CC BY
69
УДК 616.34-002-056.7:616441-008.61
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СИНДРОМА РАЗДРАЖЕННОГО КИШЕЧНИКА У БОЛЬНЫХ С ТИРЕОТОКСИКОЗОМ
Синдром раздраженного кишечника (СРК) в последнее время привлекает все больше внимания многих исследователей, что обусловлено возростанием частоты заболевания, сложностью диагностики и недостаточной эффективностью существующих методов лечения таких пациентов [з, 4, 5, 6]. Распространённость СРК в большинстве стран мира в среднем составляет 20%, варьируя поданным различных исследований от д до 48% [3, 5, 7]. Доказан весомый вклад в развитие данного заболевания инфекционных, психосоциальных и диетических факторов. [2, 4, 5]. Последнее время все чаще изучают полиморфизм генов-кандидатов, связанных с регуляцией различных функций пищеварительного тракта. Известно, что в регуляции моторики и секреции кишечника принимают участие различные нервные и гуморальные медиаторы [1, 2, 7]. Среди них важное место занимает серотонин, 95% которого синтезируется энтерохро-маффинными клетками кишечника. Повышение уровня серотонина в кишечнике способствует возникновению таких клинических проявлений, как тошноты, рвоты и диареи. Причинами такого повышения может быть увеличенный синтез, чрезмерное использование или ненадлежащая инактивация серотонина. Белок-переносчик, который транспортирует избыток серотонина из синаптической щели в везикулы, является одним из регуляторов количества серотонина в синапсе, поэтому нарушение его функции может непосредственно влиять на моторно-эвакуаторную функцию кишечника. Недавние исследования [3, 4, 5, 6, 7] доказали связь полиморфизма в регионе промотора гена - переносчика серотонина в возникновении СРК. Ген БЕЯТ, кодирующий белок-переносчик серотонина, локализуется на 17 хромосоме в области l7qll.2-ql. Функциональный полиморфизм этого гена, который проявляется во вставке или де-леции 44 пар азотистых оснований в 5-НТТЬРЯ (серотонин-транспортер-связанная полиморфная область), впервые был описан НеПв в 1996 г. [3].
В зависимости от вида полиморфизма гена, Ь (длинная аллель) и Б (короткая аллель) формируют з варианта генотипа: ЬЬ, ЬБ и ББ. Некоторые авторы [4,7] утверждают, что 3 вида генотипических вариантов соответствуют 2-м фенотипическим, так как Б-аллель является доминантным. Известно, что Б-аллель способствует уменьшению обратного захвата серотонина через дефект ДНК, который редуцирует белок - переносчик серотонина [6, 7].
Вместе с тем, анализ литературных источников относительно особенностей дистрибуции генотипических вариантов полиморфизма гена БЕЯТ у больных с СРК различных популяционных групп показал существенные противоречия в интерпретации связи вариантов полиморфизма этого гена с распространенностью и клиническими проявлениями функциональных нарушений кишечника [3, 4, 5, 6, 7]. Выявленные факты, которые можно объяснить этническими особенностями распределения генотипов и малыми выборками исследований, требуют дальнейшего изучения и систематизации.
Кроме этого, в литературе недостаточно полно изучены особенности полиморфизма гена БЕЯТ при сочетанной патологии, в частности, при наличии СРК у больных с диффузным токсическим зобом, что обусловливает целесообразность проведения таких генетических исследований.
медицинский
университет
Буковинский
государственный
А.И.ФЕДИВ И.И. МОСКАЛЮК
В статье изложены данные о связи функционального полиморфизма гена 8КкТ с разнообразием видов кишечной дисфункции при синдроме раздраженного кишечника на фоне тиреотоксикоза. В частности, среди больных диффузным токсическим зобом и синдромом раздраженного кишечника с преобладанием диареи у 67% выявлен 1,1,-вариант полиморфизма гена 8КкТ. Пациенты с тиреотоксикозом и синдромом раздраженного кишечника с преобладанием запоров были носителями вв-генотипа в 7596 случаев и 1,8- генотипа - в 2596. При наличии у пациентов диффузного токсического зоба без нарушений функции кишечника выявлен Ьв-вариант генотипа у 7996 больных, вв-генотип - у 2196. Это обусловливает необходимость коррекции лечебной тактики у таких больных в зависимости от полиморфизма гена 8КкТ.
e-mail: ohvfed@mail.ru
Ключевые слова: тиреотоксикоз, синдром раздраженного кишечника, полиморфизм, ген.
Цель исследования. Изучить полиморфизм гена SERT у больных с диффузным токсическим зобом, в т.ч. в сочетании с синдромом раздраженного кишечника и провести анализ особенностей клинического течения заболевания у лиц с разными вариантами его генотипа.
Материал и методы исследования. Обследовано 38 женщин с диффузным токсическим зобом II-III ст., в т.ч. с признаками СРК, которым после подписания информированного согласия пациента, проведен генетический анализ. У всех больных имел место тиреотоксикоз средней степени тяжести, субкомпенсированный. Возраст больных колебался от 22 до 45 лет, в среднем 32,5±1,6 лет. Комплексное обследование больных включало сбор жалоб, анамнеза, объективное обследование, лабораторные и инструментальные исследования. Объективную оценку моторно-эвакуаторной функции кишечника проводили с помощью усовершенствованного нами метода фоноэнтерографии (ФЭГ) [2].
По характеру нарушений со стороны органов пищеварения больных разделили на 3 группы. В 1-ю группу вошли 12 больных с диффузным токсическим зобом в сочетании с СРК с преобладанием поносов, что подтверждалось на ФЭГ наличием гипермоторики кишечника. Во 2-ю группу включены 12 пациентов с тиреотоксикозом и СРК с преобладанием запоров, что проявлялось снижением моторики кишечника на ФЭГ. 3-ю группу составили 14 человек с тиреотоксикозом без клинико-инструментальных признаков нарушения моторно-эвакуаторной функции кишечника.
Аллели полиморфного участка 5-HTTLPR гена SERT изучали путем выделения геномной ДНК из лейкоцитов периферической крови, стабилизированной ЭДТА в качестве антикоагулянта ("Merk ®", Германия), с последующей амплификацией полиморфного участка с помощью полимеразной цепной реакции на программируемом амплификаторе «Amply -4L »(Рос-сия), с индивидуальной температурной программой для специфических праймеров: sense (5-GCCGCTCTGAATGCCAGCAC 3 '), antisense (5-GGAGGAACTGACC-CCTGAAAACTG 3').
Продукты ПЦР анализировали с помощью электрофореза в 3% агарозном геле в присутствии трисборатного буфера, концентрированного с бромидом этидия. Фрагменты визуализировали с помощью УФ-излучателя в присутствии маркера молекулярных масс 100-1000 Ьр ("СибЭнзим", Россия).
Статистическая обработка результатов исследований проводилась с использованием электронных таблиц Microsoft ® Office Excel (build 11.5612.5703) и программы для статистической обработки Statgraphics Pluss.i Enterprise edition (® Statistical Graphics corp. 2001). Статистическую зависимость между величинами проверяли путем определения критерия Фишера, в т.ч. соответствие распределения генотипов равновесию Харди-Вайнберга.
Результаты исследования и их обсуждение. В результате исследований установлено, что у пациентов с диффузным токсическим зобом в сочетании с СРК, полиморфизм гена SERT имеет свои особенности в зависимости от характера моторно-эвакуаторной функции кишечника.
Дистрибуция полиморфизма гена SERT у больных с различными вариантами СРК при диффузном токсическом зобе приведены в табл. 1.
В 1-й группе пациентов нами обнаружены все виды полиморфизма: 67% обследованных имели LL генотип, 25% - SS-генотип и только 1 пациент (8%) был гетерозиготным носителем LS-варианта гена SERT.
У лиц 2-й группы наблюдалась тенденция к превалированию носительства короткого аллеля, в частности: 75% пациентов были LS-гетерозиготами, тогда как 25% имели SS-вариант генотипа. В данной группе больных гомозиготного LL-генотипа не было.
При анализе группы лиц с тиреотоксикозом без клинико-инструментальных признаков нарушения моторно-эвакуаторной функции кишечника количество больных с SS-генотипом (79%) достоверно преобладала над количеством LS-гетерозигот (21%). Среди пациентов этой группы также не было гомозигот по длинному аллелю.
Поскольку ген SERT кодирует белок-переносчик серотонина, функция которого транспортировать избыточный серотонин из синапса к везикулам, нарушение обратного захвата серотонина зависит от вида аллеля. В частности, наличие длинного (L) аллеля способствует более быстрому транспорту серотонина, а короткого (S) - к замедлению этого процесса. Ряд авторов [4, 7] утверждают, что S-аллель является доминантным, поэтому LS и SS-генотипы будут клинически проявляться одинаково.
Серотонин, который синтезировался энтерохромаффинными клетками кишечника в синаптическую щель при отсутствии точки приложения быстро разрушается моноаминоокси-дазой, поэтому активность транспортера серотонина имеет большое клиническое значение. Усиленный обратный захват серотонина приводит к чрезмерному его откладыванию в везикулах, а, следовательно, и к избытку его высвобождения при появлении малейших стимулов, что клинически проявляется диареей. Проведенное нами исследование подтверждает наличие та-
кого механизма, поскольку у 67% больных диффузный токсический зоб и СРК с преобладанием поносов обнаружено ЬЬ-вариант гена ЭЕЯТ.
Гомозиготные и гетерозиготные пациенты по короткому аллелю (ББ и ЬБ) имеют замедленную транскрипцию гена ЭЕЯТ, а это ведет к уменьшению экспрессии переносчика серотонина. При данных вариантах генотипа обратный захват серотонина из синаптической щели снижен, что проявляется у больных с тиреотоксикозом и СРК гипомоторными нарушениями с клиническими проявлениями в виде запора.
Поскольку ББ и ЬБ-генотипы нами выявлены в 2-х группах больных: с пониженной и сохраненной моторно-эвакуаторной функцией кишечника, можно утверждать о связи между недостаточным захватом серотонина и гипомоторными нарушениями кишечника. Возможно, наличие у больных с диффузным токсическим зобом без нарушения функции кишечника короткого аллеля гена БЕЯТ обусловил отсутствие проявлений гипермоторики у данной категории пациентов.
В когорте пациентов с диффузным токсическим зобом и СРК с преобладанием запоров количество Ь8-гетерозигот (75%) достоверно превышало количество больных с БЭ-генотипом (25%) (р<0,05).
У больных с тиреотоксикозом без признаков нарушения моторно-эвакуаторной функции кишечника результат имел противоположную тенденцию: БЭ-вариант выявлен у 79% лиц, а ЬБ-генотип - у 21% (р<0,05). Таким образом, несмотря на доминантность короткого аллеля, гетерозиготный генотип имеет свои клинические различия.
Учитывая полученные данные, правомерно считать, что одной из причин развития определенного вида кишечной дисфункции при тиреотоксикозе является полиморфизм гена БЕЯТ. Наличие двух длинных аллелей способствует усиленному обратному захвату серотонина, что клинически проявляется СРК с преобладанием поносов. Напротив, генотип с коротким аллелем приводит к уменьшению уровня серотонина у больных, что способствует снижению моторики кишечника при тиреотоксикозе.
Дальнейшее изучение полиморфизма гена БЕЯТ у больных с диффузным токсическим зобом и СРК, а также исследования его влияния на характер течения заболевания составило основу для наработанных нами новых подходов к оптимизации лечебной тактики у таких лиц.
Выводы.
1. Вид кишечной дисфункции при диффузном токсическом зобе связан с полиморфизмом гена БЕЯТ: ЬЬ-генотип ассоциируется с ускоренной моторикой кишечника, а Б - аллель - с замедленной.
2. Среди больных с диффузным токсическим зобом и СРК с преобладанием поносов чаще встречается носительство ЬЬ-варианта гена БЕЯТ (67%) при меньшем количестве ББ - гомозигот (25%) и Ь8-гетерозигот (8%).
3. При диффузном токсическом зобе с преобладанием запоров достоверно чаще встречается Ь8-вариант гена БЕЯТ (75%), тогда как 88-гомозиготами являются только 25% таких пациентов.
4. У больных с тиреотоксикозом без нарушения функции кишечника ЭЗ-генотип имели 79% лиц, а ЬЭ-вариант - 21%.5. Повышение эффективности лечения больных с диффузным токсическим зобом в сочетании с СРК возможно с учетом полиморфизма гена БЕЯТ.
Таблица
Фенотипическая характеристика больных с диффузным токсическим зобом в сочетании с синдромом раздраженного кишечника в зависимости от полиморфизма гена БЕЫТ, 11=38
№ Группа Генотип вЕЫТ
больных І.І., 96 (п) 1,8, 96 (п) ЯЯ, 96 (п)
1. ДТЗ и СРК с преобладанием ПОНОСОВ, 11=12 67% (8) 896 (1)* 25% (3)
2. ДТЗ и СРК с преобладанием запоров, п=12 о 75% (9) * 25% (3)
3- ДТЗ без дисфункции кишечника, 11=14 о 2196 (3) * 79% (п)
Примечание: * - достоверность различий показателей относительно гомозигот, р<0,05.
Литература
1. Зимницкая Т.В. Влияние содержания серотонина и гистамина в крови у детей с синдромом раздраженного кишечника на показатели биоелектрической активности толстой кишки/ТВ. Зимницкая // Современная педиатрия. - 2009. №1(23). - С. 114-116.
2. Москалюк І.І. Корекція нейро-гуморальних порушень при синдромі подразненого кишечнику у хворих на токсичні форми зобу/ І.І. Москалюк // Клін. та експерим. патологія.- 2012.Т.ХІ. №3(41), Ч. 2. -С.58-61.
3. Bengtson М.В. Irritable bowel syndrome in twins: genes and environment / M.B.Bengtson, T.Ronning, M.H. Vatn [et al.] // Gut. - 2006. №55. - P.1754-1759.
4. Jarrett M.E. Relationship of SERT polymorphisms to depressive and anxiety symptoms in irritable bowel syndrome / M.E. Jarrett, R. Kohen, K.C. Cain [et al. ] //Biol. Res. Nurs. - 2007. №9. - P.161-169.
5. Saito Y.A. The genetics of irritable bowel syndrome / Y.A. Saito, G.M.Petersen, G.R. Ill Locke [et al.] //Clin. Gastroenterol. Hepatol. - 2005. №3. - P.1057-1065.
6. Sikander A. Serotonin transporter promoter variant: analysis in Indian IBS patients and control population / ASikander, S.Rana, V.Sinha [et al.] // J. Clin. Gastro. - 2009. №43. - P.957-961.
7. Yeo A. Association between a functional polymorphism in the serotonin transporter gene and diarrhoea predominant irritable bowel syndrome in women / AYeo, P.Boyd, S.Lumsden [et al. ] //Gut. - 2004. №53. - P.1452-1458.
GENETIC FEATURES OF IRRITABLE BOWEL SYNDROME AMONG THYROTOXICOSIS PATIENTS
Bukovina State Medical University
e-mail: oKvfed@mail.ru
0.1. FEDIV l.l. MOSKALIUK
The review provides data on the correlation of functional SERT gene polymorphism and diversity of intestinal dysfunction in irritable bowel syndrome on the background of thyrotoxicosis. LL-variant SERT gene polymorphism was observed among patients with diffuse toxic goiter and irritable bowel syndrome with diarrhea predominance of 67%. Patients with thyrotoxicosis and irritable bowel syndrome with constipation predominance were carriers of SS-genotype in 7596 of cases and LS-genotype in 2596 ones. The presence of diffuse toxic goiter in patients without bowel disorders helped to diagnose LS-variant genotype in 7996 of patients, and the SS-genotype in 2196 ones. This requires correction treatment strategy in these patients, depending on the polymorphism of SERT gene.
Keywords: thyrotoxicosis, irritable bowel syndrome, polymorphism, gene.
