CC BY
59
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION. NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
УДК 618.11-006.6:612.1:612.015.11 DOI 10.23683/0321-3005-2017-4-2-10-19
СОСТОЯНИЕ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ПРИ РАКЕ ЯИЧНИКОВ С РАЗНОЙ РАСПРОСТРАНЕННОСТЬЮ И ТЕЧЕНИЕМ ЗАБОЛЕВАНИЯ
© 2017 г. И.А. Горошинская1, Е.И. Сурикова1, Е.В. Шалашная1, Г.А. Неродо1, Н.А. Максимова1, А.П. Меньшенина1, М.М. Сергеева1, П.С. Качесова1, Л.А. Немашкалова1, А.В. Чудилова1, О.И. Кит1
1 Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, Ростов-на-Дону, Россия
STATE OF FREE RADICAL PROCESSES IN OVARIAN CANCER WITH DIFFERENT PREVALENCE AND COURSE OF THE DISEASE
I.A. Gorosh'mskaya1, E.I. Surikova1, E.V. Shalashnaya1, G.A. Nerodo1, N.A. Maximova1, A.P. Menshenina1, M.M. Sergeeva1, P.S. Kachesova1, L.A. Nemashkalova1, A.V. Chudilova1, O.I. Kit1
1Rostov Research Institute of Oncology, Rostov-on-Don, Russia
Горошинская Ирина Александровна - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: iagor17@mail.ru
Сурикова Екатерина Игоревна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: sunsur2000@mail. ru
Шалашная Елена Владимировна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: rnioi.biochem@gmail.com
Неродо Галина Андреевна - доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, главный научный сотрудник, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: rnioi@list.ru
Максимова Наталья Александровна - доктор медицинских наук, профессор, руководитель радиоизотопной лаборатории с группой УЗИ-диагностики, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: zhenilo_mihail@mail.ru
Меньшенина Анна Петровна - кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник, отделение опухолей репродуктивной системы, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: anna.menshenina.00@mail.ru
Сергеева Марина Михайловна - кандидат медицинских наук, врач радиоизотопной лаборатории с группой УЗИ-диагностики, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-ялиния, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия
Irina A. Goroshinskaya - Doctor of Biological Science, Professor, Main Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: iagorl 7@mail.ru
Ekaterina I. Surikova - Candidate of Biological Science, Senior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: sun-sur2000@mail. ru
Elena V. Shalashnaya - Candidate of Biological Science, Senior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: rnioi.biochem@gmail.com
Galina A. Nerodo - Doctor of Medicine, Professor, Corresponding Member, RAS, Main Researcher, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: rnioi@list.ru
Nataliya A. Maximova - Doctor of Medicine, Professor, Head of Radioisotope Laboratory with Ultrasonic Diagnostics Group, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: zhenilo_mihail@mail.ru
Anna P. Menshenina - Candidate of Medicine, Leading Researcher, Department of Reproductive System Tumors, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: an-na.menshenina.00@mail.ru
Marina M. Sergeeva - Candidate of Medicine, Doctor, Radioisotope Laboratory with Ultrasonic Diagnostics Group, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION. NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
Качесова Полина Сергеевна - научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: vnp61@yandex.ru
Немашкалова Людмила Анатольевна - научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: rnioi.biochem@gmail.com
Чудилова Анастасия Викторовна - младший научный сотрудник, лаборатория изучения патогенеза злокачественных опухолей, Ростовский научно-исследовательский онкологический институт, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: nasta706@mail.ru
Кит Олег Иванович - доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, генеральный директор Ростовского научно-исследовательского онкологического института, ул. 14-я линия, 63, г. Ростов-на-Дону, 344037, Россия, e-mail: rnioi@list.ru
Polina S. Kachesova - Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: vnp61@yandex.ru
Ljudmila A. Nemashkalova - Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, email: rnioi.biochem@gmail.com
Anastasija V. Chudilova - Junior Researcher, Laboratory of Malignant Tumor Pathogenesis Study, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: nasta706@mail.ru
Oleg I. Kit - Doctor of Medicine, Professor, Corresponding Member, RAS, General Director, Rostov Research Institute of Oncology, 14-ya Liniya St., 63, Rostov-on-Don, 344037, Russia, e-mail: rnioi@list.ru
Проведен сравнительный анализ интенсивности окислительных процессов и активности антиоксидантных ферментов в крови 114 больных раком яичников (РЯ) в зависимости от распространенности процесса и при рецидивирова-нии. Исследованы интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ), состояние ферментативного звена антиокси-дантной системы эритроцитов по активности супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионовой системы, а также в плазме крови активность и содержание основного антиоксидантного белка - церулоплазмина, содержание белков острой фазы воспаления - С-реактивного белка (СРБ) и гаптоглобина. Выявлена зависимость интенсивности ПОЛ в плазме крови больных от стадии процесса. Для асцитной формы РЯ были характерны большая интенсивность свобод-норадикальных звеньев ПОЛ, максимальное увеличение уровня СРБ и гаптоглобина. Интенсивность хемилюминесценции, отражающая образование свободных радикалов, при асцитной форме была выше по сравнению со значениями у больных без асцита, а содержание молекулярного продукта - малонового диальдегида в плазме крови, хотя и было повышено у всех больных распространенным РЯ, было выше в группе без асцита. При рецидивах основная роль в утилизации перекиси водорода переходит от каталазы к глютатионпероксидазе (ГПО), о чем свидетельствует увеличение коэффициента ГПО/каталаза в 2,6-2,8 раза, в то время как у больных с первичным РЯ такие изменения отсутствовали. Наблюдалась зависимость активности каталазы в плазме крови от динамики развития рецидивной опухоли. Выявленные особенности интенсивности окислительных процессов и баланса активности антиоксидантных ферментов у больных РЯ могут способствовать пониманию условий прогрессирования заболевания и механизмов, опосредующих эффективность противоопухолевого лечения.
Ключевые слова: рак яичников, свободнорадикальное окисление, антиоксидантные ферменты, белки острой фазы.
A comparative analysis of the intensity of oxidative processes and the activity of antioxidant enzymes in the blood of 114 patients with ovarian cancer (OC) was carried out, depending on the prevalence of process and the presence of recurrence. The intensity of lipid peroxidation (LPO), the state of the enzymatic link of the antioxidant system of erythrocytes according to the activity of superoxide dismutase, catalase, glutathione system were investigated, as well as the activity and content of the main antioxidant protein ceruloplasmin and the content of C-reactive protein (CRP) and haptoglobin in the blood plasma. The dependence of LPO intensity in the blood plasma ofpatients from the stage of the process was revealed. The ascitic form of OC was characterized by a high intensity offree radical LPO links, a maximum increase in the level of CRP and haptoglobin. The intensity of chemiluminescence, reflecting the formation offree radicals, was higher in ascitic form than in patients without ascites, but the content of the molecular product -malonic dialdehyde in blood plasma, although it was increased in all patients with advanced ovarian cancer, was higher in the group without ascites. In case of relapses, the main role in the utilization of hydrogen peroxide is transferred from catalase to glutathione peroxidase (GPO), as evidenced by an increase in the GPO / catalase coefficient of 2.6-2.8 times, while in patients with primary ovarian cancer, such changes were absent. The dependence of catalase activity in the blood plasma on the dynamics of recurrent tumor development was observed. The revealed features of the intensity of oxidative processes and balance of activity of antioxi-dant enzymes in patients with ovarian cancer can contribute to the understanding of disease progression conditions and mechanisms that mediate the effectiveness of antitumor treatment.
Keywords: ovarian cancer, free radical oxidation, antioxidant enzymes, acute phase proteins.
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
Лечение злокачественных опухолей женских половых органов, в первую очередь рака яичников (РЯ), является одной из актуальных проблем в клинической онкологии. РЯ занимает стабильно 3-е место в структуре онкогенитальной патологии, уступая по частоте раку эндометрия и шейки матки. При этом по выявляемости в поздних стадиях и смертности от этого заболевания РЯ лидирует среди онкозаболеваний женской половой сферы, а смертность от РЯ превышает смертность от рака шейки матки и тела матки, вместе взятых. Ежегодно в мире регистрируется около 225 тыс. больных РЯ. В России в 2014 г. выявлено 13,6 тыс. женщин, заболевших РЯ, рост заболеваемости за 5 лет составил 6,16 %. Несмотря на достигнутые успехи в диагностике и лечении, смертность при РЯ во всем мире составляет 55^65 %. Летальность у данных больных после установления диагноза на первом году варьирует от 35 до 40 %. Высокая смертность женщин со злокачественными опухолями яичников зависит от бессимптомного течения заболевания на ранних стадиях, приводящего к позднему обращению к врачу, а следовательно, и к выявляемости уже с распространенными стадиями онкологического процесса (до 70 %). Запущенность онкологического процесса при РЯ, естественно, ведет к низкой эффективности лечения, так как больные с 3-й, 4-й ст. заболевания в большинстве своем неоперабельны. Настораживает тенденция увеличения количества заболевших женщин в молодом, репродуктивном возрасте. Доля РЯ максимальна в возрастном периоде 15-39 лет - 7,4 %, в 40-54 года - 7, в 55-69 лет она снижается до 4,7 % [1-3].
Инициация злокачественной трансформации и прогрессирование неоплазии тесно связаны с нарушением баланса окислительно-
восстановительных процессов и развитием окислительного стресса [4, 5]. Важнейшими биохимическими системами, противостоящими этому, являются ферментативные и неферментативные ан-тиоксидантные системы. В последние годы их функционированию придают большое значение в регуляции процессов, поддерживающих прогрессию опухоли и развитие ее резистентности к проводимому лечению [6, 7]. При этом особая роль отводится глутатиону и сопряженной с ним ферментативной системе, участвующим не только в регуляции редокс-баланса, но и во многих внутриклеточных процессах (синтез белка, экспрессия и регуляция генов клеточного цикла, детоксика-ция ксенобиотиков, злокачественный рост) [8-10]. Показано, что изменения биохимических показателей в крови коррелируют с клиническими стадиями РЯ, разделяя ранние и распространенные
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
формы [11]. При злокачественном росте установлены патогенетически значимые изменения в ряде важных систем, функционирование которых непосредственно связано со свободнорадикальными процессами [12]. В этой связи изучение состояния антиоксидантной системы и интенсивности сво-боднорадикального окисления у больных РЯ может быть полезным как для понимания условий развития и прогрессирования заболевания, так и для выяснения механизмов, опосредующих эффекты противоопухолевого лечения.
Цель данной работы - сравнительный анализ интенсивности окислительных процессов и активности антиоксидантных ферментов в крови больных РЯ в зависимости от распространенности процесса и при рецидивировании.
Материалы и методы
Показатели, характеризующие интенсивность окислительных процессов и активность антиокси-дантных ферментов, исследованы в крови 114 больных РЯ 1-4-й стадии (ст.). Возраст больных колебался от 32 до 76 лет. Все проходили лечение и мониторирование в стационаре ФГБУ «РНИОИ» Минздрава России с 2012 по 2016 г. Одновременно было обследовано 30 относительно здоровых женщин без онкопатологии, аутоиммунных, тяжелых хронических или психических заболеваний, сопоставимых по возрасту с обследованными больными (группа доноров). У всех больных и доноров было получено добровольное информированное согласие на использование биологического материала для научных исследований.
При анализе результатов исследования показателей, характеризующих окислительный статус, были сформированы сравниваемые группы больных РЯ: 1-2-й ст. - 10 чел., 3-4-й ст. - 52 (из которых больных асцитной формой РЯ - 44, без асцита -8 чел.), больные с рецидивом РЯ 3-4-й ст. - 40 чел., больные с 3-й ст. в состоянии ремиссии - 12.
Исследовали интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) по уровню Н2О2-индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции (ХЛ) и накоплению молекулярного продукта - малонового диальдегида (МДА) в плазме и эритроцитах; состояние ферментативного звена антиоксидантной системы эритроцитов - по активности супероксид-дисмутазы (СОД), каталазы, глутатионпероксидазы (ГПО), глутатионредуктазы (ГР), глутатионтранс-феразы (ГТ), уровню восстановленного глутатиона (ВГ), а также в плазме крови активность и содержание церулоплазмина (ЦП) - основного антиокси-данта плазмы крови, активность каталазы и содер-
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
жание белков острой фазы (БОФ) воспаления - С-реактивного белка (СРБ) и гаптоглобина. Полученные данные сопоставляли со значениями в группе женщин без онкопатологии.
Показатели определяли в плазме и 1%-м гемоли-зате венозной крови, взятой утром натощак. Интенсивность липопероксидации оценивали спектрофо-тометрическим методом по накоплению продуктов реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активных соединений) при 540 нм в пересчете на концентрацию МДА как наиболее изученного продукта ПОЛ [13]. Интенсивность радикалообразова-ния в плазме крови (в основном О2^- и НО^-радикалов) оценивали по интенсивности Н2О2-индуцированной люминолзависимой ХЛ [14]. Све-тосумму ХЛ регистрировали в течение 6 с и выражали в импульсах (имп.) за 6 с. Активность СОД (КФ 1.15.1.1) определяли по степени ингибирования восстановления нитросинего тетразолия в присутствии супероксидного радикала, генерируемого в реакции восстановления молекулярного кислорода адреналином в щелочной среде при 545 нм [15]. За единицу активности (ед. ак.) принимали количество фермента, вызывавшего 50%-е торможение реакции. Активность каталазы (КФ 1.11.1.6) определяли методом с использованием молибдата аммония [16], содержание ВГ - по реакции с 5,5-дитиобис (2-нитробензойной кислотой) при 412 нм, активность ГР (КФ 1.6.4.2) - по скорости окисления NADPH в присутствии окисленного глутатиона при 340 нм, активность ГПО (КФ 1.11.1.9) - в реакции расщепления гидроперекиси третичного бутила, используя в качестве субстрата ВГ, при 412 нм, активность глутатионтрансферазы (КФ 2.1.5.18) - по скорости образования конъюгатов с 1-хлор-2,4-динитро-бензолом в присутствии ВГ при 340 нм [15], окси-дазную активность ЦП - общепринятым колориметрическим методом, основанным на окислении n-фенилендиамина [17], концентрацию гемоглобина в гемолизатах - гемоглобинцианидным методом с использованием коммерческого набора реагентов («ЭКОлаб-Гемоглобин», Россия). Содержание СБР, гаптоглобина и ЦП определяли в сыворотке крови онкологических больных на биохимическом анализаторе COBAS INTEGRA 400 (Roche) унифицированными методами.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ STATISTrcA 6.0, критерия Стьюдента и Манна - Уитни для оценки достоверности различий двух независимых выборок. Отклонения между рядами оценивали как значимые при вероятности различий, превышающих 95 % (0,001<p<0,05), а при 0,1>p>0,05 считали, что различия обнаружены на уровне статистической тенденции.
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
Результаты и обсуждение
В табл. 1 представлены показатели, отражающие интенсивность окислительных процессов, активность антиоксидантных ферментов и содержание некоторых БОФ воспаления в плазме крови больных. Интенсивность ХЛ, активность каталазы и ЦП при 3-й, 4-й ст. РЯ были изучены в плазме крови 52 больных, остальные показатели - в крови 27 пациенток.
Интенсивность Н2О2-индуцированной люми-нолзависимой ХЛ, по которой можно судить об образовании в плазме крови свободных радикалов кислорода (R% OH% RO% RO2^), инициирующих свободнорадикальное окисление, была увеличена у большинства обследованных больных РЯ. Статистически значимое увеличение на 87,7 % относительно группы женщин без онкопатологии было выявлено при анализе в целом группы больных РЯ 3-й, 4-й ст. заболевания. При этом более выраженное - двукратное - увеличение данного показателя было характерно для пациенток с асцитной формой, в то время как у больных без асцита значимого повышения интенсивности ХЛ не выявлено. У больных РЯ 1-й, 2-й ст. интенсивность ХЛ оставалась в пределах нормы.
Отдельно был проведен анализ показателей окислительного статуса у 52 больных РЯ, находившихся на мониторинге после проведенного оперативного и химиотерапевтического лечения. При возникновении рецидива заболевания имело место резкое увеличение интенсивности ХЛ - в среднем в 3 раза (на 197 %) относительно женщин без онкопа-тологии. У больных, находившихся в состоянии ремиссии, интенсивность ХЛ была существенно ниже - проявлялась тенденция к снижению на 37,8 % относительно больных с рецидивом и повышению относительно уровня у здоровых женщин на 84,5 % (табл. 1). Содержание МДА (вторичного молекулярного продукта ПОЛ) было исследовано как в плазме крови, так и в эритроцитах, где функционируют основные ферменты, участвующие в антиок-сидантной защите. В эритроцитах крови (табл. 2) не было выявлено увеличения уровня МДА и его зависимости от стадии и формы заболевания у больных первичным РЯ. Однако при мониторинге больных РЯ после проведения комплексного лечения наблюдали повышенное на 43,2 % содержание МДА в эритроцитах при возникновении рецидива, а у больных, находившихся в состоянии ремиссии, увеличение на 34,6 % не было статистически значимым. При этом уровень МДА зависел от состояния рецидивной опухоли: при положительной динамике (снижение размеров рецидивной опухоли и улучшение со-нографических характеристик при ультразвуковом исследовании) значимые различия с нормой отсут-
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
ствовали, а при отрицательной динамике содержание МДА в эритроцитах превышало уровень у здоровых женщин на 67,9 %. Различие в содержании МДА между больными с отрицательной и положительной динамикой достигало 32,9 % (р=0,05). В плазме крови (табл. 1) содержание МДА было повышено только при первичном РЯ, а при рецидивах не отличилось от уровня у здоровых женщин. У
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
больных РЯ 1-й, 2-й ст. увеличение МДА в плазме составляло 55 %, а при 3-й, 4-й ст. достигало 99,8 %. При этом наибольшее увеличение данного показателя наблюдали у всех больных с безасцитной формой заболевания - в среднем в 3 раза выше, чем у женщин без онкопатологии. Различие в содержании МДА в плазме крови у больных без асцита и с ас-цитной формой РЯ достигало 89,1 % (р=0,017).
Таблица 1
Интенсивность окислительных процессов, активность антиоксидантных ферментов и содержание некоторых БОФ
воспаления в плазме крови больных РЯ / The intensity of oxidative processes, the activity of antioxidant enzymes and the content of certain proteins of the acute phase of inflammation in the blood plasma of patients with ovarian cancer
Группа ХЛ, имп. /6 с МДА, нмоль/ мл плазмы Каталаза, мкмоль Н2О2/мин-л Активность ЦП, мкмоль/л Содержание ЦП, г/л СРБ, мг/л Гаптоглобин, г/л
Без онкопатологии (n=25) 3276±175 2,737±0,334 34,18±1,76 1,326±0,067 0,295±0,023 1,744±0,198 норма<5 1,207±0,088
РЯ
1-я, 2-я ст. (п=10) 3571±698 4,243±0,637 р<0,05 37,94±2,54 Р>0,1 1,879±0,156 Р<0,01 0,398±0,013 р<0,05 5,45±0,54 Р<0,0001 1,985±0,225 р<0,01
3-я, 4-я ст. (п=52) 6148±616 р<0,0001 Р1<0,01 5,468±0,759 р<0,01 45,71±2,48 р<0,001 Р1<0,05 2,14±0,113 р<0,0001 0,423±0,017 р<0,0001 69,51±16,62 Р<0,001 pi<0,001 4,127±0,237 р<0,0001 Р1<0,00001
Асцитная форма (п=44) 6583±712 р<0,0001 4,326±0,861 0,05<р<0,1 45,76±2,64 р<0,001 2,145±0,108 р<0,0001 0,405±0,020 р<0,01 95,60±27,53 Р<0,01 4,331±0,310 р<0,0001
Без асцита (п=8) 3896±659 р2<0,02 8,181±1,098 р<0,0001 р2<0,02 45,41±8,32 р<0,05 2,1±0,237 р<0,01 0,462±0,027 р<0,001 40,75±11,74 Р<0,01 0,05<р2<0,1 3,719±0,322 р<0,0001
Ремиссия (п=12) 6050±821 р<0,01 — 43,15±5,35 р<0,05 1,325±0,092 — — 1,78±0,22 р<0,05
Рецидив (п=40) 9729±999 р<0,0001 0,05<рз<0,1 2,949±0,306 Р>0,1 51,18±3,28 р<0,001 1,64±0,081 р<0,01 рз<0,02 0,384±0,012 р<0,05 1,95±0,23 2,63±0,25 р<0,0001 рз<0,02
Положительная динамика(п=13) 11513±1877 р<0,001 — 52,16±5,91 р<0,01 1,62±0,081 р<0,01 — — 1,76±0,17 р<0,01
Отрицательная динамика(п=14) 8962±1408 р<0,001 42,78±5,75 Р>0,1 1,553±0,145 (14) Р>0,1 2,93±0,34 р<0,0001 Р4<0,01
Примечание. Статистическая значимость различий: р - относительно женщин без онкопатологии; р1 - между больными с 1-й, 2-й и 3-й, 4-й ст.; р2 - относительно асцитной формы РЯ; рз - относительно группы больных в состоянии ремиссии; р4 - относительно группы с положительной динамикой. Во всех таблицах представлены р только для значимых различий.
Активность каталазы в плазме крови изменялась в зависимости от распространенности процесса. У больных с 1 -й, 2-й ст. РЯ значимых изменений не выявлено, а у больных с 3-й, 4-й ст. наблюдалось увеличение активности каталазы на 33,7 % независимо от наличия или отсутствия асцита. Наибольшее увеличение данного показателя было обнаружено при рецидивах РЯ - на 49,7 % относительно
женщин без онкопатологии. При динамическом наблюдении было установлено, что значимое увеличение активности каталазы было характерно только для больных с положительной динамикой рецидивной опухоли - на 52,6 %, при отрицательной динамике значимые изменения отсутствовали, а у больных с ремиссией (отсутствие рецидивов) увеличение составляло лишь 23,5 %.
Таблица 2
Содержание МДА и активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах крови больных распространенным РЯ / The MDA content and the activity of antioxidant enzymes in blood erythrocytes in patients with advanced ovarian cancer
Группа МДА, нмоль/ мл 1%-го гемолизата СОД, ед. актив./мг Hb Каталаза, мкмоль Н2О2/мин-мг Hb Глутатион, мкмоль/мг Hb ГПО, МЕ/мг Hb ГТ, МЕ/мг Hb ГР, МЕ/мг Hb
Без онкопатологии (n=30) 1,495±0,079 500,8±16,44 135,5±4,1 31,49±1,06 251,2±22,7 62,00±1,81 7, 56±0,31
РЯ
1-я, 2-я ст. (П=10) 1,496±0,16 422,3±21,0 р<0,02 120,9±7,75 0,05<р<0,1 29,94±2,49 229,2±27,7 59,67±1,55 7,94±0,55
3-я, 4-я ст. (П=27) 1,575±0,157 452,9±24,7 137,9±5,9 36,44±1,2 р<0,01 р1<0,05 304,1±26,6 0,05<р1<0,1 58,93±1,81 5,12±0,56 р<0,001 р1<0,001
Асцитная форма (П=19) 1,574±0,209 427±31,8 р<0,05 134,8±7,5 36,59±1,65 р<0,02 319,6±34,1 р1<0,05 58,58±2,32 5,49±0,63 р<0,02
Без асцита (П=8) 1,577±0,206 514,4±25,6 р2<0,05 145,6±8,8 36,09±1,18 р<0,01 300,4±28,3 0,05<р1<0,1 59,7±2,92 4,96±1,13 р<0,05
Ремиссия (П=12) 2,012±0,300 Р>0,1 380,5±24,9 р<0,001 110,1±9,15 р<0,01 34,30±1,79 452,8±25,6 р<0,0001 65,35±1,62 7,09±0,98
Рецидив (П=40) 2,141±0,167 р<0,01 470,3±21,7 р3<0,01 95,33±4,00 р=0,000000 32,38±1,03 458,0±17,8 р<0,00001 65,19±1,48 6,62±0,30 р<0,05
Положительная динамика(п=12) 1,891±0,22 Р>0,1 573,05±72,3 87,04±7,44 32,68±3,7 420,9±45,9 р<0,01 58,49±4,55 6,199±1,17
Отрицательная динамика (П=12) 2,514±0,202 р<0,0001 Р4<0,05 545,5±65,2 91,89±8,52 34,20±1,22 468,8±37,05 р<0,0001 67,85±2,49 0,05<р<0,1 6,70±0,38 0,05<р<0,1
Примечание. Статистическая значимость различий: р - относительно женщин без онкопатологии; р1 - между больными с 1-й, 2-й и 3-й, 4-й ст.; р2 - относительно асцитной формы РЯ; р3 - относительно группы больных в состоянии ремиссии; р4 - относительно группы с положительной динамикой.
В плазме крови основной супероксид устраняющей активностью обладает ЦП. Наибольшее увеличение как оксидазной активности, так и содержания этого белка было выявлено при 3-й, 4-й ст. РЯ - на 61,4 и 43,4 %, а при 1-й, 2-й ст. - 41,7 и 34,9 % относительно нормативных значений. При рецидивах концентрация ЦП была повышена на 30,2 %, а его активность - на 23,7 %, и значимо только у больных с положительной динамикой.
Поскольку ЦП приписывают ключевые антиок-сидантные функции в плазме крови, можно предположить, что наиболее выраженное увеличение интенсивности ХЛ у больных с рецидивами обусловлено значительно меньшей активацией антиок-сидантных защитных механизмов плазмы при рецидивах по сравнению с первичным РЯ. ЦП относят также к БОФ, в связи с чем представляло интерес исследовать при РЯ содержание и других БОФ. Нами было установлено увеличение концентрации СРБ и гаптоглобина, наиболее выраженное при асцитной форме распространенного РЯ, - в 54,8 и в 3,6 раза, у больных с 3-й, 4-й ст. без асцита - 23,4 и 3,1 раза, а при 1-й, 2-й ст. - 3,1 и 1,6 раза. При рецидивах РЯ значимых изменений СРБ не выявлено, а концентрация гаптоглобина была увеличена в среднем в 2,2 раза. Более выраженное увеличение
концентрации гаптоглобина было характерно для больных с отрицательной динамикой при лечении рецидива - в 2,4 раза, тогда как у больных с положительной динамикой, как и при ремиссии, - лишь на 46^47 % (табл. 1).
Выявленные различия в динамике антиокси-дантной способности ЦП и в изменении содержания типичных БОФ на разных стадиях РЯ подтверждают роль данного белка преимущественно в качестве антиоксиданта плазмы крови.
Полученные нами результаты свидетельствуют об интенсификации процессов ПОЛ в плазме крови больных распространенным РЯ. Активация сво-боднорадикального окисления происходила на фоне повышенной антиоксидантной активности, что, очевидно, носило компенсаторный характер. Как известно, каталаза не имеет собственной внеклеточной формы, и ее высокая активность в плазме крови обусловлена выходом из клеток крови в результате повреждения [18]. В отличие от катала-зы, ЦП является основным антиоксидантом плазмы крови. При изучении его содержания в крови женщин с онкогинекологическими заболеваниями наиболее высокий уровень этого белка установлен именно при РЯ [19]. Оценивая активность ЦП у больных РЯ, следует иметь в виду, что его роль при
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION.
злокачественной патологии обусловлена не только антиоксидантными свойствами, но и участием в транспорте меди и обмене железа. Данный фермент рассматривается в последнее время как один из факторов нейроэндокринной регуляции и естественной защиты организма при стрессовых ситуациях, воспалительных процессах, токсических повреждениях органов и тканей и как БОФ воспаления [20, 21]. Повышение содержания ЦП и резкое увеличение содержания других реактантов воспаления - СРБ и гаптоглобина свидетельствуют о формировании патологической реакции воспаления у больных РЯ, особенно при его асцитной форме.
Ранее нами были изучены в плазме крови состояние некоторых звеньев антиоксидантной системы, интенсивность ХЛ и уровень окислительной модификации белков у больных с рецидивом РЯ в зависимости от интенсивности кровотока в рецидивной опухоли. Показаны усиление ХЛ плазмы крови и увеличение степени окисленности белковых молекул по мере усиления васкуляризации и увеличения скорости кровотока в рецидивной опухоли [22].
В эритроцитах крови была исследована и проанализирована активность основных антиокси-дантных ферментов в зависимости от стадии и формы РЯ (табл. 2).
Активность СОД была статистически значимо снижена как у больных с 1-й, 2-й ст. РЯ, так и у больных распространенным РЯ с асцитной формой заболевания - на 15,7 и 14,7 % соответственно по сравнению с активностью данного фермента
NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
в группе без онкопатологии. В то же время у больных с 3-й, 4-й ст. без асцита активность СОД превышала значение в группе больных с асцитом на 20,5 % и значимо не отличалась от нормы. В группе больных, находившихся в состоянии ремиссии при мониторинге после проведения комплексного лечения, активность СОД была снижена на 24 % относительно здоровых женщин, а у больных с рецидивом заболевания повышалась на 23,6 % по сравнению с больными в ремиссии до уровня у здоровых. При последующем мониторинге больных с рецидивом РЯ был отмечен дальнейший рост активности фермента, который не зависел от динамики изменения размеров и других ультразвуковых характеристик рецидивной опухоли.
Активность каталазы проявляла тенденцию к снижению у больных с начальными стадиями РЯ на 10,8 %, однако скоординированное соотношение между сопряженными ферментами первой линии ан-тиоксидантной защиты (СОД и каталаза) сохранялось на уровне, характерном для женщин без онкологической патологии. В отличие от этого при асцитной форме распространенного РЯ наблюдалось нарушение скоординированной работы данного ключевого звена антиоксидантной системы крови, о чем свидетельствовала тенденция к снижению коэффициента соотношения СОД/каталаза до 3,3 по сравнению с 3,7 у здоровых женщин. При этом у больных без асцита и при 1-й, 2-й ст. РЯ коэффициент СОД/каталаза оставался на уровне 3,5-3,6 (табл. 3).
Таблица 3
Коэффициенты соотношения активности антиоксидантных ферментов в эритроцитах крови больных РЯ / Coefficients of the ratio of the activity of antioxidant enzymes in erythrocytes of blood of patients with ovarian cancer
Группа СОД/каталаза СОД/ГПО ГПО/каталаза
Без онкопатологии (n=30) 3,696±0,12 1,994±0,215 1,854±0,199
Рак яичников
1-я, 2-я ст. (п=10) 3,559±0,204 1,842±0,247 1,896±0,251
3-я, 4-я ст. 3,395±0,211 1,489±0,159 2,20±0,235
(п=27) 0,05<р<0,1
Асцитная форма 3,327±0,299 1,336±0,148 2,371±0,254
(п=19) р<0,02
Без асцита(п=8) 3,557±0,081 1,712±0,163 2,063±0,219
Ремиссия 3,69±0,339 0,840±0,091 4,113±0,457
(п=12) р<0,0001 р<0,0001
Рецидив 5,39±0,34 1,027±0,089 4,804±0,352
(п=40) р=0,0001 р<0,0001 р=0,000000
Положительная динамика 6,584±0,829 1,361±0,211 4,836±0,597
(п=12) р<0,01 р<0,05 р<0,0001
Отрицательная динамика 5,936±0,831 1,164±0,152 5,102±0,621
(п=12) р<0,02 р<0,01 р<0,0001
Примечание. Статистическая значимость различий: р - относительно женщин без онкопатологии.
После проведения лечения активность каталазы была значимо снижена у всех больных, находившихся на мониторинге: на 18,7 % при ремиссии и на 29,6 % - при рецидиве РЯ. Однако если при ремиссии коэффициент СОД/каталаза не отличался от значения у здоровых женщин (3,69), то при ре-цидивировании наблюдалось его резкое увеличение до 5,4 с дальнейшим повышением до 5,9^6,6 в процессе мониторинга больных, что свидетельствовало о недостаточной способности каталазы элиминировать пероксид, образование которого катализирует СОД.
Содержание ВГ было повышено у больных распространенным РЯ в среднем на 15,7 % относительно здоровых и на 21,7 % относительно больных с 1-й, 2-й ст. РЯ. При увеличении распространенности РЯ наблюдалось увеличение активности ГПО -в среднем на 31,1 % относительно 1 -й, 2-й ст. Во всех группах больных, находившихся на мониторинге после проведения комплексного лечения РЯ, выявлена высокая активность ГПО, превосходившая ее значение в группе без онкопатологии в среднем на 81,8 %. Наибольшее увеличение наблюдалось у больных с отрицательной динамикой ультразвуковых параметров рецидивной опухоли (на 86,6 %), наименьшее - у больных с положительной динамикой (на 67,5 %). Активность ГР была статистически значимо снижена при распространенном РЯ (на 32,3 %) и рецидивах РЯ (на 12,4 %), а у больных с 1-й, 2-й ст. заболевания и у находящихся в состоянии ремиссии не отличалась от уровня у здоровых. Различие между значениями активности ГР в группах больных с 1-й, 2-й ст. и 3-й, 4-й ст. достигало 55,1 % (табл. 2).
Коэффициенты СОД/каталаза и СОД/ГПО, характеризующие сбалансированность работы каскадов антиоксидантных ферментов, имели разнонаправленную динамику, особенно выраженную у больных, находившихся на мониторинге после проведения комплексной терапии. Коэффициент СОД/каталаза возрастал при появлении рецидива и продолжал повышаться в процессе наблюдения до значений, превышающих уровень здоровых на 60,6-78,1 %. Коэффициент СОД/ГПО во всех группах больных был снижен. Наиболее существенное снижение имело место у больных, наблюдавшихся после завершения комплексного лечения, - на 31,757,9 % по сравнению с группой без онкопатологии. Снижение коэффициента СОД/ГПО на 33 % отмечено и у больных с асцитной формой РЯ (табл. 3).
В условиях снижения активности каталазы, приводящего к накоплению перекиси водорода, СОД может взаимодействовать с Н2О2 и выступать в качестве прооксиданта, инициируя образование супероксидного анион-радикала и гидроксильного
радикала. Кроме того, высокая активность СОД при сниженной активности каталазы способствует усилению цитотоксического действия Н2О2 [23]. Следовательно, наблюдаемое при рецидивировании снижение активности каталазы на фоне относительно высокой активности СОД может способствовать интенсификации свободнорадикальных процессов.
Увеличение величины коэффициента ГПО/ка талаза, наряду со снижением коэффициента СОД/ГПО, указывает на возрастание роли ГПО в деградации перекиси водорода у больных РЯ, что было наиболее выражено у больных, наблюдавшихся после окончания комплексного лечения. Лишь у больных с 1 -й, 2-й ст. РЯ все коэффициенты, отражающие соотношение активности антиок-сидантных ферментов, не отличались от их значений у здоровых женщин.
Повышенный уровень глутатиона и активацию ГТ рассматривают в качестве одного из компонентов формирования множественной лекарственной устойчивости [24-27]. Согласно полученным нами данным, тенденция к значимому повышению активности ГТ наблюдается только в одной из групп больных - с отрицательной динамикой рецидивной опухоли. Это в совокупности с выявленным в этой группе относительно высоким уровнем глутатиона позволяет предполагать развитие у данных больных резистентности к лечению, что и способствует наблюдаемому у них течению заболевания, несмотря на проводимое лечение.
Заключение
Согласно полученным данным, интенсивность процессов ПОЛ в плазме крови больных РЯ зависит от стадии процесса и значимо выше у больных с 3-й, 4-й ст. заболевания. Для асцитной формы РЯ были характерны большая интенсивность сво-боднорадикальных звеньев ПОЛ, максимальное увеличение уровня СРБ и гаптоглобина. Направленность изменений у больных с асцитом отличалась для свободнорадикальных и молекулярных продуктов ПОЛ. Интенсивность ХЛ, отражающая образование свободных радикалов, при асцитной форме была выше на 69 % по сравнению с больными без асцита, а содержание молекулярного продукта МДА в плазме крови, хотя и было повышено у всех больных распространенным РЯ, в группе без асцита было выше на 89,1 %, чем при асцитной форме.
При рецидивах основная роль в утилизации перекиси водорода переходит от каталазы к ГПО. Подтверждением является увеличение коэффициента ГПО/каталаза в 2,6^2,8 раза (при рецидивах он
равен 4,8^5,1, без онкопатологии - 1,85), в то время как у больных с первичным РЯ таких изменений не наблюдалось (при 1-й, 2-й ст. - 1,9, при 3-й, 4-й -2,2). Выявлена зависимость активности каталазы в плазме крови от динамики развития рецидивной опухоли. Отсутствие увеличения содержания МДА в плазме крови при рецидивах РЯ, в отличие от первичного РЯ, может быть связано с более высокой активностью каталазы плазмы именно у больных с рецидивами.
Таким образом, нарушение скоординированной работы антиоксидантных ферментов, приводящее к усилению свободнорадикальных процессов, может являться одним из факторов, способствующих про-грессированию заболевания при РЯ.
Литература
1. Урманчеева А.Ф., Кутушева Г.Ф., Ульрих Е.А. Опухоли яичника (клиника, диагностика и лечение). СПб. : Н-Л, 2012. 68 с.
2. Doubeni C.A., Doubeni A.R.B., Myers A.E. Diagnosis and Management of Ovarian Cancer // American Family Physician. 2016. Vol. 93 (11). P. 937-944.
3. Исакова Ф.С. Значение некоторых клинико-биологических показателей в патогенезе, диагностике и мониторинге больных со злокачественными и доброкачественными опухолями яичников : дис. ... канд. мед. наук. Ростов н/Д., 2016.
4. Grek C.L., Tew K.D. Redox metabolism and malignancy // Curr. Opin. Pharmacol. 2010. Vol. 10 (4). P. 362-368. DOI 10.1016/j.coph.2010.05.003.
5. Dawane J.S., Pandit V.A. Understanding Redox Homeostasis and its Role in Cancer // J. Clin. Diagnos. Res. 2012. Vol. 6 (10). P. 1796-1802.
6. Valko M., Rhodes C.J., Moncol J., Izakovic M., MazurM. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer // Chem. Biol. Interact. 2006. Vol. 160 (1). P. 1-40.
7. Nogueira V., Hay N. Molecular pathways: reactive oxygen species homeostasis in cancer cells and implications for cancer therapy // Clin. Cancer Res. 2013. Vol. 19 (16). P. 43094314. DOI 10.1158/1078-0432.CCR-12-1424.
8. GamcsikМ.Р., Kasibhatla M.S., Teeter S.D., Colvin O.M. Glutathione Levels in Human Tumors // Biomarkers. 2012. Vol. 17 (8). Р. 671-691.
9. Traverso N., Ricciarelli R., Nitti M., Marengo B., Fur-faro A.L., Pronzato M.A., Marinari U.M., Domenicotti C. Role of glutathione in cancer progression and chemoresistance // Ox-idative Medicine and Cellular Longevity. 2013. Article ID 972913. DOI 10.1155/2013/972913.
10. Сурикова Е.И., Горошинская ИА., Неродо Г.А., Фран-циянц Е.М., Малейко М.Л., Шалашная Е.В., Качесова П.С., Немашкалова Л.А., Леонова А.В. Активность редокс-регулирующих систем в опухоли и окружающих ее тканях при различных гистологических вариантах // Биомед. химия. 2016. № 62 (2). С. 187-192.
11. Кит О.И., Франциянц Е.М., Моисеенко Т.И., Верени-кина Е.В., Черярина Н.Д., Козлова Л.С., Погорелова Ю.А. Факторы роста семейства VEGF и FGF 21 в сыворотке крови в динамике развития рака яичников // Современные проблемы науки и образования. 2017. № 1. URL: https://science-
education.ru/ru/article/view?id=25898 (дата обращения: 16.03.2017).
12. Кит О.И., Франциянц Е.М., Никипелова Е.А., Комарова Е.Ф., Козлова Л.С., Таварян И.С., Аверкин М.А., Черярина Н.Д. Изменения маркеров пролиферации, неоангио-генеза и системы активации плазминогена в ткани рака прямой кишки // Эксперим. и клин. гастроэнтерология. 2015. № 2 (114). С. 40-45.
13. Стальная И.Д., Горешвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / ред. В.Н. Орехо-вич. М. : Медицина, 1977. С. 66-68.
14. Шестаков В.А., Бойчевская Н.О., Шерстнев М.П. Хемилюминесценция плазмы крови в присутствии перекиси водорода // Вопросы мед. химии. 1979. № 25 (2). С. 132-137.
15. Арутюнян А.В., Дубинина Е.Е., Зыбина Н.Н. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидант-ной системы организма: метод. рекомендации. СПб. : Фолиант, 2000. 104 с.
16. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. № 1. С. 16-19.
17. Камышников В.С. Методы клинических лабораторных исследований. 6-е изд. М. : МЕДпресс-информ, 2013. 736 с.
18. Герасименко М.Н., Зуков Р.А., Титова Н.М., Дыхно Ю.А., Модестов А.А., Попов Д.В. Антиоксидантная система и маркеры окислительного стресса при раке почки // Сиб. онкол. журн. 2012. № 25 (5). С. 39-43.
19. Гусарова Ю.Н., Степанова Е.В., Ландесан Е.О., Королева О.В., Вавилова Т.П., Макаров О.В., Косецкий В.Н. Регуляция активности церулоплазмина при онкогинеколо-гических заболеваниях // Вопросы мед. химии. 2002. № 48 (4). С. 388-393.
20. ЖуковВ.И., Васильев И.М., ВинникЮА., БелевцовЮ.П. Состояние антирадикальной и антиперекисной защиты у больных гастроканцерогенезом // Вестн. проблем биол. медицины. 2013. № 1 (4). С. 126-131.
21. Ващенко В.И., Ващенко Т.Н. Церулоплазмин - от метаболита до лекарственного средства // Психофармакология и биол. наркология. 2006. № 6 (3). С. 1254-1269.
22. Горошинская И.А., Неродо Г.А., Сурикова Е.И., Качесова П.С., Внуков В.В., Шалашная Е.В., Нескубина И.В., Немашкалова Л.А., Максимова Н.А., Сергеева М.М. Интенсивность хемилюминесценции, состояние антиоксидантной системы и окислительная модификация белков плазмы крови при развитии рецидива рака яичников // Сиб. онкол. журн. 2013. № 26 (4). С. 45-49.
23. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь ИА., Круговых Н.Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Про-оксиданты и антиоксиданты. М. : Слово, 2006. 556 с.
24. Свирновский А.И., Пасюков В.В. Молекулярные основы феномена химио- и радиорезистентности при опухолевых процессах // Мед. новости. 2007. № 11. С. 7-19.
25. Волкова Т.О., Багина У.С. Множественная лекарственная устойчивость опухолевых клеток к химиотерапев-тическим препаратам. Экологические аспекты // Принципы экологии. 2012. № 2 (1). С. 4-20.
26. McConkey D.J., Zhu K. Mechanisms of proteasome inhibitor action and resistance in cancer // Drug Resistance Updates. 2008. Vol. 11. Р. 164-179.
27. Maher Y.A. Glutathione as potential target for cancer therapy; more or less is good? (Mini-review) // Jordan J. of Biological Sciences. 2011. Vol. 3 (4). Р. 119-124.
ISSN 0321-3005 IZVESTIYA VUZOV. SEVERO-KAVKAZSKII REGION. NATURAL SCIENCE. 2017. No. 4-2
References
1. Urmancheeva A.F., Kutusheva G.F., Ul'rikh E.A. Opukholi yaichnika (klinika, diagnostika i lechenie) [Tumors of the ovary (clinic, diagnosis and treatment)]. Saint Petersburg: N-L, 2012, 68 p.
2. Doubeni C.A., Doubeni A.R.B., Myers A.E. Diagnosis and Management of Ovarian Cancer. American Family Physician. 2016, vol. 93 (11), pp. 937-944.
3. Isakova F.S. Znachenie nekotorykh kliniko-biologi-cheskikh pokazatelei v patogeneze, diagnostike i monitoringe bol'nykh so zlokachestvennymi i dobrokachestvennymi opukhol-yami yaichnikov : dis. ... kand. med. nauk [The significance of some clinical and biological indicators in the pathogenesis, diagnosis and monitoring of patients with malignant and benign ovarian tumors]. Rostov-on-Don, 2016.
4. Grek C.L., Tew K.D. Redox metabolism and malignancy. Curr. Opin. Pharmacol. 2010, vol. 10 (4), pp. 362-368. DOI 10.1016/j.coph.2010.05.003.
5. Dawane J.S., Pandit V.A. Understanding Redox Homeostasis and its Role in Cancer. J. Clin. Diagnos. Res. 2012, vol. 6 (10), pp. 1796-1802.
6. Valko M., Rhodes C.J., Moncol J., Izakovic M., Mazur M. Free radicals, metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer. Chem. Biol. Interact. 2006, vol. 160 (1), pp. 1-40.
7. Nogueira V., Hay N. Molecular pathways: reactive oxygen species homeostasis in cancer cells and implications for cancer therapy. Clin. Cancer Res. 2013, vol. 19 (16), pp. 43094314. DOI 10.1158/1078-0432.CCR-12-1424.
8. Gamcsik М.Р., Kasibhatla M.S., Teeter S.D., Colvin O.M. Glutathione Levels in Human Tumors. Biomarkers. 2012, vol. 17 (8), pp. 671-691.
9. Traverso N., Ricciarelli R., Nitti M., Marengo B., Fur-faro A.L., Pronzato M.A., Marinari U.M., Domenicotti C. Role of glutathione in cancer progression and chemoresistance. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2013. Article ID 972913. DOI 10.1155/2013/972913.
10. Surikova E.I., Goroshinskaya I.A., Nerodo G.A., Frantsi-yants E.M., Maleiko M.L., Shalashnaya E.V., Kachesova P.S., Nemashkalova L.A., Leonova A.V. Aktivnost' redoks-reguliruyu-shchikh sistem v opukholi i okruzhayushchikh ee tkanyakh pri raz-lichnykh gistologicheskikh variantakh [Activity of redox-regulating systems in a tumor and surrounding tissues at various histological variants]. Biomed. khimiya. 2016, No. 62 (2), pp. 187-192.
11. Kit O.I., Frantsiyants E.M., Moiseenko T.I., Verenikina E.V., Cheryarina N.D., Kozlova L.S., Pogorelova Yu.A. Faktory rosta semeistva VEGF i FGF 21 v syvorotke krovi v dinamike razvitiya raka yaichnikov [Factors of growth of the VEGF family and FGF 21 in the serum in the dynamics of ovarian cancer development]. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. 2017, No. 1. Available at: https://science-education.ru/ru/article/view?id=25898 (accessed 16.03.2017).
12. Kit O.I., Frantsiyants E.M., Nikipelova E.A., Komarova E.F., Kozlova L.S., Tavaryan I.S., Averkin M.A., Cheryarina N.D. Izmeneniya markerov proliferatsii, neoangiogeneza i sistemy aktivatsii plazminogena v tkani raka pryamoi kishki [Changes in markers of proliferation, neoangiogenesis, and the system of plasminogen activation in rectal cancer tissue]. Eksperim. i klin. gastroenterologiya. 2015, No. 2 (114), pp. 40-45.
13. Stal'naya I.D., Goreshvili T.G. [Method for the determination of malonic dialdehyde with thiobarbituric acid]. Sovremennye metody v biokhimii [Modern methods in biochemistry]. Ed. V.N. Orekhovich. Moscow: Meditsina, 1977, pp. 66-68.
Поступила в редакцию /Received_
14. Shestakov V.A., Boichevskaya N.O., Sherstnev M.P. Khemilyuminestsentsiya plazmy krovi v prisutstvii perekisi vodoroda [Chemiluminescence of blood plasma in the presence of hydrogen peroxide]. Voprosy med. khimii. 1979, No. 25 (2), pp. 132-137.
15. Arutyunyan A.V., Dubinina E.E., Zybina N.N. Metody otsenki svobodnoradikal'nogo okisleniya i antioksidantnoi sis-temy organizma [Methods for assessing free radical oxidation and the body's antioxidant system]. Method. recommendations. Saint Petersburg: Foliant, 2000, 104 p.
16. Korolyuk M.A., Ivanova L.I., Maiorova I.G., Tokarev V.E. Metod opredeleniya aktivnosti katalazy [Method for determination of catalase activity]. Lab. delo. 1988, No. 1, pp. 16-19.
17. Kamyshnikov V.S. Metody klinicheskikh laboratornykh issledovanii [Methods of clinical laboratory research]. 6th ed. Moscow: MEDpress-inform, 2013, 736 p.
18. Gerasimenko M.N., Zukov R.A., Titova N.M., Dykhno Yu.A., Modestov A.A., Popov D.V. Antioksidantnaya sistema i markery okislitel'nogo stressa pri rake pochki [Antioxidant system and markers of oxidative stress in kidney cancer]. Sib. onkol. zhurn. 2012, No. 25 (5), pp. 39-43.
19. Gusarova Yu.N., Stepanova E.V., Landesan E.O., Koroleva O.V., Vavilova T.P., Makarov O.V., Kosetskii V.N. Regulyatsiya aktivnosti tseruloplazmina pri onkoginekologich-eskikh zabolevaniyakh [Regulation of the activity of cerulo-plasmin in oncogynecologic diseases]. Voprosy med. khimii. 2002, No. 48 (4), pp. 388-393.
20. Zhukov V.I., Vasil'ev I.M., Vinnik Yu.A., Belevtsov Yu.P. Sostoyanie antiradikal'noi i antiperekisnoi zashchity u bol'nykh gastrokantserogenezom [The state of antiradical and antiperoxide protection in patients with gastro-carcinogenesis]. Vestn. problem biol. meditsiny. 2013, No. 1 (4), pp. 126-131.
21. Vashchenko V.I., Vashchenko T.N. Tseruloplazmin - ot metabolita do lekarstvennogo sredstva [Ceruloplasmin - from the metabolite to the drug]. Psikhofarmakologiya i biol. narkologiya. 2006, No. 6 (3), pp 1254-1269.
22. Goroshinskaya I.A., Nerodo G.A., Surikova E.I., Kachesova P.S., Vnukov V.V., Shalashnaya E.V., Neskubina I.V., Nemashkalova L.A., Maksimova N.A., Sergeeva M.M. Inten-sivnost' khemilyuminestsentsii, sostoyanie antioksidantnoi sis-temy i okislitel'naya modifikatsiya belkov plazmy krovi pri razvitii retsidiva raka yaichnikov [Intensity of chemiluminescence, the state of the antioxidant system and oxidative modification of plasma proteins in the development of recurrent ovarian cancer]. Sib. onkol. zhurn. 2013, No. 26 (4), pp. 45-49.
23. Men'shchikova E.B., Lankin V.Z., Zenkov N.K., Bondar' I.A., Krugovykh N.F., Trufakin V.A. Okislitel'nyi stress. Prooksidanty i antioksidanty [Oxidative stress. Prooxi-dants and antioxidants]. Moscow: Slovo, 2006, 556 p.
24. Svirnovskii A.I., Pasyukov V.V. Molekulyarnye osnovy fe-nomena khimio- i radiorezistentnosti pri opukholevykh protsessakh [Molecular basis of the phenomenon of chemo- and radioresistance in tumor processes].Med. novosti. 2007, No. 11, pp. 7-19.
25. Volkova T.O., Bagina U.S. Mnozhestvennaya lekarstven-naya ustoichivost' opukholevykh kletok k khimioterapevticheskim preparatam. Ekologicheskie aspekty [Multiple drug resistance of tumor cells to chemotherapeutic drugs. Ecological aspects]. Printsipy ekologii. 2012, No. 2 (1), pp. 4-20.
26. McConkey D.J., Zhu K. Mechanisms of proteasome inhibitor action and resistance in cancer. Drug Resistance Updates. 2008, vol. 11, pp. 164-179.
27. Maher Y.A. Glutathione as potential target for cancer therapy; more or less is good? (Mini-review). Jordan J. of Biological Sciences. 2011, vol. 3 (4), pp. 119-124.
_6 сентября 2017 г. /September 6, 2017
