CC BY
33
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 105
Заключение. В настоящее время имеются неоспоримые сом оксида азота. Были построены профили клеточного доказательства эффективности ФДТ при лечении местно- цикла клеток M-HeLa в контроле и при действии исследу-распространенного рака кожи. Достоинства ФДТ прояв- емых комплексов в дозе IC50 в течении 24 ч. Из результатов ляются при лечении рака кожи на лице и других открытых видно, что все исследуемые комплексы являются цитоток-участках тела, так как наряду с высоким процентом изле- сичными и вызывают гибель клеток. Дальнейшим этапом чений ФДТ выгодно отличается от традиционных методов работы было изучение ядерной транслокации белка NF-kB. хорошими косметическими результатами, что оказывается Нами были получены данные о накоплении белка NF-kB бесценным фактором при локализации опухоли на лице, в ядрах. В ходе исследования было установлено, что дан-особенно у женщин. Наряду с онкологией ФДТ все шире ные комплексы незначительно влияют на ДНК-связыва-применяется в стоматологии и косметологии. Этому спо- ющую активность. собствует тот факт, что в процессе терапии не разрушается Заключение. В ходе выполнения работы нами было коллагеновый каркас тканей, а наоборот, усиливается син- обнаружено, что исследуемые комплексы обладают сред-тез коллагена, обеспечивающий восстановление целост- ней цитотоксичностью и вызывают гибель клеток HeLa. ности кожи преимущественно не путем рубцевания, а пу- Были определены дозы IC50 для исследуемых НКЖ. Дока-тем репарации местных тканей, что и дает возможность зано, что НКЖ вызывают накопление транскрипционного наряду с ликвидацией патологического очага получить фактора NF-kB в ядрах, оценено влияние НКЖ на его хороший косметический эффект. ДНК-связывающую активность. Т.С. Ступина, Н.А. Санина, А.А. Терентьев Д.В. Табаков, Т.Н. Заботина, А.А. Борунова, ВЛИЯНИЕ НИТРОЗИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ О.В. Короткова, З.Г. Кадагидзе ЖЕЛЕЗА НА ТРАНСКРИПЦИОННЫЙ ФАКТОР NF-kB ГЕТЕРОГЕННОСТЬ ПОПУЛЯЦИЙ NK- ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область И NKT-ЛИМФОЦИТОВ У ЗДОРОВЫХ ДОНОРОВ Введение. Транскрипционный фактор NF-kB является ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва регулятором таких важных клеточных процессов, как кле- Введение. Для NK-клеток не существует специфиче-точный цикл, клеточный ответ на различные стимулы, ского антигена, как Т- или В-клеточные рецепторы, и их а также участвует в повышении жизнеспособности и уси- принято оценивать по комбинации антигенов CD16 и CD56. лении пролиферации клеток, что связано с его ролью в раз- CD16 — низкоаффинный рецептор к Fc-фрагменту имму-витии опухолей, поэтому он рассматривается в качестве ноглобулина G, CD56 — гликопротеиновый рецептор, при-молекулярной мишени для противоопухолевых препара- нимающий участие в межклеточной адгезии. В норме котов. Известно, что одним из регуляторов NF-kB является личество NK-клеток составляет 10—25 % от общего числа монооксид азота, который также является молекулой, вы- лимфоцитов. Для их определения принято использовать полняющей множество функций в клетке. В связи с этим тест-систему CD3 — FITC/CD16&CD56 — PE, что позволяет большой интерес в качестве потенциальных противоопу- одновременно дифференцировать их от Т-лимфоцитов холевых препаратов вызывают доноры оксида азота. и субпопуляции NKT-клеток, несущей признаки обеих Цель исследования — изучение цитотоксичности спон- популяций. танных доноров оксида азота нитрозильных комплексов Цель исследования — оценить гетерогенность популя-железа (НКЖ), а также их влияние на транскрипционный ций NK- и NKT-клеток, обусловленную различной экс-фактор NF-kB. прессией CD16 и CD56 в периферической крови (ПК) Материалы и методы. В работе изучались цитотокси- здоровых доноров. ческие свойства НКЖ, содержащих в качестве лигандов Материалы и методы. Проведено исследование фено-фенилтиил (Ph), 2-амино-фенилтиил (2AmPh) и 4-амино- типа лимфоцитов ПК 30 здоровых доноров методом про-фенилтиил (4AmPh). Исследования проводились на опу- точной цитометрии с помощью двухлазерного проточного холевых клетках M-HeLa (Институт цитологии РАН). цитометра аналитического типа FACSCalibur с примене-Для определения цитотоксичности исследуемых комплек- нием пакета программного обеспечения сбора и анализа сов был использован метод МТТ-окрашивания. Оценка данных CELLQuest (BD Biosciences). В работе были ис-ДНК-связывающей активности проводилась методом тор- пользованы антитела к антигенам: CD45- FITC, CD3— FITC, можения в геле с использованием олигонуклеотида, содер- CD56- PE, CD16- PE— Cy5, CD16+56- PE (Beckman Coulter). жащего консенсусную последовательность для связывания Результаты. В ПК здоровых доноров субпопуляция белка NF-kB. NK-лимфоцитов (CD3- CD16&CD56+) составила 18,0 ± 11,3 %. Результаты. В ходе работы были получены данные При анализе экспрессии антигенов CD16 и CD56 на по-по цитотоксичности исследуемых комплексов, а также ци- верхности NK-клеток оказалось, что количество CD3-тотоксичности их лигандов (тиофенол, 2-амино-тиофенол CD56+-клеток составляет 16,2 ± 8,1 %, что совпадает и 4-амино-тиофенол (4-Ам-ТФ)). Доказано, что цитоток- со значением CD3-CD16&CD56+-клеток, а количество сичность комплексов Ph и 2-AmPh примерно в 2 раза пре- CD3- CD16+ меньше (11,0 ± 6,7 %). Было выявлено, что вышает цитотоксичность их лигандов, что дает возможность основную массу NK-клеток составляют СD56+lowCD16+low-говорить о значительном вкладе лигандов в цитотоксич- лимфоциты (52,3 ± 19,9 % из CD45+CD3—-лимфоцитов), ность комплексов. Доза IC50 комплекса 4-AmPh в 4 раза а CD56- CD16+-клетки — 1,7 ± 0,9 %. Субпопуляции с фе-меньше дозы ГС^-АмТФ, что может свидетельствовать нотипом CD56+CD16- и CD56+lowCD16+hi составили ме-о вкладе в токсичность комплекса, выделяемого комплек- нее 1 %. При анализе популяции CD3+-лимфоцитов коли-
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
106
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
чество CD3+CD16&CD56- -клеток было 7,1 ± 5,1 %, в то время как CD3+CD56+- и CD3+CD16+-KreTOK было значительно меньше (4,3 ± 3,0 % и 3,1 ± 2,9 % соответственно). Основную массу NKT-клеток составляют CD56+CD16 - -лимфоциты (5,5 ± 3,7 % из СD45+CD3+-клеток), реже встречаются клетки с фенотипом CD56- CD16+ и CD56+CD16+ (3,0 ± 4,2 % и 0,7 ± 0,6 % соответственно).
Заключение. В структуре популяций NK- и NKT-клеток присутствует несколько субпопуляций лимфоцитов, отличающихся по экспрессии антигенов CD16 и CD56. Для NK-клеток наиболее характерны субпопуляции CD56+lowCD16+low~-, CD56 - CD16+-лимфоцитов и 2 минорные субпопуляции CD56+lowCD16+hi и CD56+CD16-. Популяция NKT-клеток представлена в основном субпопуляциями CD56+CD16 - -, CD56 - CD16+- и CD56+CD16+-клеток.
А. В. Таллерова, О. С. Кузнецова
ВЛИЯНИЕ ЛАДАСТЕНА НА РОСТ КАРЦИНОМЫ
ЛЕГКИХ ЛЬЮИС У МЫШЕЙ
ФГБНУ«НИИ фармакологии им. В. В. Закусова», Москва
Введение. Современная интенсивная противоопухолевая химиотерапия сопровождается многочисленными побочными эффектами. В связи с этим одной из важнейших проблем экспериментальной и клинической фармакологии является разработка новых фармакотерапевтических подходов к снижению токсичности и повышению терапевтической эффективности лекарственного метода лечения злокачественных опухолей. В настоящее время определено место антиоксидантов в профилактике как опухолевых заболеваний, так и осложнений цитостатической терапии. В НИИ фармакологии им. В.В. Закусова разработан анксио-литический препарат Ладастен (^(2-адамантил)-^(2-п-бромфенил)амин), сочетающий антирадикальную и имму-нофармакологическую активности.
Цель исследования — оценить влияние Ладастена на рост опухоли карциномы легкого Льюис (Lewis lung carcinoma, LLC) у мышей линии C57Bl/6.
Материалы и методы. В качестве экспериментальной модели злокачественного роста была использована эпидер-моидная LLC, штаммы опухолевых клеток получены из банка клеточных культур НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н.Н. Блохина. Взвесь опухолевых клеток LLC имплантировали мышам подкожно в область подмышечной впадины по 50 мг в 0,5 мл раствора Хэнкса на 1 мышь. Животных рандоми-зировали в следующие группы: 1-я — группа активного контроля (LLC), в которой обработку производили 1 % суспензией крахмала, 2-я — Ладастен в дозе 30 мг/кг. Введение препарата начинали через 48 ч после инокуляции опухоли и продолжали в течение 7 дней. На 9-е сутки развития LLC через 24 ч после окончания введения крахмала и Ладастена мышам измеряли объем опухоли метрически и вычисляли процент торможения роста опухоли (ТРО). Статистическую обработку данных проводили по непарному t-критерию Стьюдента. Различия считали статистически значимыми прир < 0,05.
Результаты. При введении Ладастена в течение 7 дней в дозе 30 мг/кг у мышей-опухоленосителей наблюдали ТРО на 60,7 % (1025,5 ± 106,1 мм3) по сравнению с контрольной группой (2611,5 ± 216,5 мм3).
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что применение Ладастена безопасно при развитии опухоли, и монотерапия препаратом вызывает выраженное ТРО, что определяет перспективы исследования Ладастена при комбинированном применении в химиотерапии.
П. А. Тараканов1, А. О. Симаков2, М.Е. Неганова1, Е.Н. Тараканова1, Д. В. Мищенко3 5,7-БИС(СТИРИЛ)-1,4-ДИАЗЕПИНОПОРФИРАЗИНЫ КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЕ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРЫ: СИНТЕЗ, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ И ФОТОФИЗИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ИФАВ РАН, Черноголовка, Московская область; 2Центр теоретической и компьютерной химии, Осло, Норвегия;
3ИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область
Введение. Полусинтетические фотосенсибилизаторы (ФС) тетрапиррольного типа благодаря своей биосовместимости и высоким фотофизическим характеристикам на сегодняшний день лидируют среди ФС, прошедших клинические испытания. Однако ввиду сложности и нестабильности их структуры поиск синтетических аналогов тетрапиррольных макроциклов является актуальным направлением в химии макрогетероциклических соединений. К основным недостаткам синтетических ФС относят низкую биосовместимость и отсутствие доступного разнообразия. Одним из перспективных направлений решения данной проблемы является синтез новых гетероциклических аналогов фталоцианина.
Цель исследования — синтез тетрапиррольных макроциклов, содержащих 5,7-бис(стирил)-1,4-диазепиновые гетероциклы. Исследование физико-химических и фотофизических свойств полученных соединений, а также оценка их перспективности в качестве ФС для фотодинамической терапии.
Материалы и методы. Очистку соединений проводили с помощью гельпроникающей хроматографии. Строение полученных соединений подтверждено методами ЭСП, инфракрасного (ИК) излучения, Ш- и 2Б-ядерной магнитно-резонансной спектроскопии и МЛЪВ1-ТОР масс-спек-трометрии. Квантовые выходы флуоресценции и генерации синглетного кислорода определены методом сравнения со стандартом (Рс/п). Теоретический анализ механизма фотосенсибилизации в рамках модели диаграммы Яблонского проводили на основе квантово-химических расчетов методом теории функционала плотности (ББТ), используя програмный пакет ОЯСЛ 3.0.3.
Результаты. Разработаны методы синтеза новых макро-гетероциклов, содержащих 1,4-диазепиновые гетероциклы как симметричного (Л4-типа), так и низкосимметричного строения (Л3В-типа). В рамках полученной серии структурных аналогов 5,7-бис(стирил)-1,4-диазепинопорфира-зинов удалось установить взаимосвязь структура — свойство, что открывает эффективные пути управления физико-химическими и фотофизическими свойствами данного класса соединений для решения как терапевтических, так и диагностических задач.
Заключение. Интенсивное поглощение в ближнем ИК-диапазоне (более 700 нм), высокие квантовые выходы син-
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
