CC BY
13
УДК 591.111.1:(636.4.084.1:633.31.085.532)
И.В. Воронов, А.А. Варламов, В.Г. Дарханова,
H.С. Строева, Г.В. Филиппова
I.V. Voronov, A.A. Varlamov, V.G. Darkhanova, N.S. Stroyeva, G.V. Filippova
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПОРОСЯТ-ОТЪЁМЫШЕЙ ПРИ ДОБАВЛЕНИИ В РАЦИОН ТРАВЯНОЙ МУКИ СОРТООБРАЗЦА СЮЛИНСКАЯ ЛЮЦЕРНЫ ИЗМЕНЧИВОЙ (MEDICAGO VARIA)
HEMATOLOGICAL AND BIOCHEMICAL BLOOD INDICES OF WEANER PIGLETS WHEN THE DIET IS SUPPLEMENTED BY GRASS MEAL OF ALFALFA CANDIDATE VARIETY SYULINSKAYA (MEDICAGO VARIA)
Ключевые слова: поросята-отъёмыши, Medicago varia сортообразец Сюлинская, биодобавка, апигенин-7-глюкозид, лютеолин-7-глюкозид, дигидрокверцетин, апигенин, гематологические и биохимические показатели крови.
Исследования проведены на поросятах-отъёмышах крупной белой породы в зимний период на базе ООО «Хатасский свинокомплекс» г. Якутска РС(Я) в 2018 г. Изучали эффективность применения травяной муки из Medicago varia сортообразца Сюлинская в качестве кормовой биодобавки. Были сформированы контрольная и 2 опытные группы из поросят-отъёмышей в возрасте 40 дней по 9 гол. в каждой. Условия кормления и содержания поросят в группах были одинаковыми. Травяную муку, полученную на мельнице мелкого помола, смешивали с основным кормом в количестве 15,0 и 25,0 г/сут. на одного поросёнка и давали в течение 30 дней с момента отъёма. Определено общее содержание флавоноидов, входящих в состав травяной муки, и идентифицированы некоторые из них: апигенин-7-глюкозид, лютеолин-7-глюкозид, дигидрокверцетин и следовые количества апи-генина. Использование в рационе поросят-отъёмышей биодобавки из травяной муки M. varia сортообразца Сюлинская способствовало снижению воспалительных процессов и улучшению гематологических показателей. Введение в рацион биодобавки приводило к снижению окислительного стресса при интенсификации обменных процессов в организме 40-70-суточных поросят благодаря повышению низкомолекулярного антиоксидантного пула в клетках. Это может отражаться на повышении устойчивости животных к технологическим стрессовым воздействиям, связанным с отъемом. Целью работы яв-
лялось изучение влияния растительном муки из надземной части M. varia сортообразца Сюлинская на гематологические и биохимические показатели крови поросят-отъёмышей.
Keywords: weaner piglets, Medicago varia candidate variety Syulinskaya, biological supplement, apigenin-7-glucoside, luteolin-7-glucoside, dihydroquercetin, apigenin, blood hematological and biochemical indices.
The studies involved Large White weaner piglets in winter on the pig farm of the OOO "Khatasskiy svinokompleks" in the City of Yakutsk in 2018. The research goal was to study the effectiveness of using grass meal of alfalfa candidate variety Syulinskaya (Medicago varia) as a feed supplement to piglet diet. To conduct the experiment, the control group and two trial groups of piglets were formed; there were 9 animals of 40 day's age in each group. The nutrition and housing conditions were the same in all groups. The grass meal obtained in a pulverizing mill was mixed with the main feed in amount of 15.0 g and 25.0 g per day per piglet; the mix was fed for 30 days beginning with the weaning. The total flavonoid content in the composition of grass meal was determined and some fla-vonoids were identified: apigenin-7-glucoside, luteolin-7-glucoside, dihydroquercetin and trace amounts of apeginin. The use of grass meal of alfalfa candidate variety Syulinskaya (Medicago varia) as a feed supplement for weaner piglets of 40-70 days' age contributed to the reduction of inflammation and improved hematological indices. Due to the increase of low-molecular antioxidant pool in the cells, there was a decrease of oxidative stress level in the piglets. The use of grass meal supplement may increase the resistance of animals to technological stress associated with weaning.
Воронов Иван Васильевич, к.б.н., с.н.с., Институт биологических проблем криолитозоны СО РАН, г. Якутск. Тел.: (4112) 33-56-81. E-mail: viv_2002@mail.ru. Варламов Алексей Александрович, аспирант, Якутская государственная сельскохозяйственная академия. Тел.: (4112) 40-90-20. E-mail: varlamov.alekse.1991@mail.ru.
Voronov Ivan Vasilyevich, Cand. Bio. Sci., Senior Staff Scientist, Institute of Biologic Problems of Cryolithic Zone, Sib. Branch of Rus. Acad. of Sci., Yakutsk. Ph.: (4112) 33-56-81. E-mail: viv_2002@mail.ru. Varlamov Aleksey Aleksandrovich, post-graduate student, Yakutsk State Agricultural Academy. Ph.: (4112) 40-90-20. E-mail: varlamov.alekse.1991@mail.ru.
Дарханова Валентина Гаврильевна, инженер-исследователь, Институт биологических проблем крио-литозоны СО РАН, г. Якутск. Тел.: (4112) 33-56-81. E-mail: darhana@mail.ru.
Строева Наталья Семеновна, инженер исследователь, Институт биологических проблем криолитозоны СО РАН, г. Якутск. Тел.: (4112) 33-56-81. E-mail: nata-li.stroeva.62@mail.ru.
Филиппова Галина Валерьевна, к.б.н., с.н.с., Институт биологических проблем криолитозоны СО РАН, г. Якутск. Тел.: (4112) 33-56-81. E-mail: nureeva@yandex.ru.
Darkhanova Valentina Gavrilyevna, Research Engineer, Institute of Biologic Problems of Cryolithic Zone, Sib. Branch of Rus. Acad. of Sci., Yakutsk. Ph.: (4112) 33-56-81. E-mail: darhana@mail.ru.
Stroyeva Natalya Semenovna, Research Engineer, Institute of Biologic Problems of Cryolithic Zone, Sib. Branch of Rus. Acad. of Sci., Yakutsk. Ph.: (4112) 33-56-81. E-mail: nata-li.stroeva.62@mail.ru.
Filippova Galina Valeryevna, Cand. Bio. Sci., Senior Staff Scientist, Institute of Biologic Problems of Cryolithic Zone, Sib. Branch of Rus. Acad. of Sci., Yakutsk. Ph.: (4112) 33-56-81. E-mail: nureeva@yandex.ru.
Введение
Создание базы кормов и кормовых добавок для ведения высокопродуктивного животноводства является одной из приоритетных задач сельского хозяйства. Люцерна как кормовая культура отличается высокой урожайностью и позволяет получать высокоэнергетические корма и кормовые добавки в виде зеленой массы, сена, сенажа и травяной муки [1]. Известно, что люцерна (Medicago L.) содержит большое количество белка, витаминов и минеральных веществ [2]. Исследования экстрактов люцерны выявили противовоспалительные, экстрогеноподобные, антиокси-дантные свойства, а также могут применяться как корректор белкового обмена [3]. Вследствие этого целью работы являлось изучение влияния растительной муки из надземной биомассы M. varia сортообразца Сюлинская на гематологические и биохимические показатели крови поросят-отъёмышей.
Объекты и методы
Исследования проведены на поросятах-отъемышах крупной белой породы в зимний период на базе ООО «Хатасский свинокомплекс» г. Якутска РС(Я). Формировались контрольная и 2 опытные группы из поросят-отъёмышей (возраст 40 дней) по 9 гол. каждой. Животных подбирали по принципу аналогов с учетом происхождения, массы тела и развития. Условия кормления и содержания поросят в группах были одинаковыми. Согласно схеме опыта рацион по питательности кормов, энергетическому уровню и содержанию других основных питательных веществ был в пределах требуемой номы ВИЖа. Разница в кормлении заключалась в том, что животные опытных групп получали травяную муку Medicago varia в количестве 15,0 (2-я группа) и 25,0 г/сут. (3-я группа) на одного поросёнка в течение
30 дней с момента отъема. В рационе поросят использовался комбикорм СКК-58.
Надземную часть растений M. varia брали в фазе начала цветения, травяную муку получали с использованием мельницы Fritsch (Германия). Концентрацию хлорофиллов и каротиноидов в травяной муке устанавливали по методике, описанной Н.Н. Третьяковым и соавт. [4].
Определение содержания апигенин-7-глюко-зида, лютеолин-7-глюкозида, дигидрокверцетина и апигенина в метанольных экстрактах осуществляли методом ВЭЖХ на хроматографе Милихром А-02 (Россия), пробоподготовку и хроматографи-рование выполняли согласно методу [5].
Для гематологических и биохимических исследований кровь брали из яремной вены, утром до кормления в день отъема и на 30-й день. Исследование проводили с использованием гематологического анализатора IDEXX VetAutoread (США) и биохимического анализатора iCubio iMagic V7 (Китай). Суммарное содержание низкомолекулярных антиоксидантов (НМАО) в эритроцитарных клетках проводили по методу [6]. Уровень пере-кисного окисления липидов (ПОЛ) в эритроцитар-ных клетках оценивали по накоплению малонового диальдегида (МДА) [7]. Спектрофотометриче-ские исследования проводили с использованием спектрофотометра UV-2600 SHIMADZU (Япония). Измерения выполняли в четырех биологических и аналитических повторностях. Статистический анализ полученных данных - с помощью программы Statistica 10. Достоверность различий определялась по критерию Стьюдента, различия считали достоверными при Р<0,05.
Экспериментальная часть и обсуждение результатов
В травяной муке определено общее содержание флавоноидов, которое составляло 8,49±0,17 мг-экв кверцетина/г. Содержание хло-
рофиллов а и Ь, каротиноидов было 0,51±0,01 и 0,24±0,01 мг/г соответственно. Идентифицированы флавоноиды: апигенин-7-глюкозид 0,64±0,01 мг/г; лютеолин-7-глюкозид 0,28±0,01 мг/г, дигидрокверцетин 0,07±0,01мг/г (Р<0,05) и следовые количества апигенина.
По результатам общего клинического анализа крови поросят установлено, что в контрольной группе поросят в отличие от экспериментальных, наблюдался лейкоцитоз, количество лейкоцитов в конце опыта увеличивалось на 15,4% (Р<0,05) (табл. 1).
Количество эритроцитов в крови поросят контрольной группы снижалось на 16,3%, у 2- и 3-й групп - до 23,6% (Р<0,05), по сравнению с начальными показателями. Это может быть вызвано интенсификацией обменных процессов в растущем организме при введении в рацион растительной муки. Во 2-й группе также отмечено снижение на 30-й день уровня гемоглобина и ге-матокрита на 14,1 и 12,5% (Р>0,05) соответственно, по сравнению с контролем. Введение в рацион травяной муки приводило к нормализации уровня
Гематологические показатели к
тромбоцитопоэза в организме поросят. На 30-й день количество тромбоцитов статистически достоверно не отличалось от контрольной группы.
В лейкограмме поросят всех исследованных групп наблюдался ядерный сдвиг вправо за счет увеличения количества зрелых форм нейтрофи-лов, что может быть связано с проявлением анемии. Во всех исследованных группах поросят на протяжении опыта наблюдалось увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов: в контроле - в 5,1 раза, у 2- и 3-й - в 2,3 и 1,7 раза соответственно (табл. 2).
Количество сегментоядерных нейтрофилов увеличивалось в контрольной и 2-й группах в 1,3 и 1,2 раза соответственно. Введение в рацион травяной муки способствовало снижению количества эозинофилов (2-я группа), тогда как в контроле их количество возрастало в 1,5 раза. Число моноцитов в контрольной и 2-й группах относительно фона снижалось в 1,7 раза. Во 2-й группе поросят наблюдалась лимфопения, количество лимфоцитов снижалось на 22,0%, в остальных группах уровень лимфоцитов не изменялся.
Таблица 1
ви поросят-отъемышей (M±SE)
Показатели Группа
1-я - контроль 2-я - 15 г 3-я - 25 г
день отъема 30-й день день отъема 30-й день день отъема 30-й день
Лейкоциты, 109/л 29,53±1,48 34,10±1,711 35,60±1,78 34,29±1,72 39,30±1,97 36,90±1,85
Эритроциты, 1012/л 7,35±0,37 6,32±0,321 6,69±0,33 5,41 ±0,2712 7,04±0,35 5,70±0,2912
Гемоглобин, г/л 112,0±5,60 110,0±5,50 106,50±5,33 91,50±4,5812 111,0±5,55 104,0±5,20
Гематокрит, % 33,40±1,67 29,30±1,471 32,20±1,61 25,65±1,2812 31,75±1,59 27,60±1,381
Тромбоциты, 109/л 593,67±29,68 591,67±29,58 487,0±24,35 536,50±26,08 775,50±38,78 586,0±29,301
Примечание. 1Гематологические показатели крови поросят в группе на начало и конец опыта достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05). Гематологические показатели крови поросят на конец опыта относительно контрольной группы достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05).
Таблица 2
Лейкоцитарная формула крови поросят экспериментальных групп (M±SE)
Показатели, 109/л Группа
1-я 2-я 3-я
день отъема 30-й день день отъема 30-й день день отъема 30-й день
Нейтрофилы п/я 0,41±0,02 2,10±0,111 0,52±0,03 1,22±0,0612 1,18±0,06 2,01 ±0,101
с/я 10,57±0,53 13,53±0,681 15,47±0,77 18,57±0,9312 13,11±0,66 12,08±0,602
Эозинофилы 0,41±0,02 0,60±0,031 0,36±0,02 012 0 02
Моноциты 2,18±0,11 1,30±0,071 2,69±0,13 1,57±0,0812 3,33±0,17 3,47±0,172
Лимфоциты 15,95±0,80 16,56±0,78 16,57±0,83 12,93±0,6512 21,19±1,08 19,29±0,9612
Примечание. Жоличество лейкоцитов в крови поросят на начало и конец опыта в группе достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05). 2Количество лейкоцитов у поросят на конец опыта относительно контрольной группы достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05).
Таблица 3
Биохимические показатели крови поросят-отъёмышей в экспериментальных группах (M±SE)
Показатели Группа
1-я 2-я 3-я
день отъема 30-й день день отъема 30-й день день отъема 30-й день
Общий белок, г/л* 60,43±3,02 61,53±3,08 58,8±2,94 61,00±3,05 62,6±3,13 60,80±3,04
Альбумин, г/л* 37,97±2,0 29,40±1,471 34,85±1,74 26,40±1,3212 36,95±1,84 29,15±1,461
Глобулин, г/л* 22,47±1,12 32,13±1,611 23,95±1,20 34,60±1,731 25,65±1,28 31,65±1,581
Аланинамино-трасфераза, Ед/л* 64,17±3,21 60,83±3,04 49,8±2,49 55,00±2,752 50,2±2,51 58,60±2,931
Щелочная фосфотаза, Ед/л* 519,63±25,98 310,27±15,511 546,1±27,31 353,05±17,6512 463,5±23,18 426,40±21,232
Креатинин, мкмоль/л* 103,47±5,17 80,23±4,011 96,65±4,83 93,10±4,662 99,75±4,99 69,00±3,4512
Мочевина, ммоль/л* 5,30±0,27 4,46±0,221 5,33±0,27 4,94±0,26 5,37±0,27 4,10±0,211
Глюкоза, ммоль/л* 5,83±0,29 4,53±0,231 5,46±0,27 3,74±0,1912 5,34±0,27 3,80±0,1912
НМАО мг-экв кверц/мл эр** 0,31±0,01 0,52±0,011 0,29±0,01 0,56±0,0112 0,22±0,01 0,58±0,0112
МДА нмоль/мл эр** 2,42±0,02 14,57±0,141 2,12±0,02 10,41 ±0,101,2 2,28±0,02 11,73±0,111,2
Примечание. 1Биохимические показатели крови поросят на начало и конец опыта в группе достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05*; Р<0,01**). 2Биохимические показатели крови поросят на конец опыта относительно контрольной группы достоверно различаются (критерий Стьюдента, Р<0,05*; Р<0,01**).
Биохимические исследования крови поросят-отъемышей выявили, что в течение опыта количество общего белка не менялось. На конец эксперимента количество альбуминовой фракции в сыворотке крови уступало глобулиновой в 1,3 раза, что может указывать на повышенную функциональную активность тканей в организме растущих поросят (табл. 3) [8].
Повышение уровня глобулинов в контрольной и 2-й группах было в 1,4 раза, а у 3-й группы - в 1,2 раза относительно фона. Уровень АЛТ в сыворотке крови у 2- и 3-й групп увеличивался на 10,9 и 16,7% соответственно относительно их фона. Щелочная фосфатаза в крови поросят контрольной и 2-й групп на протяжении опыта снижалась в 1,7 и 1,5 раза соответственно. Уровень креатинина в крови контрольной и 3-й группы поросят относительно фона снижался на 22,5 и 30,8% соответственно. Снижение содержания креатинина в крови при введении в рацион биодобавки в количестве 25 г/сут. на 1 гол. может указывать на улучшение креатининового обмена, стимуляцию работы почечного фильтра и увеличение физической активности поросят. При этом функциональное состояние почек поросят на 30-й день опыта, оцениваемое по уровню мочевины в крови у исследованных групп, находилось на одном уровне. При введении в рацион травяной муки было зафиксировано снижение количества
глюкозы в крови до 1,5 раза, что может говорить об интенсификации углеводного обмена в организме опытных групп поросят. В эритроцитарных клетках поросят контрольной группы на конец опыта наблюдалось увеличение количества НМАО в 1,7 раза, у 2-й группы их количество увеличивалось в 1,9 раз, у 3-й - в 2,6 раз, относительно их фонового содержания. При этом на протяжении опыта концентрация МДА в эритроцитах у контрольной группы возрастала в 6,0 раз, у 2-й - в 4,9, у 3-й - в 5,1 раза.
Выводы
Использование в рационе поросят-отъёмышей травяной муки из сортообразца Medicago varia Сюлинская в количестве 15,0 и 25,0 г/сут. в течение 30 дней способствовало снижению воспалительных процессов, улучшению гематологических показателей в организме 40-70-суточных поросят. Снижение окислительного стресса, по-видимому, обусловлено повышением низкомолекулярного антиоксидантного пула в клетках крови.
Библиографический список
1. Шеуджен А.Х., Онищенко Л.М., Хурум Х.Д. Люцерна. - Майкоп: ОАО Полиграфиздат «Адыгея», 2007. - 226 с.
2. Тарковский М.И. Люцерна. - М.: Колос, 1974. - 240 с.
3. Еременко Р.Ф., Ковалев С.В., Мало-штан Л.Н., Ковалев В.Н. Экстракт из травы люцерны посевной (Medicago sativa L.) перспективный корректор белкового обмена // Вестник Витебского государственного медицинского университета. - 2014. - С. 138-142.
4. Третьяков Н.Н., Карнаухова Т.В., Панич-кин Л.А. Практикум по физиологии растений. - М., 1990. - 271 с.
5. Шеин А.А., Прокопьев И.А., Филиппова Г.В., Журавская А.Н. Влияние техногенного загрязнения на содержание фотосинтетических пигментов и флавоноидов Matricaria Chamomila (Asteraceae) // Растительные ресурсы. - 2014(2). - С. 235-241.
6. Hunter, F.E., Gebicki, J.M., Hoffstein, P.E., Weinstein, J., Scott, A. (1963). Swelling and lysis of rat liver mitochondria induced by ferrous ions. J. Biol. Chem. 238: 828-835.
7. Кондрахин И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. - М.: Колос, 2004. - 520 с.
8. Кислинская А.И., Калиниченко Г.И. Оценка естественной резистентости организма свиней крупной белой породы венгерской селекции в период адаптации // Современные тенденции и технологические инновации в свиноводстве: матер. Междунар. науч.-практ. конф. - Горки, 2012. -С. 78-83.
References
1. Sheudzhen A.Kh., Onishchenko L.M., Khurum Kh.D. Lyutserna. - Maykop: OAO Poligrafizdat «Ady-geya», 2007. - 226 s.
2. Tarkovskiy M.I. Lyutserna. - M.: Kolos, 1974. -240 s.
3. Yeremenko R.F. Ekstrakt iz travy lyutserny po-sevnoy (Medicago sativa L.) perspektivnyy korrektor belkovogo obmena / R.F. Yeremenko, S.V.Kovalev, L.N. Maloshtan, V.N. Kovalev // Vestnik Vitebskogo gosudarstvennogo meditsinskogo universiteta. -2014. - S. 138-142.
4. Tretyakov N.N., Karnaukhova T.V., Panich-kin L.A. Praktikum po fiziologii rasteniy. - M., 1990. -271 s.
5. Shein A.A. Vliyanie tekhnogennogo zagrya-zneniya na soderzhanie fotosinteticheskikh pigmen-tov i flavonoidov Matricaria Chamomila (Asteraceae) / A.A. Shein, I.A. Prokopev, G.V. Filippova, A.N. Zhuravskaya // Rastitelnye resursy. - 2014. -No. 2. - S. 235-241.
6. Hunter, F.E., Gebicki, J.M., Hoffstein, P.E., Weinstein, J., Scott, A. (1963). Swelling and lysis of rat liver mitochondria induced by ferrous ions. J. Biol. Chem. 238: 828-835.
7. Kondrakhin I.P. Metody veterinarnoy klinich-eskoy laboratornoy diagnostiki. - M., Kolos, 2004. -520 s.
8. Kislinskaya A.I., Kalinichenko G.I. Otsenka estestvennoy rezistentosti organizma sviney krupnoy beloy porody vengerskoy selektsii v period adaptatsii: materialy Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. Sovremennye tendentsii i tekhnologicheskie innovatsii v svinovodstve. - Gorki, 2012. - S. 78-83.
Исследование выполнено в рамках проекта 0376-2019-0003 АААА-А17-117020110056-0 «Фундаментальные и прикладные аспекты изучения разнообразия растительного мира Северной и Центральной Якутии».
+ + +
УДК 639.3.043 Д.А. Ранделин, А.И. Новокщенова, Е.А. Морозова, Мохсен А.М.Я. Эльебяри D.A. Randelin, A.I. Novokshchenova, Ye.A. Morozova, Mohsen A.M.Ya. Elebiary
АНАЛИЗ ВЛИЯНИЯ БЕЛКОВОГО КОНЦЕНТРАТА НА МИКРОБИОТУ КИШЕЧНИКА МОЛОДИ ЛЕНСКОГО ОСЕТРА В УСЛОВИЯХ УЗВ
ANALYSIS OF PROTEIN CONCENTRATE EFFECT ON INTESTINAL MICROBIOTA OF JUVENILE SIBERIAN STURGEON IN RECIRCULATION AQUACULTURE SYSTEM
Ключевые слова: продукционный комбикорм, лен- Keywords: production formula feed, Siberian sturgeon ский осетр, микробиота кишечника, белковый концен- (Acipenser baerii), intestinal microbiota, protein concentrate, трат, рыбная мука в составе комбикорма осетровых. fish meal as part of sturgeon feed.
