CC BY
68
УДК 612.111.19:618.36:616.523 И.В. Довжикова
ГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХОЛЕСТЕРИНА В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ,
ОСЛОЖНЕННОЙ ГЕРПЕСОМ
РЕЗЮМЕ
С помощью нового гистохимического метода проанализировано 29 зрелых плацент и 32 ворсинчатых хориона от женщин, перенесших герпетическую инфекцию во время беременности и практически здоровых женщин. Выявлен фермент, маркирующий процесс обмена холестерина, и было показано снижение его активности при герпетической инфекции у матери. Высказаны предположения, объясняющие возможный механизм негативного влияния инфекции на холестериновый обмен.
SUMMARY
I.V.Dovdzikova
HISTOCHEMICAL CHARACTERISTICS OF CHOLESTERIN IN PLACENTA DURING PREGNANCY COMPLICATED WITH HERPES INFECTION
29 term placentas and 32 ciliated chorions from patients with herpes infection and from healthy women have been studied with new his-tochemical technique. Enzyme marking cholesterin exchange has been revealed. Studies showed decrease in this enzyme activity in patients with herpes infection. Mechanism of adverse infection effect on cholesterine exchange has been postulated.
Холестерин находится во всех клетках животного организма, он является одним из главных компонентов плазматической мембраны, где он влияет на состояние и функцию, регулируя текучесть и проницаемость, часто находится в форме эфиров жирных кислот и служит исходным соединением для синтеза всех стероидов, функционирующих в организме. Холестерин находится в животных, но не в растительных жирах. Его химическое название 3-гидрокси-5,6-холестен [6].
Мы считаем, что обмену в плаценте такого важного соединения как холестерин следует уделять повышенное внимание. Плацента беременной является целой биохимической лабораторией по созданию в своих тканях циклических стероидов, которые становятся источником формирования различных гормонов и других веществ, сильно влияющих на поддержание плацентарного гомеостаза. Отклонения в этом процессе не могут не порождать признаки фетоплацентарной недостаточности. Причиной такого отклонения может служить наличие инфекционного процесса. Наиболее распространенным вирусным заболеванием во время беременности является герпетическая инфекция [1, 2, 8]. В связи с этим целью нашей работы было дать оценку метаболизма холестерина в
плаценте при физиологической и осложненной герпесом беременностью.
Материалы и методы
Было исследовано 29 зрелых плацент, взятых при родах от женщин, перенесших обострение герпетической инфекции во время беременности (19 случаев) и не имевших такового (10 случаев - контрольная группа), а также 32 ворсинчатых хориона, полученных при проведении медицинских абортов, на сроке от 4 до 12 недель с обострением герпеса (10 случаев) и практически здоровых женщин (22 случая).
Для оценки процесса превращения холестерина в лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при НЗЛ ГУ ДНЦ ФПД СО РАМН (руководитель академик РАМН М. Т. Луценко) был разработан метод выявления ферментативной реакции его преобразования, позволяющий проанализировать интенсивность обмена этого стероида. Суть метода базировалась на том, что окисление веществ в тканях происходит посредством включения промежуточных переносчиков водорода соответствующими ферментами при помощи кофакторов. Для определения локализации энзима в качестве акцептора применялась соль тетразолия фирмы 1СМ Вюше&сак. Как кофактор использовали НАДФ. Распределение и количество образующихся формазановых гранул в точках локализации энзима позволяло оценивать активность изучаемого фермента. Для исключения участия других факторов в восстановлении тетразолиевой соли мы проводили контрольные опыты.
Результаты и обсуждение
Как известно, холестерин во всех тканях находится в состоянии непрерывного обмена. Поступление холестерина в ткани происходит при захвате холестеринсодержащих липопротеидов либо специальными рецепторами, например, рецепторами ЛПНП, либо этот процесс протекает без участия рецепторов. В некоторых случаях свободный холестерин, содержащийся в богатых холестерином липопротеидах, захватывается сначала клеточными мембранами, а затем уже из них поступает в клетку. Кроме этого все клетки, не утратившие ядро, способны синтезировать данный стероид из углеродных атомов ацетил-СоА в микросомах (эндо-плазматическом ретикулуме) и цитозоле. Приблизительно половина холестерина, имеющегося в организме, образуется путем биосинтеза. Холестерин высвобождается еще и при гидролизе эфиров холестерина, катализируемом гидролазой эфиров холестерина.
Уменьшение содержания данного стероида наблюдается при его переходе из мембран в липопро-теиды с низким содержанием холестерина, а именно в ЛПВП, при действии фермента лецитин: холесте-
рин-ацилтрансферазы. Также происходит этерифика-ция, катализируемая ацил-СоА: холестерин-
ацилтрансферазой или фосфатидилхолин: холесте-рин-ацилтрансферазой. Самое заслуживающее внимание - холестерин используется для синтеза других стероидов: гормонов или желчных кислот.
Нами была предпряинята попытка выявления посредством гистохимической реакции восстановления тетразолия фермента, отвечающего за деградацию (окисление) холестерина и условно названного нами холестериндегидрогеназа. С его помощью мы получаем возможность дать оценку процессам метаболизма вышеназванного стероида.
Гранулы формазана определялись в зоне эпителия ворсинчатого хориона с начала 2-го месяца беременности, что свидетельствовало о наличии процессов обмена холестерина уже на ранних этапах онтогенеза. В соединительнотканной строме и сосудах хориона следов гистохимической реакции не наблюдалось. По мере увеличения срока развития интенсивность окраски симпласта возрастала (рис. 1). На поздних сроках беременности кроме гранулярного, появлялось и диффузное окрашивание эпителия. Обострение герпетической инфекции во время гестации оказывало влияние на активность энзима, подавляя ее (рис. 2).
Ранее был получен ряд убедительных свидетельств, что вирусная инфекция влияет на процесс синтеза стероидных гормонов [3, 4, 5]. В связи с чем возникает вопрос: за счет чего происходит это влияние. Нами было сделано предположение, что при воздействии инфекционного агента изменению подвергается сама молекула холестерина.
Еще в прошлом веке была описана пространственная структура стероидов, состоящая из четырех колец, обозначенных латинскими буквами А, В, С и Б. Каждое циклическое кольцо может иметь различную пространственную конформацию: «кресло»,
«ванну» и другие. Обычно все кольца имеют конформацию «кресла». Например, оптимальная конформация кольца А соответствует «полукреслу», но в отличие от В- и С-колец оно может легко деформироваться [7]. В- и С-кольца находятся в конформации нормальных «Р-кресел». Было установлено, что реакционная способность стероидов сильно зависит от того, в какой конформации находится молекула. Также важную роль в реализации биологической активности этих молекул играет конфигурация боковых заместителей, под которой подразумевается расположение атомов и групп атомов вокруг стераново-го скелета. Холестерин содержит две боковые ме-тильные и одну гидроксильную группы. От того, в каком положении (а- или Р-) они будут располагаться, зависит очень многое, так как существует правило преимущественности «атаки с а-стороны». Для стероидов большое значение боковые цепи имеют для перехода в другие формы; было доказано, что для этого достаточно лишь небольшого энергетического вмешательства [7]. Таким энергетическим вмешательством (для превращения в иные конформацион-ные виды) может послужить лазерное излучение.
В своих опытах мы облучали субстрат (инкубационный раствор) или фермент (ткань плаценты) лазерным лучом в течение 30 и 60 секунд. Предварительное облучение очень резко снижало интенсивность последующей гистохимической реакции на дегидрогеназу холестерина в симпластическом эпителии. Чем длительнее было воздействие, тем сильнее уменьшалось ферментативная активность. Для доказательства того, что инфекционное начало воздействует на активность выявленного фермента, в другом смоделированном нами опыте мы добавляли в инкубационный раствор смыв с культуры стафилококка. В результате оказалось, что активность проводимых
гистохимических реакций также подавлялась.
Проведенные опыты продемонстрировали то, что путем энергетического воздействия можно влиять на структуру молекулы холестерина и снижать или даже подавлять процессы холестеринового обмена, что и происходило, как мы считаем, при воздействии вирусного начала в организме.
ЛИТЕРАТУРА
1. Роль персистирующих вирусных инфекций в
формировании перинатальных потерь
[Текст]/Владимирова Н.Ю. [и др.]//Дальневосточный медицинский журнал .-2001.-№3.-С.5-9.
2. Вирусные инфекции беременных: патология плода и новорожденных [Текст]/В.Я. Кицак.-Кольцово, 2004.-84 с.
3. Новые методы оценки холестеринового обмена в
плаценте при вирусно-бактериальном повреждении дыхательной системы беременной/М.Т. Луценко//Бюл. физиол. и патол. дыхания.-1999.-Вып.3.-С52-60.
4. Фетоплацентарная система при ОРВИ [Текст]/Луценко М.Т. [и др.].-Благовещенск, 2000.168 с.
5. Фетоплацентарная система при герпесной инфекции [Текст]/Луценко М.Т.[и др.].-Благовещенск, 2003.-200 с.
6. Биохимия человека [Текст]/Марри Р. [и др.].-М.: Мир, 1993.-381 с.
7. Стероидные гормоны [Текст]/ П.В.Сергеев.-М.: Наука, 1984.-240 с.
8. Внутриутробное инфицирование у беременных с ВЗРП [Текст]/Е.Е.Царегородцева//Пробл. бе-ременности.-2001.-№3.-С.38-41.
п □ □
УДК 618.3:618.36:616.921.5 И.Н.Гориков
ФЕТОПЛАЦЕНТАРНАЯ НЕДОСТАТОЧНОСТЬ ПРИ ГРИППЕ А(Н3Ш)
У ЖЕНЩИН ВО II ТРИМЕСТРЕ БЕРЕМЕННОСТИ
ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
Изучены клинико-серологические, гематологические, биохимические, иммунологические, гормональные и ультразвуковые показатели у женщин с гриппом А(Н3Ш) во II триместре беременности, осложненной и неосложненной фетоплацентарной недостаточностью. Установлено, что при гриппозной инфекции, проявляющейся ост-
рым ринофарингитом и ларинготрахеитом, основными признаками фетоплацемтармой недостаточности являются: диагностический рост титров противогриппозных антител, СОЭ, концентрации общего кальция, общего, непрямого билирубина, среднемолекулярных пептидов, фибриногена, серотонина, кортизола, малонового диальдегида, иммунных комплексов, иммуноглобулинов А, М и
