CC BY
61
Лечение и профилактика
УДК 619.616:995.1-085
ГЕЛЬМИНТОФАУНА ПЛОТОЯДНЫХ ГОРОДА ПЯТИГОРСКА И УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕР БОРЬБЫ
В.А. ОРОБЕЦ доктор ветеринарных наук И.В. ЗАИЧЕНКО аспирант
Ставропольский государственный аграрный университет, 355042 г. Ставрополь, ул. 50 лет ВЛКСМ, д. 67, корп. 4, кв. 4, e-mail: orobets@,stgau. ru
Установлен видовой состав гельминтов, паразитирующих у кошек и собак в условиях курортной зоны Кавказских минеральных вод. Разработана новая лекарственная форма антигельминтика на основе албендазола и изучены его биологическая активность и токсические свойства.
Ключевые слова: гельминты, кошки, собаки, лечение, город Пятигорск.
Гельминты домашних плотоядных издавна являются объектом особого интереса - как возбудители болезней человека и домашних продуктивных животных. В последние годы увеличение числа домашних плотоядных, в том числе и в таких городах как Пятигорск, способствует распространению заразных болезней среди животных и людей. Поскольку город Пятигорск находится на территории Кавказских Минеральных вод, он является курортной зоной и округом санитарной охраны. Поэтому изучение гельминтофау-ны собак и кошек этого региона особо актуально.
Многие из существующих антигельминтиков [2, 3, 5] действуют сразу на нескольких паразитов. Это препараты группы бензимидазолкарбаматов, которые широко используются в ветеринарной медицине в связи с их незначительной токсичностью. Производные бензимидазола эффективны в основном против нематод и в меньшей степени против цестод и трематод. Они действуют как ингибиторы полимеризации тубулина, фиксируя бета-тубулин нематод или цестод [8]. Помимо этого, считают, что механизм их действия связан с теми или иными нарушениями энергетического обмена, в частности, с разобщением цепочки окислительного фосфорилирования и с воздействием на фумаратредуктазу [7]. Производные бензимидазола вызывают дезорганизацию большого числа скелетоформирующих клеток и клеток эпителия пищевода у нематод [4]. При неоднократном назначении бензимидазолы активно действуют на цестод рода Taenia. В терапевтической дозе они не эффективны против ленточных червей рода Echinococcus и Diрylidium caninum. Ларвицидное действие бензимидазолов при аскаридозе (Toxocara canis или T. cati) основано на пенетрации препарата в ткани, что не поддается количественной оценке, и поэтому дозу препарата часто приходится завышать по сравнению с рекомендуемой [9].
Наряду с созданием новых препаратов, важным является усовершенствование уже существующих антигельминтиков [1]. Один из наиболее эффективных бензимидазолов - албендазол. Токсическая доза албендазола для крыс 500 мг/кг. ЛД50 для крыс при введении через рот 2400 мг/кг [6]. Поэто-
му, изучение свойств албендазола и создание эффективных лекарственных форм на его основе является актуальным.
Так, в Испании доказано, что скорость распада албендазола, а также коэффициент растворимости увеличиваются при смешивании его с поливинил-пирролидоном (PVP К 12) [14]. Установлена зависимость влияния показателя pH на водную растворимость албендазола [13]. Его растворимость была испытана в диапазоне pH 1,2-7,5. Она была ниже при самых высоких показателях pH. Полученный коэффициент растворимости составил 0,376 мг/мл в буферном растворе на 1 ,2 pH.
Определено, что комбинация из албендазола и 2-гидроксипропил-циклодекстрина в отношении 1/10 привела к существенному увеличению во-дорастворимости препарата - до 3500 раз. После чего она была рекомендована для парентерального введения из-за ее хороших свойств растворимости и безопасности используемого циклодекстрина [10].
Изучено комплексообразование албендазола с четырьмя циклодекстри-нами, a-CD, P-CD, y-CD, и гидроксипропилами (HP)-P-CD при использовании электронной абсорбционной спектроскопии и молекулярной механики [11].
В Саудовской Аравии Фарс К. Аланази увеличили показатель распада албендазола, готовя его микрочастицы с определенными гидрофильньными полимерами, типа гидроксипропил метилцелюлоза, поливинил алкоголь, и поливинилпирралидон используя технику «Spray-Drying» [12].
Материалы и методы
Работу по определению видового состава гельминтов и определению терапевтической эффективности новой лекарственной формы албендазола выполняли в 2009 г. на базе Пятигорской городской станции по борьбе с болезнями животных.
Для изучения особенностей эпизоотологии гельминтозов были исследованы фекалии от 121 собаки, приведенных владельцами для клинического обследования в лечебницу из всех административных районов города. Диагноз ставили по результатам копроовоскопических исследований методом флотации с использованием в качестве флотационной жидкости раствора Бреза (MgSO4*7H2O +Na2S2O3*5H2O). При этом учитывали количество яиц гельминтов в 1 г фекалий животных при использовании счетной камеры «McMaster» до и через 10 сут после введения препарата.
В опыт по определению терапевтической дозы новой лекарственной формы албендазола подобрали 20 спонтанно инвазированных T. canis собак, которых разделили на 4 группы по 5 голов в каждой. В 1 г фекалий до лечения обнаружено, в среднем, 126,27±4,49 экз. яиц токсокар. Препарат в форме 5%-ной наноэмульсии вводили внутримышечно животным первой, второй и третьей групп в дозах соответственно 0,1; 0,15 и 0,2 мл/кг (0,5; 7,5 и 10 мг/кг по ДВ). Собакам четвертой группы препарат не вводили и они служили контролем. После дегельминтизации вели наблюдения за клиническим состоянием животных. Эффективность препарата рассчитывали в опыте типа «критический тест» согласно Руководству, одобренному Всемирной Ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии (1994).
Изучение острой и хронической токсичности препарата проводили в сентябре-октябре 2009 г. на базе кафедры терапии и фармакологии СтГАУ на белых мышах (самцы и самки массой 19-21 г). Препарат животным вводили в возрастающих дозах с равным интервалом между ними, учитывали число павших и выживших животных, процент летальности и ее выражение в про-битах (по Ступникову, 1975).
Раздражающее действие препарата оценивали методом конъюнктиваль-ных проб на четырех кроликах двухмесячного возраста. Препарат разводили из расчета 1 мг в 1 мл воды для инъекций. Кроликам под верхнее веко с помощью глазной пипетки вводили по одной капле новой лекарственной формы
бензимидазола в правый глаз, а в левый глаз аналогично - воду для инъекций (контроль).
Результаты и обсуждение Анализ полученных данных показал, что паразитофауна собак г. Пятигорска представлена 6 видами возбудителей: Toxocara canis, Toxascaris leonine, Trichocephalus vulpis, A. caninum, U. stenocephala, Dipylidium caninum. Экстенсивность инвазии обследованных собак составила 59,5 % , то есть из 121 животного оказались инвазированы 72. Из них 23 собаки были инвазиро-ванны T. canis; у 15 собак наблюдали смешанную инвазию T. canis + T. leonina; у 12 - T. vulpis; 9 собак были инвазированны T. leonine, 6 - A. caninum, 4 -U. stenocephala, 3 - D. caninum;
При определении минимально токсичных доз (максимально переносимых) при парентеральном введении препарата стартовая доза составила 100 мг/кг массы тела. В группе 1, животным которой задавали эту дозе, не происходило изменений в поведении и симптомов ухудшения физического состояния животных. У животных 2-4-х групп, которым вводили дозы 130, 160, 190 и 220 мг/кг соответственно, также никаких видимых отклонений и летальных исходов не отмечено. Доза 250 мг/кг, введенная мышам 5-й группы, хотя и не вызвала смерти ни одного из четырех животных, но при этом наблюдали кратковременные периоды возбуждения, которые сменялись периодами глубокого угнетения, продолжающегося 2,5±0,5 ч. При введении препарата в дозе 250 мг/кг были обнаружены явления, указывающие на токсический эффект, но при этом гибели не отмечено. Эта доза была принята в качестве максимально переносимой (МПД) и стартовой для проведения эксперимента по определению летальных доз при парентеральном введении.
При пероральном введении показатель МПД был значительно выше. Так, доза (в пересчете на действующее вещество), равная 2000 мг/кг, гибели животных не вызывала, но были обнаружены признаки наступления токсического эффекта препарата.
Величины ЛД16 и ЛД84 определили графически на основании доз в мг и соответствующих пробитов (табл. 1 ).
1. Острая токсичность новой лекарственной формы бензимидазола _при однократном введении (мг/кг)_
Способ введения Параметры токсичности SLD50
МПД ЛД16 ЛД50 ЛД84 ЛД100
Парентеральное 250 285 477,5 610 650 ±5,86
Пероральное 2000 2200 2720 3400 3600 ±20
Из данных таблицы 1 следует, что новая лекарственная форма албенда-зола по своим токсикологическим характеристикам относится к умеренно опасным для теплокровных животных веществам и позволяет, в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76, отнести ее к III классу опасности.
После введения препарата кроликам под верхнее веко наблюдали незначительное возбуждение, которое длилось около минуты. Через 30 минут у трех животных в правом глазе отмечали незначительное изменение цвета (конъюнктива приобрела слабый бледно-розовый оттенок), что может свидетельствовать о небольшом увеличении кровотока. В левом глазе изменений не зарегистрировано.
Видимых различий в состоянии левых и правых глаз у опытных кроликов не наблюдали в течение двух суток. Таким образом, изучаемый препарат не обладает выраженным раздражающим действием и его можно применять животным, в том числе и внутримышечно.
Двукратные копрологические исследования проб собак третьей группы через 10 сут после введения препарата в дозе 0,2 мл/кг (10 мг/кг по ДВ) показали, что животные полностью освободились от гельминтов. Применение препарата в дозах 0,1 и 0,15 мл/кг обеспечило соответственно 40 и 80%-ное снижение интенсивности выделения яиц гельминтов (табл. 2).
2. Эффективность новой лекарственной формы албендазола __при токсакарРзе собак (n=5) _
№ Доза, Среднее число яиц в 1 г фека- Освобо- ЭЭ, ИИ,
группы мг/кг, лий, экз. дилось от % %
по ДВ до лечения после лечения инвазии,
гол.
1 5,0 125,8±9,6 22,9± 3,6 3 60 81,8
2 7,5 131,5±8,3 4,5±2,0 4 80 96,6
3 10,0 127,2±10,8 - 5 100 100
4 - 120,6±12,4 124,5± 9,1 0 -
При наблюдении за животными отмечено, что собаки хорошо переносили препарат. Побочного действия препарата на организм не установлено.
Таким образом, в результате проведенных исследований установлена высокая степень экстенсинвазированности плотоядных в условиях курортной зоны г. Пятигорска и необходимость определения общей и региональной зараженности гельминтами городских плотоядных в связи с их территориальным распределением и сезоном года. Установлено, что наноэмульсия албендазола в дозе 0,2 мл/кг (10 мг/кг по ДВ) при однократном парентеральном введении, по данным гельминтокопрологических исследований, показала 100%-ную эффективность при токсокарозе собак.
Литература
1. Архипов И.А. Новые отечественные антгельминтики для терапии гель-минтозов животных // Ветеринария. - 1998. - № 11. - С. 5-7.
2. Архипов И.А. Распространение гельминтозов кошек в России и их терапия с применением нового антигельминтного лекарственного средства Про-фендер производства фирмы «Байер» // Ветеринар. - 2007. - № 2. - С. 12-15.
3. Архипов И.А. Распространение гельминтозов собак и кошек в России и применение празитела для борьбы с ними // Рос. вет. журнал. - 2005. - № 2. -С.26-30.
4. Бене Ф. Выбор антигельминтных средств при гельминтозе у плотоядных // Ветеринар. - 1999. - № 5-6. - С. 4-9.
5. Виолин Б.В., Верещагина Л.А. Терапевтическая эффективность применения антигельминтного препарат на основе мебендазола и празиквантела для лечения собак // Матер. Междунар. симп. «Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклеидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний». - Казань, 2005. - Ч. 3. - С. 93-95.
6. Кузьмин А.А. Антгельминтики в ветеринарной медицине. - 2004. - № 2. - 15 с.
7. Новик Т.С., Ястреб В.Б. Механизм действия антгельминтиков // Матер. 8-го Междунар. конгр. по проблемам вет. мед. мелких домашних животных. - 2000. - С. 168-172.
8. Терней А.В. Современная органическая химия. - М.: Мир, 1981. - Т. 1. - 670 с.
9. Травень В.Ф. Органическая химия. - М.: Академкнига, 2004. - Т. 1. -708 с.
10. Bassani V.L., Krieger D., Duchene D., Wouessidjewe D. // Enhanced water-solubility of albendazole by hydroxypropyl-P-cyclodextrin complexation // J. of
Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry. - 1996. - V. 25, № 1-3. - P. 149-152.
11. Diaz David, M. Josefa Bernad Bemad, Jesus Gracia Mora, Carolina Marta Escobar Llanos Complexation and Solubility Behavior of Albendazole with Some Cyclodextrins // Pharmaceutical Development and Technology. - 1998. - V. 3, № 3. - P. 395-403.
12. Alanazi K. Fars, Mahmoud El-Badry, Mahrous O. Ahmed, Ibrahim A. Al-sarra Improvement of Albendazole Dissolution by Preparing Microparticles Using Sprav-Drvinq Technique // Scientia Pharmaceutica. - 2007. - V. 75. - P. 63-79.
13. Torrado Susana, Torrado Santiago, Torrado Juan Jose, Cadorniga Rafael Formulation parameters of Albendazole solution. - 1996. - V. 140, № 1. - P. 45-50.
14. Torrado Susana, Torrado Santiago, Torrado Juan Jose Preparations-dissolution and characterization of albendazole solid dispersions. - 1996. - V. 140, № 2. - P. 247-250.
Helminthfauna of carnivorous in Pyatigorsk and improvement of measures of
its control
V.A. Orobets, I.V. Zaichenko
The specific structure of helminths parasitizing at cats and dogs in conditions of the resort zone of the Caucasian Mineral Waters is established. The new medicinal form of anthelmintic on the basis of albendazole is developed and its biological activity and toxic properties are investigated.
Keywords: helminths, cats, dogs, treatment, Pyatigorsk.
