CC BY
5
изучению неспецифических изменений в организме с целью предупреждения их перехода в определенные нозологические формы. Развитие исследований в этом направлении требует научного обоснования системы высокоинформативных показателей, которые могли бы свидетельствовать о наличии предпатологических изменений в организме, а также разработки критериев и > методов диагностики данных состояний.
Несомненно, что для успешного решения проблемы изучения биологического загрязнения техногенного происхождения необходимо межпроблемное и межведомственное комплексирование научных исследований с привлечением к этой работе специалистов различных профилей.
Поступила 04.05.8?
УДК 614.7:615.285.7+6)5.285.7.065.07
Т. Г. Омельянец, Г. П. Мельник, М. Т. Тахиров
ГИГИЕНИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ИЗУЧЕНИЯ МИКРОБНЫХ ФУНГИЦИДОВ
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров и пластических масс, Киев; Узбекский НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний, Ташкент
Загрязнение окружающей среды химическими пестицидами поставило исследователей перед не-^ обходимостыо изыскания более безопасных и ^эффективных методов борьбы с возбудителями болезней растений.
В этом плане заслуживает внимания микробиологический способ, основанный на использовании микроорганизмов — антагонистов возбудителей болезней растений.
Наибольшее распространение в практике сельского хозяйства в последние годы получили препараты, содержащие бактерии — антагонисты рода Pseudomonas (Ps. aurantiaca, Ps. myco-phaga, Ps. sp.), грибов Trichoderma lignorurn, Gliocladium roseum, Gliocladium virens. На основе этих микроорганизмов создан целый ряд отечественных эффективных микробных препаратов для борьбы с болезнями растений (миколитин, азрин, триходермин, глиокладин и др.). [I, 2, —6]. С каждым годом количество новых, эффективных микробных препаратов увеличивается, наряду с этим постоянно совершенствуются > товарные формы ранее разработанных препаратов.
Увеличение производства и широкое применение в сельском хозяйстве микробных средств борьбы с болезнями растений выдвигают ряд задач по охране окружающей среды и здоровья человека.
Хотя для защиты растений и предлагаются микроорганизмы, не зарегистрированные ранее как естественные возбудители заболеваний человека, это вовсе не означает, что они всегда безопасны, и не исключает необходимости тщательного изучения всех сторон их возможного отрицательного влияния на организм человека. При этом особенности методических подходов к I оценке безвредности того или иного микробного препарата определяются свойствами основного действующего начала препарата, т.е. бактерий или грибов.
Методическая схема гигиенического изучения бактериальных препаратов [3] основана на всесторонних исследованиях микробных препаратов с помощью современных и адекватных микробиологических, санитарно-токсикологических и эпидемиологических методов. Согласно предложенной схеме, гигиеническая оценка микробных препаратов включает 2 этапа: 1) оценку патогенных свойств микроорганизмов, входящих в состав микробного препарата; 2) санитарно-гигиеническую оценку товарной формы препарата, содержащей, кроме жизнеспособных микроорганизмов, ряд других компонентов (продукты жизнедеятельности микроорганизмов, остатки питательной среды, наполнители, стабилизаторы и др.).
При оценке микроорганизмов — основного действующего начала препаратов — учитывают вирулентность, токсичность, токсигенность, ин-фективность микроорганизмов, аллергенные свойства и действие на нормальную микрофлору организма при различных путях введения в организм бактерий. При изучении безвредности товарной формы препаратов оценивают токсичность препаратов в остром и хроническом опытах при различных путях введения (пероральном и ингаляционном) с учетом инфективного, аллергенного и дисбактериотического действия изучаемых препаратов.
Возможность загрязнения различных объектов окружающей среды диктует необходимость изучения процессов микробного самоочищения этих объектов, в первую очередь почвы и воды водоемов, находящихся вблизи предприятий и обрабатываемых полей.
Проведенные исследования показали, что бактерии— антагонисты Рэ. аигатШаса, Рэ. тусо-phaga, Рэ. эр. невирулентны для лабораторных животных и неинвазивны при внутрибрюшинном, пероральном и интраназальном введении, характеризуются низкой токсичностью и токсигенно-
стыо. Так, ЬО50 живых культур штаммов Рэ. аигагШаса М-518 для белых мышей при внутри-брюшинном введении составляет 3,58-109— 7,67-109 микробных клеток (м.к.), Рэ. тусорЬа-0-1 -7,3-108—1,68-10° м.к.. Ре. тусорИада Х-23 — 6,5-108— 1,49• 109 м.к. ЬО50 культур, убитых прогреванием, при том же способе введения для Ре. аигапНаса М-518 составляет 2,85- 109— 5,67-109 м.к., Рэ. тусорЬада 0-1 — 1,3- 1010— 2,27-1010 м.к., Рз. тусорИада Х-23—1,7-1010— 2,04-1010 м.к.
Изученные псевдомонады не обладают способностью проникать внутрь клеток Нер-2 и размножаться в них, ни один из штаммов не вызывал дегенерации клеток. Отсутствие инвазивно-сти у этих микроорганизмов подтверждено в острых и хронических опытах на мышах, крысах и кроликах. Указанные микроорганизмы не проникают внутрь клеток тканей организма и органов и не размножаются в них, чем объясняется неспособность этих культур вызывать инфекционный процесс в организме теплокровных животных. Об этом свидетельствует и отсутствие изменений в поведении, температуре и массе тела животных, зараженных максимальным количеством клеток исследуемых микроорганизмов, отсутствие специфических клинических симптомов и специфических органических поражений внутренних органов, нарастания титра специфических антител.
Препараты на основе изученных микроорганизмов нетоксичны. ЬО50 миколитина (основное действующее начало — Рэ. аигап(ласа) для мышей при внутрибрюшинном введении составляет 51,05±8,5 мг/кг, при пероральном — 4,23± ±1,52 г/кг, ЬО50 азрина (основное действующее начало—Рэ тусорИада) при пероральном введении определить не удалось, так как введение в максимально возможной дозе (90 г/кг) не вызывало гибели ни одного из 10 взятых в опыт животных. Длительное введение в организм миколитина (перорально и ингаляционно) не оказывало токсического действия на организм, однако приводило к возникновению дисбиотиче-•ских нарушений микрофлоры кишечника. В то же время эти изменения не носят постоянного характера; через 1,5—2 мес. от начала введения препарата наступала, по-видимому, адаптация и микрофлора кишечника нормализовывалась.
После прекращения введения миколитина микроорганизмы Рэ. аигапИаса выделялись из кишечника в течение 4 сут. Изменений в структуре внутренних органов у животных не отмечено."
Длительное ингаляционное поступление азрина в организм животных также приводит к дис-бактериотическим нарушениям микрофлоры: со стороны микрофлоры кишечника наблюдается увеличение содержания кишечных палочек (/?< <;0,05), стафилококков (р<0,02), микроскопиче-
ских грибов (р<0,05), энтерококков (/?<0,001), снижение количества лактобацилл (р<0,05), со стороны микрофлоры кожи — достоверное увеличение числа стафилококков и гемолитических форм микроорганизмов (/?<0,01). С уменьшением дозы поступающего в организм препарату эти изменения были менее выражены и нормали« зация микрофлоры наступала быстрее. Изменение состава периферической крови под воздействием ( азрина также не носило постоянного характера.
В последние годы все большее распространение получают препараты на основе грибов — антагонистов возбудителей заболеваний растений. Так, в борьбе с возбудителем вилта хлопчатника эффективно используются грибы Тпс1юс1егта Н^погит} входящий в качестве основного действующего начала в состав триходермика.
Исследованиями установлено, что грибы Тг. Пдпогиш невирулентны, ЬО50 живых культур для мышей при внутрибрюшинном введении составляет 2,8-107 (2,2-107—3,4-107) спор, а при пероральном введении— 1,74-108 (1,46-108—2,02-108) спор. Препарат триходермии, содержащий ука-^' занные микроорганизмы, малотоксичен: ЬО50 при " внутрибрюшинном введении белым мь:шам составляет 354 (291—417) мг/кг, белым крысам — 564 (440—688) мг/кг, при пероральном введении белым мышам — 6240 (4919—7561) мг/кг, белым крысам —7520 (5546—9494) мг/кг.
Клиническая картина интоксикации у белых мышей после перорального введения триходер-мина характеризовалась непродолжительным периодом возбуждения, сменяющимся состоянием угнетения, которое выражалось в малоподвижности, отказе от еды, отсутствии реакций на звуковые раздражители. Гибель мышей после перорального введения препарата наступала в течение первых 7 сут, после внутрибрюшинно-го — в течение 2 сут. Клиническая картина от-£ равления у белых крыс была сходна с таковой у белых мышей, однако у крыс признаки интоксикации были менее выражены.
При длительном пероральном введении трихо-дермина в дозах '/ю и '/20 ЬО50 в крови у животных наблюдались лейкоцитоз, эозинофилия, лим-фоцитоз. Отмечались также дистрофические и воспалительные изменения во внутренних органах, степень выраженности которых зависела от величины вводимой дозы. В экспериментах на морских свинках при одно- и многократных ингаляционных воздействиях триходермином выявлено сенсибилизирующее действие.
Изучение другого фунгицида — глиокладина, используемого для борьбы с белой гнилью подсолнечника,— также свидетельствует о низкой токсичности препарата, а исследование основного действующего начала — ОНос1асПит гоэсит — о его авирулентности для лабораторных животных. Так, при внутрибрюшинном введении мышам максимально возможных доз этих грибов
(10® спор на животное) гибель не отмечалась. Введение максимально возможного количества спор вместе с мицелием также не вызывало гибели животных. В то же время эти микроорганизмы способны оказывать сенсибилизирующее действие на морских свинок.
(Ь Таким образом, микроорганизмы — антагонисты, предлагаемые для использования в качестве средств защиты растений, невирулентны для теп-■ локровных организмов и не вызывают инфекционных заболеваний. Однако штаммы-антагонисты и препараты на их основе могут оказывать сенсибилизирующее и дисбактериотическое действие.
Возможность неблагоприятного влияния микробных препаратов на организм диктует необходимость установления уровня их безопасного содержания в различных объектах и прежде всего в воздухе рабочей зоны, где при нарушениях технологии производства биопрепаратов может наблюдаться высокое микробное загрязнение. При этом нормирование микробных препаратов следует проводить по лимитирующему признаку вредности, а норматив выражать в количестве микробных клеток в том или ином объеме нормируемого объекта, т. е. по основному действующему началу препарата.
Литература
1. Айзенман Б. Е„ Бойко О. М., Мильченко К■ П. и др.// Фитопатогенные бактерии. — Киев, 1975. — С. 342—346.
2. Кайшибаев М. К■ // Пути совершенствования микробиологической борьбы с насекомыми и болезнями растений. — Оболенск, 1986.— С. 150—151.
3. Омельянец Т. Г. Методические указания по гигиенической оценке микробных средств защиты растений от насекомых и болезней на основе неспорообразующих микроорганизмов. — Киев, 1982.
4. Пантелеев А. А., Баеирова 3. С. // Тематический сборник трудов Азербайджан, науч. нсслед. ин-та защиты растений. — 1983. — Т. 6. — С. 40—47.
5. Широкова Т. Л., Сорокина Т. А. // Препараты микробиологического синтеза — сельскому хозяйству. — М., 1981, —С. 33—38.
6. Штейнберг М. Е., Бондаренко А. И. // Микробиологический метод борьбы с болезнями и вредителями растений. — Кишинев, 1984. — С. 3—12.
Поступила 01.06.87
Summary. The study was designed to analyze toxicity of microbic fungicides and pathogenic characteristics of microorganisms-antagonists forming the basis for these preparations' action. It was demonstrated that bacteria-antagonists and fungi were not pathogenic to laboratory animals, the preparations being nontoxic but having sensitizing and dis-bacteriolytic effect. The necessity of establishing permissible levels of their content in different objects is underlined.
УДК 616.9-022.369-084.4
В. С. Кощеев, А. В. Седов
ПРИМЕНЕНИЕ АНТИМИКРОБНЫХ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ВНУТРИБОЛЬНИЧНОЙ ИНФЕКЦИИ
Институт биофизики Минздрава СССР, Москва
В течение последних десятилетий во всем мире отмечается значительное увеличение частоты ^развития различных форм внутрибольничных инфекций. В частности, наблюдаются отчетливая тенденция к учащению случаев нагноения операционных ран, к повышению числа случаев нагноений на местах инъекций различных лекарственных препаратов, в том числе и антибиотиков, возрастание числа смертельных исходов от сепсиса после операций.
Одним из основных источников внутриболь-ничной инфекции является аутофлора кожи. Известно, что послеоперационные нагноения ран, флегмоны, абсцессы, фурункулы, карбункулы и ряд других заболеваний могут быть вызваны обитающими на коже стафилококками. При этом следует иметь в виду, что между стафилококками, вызывающими все эти заболевания, и стафилококками, обитающими на коже здоровых лиц, по-видимому, нет таких различий, которые исключали бы возможность превращения сапрофитных стафилококков при определенных условиях в патогенные. Росту числа случаев внутрибольничной инфекции способствует широ-
кое распространение антибиотикоустойчивых штаммов, которые инфицируют не только кожу больных, но и нательное и постельное белье, одежду медицинского персонала.
В результате исследования микрофлоры нательного и постельного белья, рабочей одежды медицинского персонала было установлено, что особое значение имеет кокковая микрофлора и в первую очередь коанулазоположительные стафилококки [3]. На белье и предметах больничного обихода могут также сохраняться различные виды грамотрицательных условно-патогенных бактерий—возбудителей внутрибольничных инфекций [14].
Анализ причин, способствующих распространению внутрибольничных инфекций, поззоляет сделать вывод о том, что одним из перспективных способов их профилактики является использование антимикробных материалов. Сущность этого способа состоит в создании длительно действующих мнкродозаторов бактерицидных препаратов, т. е. в разработке таких волокон и тканей, из которых вводимый в них препарат непрерывно, в очень малых, безвредных для че-
