциты.
лось. Явлений отека не выявлялось. Мышечные клетки плотно прилегали друг к другу. Между ними четко определялись вставочные диски. Клетки сохраняли периодичную поперечную исчерченность. Между волокнами выявлялись тонкие кол-лагеновые волокна, представляющие эндо - и перимизий миокарда без признаков склерозирования. Кровеносные сосуды и периваскулярный бассейн был без особенностей. При иммуногистохимическом выявлении Т1шр-2+ клеток в миокарде цыплят-бройлеров, установлено, что в опытной группе количество позитивно окрашенных клеток трехкратно
превосходило значения контрольной. Так, медиана в контроле составляла - 2,78 (2-4), в опыте - медиана 6,14 (3-9) клеток в поле зрения (Рисунок 5, 6, 7, 8). при р <0,05.
Чу '
Рисунок 1 - Миокард цыплят-бройлеров до применения нуклеостима. Межуточный отек, скопления эозинофилов. Окраска гематоксилином и эозином. Рисунок 2 - Миокард цыплят-бройлеров до применения нуклеостима. Межуточный отек, скопления псевдоэозинофилов. Окраска гематоксилином и эозином.
11111
Рисунок 3 - Эндомизий в миокарде цыплят-бройлеров до применения нуклеостма. Окраска по ван-Гизон. Рисунок 4 - Миокард цыплят-бройлеров после применения нуклеостима. Окраска гематоксилином и эозином
□ Median
2 . __. ПЗ 25%-75%
I Non-Outlier Range о Outliers
1 -■-'-'-■- * Extremes
контроль опыт
Рисунок 5 - Численность Timp2+ клеток в миокарде цыплят-бройлеровв контрольной и опытной группах в полях зрения при увеличении в 400 раз. Ось y - количество клеток (штуки), ось x - экспериментальные группы
щ 83У
Рисунок 6 - Т1шр-2+ клетки в миокарде опытной группы. Иммуногистохимическое окрашивание антителами к Ттр-2. Непрямая стрептавидин-биотиновая система детекции с докраской гематоксилином Рисунок 7 - Т1шр-2+ клетки в просвете кровеносного сосуда. Миокард опытной группы. Иммуногистохимическое окрашивание антителами к Ттр-2. Непрямая стрептави-дин-биотиновая система детекции с докраской гематоксилином
Рисунок 8 - Т1шр-2+ клетки в просвете кровеносного сосуда и позитивное окрашивание цитоплазмы кардиомиоцитов. Иммуногистохимическое окрашивание антителами к Т1шр-2. Непрямая стрептавидин-биотиновая система детекции с докраской гематоксилином
Рисунок 9 - Численность PCNA+ клеток в миокарде в полях зрения при ув. Х650. Ось у- количество клеток (штуки), ось х- экспериментальные группы.
11 Ив
Рисунок 10 - PCNA+ клетки в миокарде контрольной группе. Иммуногистохимиче-ское окрашивание антителами к ядерному антигену пролиферирующих клеток PCNA. Непрямая стрептавидин-биотиновая система детекции c докраской гематоксилином Рисунок 11 - PCNA+ клетки в миокарде опытной группе. Иммуногистохимическое окрашивание антителами к ядерному антигену пролиферирующих клеток PCNA. Непрямая стрептавидин-биотиновая система детекции c докраской гематоксилином
При исследовании пролиферативно активных ядер кардиомиоцитов - РСКЛ, которые часто встречаются в делящихся клетках у молодых особей птиц при гипертрофии миокарда, были выявлены количественные отличия между экспериментальными группами. Так, в контрольной группе количество делящихся ядер в миокарде было двукратно ниже, чем в опытной группе. Медиана в контрольной группе составила 40,28 (34-49), в опытной 82 (61111) (р <0,05) (Рисунок 9, 10, 11).
Таким образом, после применения нуклеостима выявлялись признаки снижения воспалительной инфильтрации, исчезновения отека. Численность PCNA+ позитивных клеток была увеличена в два раза, что свидетельствовало об активации внутриклеточного кардиомиогенеза - гипертрофии кардиомиоцитов. Клетки стромы и
кардиомиоциты секретировали Timp-2 в три раза активней, чем в контрольной группе, что способствовало кардиопротек-ции, инициированой использованием нук-леостина.
Заключение. Использование биологического стимулятора Нуклеостим оптимизирует структуру миокарда, препятствует развитию в органе нарушений клеточных механизмов метаболизма, ведущих к развитию структурных изменений. Результаты исследований показывают, что при применении Нуклеостима инфильтрация воспалительными клетками значительно снижается, это говорит о том, что биопрепарат способствует снижению риска возникновения воспалительных процессов в миокарде. Также видно, что мышечные клетки плотно прилегают друг к другу и сохраняют периодичную поперечную
исчерченность, это подтверждает то, что применение нуклеостима не влияет на структуру миокарда цыплят-бройлеров.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Бронникова, Г.З. Влияние анти-оксидантов на печень птиц мясных пород / Г.З. Бронникова, О.В. Дюдьбин, Е.Н. Ско-вородин // Морфология. - 2020. - Т. 157. -№ 2-3. - С. 40.
2. Пирс, Э. Гистохимия / Э. Пирс. -М., 1962. - С. 751-754.
3. Сковородин, Е.Н. Морфологическое обоснование применения антиокси-дантов при выращивании птицы / Е.Н. Сковородин, Г.В. Базекин, Г.З. Бронникова, О.В. Дюдьбин // Вестник Башкирского государственного аграрного университета. - 2020. - № 1 (53). - С. 114125.
4. Сулейманова, Г.Ф. Возможности получения экологически безопасной продукции животноводства / Г.Ф. Сулеймано-ва // Актуальные проблемы агропромышленного производства. Материалы Международной научно практической конферен-
ции, 23-25 января. - Курск. - 2013. - С. 298-300.
5. Dabeva, M.D. Hepatic Stem Cells and Liver Repopulation, Semin / M.D. Dabeva, D.A. Shafritz // Liver. Dis. -2003. - Vol. 23. - № 4. - P. 349-362.
6. Mc Cormick, D. The complexities of proliferating cell nuclear antigen / D. Mc Cormick, P.A. Hall // Histopathology. - 1992. - V. 21. - P. 591-543.
7. Skovorodin, E. Antioxidant influence on poultry liver morphology and hepato-cyte ultrastructure / E. Skovorodin, G. Bron-nikova, G. Bazekin [et al.] // Veterinary World. - 2019. - Т. 12. - № 11. - P. 17161728.
8. Kim, W.U. Elevated matrix metal-loproteinase-9 in patients with systemic sclerosis Arthritis / Kim W.U., Min S.Y., Cho M L. [et al.] // Res Ther. - 2005. - V. 7(1). -P. 71 -79.
9. Ito, T. Effects of antiglaucoma drops on MMP and TIMP balance in conjunc-tival and subconjunctival tissue / I. Tto // Invest Ophthalmol Vis Sci. - 2006. - V. 47. - P. 823-830.
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МИОКАРДА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ НУКЛЕОСТИМА
Долинин И.Р., Базекин Г.В., Сковородин Е.Н., Лебедева А.И.
Резюме
В статье представлены результаты исследований применения биологического стимулятора Нуклеостим при выращивании цыплят-бройлеров кросса РОСС-308. Особое внимание уделяется морфологической характеристике миокарда цыплят-бройлеров, а также влиянию на миокард биостимулятора Нуклеостим на тканевом и клеточном уровне. Проведенные гистологические исследования показали, что биологический стимулятор Нуклеостим оптимизирует структуру миокарда, препятствует развитию в органе нарушений клеточных механизмов метаболизма, ведущих к развитию структурных изменений.
HISTOLOGICAL CHARACTERISTICS OF THE MYOCARDIAL OF BROILER CHICKENS WHEN USING NUKLEOSTIM
Dolinin I.R., Bazekin G.V., Skovorodin E.N., Lebedeva A.I.
Summary
The article presents the results of studies on the use of the biological stimulator Nucleostim when growing broiler chickens of the POCC-308 cross. Particular attention is paid to the morphological characteristics of the myocardium of broiler chickens, as well as the effect on the myocardium of the biostimulator Nucleostim at the tissue and cellular levels. Histological studies have shown that the biological stimulator Nucleostim optimizes the structure of the myocardium, prevents the development of disorders of cellular metabolic mechanisms in the organ, leading to the development of structural changes.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-244-4-86-92 УДК 575.174.015.3:636.082:636.2
ОЦЕНКА БЫКОВ-ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ С РАЗНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ГЕНОВ СОМАТОТРОПИНОВОГО КАСКАДА ПО МОЛОЧНОЙ ПРОДУКТИВНОСТИ И КАЧЕСТВУ МОЛОКА БЛИЖАЙШИХ ЖЕНСКИХ ПРЕДКОВ
Загидуллин Л.Р.1 - к.б.н., доцент, Гилемханов И.Ю.1 - аспирант, Зарипов Р.У.1 - прикрепитель, Ахметов Т.М.1 - д.б.н., профессор, Ламара Мохаммед1 - аспирант, Тюлькин С.В.2 - д.б.н., ст. преподаватель
1ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана» 2ФГБОУ ВО «Казанский государственный аграрный университет»
Ключевые слова: бык-производитель, генотип, ПЦР, ПДРФ, PIT1, PRL, GH, GHRH, IGFI, молочная продуктивность
Key words: bull-producer, genotype, PCR, RFLP, PIT1, PRL, GH, GHRH, IGFI, milk productivity
Значимый интерес представляют гены соматотропинового каскада крупного рогатого скота, белковые продукты которых являются ключевыми элементами общей гуморальной цепи, участвующей в процессах лактации, роста и развития млекопитающих [2, 4]. Следовательно, изучение полиморфизма генов гипофизарного фактора транскрипции ^ГЛ), пролактина ^ЯЬ), соматотропина ^Н), соматотро-пин-рилизинг-гормона ^НЯН), инсули-ноподобного фактора (IGFI) является перспективным с точки зрения поиска маркеров, связанных с показателями молочной и мясной продуктивности у крупного рогатого скота [1, 2, 4, 10, 11, 12, 13, 14].
Всесторонняя обеспеченность качества и безопасности молочного сырья для предприятий по его переработке является гарантией стабильной выработки молоч-
ных продуктов, таких как кисломолочные изделия, продукты сепарации молока, высокотехнологичные молочные изделия, консервы, в большей степени функциональная и геродиетическая продукция [3, 5, 6, 7, 8, 9, 15].
Целью настоящей работы являлось в проведении оценки по происхождению голштинизированных чёрно-пёстрых быков-производителей с разными генотипами генов соматотропинового каскада в условиях Республики Татарстан.
Материал и методы исследований. Исследования проводились на выборке, представленной из 58 быков-производителей голштинизированной чёрно-пёстрой породы, принадлежащих АО «Головное племенное предприятие «Элита», Высокогорского района, Республика Татарстан.
