CC BY
28
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
УДК 616.33-006.6-099:612.015 DOI 10.23683/0321-3005-2017-4-2-119-127
ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНЗАВИСИМЫХ ФЕРМЕНТОВ В ТКАНЯХ АДЕНОКАРЦИНОМ ЖЕЛУДКА
© 2017 г. Е.И. Сурикова1, О.И. Кит1, И.А. Горошинская1, Е.М. Франциянц1, А.А. Маслов1, Д.Е. Медведева1, Е.В. Шалашная1, П.С. Качесова1, Л.А. Немашкалова1, И.В. Нескубина1, А.В. Чудилова1, Ю.А. Геворкян1, Д.С. Петров1
Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, Ростов-на-Дону, Россия
FUNCTION OF GLUTATHIONE-DEPENDENT ENZYME SYSTEM IN TISSUES
OF GASTRIC ADENOCARCINOMA
E.I. Surikova1, O.I. Kit1, I.A. Goroshinskaya1, E.M. Frantsiyants1, A.A. Maslov1, D.E. Medvedeva1, E.V. Shalashnaya1, P.S. Kachesova1, L.A. Nemashkalova1, I.V. Neskubina1, A.V. Chudilova1, Yu.A. Gevorkyan1, D.S. Petrov1
1Rostov Research Institute of Oncology, Rostov-on-Don, Russia
Сурикова Екатерина Игоревна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: sunsur2000@mail. ru
Кит Олег Иванович - доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, генеральный директор Ростовского научно-исследовательского онкологического института, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Горошинская Ирина Александровна - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Франциянц Елена Михайловна - доктор биологических наук, профессор, заместитель генерального директора по науке, руководитель лаборатории изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Маслов Андрей Александрович - доктор медицинских наук, профессор, главный врач, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Медведева Дарья Евгеньевна - аспирант, врач-онколог, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14 линия, 63. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, email: dashenka.medvedeva91 @mail. ru
Шалашная Елена Владимировна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Ekaterina I. Surikova - Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: sun-sur2000@mail. ru
Oleg I. Kit - Doctor of Medicine, Professor, Corresponding Member, RAS, General Director, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Irina A. Goroshinskaya - Doctor of Biological Sciences, Professor, Main Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: iagorl [email protected]
Elena M. Frantsiyants - Doctor of Biological Sciences, Professor, Deputy General Director for Science, Head of Laboratory Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Andrey A. Maslov - Doctor of Medicine, Professor, Chief Physician, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: maslov. 3 6@mail. ru
Dar'ja E. Medvedeva - Postgraduate, Oncologist, Rostov Research Oncology Institute, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Elena V. Shalashnaya - Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: rni-oi. biochem@gmail. com
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION. NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
Качесова Полина Сергеевна - научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, Ростов-на-Дону, 344037, Россия, email: [email protected]
Немашкалова Людмила Анатольевна - научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Нескубина Ирина Валерьевна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: neskubina. irina@mail. ru
Чудилова Анастасия Викторовна - младший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Геворкян Юрий Артушевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделением абдоминальной онкологии № 2, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: [email protected]
Петров Дмитрий Сергеевич - кандидат медицинских наук, заместитель главного врача по хирургии, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия
Polina S. Kachesova - Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Ljudmila A. Nemashkalova - Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Irina V. Neskubina - Candidate of Biological Sciences, Senior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: neskubina. irina@mail. ru
Anastasija V. Chudilova - Junior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Yuriy A. Gevorkyan - Doctor of Medicine, Professor, Head of the Department of Abdominal Oncology No. 2, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: [email protected]
Dmitriy S. Petrov - Candidate of Medicine, Deputy Chief Physician on Surgery, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia
Аденокарцинома (АК) желудка - злокачественная опухоль, происходящая из железистых клеток эпителия стенки желудка. Является одним из самых распространенных опухолевых заболеваний в России. Этиология опухолей желудка сложна, включает взаимодействие генетических и экологических влияний. Восстановленный глутатион (ВГ) и глутатионзависимые ферменты имеют большое значение для нормального функционирования интестинального эпителия желудка. Цель работы -изучение динамики системы ферментов супероксиддисмутазы (СОД), каталазы и глутатионзависимых ферментов в тканях аденокарциномы желудка разной степени дифференцировки, перитуморальной зоны и условно здоровой ткани для выяснения особенностей патогенеза данного заболевания. Содержание ВГ и активность глутатионпероксидазы (ГПО), глутатионре-дуктазы (ГР), глутатионтрансферазы (ГТ), СОД, каталазы определяли в образцах опухоли, перитуморальной зоны и условно здоровой ткани (взятой по линии резекции), полученных во время операции у 29 первичных больных раком желудка (13 больных АК G1 и G2 degree (T3-4N0-1M0, II-III st.), 16 - АК G3 (T3-4N1-3M0, II-III st.)). Также была исследована ткань здорового желудка (интактный желудок) 12 случайно погибших людей. Не было выявлено значимых различий между исследованными показателями в здоровой ткани при АК G1-G2 и интактным желудком. Найдено только значимое снижение активности каталазы на 27 % в ткани опухоли и увеличение активности ГТ в 2,6 раза в ткани перитуморальной зоны по сравнению с условно здоровой тканью (р<0,05). При АК G3 в условно здоровой ткани по сравнению с интактным желудком были значимо увеличены активность ГТ в 2,7раза (р<0,01) и содержание ВГ в 2,3 раза (р<0,05). В ткани опухоли выявлено значимое снижение активности СОД, ГР и ГТ на 24-44 % (р<0,05) и содержания ВГ в 2,0 раза (р<0,05), а также увеличение активности ГПО на 26 % (p<0,05) по сравнению с перитуморальной зоной, которая характеризовалась снижением активности СОД на 44 %, ГР -на 30 % (р<0,05) и каталазы - на 34 % (p<0,01), а также более низким (в 1,9 раза (p<0,05)) содержанием ВГ по сравнению с соответствующей условно здоровой тканью. При этом активность ГТ в условно здоровой ткани в 3,0 раза выше по сравнению с АК G1-G2 (р<0,01). Результаты показали, что при высоко- и умеренно дифференцированной АК желудка изменения происходят в перитуморальной зоне - значительное усиление активности ГТ. При снижении степени дифференцировки и усилении агрессивности неоплазмы происходят снижение активности антиоксидантных ферментов в тканях опухоли и пе-ритуморальной зоны и изменение метаболизма глутатионзависимой системы в условно здоровой ткани. При этом сама условно здоровая ткань приобретает некоторые черты сходства с малигнизированной тканью.
Ключевые слова: аденокарцинома желудка, степень дифференцировки, глутатионзависимые ферменты, восстановленный глутатион, антиоксидантные ферменты.
Gastric adenocarcinoma (AC) is a malignant tumor originating from glandular cells of the epithelium of the stomach wall and is one of the most common cancers in Russia. Etiology of gastric tumors is complicated and involves an interaction ofgenetic and environmental influences. Reduced glutathione and glutathione-dependent enzymes are of much importance for the normal function of intestinal epithelium of the stomach. Our aim was to study the dynamics of the system of SOD enzymes, catalase and glutathione-dependent en-
zymes in tissues of gastric adenocarcinoma of various grades, in the peritumoral zone and in intact tissues to reveal characteristics of the disease pathogenesis. Content of reduced glutathione (GSH) and activity of glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), glutathione transferase (GST), as well as superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) were determined in samples of tumor, peritumoral zone and healthy tissue taken from the resection line during surgery in patients with primary stomach cancer: 13 with G1-G2 AC (T3-4N0-1M0, st. II-III) and 16 with G3 AC (T3-4N1-3M0, II-III st). Intact cadaver stomach tissue was studied as well (n=12). We found no difference between the studied parameters in healthy tissue in G1-G2 AC and in intact gastric tissues, exceptfor the significant decrease in CAT activity by 27 % in tumor tissue and increased GST activity by 2.6 times in the peritumoral zone, compared to the healthy tissues (p<0.05). Healthy tissues in G3 AC, compared to intact tissues, showed significant increase in the GST activity by 2.7 times (р<0.01) and in the GSH content by 2.3 times (р<0.05); tumor tissue demonstrated significant decrease in the activity of SOD, GR and GST by 24-44 % (р<0.05) and in the GSH content by 2.0 times (р<0.05), as well as increased by 26 % GPx activity (p<0.05) compared to the peritumoral area. The peritumoral area was characterized by decreased SOD activity by 44 %, GR by 30% (р<0.05) and CAT by 34 % (p<0.01), as well as lower by 1.9 times (p<0.05) levels of GSH, compared to the corresponding healthy tissues. The GST activity in healthy tissues was 3.0 times higher than in G1-G2 AC (р<0.01). The results showed that changes in well- and moderately-differentiated gastric AC took place in the peritumoral zone - significant increase of the GST activity. Higher tumor grades and increased aggressiveness were accompanied by decreased activity of antioxidant enzymes in tumor and peritumoral tissues and by changes in the metabolism of the GSH-dependent system in conditionally healthy tissue. The conditionally healthy tissue itself acquired some similarities to malignant tissues.
Keywords: gastric adenocarcinoma, tumor grade, glutathione-dependent enzyme, reduced glutathione, antioxidant enzymes.
Аденокарцинома желудка - злокачественная опухоль, происходящая из железистых клеток эпителия стенки желудка. Это заболевание составляет подавляющее большинство случаев рака желудка, который занимает одно из ведущих мест по заболеваемости во многих странах, в том числе в России, странах Скандинавии, Украине, Японии [1]. В России рак желудка занимает 4-е место по заболеваемости злокачественными новообразованиями у мужчин и 5-е - у женщин, а по смертности - на 2-м месте после рака легкого у мужчин и рака молочной железы у женщин [2]. Это связано с увеличением доли больных распространенным раком желудка и сложностью его лечения [3, 4].
Этиология опухолей желудка сложна, включает взаимодействие генетических и экологических влияний. Опухоль является весьма полиморфной - имеет свою особенность роста, строения, формы, локализации. Патогенез различных заболеваний желудочно-кишечного тракта, включая пептические язвы, рак желудочно-кишечного тракта и воспалительные заболевания кишечника, в большой мере обусловлен окислительным стрессом. Активные формы кислорода (АФК) в значительном количестве производятся в желудочно-кишечном тракте, несмотря на защитный барьер, обеспечиваемый слизистой оболочкой. Экзогенные вещества и микробные патогены могут вызывать окислительное повреждение и воспалительные реакции с участием эпителия и иммунокомпетентных клеток [5].
Восстановленный глутатион (ВГ) и глутатионза-висимые ферменты имеют большое значение для нормального функционирования интестинального эпителия желудка, относящегося к тканям, которым свойственно непрерывное клеточное обновление: постоянство структуры эпителия обеспечивается только при координации фаз пролиферации, диффе-ренцировки и апоптоза. Редокс-гомеостаз очень важен для функционирования клеток; его нарушение может приводить к повышению уровня АФК, он
играет существенную роль в процессах синтеза ДНК, экспрессии генов, ферментативной активности и т.д. Изменение редокс-состояния внутриклеточного содержимого и отдельных молекул из-за стрессовых воздействий или активности самих клеток влияет на регуляцию всех основных клеточных процессов. При нарушении баланса осуществляются инициация злокачественной трансформации и прогрес-сирование неоплазии. Как правило, внеклеточная среда характеризуется окислительными условиями, внутриклеточная - восстановительными [6, 7].
Понимание биологии редокс-процессов, лежащих в основе развития онкологической патологии, и механизмов их функционирования имеет большое значение для разработки новых терапевтических подходов, основанных на изменении редокс-состо-яния неоплазмы и окружающих ее тканей, к воздействию на устойчивые опухоли [8, 9]. Это обусловливает актуальность изучения окислительно-восстановительных характеристик конкретной опухоли и ее окружения, особенно в опухолях желудка.
В связи с вышесказанным целью данного исследования было изучение системы ферментов суперок-сиддисмутазы (СОД), каталазы и глутатионзависи-мых ферментов в ткани опухоли, перитуморальной зоне и условно здоровой ткани у больных аденокар-циномой желудка разной степени дифференцировки.
Материалы и методы
В работе исследовали активность СОД, каталазы, глутатионпероксидазы (ГПО), глутатионредук-тазы (ГР), глутатионтрансферазы (ГТ) и содержание ВГ в образцах опухоли, перитуморальной зоны и условно здоровой ткани, взятой по линии резекции во время операции у 29 первичных больных раком желудка (13 больных аденокарциномой G1 и G2 степени дифференцировки (T3-4N0-1M0, II-III st.) и 16 больных аденокарциномой G3 степени диффе-
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE.
2017. No. 4-2
ренцировки (T3-4N1-3M0, II-III st.)). Среди больных женщины составили 24 % (7 чел.), мужчины - 76 (22 чел.). Дизайн исследования одобрен этическим комитетом ФГБУ «РНИОИ». У всех больных получено добровольное информированное согласие на использование биологического материала для научных исследований. Также использованы результаты изучения ткани здорового желудка (ин-тактный желудок) у 12 случайно погибших людей, полученные в предыдущих исследованиях.
Активность Cu/Zn-СОД, каталазы, ГПО, ГР, ГТ и содержание ВГ определяли в 10%-х (масса/объем) гомогенатах тканей (0,04 моль Tris-HCl буфер, рН 7,4) общепринятыми спектрофотометри-ческими методами, содержание белка - биурето-вым, активность СОД (КФ 1.15.1.1) - по степени ингибирования восстановления нитросинего тетра-золия в присутствии супероксидного радикала, генерируемого в реакции восстановления молекулярного кислорода адреналином в щелочной среде при 545 нм [10]. За единицу активности принимали количество фермента, вызывавшее 50%-е торможение реакции, и выражали в усл. ед./г белка. Активность каталазы (КФ 1.11.1.6.) определяли с использованием молибдата аммония [11] и выражали в мкмоль Н2О2/мин-г белка. Содержание ВГ - по реакции с 5,5-дитиобис(2-нитробензойной кислотой) при 412 нм, выражали в мкмоль/мг белка. Активность ГР (КФ 1.6.4.2.) - по скорости окисления NADPH в присутствии окисленного глутатиона при
340 нм. Активность выражали в микромолях окисленного глутатиона / мин-мг белка; активность ГПО (КФ 1.11.1.9.) - в реакции расщепления гидроперекиси третичного бутила, используя в качестве субстрата ВГ, при 412 нм. Активность фермента выражали в микромоль ВГ/ми н-мг белка. Активность ГТ (КФ 2.1.5.18) определяли по скорости образования конъюгатов с 1-хлор-2,4-динитробензолом в присутствии ВГ при 340 нм [12] и выражали в микромоль ВГ/мин-мг белка.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы STATISTIСA 6.0. Все данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Соответствие распределения полученных данных нормальному распределению оценивали, используя критерий Шапиро - Уилка. В зависимости от результата значимость различий двух независимых выборок оценивали с помощью критериев Стьюдента или Манна - Уитни. Различия оценивали как статистически значимые при р<0,05, при 0,1>р>0,05 считали, что различия обнаружены на уровне статистической тенденции.
Результаты
Результаты исследования активности ферментов первой линии антиоксидантной защиты, глутатион-зависимой системы и содержания ВГ приведены в таблице.
Активность ферментов каскада СОД-каталаза, глутатион-зависимой системы и содержание ВГ в ткани аденокарци-номы желудка, ее перитуморальной зоне и здоровой ткани желудка / The activity of SOD catalase cascade enzymes, the glutathione-dependent system and the content of reduced glutathione in the gastric adenocarcinoma tissue, its peritumoral zone and conditionally healthy stomach tissue
Ткань СОД Каталаза ГПО ВГ ГР ГТ
Интактный желудок
n=12 1,108±0,112 6,32±0,46 317,6±42,8 36,8±7,2 16,3±1,8 70,9±8,0
Аденокарцинома G1-G2
Опухоли, n=13 0,892±0,136 4,99±0,52 p<0,05 291,1±50,1 27,5±6,6 16,2±2,1 82,6±14,6
Перитуморальной зоны, n=13 0,948±0,125 5,49±0,67 213,5±37,2 42,1±7,5 16,3±2,4 161,0±22,4 р<0,05 р3<0,01
Условно здоровая, n=10 1,116±0,164 6,85±0,53 253,2±34,3 35,1±5,8 16,8±2,1 62,6±9,9
Аденокарцинома G3
Опухоли, n=16 0,849±0,078 p<0,05 5,27±0,53 384,1±43,3 р1<0,05 42,4±7,5 р<0,05 15,9±1,0 р<0,05 105,9±15,2 р<0,05 0,1>р3>0,05
Перитуморальной зоны, n=16 0,753±0,105 р<0,05 4,61±0,37 р<0,01 283,6±35,1 44,2±6,4 р<0,05 14,6±1,5 р<0,05 141,3±20,2
Условно здоровая, n=10 1,344±0,269 7,03±0,83 353,9±43,1 0,1>р2>0,05 83,8±15,1 р2<0,05 р3<0,05 20,8±2,0 189,8±26,8 р2<0,01 р3<0,01
Примечание. Уровень значимости различий по сравнению: р - с условно здоровой тканью желудка; р1 - с перитуморальной зоной аденокарциномы; р2 - с условно здоровой тканью желудка при аденокарциноме G1- G2; р3 - с тканью интактного желудка.
Предварительно проведенный статистический анализ результатов показал отсутствие значимых тендерных различий в содержании ВГ и активности ферментов в опухолевой ткани, перитуморальной зоне и здоровой ткани.
При анализе полученных результатов не было выявлено статистически значимых различий между изученными показателями в условно здоровой ткани при аденокарциноме G1-G2 и интактным желудком. Обнаружено только статистически значимое снижение активности каталазы на 27,2 % (p<0,05) в ткани опухоли по сравнению с соответствующей условно здоровой тканью и увеличение активности ГТ в 2,6 раза (p<0,05) в ткани периту-моральной зоны по сравнению с условно здоровой тканью желудка.
В группе с аденокарциномой G3 выявлено статистически значимое увеличение активности ГТ в 2,7 раза и содержания ВГ в 2,3 раза в условно здоровой ткани по сравнению с интактным желудком (р<0,05). При этом в ткани опухоли отмечалось статистически значимое снижение активности ферментов СОД на 36,8 % (р<0,05), ГР - 23,6 (р<0,05), ГТ - 44,2 % (р<0,05), содержания ВГ -в 2,0 раза (p<0,05) по сравнению с условно здоровой тканью желудка, а также увеличение активности ГПО на 26,2 % (p<0,05) по сравнению с пери-туморальной зоной, которая характеризовалась снижением активности СОД на 44 %, ГР - 29,8 (р<0,05), каталазы - 34,4 % (p<0,01), а также более низким (в 1,9 раза (p<0,05)) содержанием ВГ по сравнению с соответствующей условно здоровой тканью.
При сравнении состояния изученной системы ферментов между двумя группами можно отметить, что в ткани опухоли и перитуморальной зоны не было выявлено статистически значимых различий. Однако обращает на себя внимание более высокая активность ГТ в условно здоровой ткани в группе с аденокарциномой G3 - активность фермента была выше в 3,0 раза (р<0,01) по сравнению с активностью в условно здоровой ткани в группе с аденокарциномой G1 -G2, а также тенденция к увеличению активности ГПО на 39,7 %. Такое увеличение активности ферментов сопровождалось более высоким уровнем ВГ - в 2,4 раза (р<0,05) по сравнению с уровнем в условно здоровой ткани в группе с аденокарциномой G1 -G2.
Таким образом, можно отметить, что в случае высоко- и умеренно дифференцированных адено-карцином желудка активность изученной системы ферментов в ткани самой опухоли и в ее перитумо-ральной зоне мало отличалась от активности в условно здоровой ткани желудка (за исключением значительного увеличения активности ГТ в ткани
перитуморальной зоны). Иная картина наблюдалась в группе с низкодифференцированными аденокар-циномами, где были выявлены более выраженные изменения в активности ферментов изученной системы - в ткани опухоли и в ее перитуморальной зоне по сравнению с соответствующей условно здоровой тканью наблюдалась более низкая активность ферментов, утилизирующих такие АФК, как супероксидный анион-радикал и Н2О2, а также фермента ГР, осуществляющего восстановление окисленного глутатиона. Обнаружен также более низкий уровень ВГ по сравнению с условно здоровой тканью желудка. При этом в перитуморальной зоне аденокарци-номы G3 изменения были более выражены, чем в ткани опухоли. Кроме того, содержание ВГ, активность ферментов ГПО и ГТ в условно здоровой ткани при аденокарциноме G3 были выше, чем в группе с аденокарциномой G1-G2 и в ткани интактного желудка.
Известно, что слизистая желудочно-кишечного тракта подвержена атакам АФК, поскольку она контактирует как с факторами питания, так и с резидентными иммунными клетками и кишечной флорой, т.е. всеми потенциальными источниками АФК. Желудочно-кишечный тракт имеет самую высокую концентрацию ксантиноксидазы в организме, которая наряду с многочисленными фагоцитирующими клетками в совокупности генерирует большие количества супероксид-анион-радикала [5]. Избыток АФК индуцирует воспаление, тем самым вызывая повреждение ткани. На наш взгляд, следует обратить внимание на то, что как при высоко-, так и при низкодифференцированной адено-карциноме активность антиоксидантных ферментов СОД и каталазы в условно здоровой ткани не отличалась от активности в тканях интактного желудка. Возможно, это свидетельствует о сохранности барьерных функций слизистой оболочки желудка. Однако в ткани самой опухоли и близлежащей зоны наблюдается снижение активности этих ферментов, особенно выраженное в случае низкодиф-ференцированной аденокарциномы и особенно ее перитуморальной зоны. Можно предположить, что создаются условия для накопления супероксида и Н2О2, при этом возможное накопление Н2О2 может быть отмечено даже в тканях высоко- и умеренно дифференцированных аденокарцином.
В настоящее время известно, что АФК, в частности, супероксидный анион-радикал и Н2О2, очень важны для функционирования опухолевых клеток. В высоких концентрациях АФК вызывают повреждение макромолекул ДНК, белков, липидов, что способствует изменению мембранной проницаемости, повреждению ДНК и развитию геномной нестабильности (а следовательно, и опухолевой гете-
рогенности), окислительной модификации белков и изменению ферментативной активности или их чувствительности к протеолитической деградации. Низкие уровни АФК участвуют в регуляции экспрессии генов, синтезе ряда биологически активных соединений (простагландинов, эйкозаноидов, факторов роста), стимулировании пролиферации опухолевых клеток, их распространении и выживании [13, 14]. Действуя как первичные мессенджеры, АФК модулируют многие внутриклеточные сигнальные каскады, вовлеченные в опухолевую прогрессию (MAPK, фосфатидилинозитол-3-киназный PI3K/Akt, фосфолипазный PLCgl, ядерный фак-тор-KB (NF-kB) и Jak/Stat) [15, 16]. Важную роль АФК играют в процессе контроля за прохождением клеточного цикла, убиквитинировании и деградации белков в протеасоме, (ре-)организации цитоскелета [17, 18].
В ряде работ в тканях аденокарциномы желудка, плоскоклеточного рака пищевода, а также в ткани колоректального рака показан схожий либо несколько сниженный уровень экспрессии Cu/Zn-СОД, при этом уровень экспрессии Mn-СОД был значительно более высоким по сравнению с тканью нормальной слизистой оболочки [19, 20]. Являются ли эти изменения патогенетическими или они просто отражают измененное состояние гомеостаза, пока не установлено.
Однако в настоящее время считается, что АФК играют более сложную роль в опухолях: низкие уровни свободных радикалов и уровни устойчивого состояния антиоксидантных ферментов ответственны за модулирование редокс-статуса внутри клеток, изменение которого является способом изменения физиологического состояния клетки [21, 22].
Фермент ГТ, помимо детоксикационной и анти-оксидантной функций, участвует в осуществлении процесса S-глутатионилирования - присоединении ВГ к тиоловым группам белков. Предполагается, что одна из функций этого процесса состоит в защите SH-групп белков от необратимого окисления. Кроме того, выявлено несколько метаболических путей и регуляторных факторов, активность которых модулируется глутатионилированием (транскрипционные факторы AP1 и NFkB, убиквитинза-висимая протеолитическая деградация белков, цАМР, цАМР-зависимая протеинкиназа и др.). Предполагается, что повышенный уровень ВГ и активности ГТ согласуется с усилением процессов S-глутатионилирования [23-25].
В связи с этим обращает на себя внимание изменение активности ГТ - существенное увеличение в перитуморальной зоне при аденокарциноме G1-G2 по сравнению с величиной в условно здоровой ткани, а также значительное ее увеличение в
условно здоровой ткани при аденокарциноме G3 по сравнению с тканью интактного желудка. Возможно, такие изменения могут отражать усиление процесса регуляторного S-глутатионилирования в результате взаимодействия опухоли с неопухолевым окружением для формирования условий, способствующих дальнейшему распространению опухоли и опухолевой прогрессии.
Гены изоформ ГТ по-разному экспрессируются в нормальной и опухолевой тканях. Наблюдаемый высокий уровень экспрессии гена GSTP1-1 в опухолевых тканях яичников, легких, молочных желез, толстого кишечника, желудка и при пролифератив-ных заболеваниях крови часто коррелирует с лекарственной устойчивостью [26]. В [27] с помощью двумерного дифференциального гель-электрофореза (2D-DIGE) и иммуногистохимии показано, что в тканях рака желудка была значительно повышена экспрессия GSTpi.
Приведенные в [28, 29] данные по содержанию ВГ в тканях опухолей различной локализации и гистологической структуры свидетельствуют о том, что нет единой направленности изменений по сравнению с его уровнем в немалигнизированных тканях. Для различных опухолей желудочно-кишечного тракта имеются противоречивые данные, но в целом опухоли желудка проявляют тенденцию к более низкому уровню ВГ по сравнению с немалигнизированными тканями. В противоположность этому при раке яичников, раке вульвы, раке молочной железы, опухолях орофарингеаль-ной зоны обнаруживается, как правило, более высокий уровень глутатиона в опухолевой ткани.
Среди ферментов, участвующих в обмене глу-татиона в опухолевой ткани, особая роль отводится семейству ГП, играющему важную роль в регуляции перекисного гомеостаза, выполняя антиок-сидантную функцию. В последние годы для некоторых представителей этого семейства установлена неоднозначная роль на разных этапах формирования и развития опухолей [30]. Признание того, что органические гидроперекиси являются медиаторами в различных физиологических процессах, приводит к пересмотру роли ГП в качестве только антиоксидантных, защитных ферментов. Регулируя концентрацию органических гидропе-роксидов, ГП участвуют в путях регуляции клеточной пролиферации, выживания клеток, апопто-за. В последние годы активно обсуждается роль фермента ГПО 2 (GPx2), который в основном экс-прессируется в эпителии желудочно-кишечного тракта и препятствует поглощению экзогенных гидроперекисей. Обнаружена его активация в клетках колоректального рака, рака желудка [30, 31]. Экспрессия этого фермента находится под
регулирующим влиянием нескольких транскрипционных факторов, в том числе фактора Nrf2, который играет важную роль в активации клеточных систем защиты, обеспечивая выживание клеток [32]. В ряде исследований установлено, что сверхэкспрессия фермента ГПО1 (GPxl) обеспечивает защиту опухолевых клеток от окисляющих соединений, образующихся в результате метаболизма противоопухолевых препаратов [33].
Подытоживая полученные результаты и данные литературы, можно предположить, что наблюдаемые изменения в функционировании редокс-регулирующей системы глутатиона и антиоксидант-ного каскада СОД - каталаза в ткани аденокарцино-мы желудка могут определяться не только особенностями исследуемых популяций больных раком желудка (характеризующихся определенным укладом жизни, особенностями характера питания, возможно, особенностями психологического статуса), но и, вероятно, изменением некоторых биохимических характеристик самих опухолей желудка, обусловленных изменением свойств внешних факторов (качество продуктов питания, воды, принимаемые лекарственные препараты и т.п.), воздействующих на слизистую оболочку желудка.
Заключение
В настоящее время существует понимание того, что злокачественная опухоль является сложной динамической системой, а опухолевые клетки, находясь под влиянием различных клеточных и гуморальных факторов со стороны организма, в свою очередь, воздействуют на свое окружение.
Результаты показали, что при высоко- и умеренно дифференцированной аденокарциноме желудка изменения происходят в перитуморальной зоне (значительное усиление активности ГТ). При снижении степени дифференцировки и усилении агрессивности неоплазмы происходят снижение активности антиоксидантных ферментов в тканях опухоли и перитуморальной зоны и изменение метаболизма глутатионзависимой системы в условно здоровой ткани. При этом сама условно здоровая ткань приобретает некоторые черты сходства с ма-лигнизированной тканью.
Литература
1. StewartB. W, Wild C.P. World cancer report 2014. Lyon: International Agency for Research on Cancer, 2014. URL: http://pubhcations.iarc.fr/Non-Series-Publications/World-Cancer-Reports/World-Cancer-Report-2014 (дата обращения: 10.10.2016).
2. Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2014 г. (заболевае-
мость и смертность). М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России, 2016. 250 с.
3. Мерабишвили В.М. Динамика наблюдаемой и относительной выживаемости больных раком желудка (популя-ционное исследование) // Вопросы онкологии. 2013. Т. 59 (6). Р. 701-707.
4. Касаткин В.Ф., Кит О.И., Захарова Н.П., Скрипни-ченко О.В. Хирургическая интраоперационная химиотерапия на аутосредах организма как компонент паллиативного лечения распространенного рака желудка: обоснование и экспериментальная разработка метода // Паллиативная медицина и реабилитация. 2004. № 1. С. 14-18.
5. Martin H.M., Hancock J.T., Salisbury V., Harrison R. Role of xanthine oxidoreductase as an antimicrobial agent // Infection and immunity. 2004. Vol. 72 (9). P. 4933-4939.
6. Октябрьский О.Н., Смирнова Г.В. Редокс-регуляция клеточных функций // Биохимия. 2007. № 72. С. 158-174.
7. Dawane J.S., Pandit V.A. Understanding Redox Homeostasis and its Role in Cancer // J. Clin. Diagnos. Res. 2012. Vol. 6. Р. 1796-1802.
8. Policastro L.L., Ibanez I.L., Notcovich C., Duran H.A., Podhajcer O.L. The Tumor Microenvironment: Characterization, Redox Considerations, and Novel Approaches for Reactive Oxygen Species-Targeted Gene Therapy // Antiox. & Redox Sign. 2013. Vol. 19. Р. 854-895.
9. Castaldo SA., Freitas J.R., Conchinha N. V., Madureira PA. The Tumorigenic Roles of the Cellular REDOX Regulatory Systems // Oxid. Med. Cell. Longev. 2015. Article ID 8413032. DOI 10.1155/2016/8413032.
10. Стальная И.Д., Горешвили Т.Г. Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. 392 с.
11. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. № 1. С. 16-19.
12. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидант-ной системы организма: метод. рекомендации. СПб.: Фолиант, 2000. 104 с.
13. Liou G.Y., Storz P. Reactive oxygen species in cancer // Free radical research. 2010. Vol. 44 (5). Р. 479-496.
14. Sosa V., Moline T., Somoza R., Paciucci R., Kondoh H., Leonart M.E. Oxidative stress and cancer: an overview // Ageing research reviews. 2013. Vol. 12 (1). Р. 376-390.
15. Martindale J.L., HolbrookN.J. Cellular response to oxi-dative stress: signaling for suicide and survival // J. of Cellular Physiology. 2002. Vol. 192 (1). Р. 1-15.
16. Benhar M., Engelberg D., Levitzki A. ROS, stressactivated kinases and stress signaling in cancer // EMBO Reports. 2002. Vol. 3 (5). Р. 420-425.
17. Boonstra J., Post J.A. Molecular events associated with reactive oxygen species and cell cycle progression in mammalian cells // Gene. 2004. Vol. 337. Р. 1-13.
18. Havens C.G., Ho A., Yoshioka N., Dowdy S.F. Regulation of late G1/S phase transition and APCCdh1 by reactive oxygen species // Molecular and Cellular Biology. 2006. Vol. 26 (12). Р. 4701-4711.
19. Janssen A.M., Bosman C.B., van Duijn W., Oostendorp-van de Ruit M.M., Kubben F.J., Griffioen G., Lamers C.B., van Krieken J.H., van de Velde C.J., Verspaget H.W. Superoxide dismutases in gastric and esophageal cancer and the prognostic impact in gastric cancer // Clin. Cancer Res. 2000. Vol. 6 (8). Р. 3183-3192.
20. Hwang T.S., Choi H.K., Han H.S. Differential expression of manganese superoxide dismutase, copper/zinc superox-
ide dismutase, and catalase in gastric adenocarcinoma and normal gastric mucosa // European J. of Surgical Oncology (EJSO). 2007. Vol. 33 (4). Р. 474-479.
21. Buettner R.G. Superoxide dismutase in redox biology: the roles of superoxide and hydrogen peroxide // Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents). 2011. Vol. 11 (4). Р. 341-346.
22. Sies H. Hydrogen peroxide as a central redox signaling molecule in physiological oxidative stress: Oxidative eustress // Redox Biology. 2017. Vol. 11. Р. 613-619.
23. Lindahl M., Mata-Cabana A., Kieselbach T. The disul-fide proteome and other reactive cysteine proteomes: analysis and functional significance // Antioxidants & Redox Signaling. 2011. Vol. 14. Р. 2581-2642.
24. Tikhanovich I., Cox J., Weinman S.A. Forkhead box class O transcription factors in liver function and disease // J. of Gastroenterology and Hepatology. 2013. Vol. 28 (l). Р. 125-131.
25. Klaus A., Zorman S., Berthier A., Polge C., Ramirez S., Michelland S., Sève M., Vertommen D., Rider M., Lentze N., Auerbach D., Schlattner U. Glutathione S-transferases interact with AMP-activated protein kinase: evidence for S-glutathionylation and activation in vitro // PLoS One. 2013. Vol. 8. Р. e62497.
26. Board P.G., Menon D. Glutathione transferases, regulators of cellular metabolism and physiology // Biochimica et Biophysica Acta. 2013. Vol. 1830. Р. 3267-3288.
27. Wu J.-Y., Cheng C.-C., Wang J.-Y., Wu D.-C., Hsieh J.-S., Lee S.-C., Wang W.M. Discovery of Tumor Markers for Gastric Cancer by Proteomics // PLoS ONE. 2014. Vol. 9 (1). Р. e84158. URL: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158 (дата обращения: 15.10. 2015).
28. GamcsikМ.Р., Kasibhatla M.S., Teeter S.D., Colvin O.M. Glutathione Levels in Human Tumors // Biomarkers. 2012. Vol. 17 (8). P. 671-691.
29. Сурикова Е.И., Горошинская ИА., Неродо Г.А., Фран-циянц Е.М., Малейко М.Л., Шалашная Е.В., Качесова П.С., Немашкалова Л.А., Леонова А.В. Активность редокс-регулирующих систем в опухоли и окружающих её тканях при различных гистологических вариантах // Биомед. химия. 2016. Т. 62, № 2. С. 187-192.
30. Brigelius-Flohe R., Maiorino M. Glutathione peroxidases // Biochim. Biophys. Acta. 2013. Vol. 1830 (5). Р. 3289-303. DOI 10.1016/j.bbagen.2012.11.020.
31. Komatsu H., Okayasu I., Mitomi H., Imai H., Nakagawa Y., Obata F. Immunohistochemical detection of human gastrointestinal glutathione peroxidase in normal tissues and cultured cells with novel mouse monoclonal antibodies // J. of Histochemistry & Cytochemistry. 2001. Vol. 49 (6). Р. 759-766.
32. Itoh K., Mimura J., Yamamoto M. Discovery of the negative regulator of Nrf2, Keap1: a historical overview // Antioxid. Redox Signal. 2010. Vol. 13 (11). Р. 1665-1678. DOI 10.1089/ars.2010.3222.
33. Vibet S., Goupille C., Bougnoux P., Steghens J.P., Gon J., Mahеo K. Sensitization by docosahexaenoic acid (DHA) of breast cancer cells to anthracyclines through loss of glutathione peroxidase (GPx1) response // Free Radic. Biol. Med. 2008. Vol. 44 (7). Р. 1483-1491. DOI 10.1016/j.freeradbiomed.2008.01.009.
References
1. Stewart B.W., Wild C.P. World cancer report 2014. Lyon: International Agency for Research on Cancer, 2014. Available at: http://publications.iarc.fr/Non-Series-Publications/
World-Cancer-Reports/W orld-Cancer-Report-2014 (accessed 10.10. 2016).
2. Kaprin A.D., Starinskii V.V., Petrova G.V. Zloka-chestvennye novoobrazovaniya v Rossii v 2014 g. (zabolevae-most' i smertnost') [Malignant neoplasms in Russia in 2014 (morbidity and mortality)]. Moscow: MNIOI im. P.A. Gertsena - filial FGBU «NMIRTs» Minzdrava Rossii, 2016, 250 p.
3. Merabishvili V.M. Dinamika nablyudaemoi i otnosi-tel'noi vyzhivaemosti bol'nykh rakom zheludka (populyatsion-noe issledovanie) [Dynamics of the observed and relative survival of patients with gastric cancer (population-based study)]. Voprosy onkologii. 2013, vol. 59 (6), pp. 701-707.
4. Kasatkin V.F., Kit O.I., Zakharova N.P., Skripnichenko O.V. Khirurgicheskaya intraoperatsionnaya khimioterapiya na autosredakh organizma kak komponent palliativnogo lecheniya rasprostranennogo raka zheludka: obosnovanie i eksperi-mental'naya razrabotka metoda [Surgical intraoperative chemotherapy on the autosperms of the body as a component of palliative treatment of advanced stomach cancer: the rationale and experimental development of the method]. Palliativnaya med-itsina i reabilitatsiya. 2004, No. 1, pp. 14-18.
5. Martin H.M., Hancock J.T., Salisbury V., Harrison R. Role of xanthine oxidoreductase as an antimicrobial agent. Infection and immunity. 2004, vol. 72 (9), pp. 4933-4939.
6. Oktyabr'skii O.N., Smirnova G.V. Redoks-regulyatsiya kletochnykh funktsii [Redox-regulation of cellular functions]. Biokhimiya. 2007, No. 72, pp. 158-174.
7. Dawane J.S., Pandit V.A. Understanding Redox Homeostasis and its Role in Cancer. J. Clin. Diagnos. Res. 2012, vol. 6, pp. 1796-1802.
8. Policastro L.L., Ibanez I.L., Notcovich C., Duran H.A., Podhajcer O.L. The Tumor Microenvironment: Characterization, Redox Considerations, and Novel Approaches for Reactive Oxygen Species-Targeted Gene Therapy. Antiox. & Redox Sign. 2013, vol. 19, pp. 854-895.
9. Castaldo S.A., Freitas J.R., Conchinha N.V., Madureira P.A. The Tumorigenic Roles of the Cellular REDOX Regulatory Systems. Oxid. Med. Cell. Longev. 2015. Article ID 8413032. DOI 10.1155/2016/8413032.
10. Stal'naya I.D., Goreshvili T.G. Sovremennye metody v biokhimii [Modern methods in biochemistry]. Moscow: Med-itsina, 1977, 392 p.
11. Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Maiorova I.G., Tokarev V.E. Metod opredeleniya aktivnosti katalazy [Method for determination of catalase activity]. Lab. delo. 1988, No. 1, pp. 16-19.
12. Arutyunyan A.V., Dubinina E.E., Zybina N.N. Metody otsenki svobodnoradikal'nogo okisleniya i antioksidantnoi sis-temy organizma [Methods for assessing free radical oxidation and the body's antioxidant system]. Method. Recommendations. Saint Petersburg: Foliant, 2000, 104 p.
13. Liou G.Y., Storz P. Reactive oxygen species in cancer. Free radical research. 2010, vol. 44 (5), pp. 479-496.
14. Sosa V., Moline T., Somoza R., Paciucci R., Kondoh H., Leonart M.E. Oxidative stress and cancer: an overview. Ageing Research Reviews. 2013, vol. 12 (1), pp. 376-390.
15. Martindale J.L., Holbrook N.J. Cellular response to oxi-dative stress: signaling for suicide and survival. J. of Cellular Physiology. 2002, vol. 192 (1), pp. 1-15.
16. Benhar M., Engelberg D., Levitzki A. ROS, stressactivated kinases and stress signaling in cancer. EMBO Reports. 2002, vol. 3 (5), pp. 420-425.
17. Boonstra J., Post J.A. Molecular events associated with reactive oxygen species and cell cycle progression in mammalian cells. Gene. 2004, vol. 337, pp. 1-13.
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
NATURAL SCIENCE.
2017. No. 4-2
18. Havens C.G., Ho A., Yoshioka N., Dowdy S.F. Regulation of late G1/S phase transition and APCCdhl by reactive oxygen species. Molecular and Cellular Biology. 2006, vol. 26 (12), pp. 4701-4711.
19. Janssen A.M., Bosman C.B., van Duijn W., Oostendorp-van de Ruit M.M., Kubben F.J., Griffioen G., Lamers C.B., van Krieken J.H., van de Velde C.J., Verspaget H.W. Superoxide dismutases in gastric and esophageal cancer and the prognostic impact in gastric cancer. Clin. Cancer Res. 2000, vol. 6 (8), pp. 3183-3192.
20. Hwang T.S., Choi H.K., Han H.S. Differential expression of manganese superoxide dismutase, copper/zinc superoxide dismutase, and catalase in gastric adenocarcinoma and normal gastric mucosa. European J. of Surgical Oncology (EJSO). 2007, vol. 33 (4), pp. 474-479.
21. Buettner R.G. Superoxide dismutase in redox biology: the roles of superoxide and hydrogen peroxide. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents). 2011, vol. 11 (4), pp. 341-346.
22. Sies H. Hydrogen peroxide as a central redox signaling molecule in physiological oxidative stress: Oxidative eustress. Redox Biology. 2017, vol. 11, pp. 613-619.
23. Lindahl M., Mata-Cabana A., Kieselbach T. The disul-fide proteome and other reactive cysteine proteomes: analysis and functional significance. Antioxidants & Redox Signaling. 2011, vol. 14, pp. 2581-2642.
24. Tikhanovich I., Cox J., Weinman S.A. Forkhead box class O transcription factors in liver function and disease. J. of Gastroenterology and Hepatology. 2013, vol. 28 (1), pp. 125131.
25. Klaus A., Zorman S., Berthier A., Polge C., Ramirez S., Michelland S., Sève M., Vertommen D., Rider M., Lentze N., Auerbach D., Schlattner U. Glutathione S-transferases interact with AMP-activated protein kinase: evidence for S-glutathionylation and activation in vitro. PLoS One. 2013, vol. 8, p. e62497.
26. Board P.G., Menon D. Glutathione transferases, regulators of cellular metabolism and physiology. Biochimica et Bio-physica Acta. 2013, vol. 1830, pp. 3267-3288.
27. Wu J.-Y., Cheng C.-C., Wang J.-Y., Wu D.-C., Hsieh J.-S., Lee S.-C., Wang W.M. Discovery of Tumor Markers for Gastric Cancer by Proteomics. PLoS ONE. 2014, vol. 9 (1), p. e84158. Available at: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084158 (accessed 15.10.2015).
28. Gamcsik M.R., Kasibhatla M.S., Teeter S.D., Colvin O.M. Glutathione Levels in Human Tumors. Biomarkers. 2012, vol. 17 (8), pp. 671-691.
29. Surikova E.I., Goroshinskaya I.A., Nerodo G.A., Frantsiyants E.M., Maleiko M.L., Shalashnaya E.V., Kachesova P.S., Nemashkalova L.A., Leonova A.V. Aktivnost' redoks-reguliruyushchikh sistem v opukholi i okruzhayushchikh ee tkanyakh pri razlichnykh gistologicheskikh variantakh [Activity of redox-regulating systems in a tumor and surrounding tissues at various histological variants]. Biomed. khimiya. 2016, vol. 62, No. 2, pp. 187-192.
30. Brigelius-Flohe R., Maiorino M. Glutathione peroxidas-es. Biochim. Biophys. Acta. 2013, vol. 1830 (5), pp. 3289-3303. DOI 10.1016/j.bbagen.2012.11.020.
31. Komatsu H., Okayasu I., Mitomi H., Imai H., Nakagawa Y., Obata F. Immunohistochemical detection of human gastrointestinal glutathione peroxidase in normal tissues and cultured cells with novel mouse monoclonal antibodies. J. of Histochem-istry & Cytochemistry. 2001, vol. 49 (6), pp. 759-766.
32. Itoh K., Mimura J., Yamamoto M. Discovery of the negative regulator of Nrf2, Keap1: a historical overview. Antioxid. Redox Signal. 2010, vol. 13 (11), pp. 1665-1678. DOI 10.1089/ars.2010.3222.
33. Vibet S., Goupille C., Bougnoux P., Steghens J.P., Gore J., Maheo K. Sensitization by docosahexaenoic acid (DHA) of breast cancer cells to anthracyclines through loss of glutathione peroxidase (GPx1) response. Free Radic. Biol. Med. 2008, vol. 44 (7), pp. 1483-1491. DOI 10.1016/j.freeradbiomed.2008.01.009.
Поступила в редакцию /Received
6 сентября 2017 г. /September 6, 2017
