CC BY
181
На 3-5-й день после применения препарата у телят опытной группы улучшилось общее состояние, снизилась температура тела, улучшился аппетит, прекратилась диарея.
После однократной обработки из 15-ти проб фекалий телят опытной группы ооцисты эймерий были обнаружены в 3-х пробах. У телят контрольной группы ооцисты эймерий были выделены во всех пробах.
Исследование проб фекалий после обработки препаратом проводили и на 15-21 день. Результаты были следующие: на 15-й день после использования препарата толтарокс в фекалиях телят опытной группы наблюдали увеличение интенсивности инвазии, которая составляла 1 -3 экз. ооцист в поле зрения микроскопа, а на 22-й день - интенсивность инвазии возросла до 5-7 экземпляров. При этом наблюдали выделение полужидких фекалий, часто с примесью слизи, снижение аппетита, шерсть взъерошена, молодняк отстает в росте и развитии.
Таким образом, экстенсэффективность препарата толтарокс при однократном применении составила 80%. Побочных явлений у телят после применения препарата не регистрировали. Наши наблюдения показывают, что через 21 день у телят наблюдается увеличение ИИ до 5-7 экз. ооцист эймерий в поле зрения микроскопа. При этом наблюдается снижение аппетита, фекалии полужидкие, с примесью слизи, молодняк отстает в росте и развитии. Рекомендуем исследовать фекалии после обработки телят кокцидиостатиком на 5-15-22-е сутки.
Ооцисты эймерий, которые выделились с фекалиями до применения препарата, длительное время сохраняются во внешней среде, способствуют повторному заражению животных. Поэтому необходимо воздействовать не только на эндогенные, но и на экзогенные стадии, чтобы не допустить реинвазии животных.
Литература: 1. Подкопаев В.М., Степанов А.В. Инфекционные и инвазионные болезни молодняка крупного и мелкого рогатого скота. - М.: Россельхозиздат, 1985. - С. 163-166. 2. Урасова Э. И. //Дис... канд. биол. наук. Махачкала, 2008. - 143с.
Efficacy of Toltarox at Eimeria infection of cattle youngsters.
Andrushko E.A., Egorov S.V., Malunov S.N., Romanenko P.V. D.K. Belyaev Ivanovo State Agricultural Academy.
Summary. Extensefficacy of Toltarox given at single peroral dose level of 3 ml/10 kg of body weight was 80%. One recommends investigating faeces on 5; 15 and 22 days post treatment.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ НОВЫХ АНТИГЕЛЬМИНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ, ВКЛЮЧАЮЩИХ
28
МЕЖМОЛЕКУЛЯРНЫЕ КОМПЛЕКСЫ АЛБЕНДАЗОЛА И ФЕНБЕНДАЗОЛА С ВОДОРАСТВОРИМЫМИ ПОЛИМЕРАМИ
111 2 Архипов И.А. , Гламаздин И.И. , Варламова А.И. , Данилевская Н.В. ,
Халиков С.С.3, ЧистяченкоЮ.С.4, Душкин А.В.4
!ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
2
Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина
Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН 4Институт химии твердого тела и механохимии СО РАН
Введение. В настоящее время методы лечения гельминтозов животных базируются на применении широкого ассортимента антигельминтных препаратов, некоторые из которых часто не обеспечивают необходимую эффективность и нередко их использование может вызывать нежелательные побочные эффекты, наносящие вред здоровью животных [1]. В связи с этим в разных странах постоянно ведется разработка новых и усовершенствование уже применяемых антигельминтиков. Ранее, т.е. во второй половине ХХ века основным направлением фармации было создание новых препаратов -субстанций. Только в ВИГИСе в 60-70-е годы прошлого века синтезировано свыше 150 соединений, из которых около 30 при скрининге проявили антигельминтные свойства. Особо ценными из них были гексихол, битионол, оксид, оксинид, пиперазин, гигроветин и др. Многие из них применялись на практике [2,3]. В настоящее время имеется достаточный арсенал нематодоцидных, цестодоцидных и трематодоцидных препаратов.
Другим направлением инноваций является создание новых лекарственных средств, на основе уже существующих антигельминтиков -путем микронизации субстанций, повышения растворимости, использования вспомогательных веществ, стабилизаторов и полимеров, а также других физико-химических методов и приемов, повышающих биодоступность [4]. Улучшение фармакологических свойств препаратов достигается за счет их направленного транспорта в заданную область, органы или клетки, а также контроля скорости, времени и места действия лекарственного средства в организме. Такие технологии улучшения фармакологических свойств препаратов в англоязычной терминологии называются Drug Delivery Technology. В последние годы удельный весразработок Drug Delivery становится доминирующимв мировой фармации [7].
В предыдущие годы нами был предложен метод твердофазного получения межмолекулярных/супрамолекулярных комплексов (далее «комплексов») лекарственных веществ с водорастворимыми полимерами, заключающийся в совместной механохимической обработке их субстанции. Именно такие комплексы рассматриваются как средства доставки молекул антигельминтных препаратов [4, 6].
Целью нашей работы явилось изучение эффективности комплексов, полученных по вышеуказанной технологии на основе антигельминтных
29
препаратов албендазола и фенбендазола на лабораторной модели и домашних животных.
Материалы и методы. Сравнительные испытания препаратов проводили в лаборатории фармакологии, токсикологии и терапии ВИГИС. В испытаниях сравнивались экспериментальные образцы комплексов албендазола и фенбендазола, полученных путем механохимической модификации субстанций с полимерами в активаторах ударно-истирающего типа [6], а также их официнальные субстанции.
Изучение нематодоцидной активности комплексов проводили на лабораторной модели трихинеллеза на белых мышах, экспериментально инвазированных Trichinella spiralis в дозе 250 личинок на животное [3,5].
Испытание на цестодоцидную активность комплексов в сравнении с албендазолом в равных дозах по 10 мг/кг проводили на белых мышах, экспериментально инвазированных Hymenolepis nana в дозе 200 инвазионных яиц на животное. Животным подопытных групп (по 5 голов) вводили в желудок однократно комплексы албендазола в дозе 10 мг/кг в сравнении с базовым препаратом албендазолом в этой же дозе. Мыши контрольной группы препарат не получали.
Учет эффективности препаратов проводили по типу «контрольный тест» путем вскрытия кишечника животных и обнаружения гельминтов.
Испытание комплексов албендазола и фенбендазола также проводили в экспериментальном хозяйстве «Курилово» Подольского района Московской области на 45 овцах, спонтанно инвазированных нематодирусами и другими видами желудочно-кишечных стронгилят. Овцам разных групп по 8-9 голов в каждой задавали однократно перорально комплексы албендазола и фенбендазола в дозе 1,0 мг/кг по ДВ в сравнении с базовыми препаратами альбендазолом и фенбендазолом в дозах 1,0 и 10 мг/кг. Животные контрольной группы препарат не получали.
Эффективность препаратов учитывали по результатам копроовоскопических исследований фекалий методом флотации до и через 18 суток после дегельминтизации. Учет эффективности препаратов проводили по типу «контрольный тест» с расчетом среднего количества обнаруженных яиц нематод [1].
Результаты и обсуждение. Результаты испытания комплексов албендазола приведены в таблице 1 и свидетельствуют о 100%-ной эффективности против T. spiralis комплексов 1 и 2. Животные, получавшие эти препараты, полностью освободились от трихинелл, о чем свидетельствуют результаты вскрытий кишечника мышей.
Таблица 1
Нематодоцидная эффективность препаратов на основе албендазола при трихинеллезе белых мышей
30
Г руппа животных Номер препарата Число животных в группе Обнаружено трихинелл при вскрытии, экз./гол. ИЭ, %
Подопытная Комплекс 1 5 0 100
Подопытная Комплекс 2 5 0 100
Подопытная Комплекс 3 5 6,3±0,9 97,47
Подопытная Албендазол (о фицинальный) 5 66,6±6,2 73,12
Контрольная - 5 248,4±6,3 -
Комплекс 3 оказал также высокий эффект, равный 97,47%. Эффективность базового препарата оказалась значительно ниже, о чем указывает обнаружение в кишечнике у мышей, в среднем, по 66,6±6,2 экз. трихинелл.
У животных контрольной группы обнаружили, в среднем, по 248,4±6,3 экз. трихинелл.
Таким образом, комплексы 1 и 2 на основе албендазола в дозе 10 мг/кг, а по ДВ 1,0 мг/кг, оказали 100%-ную эффективность при экспериментальном трихинеллезе мышей.
Результаты испытания препаратов при гименолепидозе мышей приведены в таблице 2 и свидетельствуют о различной степени активности комплексов албендазола против H. nana.
Таблица 2
Цестодоцидная эффективность комплексов на основе албендазола при гименолепидозе белых мышей
Г руппа животных Номер препарата Число животных в группе Обнаружено гименолеписов при вскрытии, экз./гол. ИЭ, %
Подопытная Комплекс 1 5 2,5±0,4 90,64
Подопытная Комплекс 2 5 0 100
Подопытная Комплекс 3 5 20,4±2,6 23,60
Подопытная Албендазол (официнальный) 5 24,2±2,7 10,13
Контрольная - 5 26,7±3,0 -
100%-ную эффективность при гименолепидозе мышей проявил комплекс 2. Препарат активен как против имагинальных, так и неполовозрелых цестод. При вскрытии кишечника мышей, получавших этот препарат, цестод не обнаружили. После введения комплекса 1 эффективность составила 90,64%.
31
Комплекс 3 оказалась недостаточно эффективным. Активность его противцестод была равной 23,6%. Базовый препарат - албендазол в испытанной дозе не проявил активности против H .nana.
В кишечнике животных контрольной группы обнаружили, в среднем, по 26,7±3,0 экз./гол. H. nana, из них 35% составили неполовозрелые цестоды.
Таким образом, из испытанных комплексов албендазола, полученных по механохимической технологии, комплекс 2 показал 100%-ную эффективность как против нематод T.spiralis, так и цестод H.nana, что указывает на его широкий спектр антигельминтного действия. Эффективность этого комплекса в дозе 10 мг/кг по препарату (или около 1мг/кг по ДВ) на 80,52% выше против цестод и на 36,8% выше против нематод по сравнению с базовым препаратом албендазола.
Следует отметить, что для лечения трихинеллеза человека албендазол рекомендуется применять в дозе 20-40 мг/кг ежедневно в течение 2-3 недель [8].
Учитывая перспективность комплексных препаратов 1 и 2, в дальнейшем проводили испытание этих комплексов албендазола и комплекса фенбендазола, приготовленных по этой же технологии на овцах, спонтанно инвазированных нематодами желудочно-кишечного тракта.
Полученные результаты испытания комплексов албендазола при нематодозах овец представлены в таблице 3 и свидетельствуют о 95,0 и 87,5%-ной эффективности комплексов 2 и 1, соответственно, а при нематодирозе 100 и 94,3%-й эффективности против стронгилят других видов.
Базовый препарат - албендазол в дозе 10 мг/кг по ДВ проявил 99,2%-ный эффект против нематодирусов и 100% против других желудочнокишечных стронгилят овец, а в дозе 1,0 мг/кг по ДВ оказался практически неэффективным. Учитывая то, что комплексы албендазола 2 и 1 испытаны в дозе 10 мг/кг по препарату (или меньше чем 1,0 мг/кг по ДВ), то можно полагать, что эффективность этих комплексов в 9,5 и 8,7 раз выше базового препарата при нематодирозе и в 10 раз выше при других желудочно-кишечных стронгилятозах овец. Животные хорошо переносили препараты, побочного их действия на организм не отмечали.
32
Таблица 3
Эффективность комплексов на основе албендазола при нематодозах овец
Г руппа животных Испытуемый препарат Доза по ДВ, мг/кг Число животных в группе Из них освободилось от инвазии, Обнаружено яиц нематод в г фекалий, экз. ЭЭ, % Снижение количества яиц
голов до опыта п/лечения нематод, %
Нематодироз
Подопытная Комплекс 2 1,0 9 8 118,3±7,2 6,3±0,8 88,9 95,01
Подопытная Комплекс 1 1,0 9 7 120,5±7,6 15,7±1,6 77,8 87,57
Подопытная Албендазол (о фицинальный) 1,0 9 0 122,0±7,5 117,3±7,6 0 7,13
Подопытная Албендазол (о фицинальный) 10,0 9 8 119,7±8,0 1,0±0,3 88,9 99,2
Контрольная - - 9 0 121,4±7,8 126,3±8,1 - -
Другие желудочно-кишечные стронгилятозы
Подопытная Комплекс 2 1,0 9 9 131,2±8,3 0 100 100
Подопытная Комплекс 1 1,0 9 8 129,6±7,8 7,6±0,8 88,9 94,32
Подопытная Албендазол (о фицинальный) 1,0 8 0 131,7±7,7 127,3±8,3 0 4,79
Подопытная Албендазол (о фицинальный) 10,0 8 8 132,4±8,2 0 100 100
Контрольная - - 8 8 130,3±8,7 133,7±8,4 - -
33
Полученные результаты испытания комплекса на основе фенбендазола при нематодозах овец представлены в таблице 4 и свидетельствуют о 95,67% эффективности при нематодирозе и 100% эффективности против стронгилят других видов.
Базовый препарат - фенбендазол в дозе 10 мг/кг по ДВ проявил 96,39% эффект против нематодирусов и 100% против других желудочно-кишечных стронгилят овец, а в дозе 1,0 мг/кг по ДВ оказался практически не эффективным. Учитывая то, что комплекс фенбендазола испытан в дозе меньше чем 1,0 мг/кг по ДВ, то можно полагать, что его эффективность была в 10 раз выше базового препарата при нематодирозе и других желудочнокишечных стронгилятозах овец. Животные хорошо переносили препараты, побочного действия на организм не отмечали.
Заключение. На овцах, спонтанно инвазированных гастроинтестинальными нематодами, испытана эффективность комплексов на основе албендазола и фенбендазола, приготовленных по нанотехнологии с использованием адресной доставки (Drug Delivery System). Комплекс фенбендазола в дозе 1 мг/кг по ДВ показал 95,6% эффективность против нематодирусов и 100% эффективность против желудочно-кишечных стронгилят других видов. Базовый препарат фенбендазол (субстанция) в дозе 10 мг/кг по ДВ показал 96,39 и 100% эффективность,соответственно. Тогда как в дозе 1,0 мг/кг по ДВ он оказался практически не эффективным. Эффективность комплексов албендазола была также в 8,5-10 раз выше таковой базового препарата албендазола.
Литература: 1. Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение. - Изд-во РАСХН. - 2009. - 109 с. 2. Архипов И.А. Этапы // Рос.паразитол. журнал. - 2007. - № 1. - С. 67-73. 3. Астафьев Б.А., Яроцкий Л.С., Лебедева М.Н. Экспериментальные модели паразитов в биологии и медицине. - М.: Наука, 1989. - С. 67-73. 4. Душкин А.В., Сунцова Л.П., Халиков С.С. // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 1 (часть 2). - С. 448-457. 5. Кротов А.И. Основы экспериментальной терапии гельминтозов. -М.: Медицины, 1973. - 272 с. 6. Халиков С.С., Халиков М.С., Метелева Е.С. и др. //Химия в интересах устойчивого развития. - 2011. - Т. 19. - № 6. - С. 699-703. 7. De Jong W.I., Born P.I.A. // Inter. J. Nanomedicine. - 2008. - V. 3. -N 2. - P. 133-149.8. Pozio E. //Parasotol.Today. - 1998. - V. 14, N 1. - P. 35-38.
34
Таблица 4
Эффективность комплекса фенбендазола при нематодозах овец
Г руппа Препарат Доза по Число Из них Среднее число яиц ЭЭ, % Снижение
животных ДВ, животных освободилось от нематод в г фекалий, экз. числа яиц
мг/кг в группе инвазии, голов до опыта п/ лечения нематод, %
В ематодироз
Подопытная Комплекс на 1,0 9 8 138,3±7,8 6,0 88,9 95,67
основе
фенбендазола 1,0 9 0 140,6±7,9 122,8±7,9 0 11,21
Подопытная Фенбендазол (официнальный) 10 9 8 139,4±8,2 5 88,9 96,39
Подопытная Фенбендазол (официнальный) 9 0 139,2±7,9 138,3±8,0
Контрольная -
Другие желудочно-кишечные стронгилятозы
Подопытная Комплекс на 1,0 9 9 144,3±8,6 0 100 100
основе
фенбендазола
Подопытная Фенбендазол (официнальный) 1,0 9 0 142,7±9,2 125,2±8,5 0 12,70
Подопытная Фенбендазол (официнальный) 10 9 9 143,4±8,4 0 100 100
Контрольная - - 9 0 142,3±8,8 143,4±8,6 - -
35
Efficacies of the novel anthelmintics contained intermolecular complexes of albendazole and fenbendazole with water soluble polymers. Archipov I.A., Glamazdin I.I., Varlamova A.I., Danilevskaya N.V., Halikov S.S., ChistyachenkoYu.S., Dushkin A.V. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology; K.I. Skryabin Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology; A.N.Nesmeyanov Institute of Organoelement Compounds; Institute of Solid State Chemistry and Mechanochemistry.
Summary. One tested the efficacies of complexes based on albendazole and fenbendazole prepared by nanotechnological approaches as drug delivery systems on sheep spontaneously infected by gastrointestinal nematodes. Fenbendazole based complex given at dose level of 1 mg/kg (according to active substance) showed 95,6% efficacy against Nematodirus spp. and 100% against gastrointestinal Strongylata of other species. Fenbendazole (substance) at dose level of 10 mg/kg of body weight (according to active substance) appeared to be ineffective. The efficacy of albendazole complexes was 8,5-10 fold higher compared with albendazole alone.
ПРОИЗВОДСТВЕННЫЕ ИСПЫТАНИЯ РИКОБЕНДАЗОЛА ПРИ ГЕЛЬМИНТОЗАХ ОВЕЦ
Архипов И.А., Абрамов В.Е., Абрамова Е.В., Пигина С.Ю.
ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина
Введение. Рикобендазол является одним из основных метаболитов альбендазола, который обладает высокой антигельминтной эффективностью [1]. В ряде стран рикобендазол успешно применяется в форме инъекционного раствора для лечения гельминтозов крупного рогатого скота [2,3]. При парентеральном введении животное гарантированно получает 100%-ную дозу препарата. Кроме того, при этом значительно снижается доза действующего вещества и уменьшается токсическое действие на организм животного при сохранении антигельминтной эффективности.
Цель работы - изучение эффективности рикобендазола при гельминтозах овец в производственных условиях.
Рикобендазол произведен ЗАО «Нитафарм» г. Саратов в форме 10%-ного инъекционного раствора.
Материалы и методы. Производственное испытание рикобендазола при смешанной инвазии овец проводили в экспериментальном хозяйстве «Курилово» Подольского района Московской области на 56 овцах разного возраста цигайской породы. Препарат применяли в форме 10%-ного раствора внутримышечно в дозе 4,0 мг/кг однократно.
Эффективность препарата оценивали по результатам копроовоскопических исследований поголовья овец до и через 16 суток после дегельминтизации. Расчет эффективности проводили по типу «контрольный тест» (И.А. Архипов, 2009).
36
