CC BY
5
УДК: 616-005.1-08:331.1:615.22
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТРОМБОЦИТОВ У БЫЧКОВ КОСТРОМСКОЙ ПОРОДЫ И ХРЯКОВ ПОРОДЫ ЛАНДРАС
Соловьева Л.П. - д.б.н., профессор, Горбунова Н.П. - к.б.н., доцент, Калыш Т.В. - к.б.н., доцент
ФГБОУ ВО «Костромская государственная сельскохозяйственная академия»
Ключевые слова: тромбоциты, гемостаз, бычки, Костромская порода, хряки, порода Ландрас
Кеуwords: platelets, hemostasis, bulls, Kostroma breed, boars, Landrace breed
На протяжении онтогенеза организм всегда стремиться строго сохранять гомеостаз [5]. Известно, что сохранение разных параметров гомеостаза живого организма связан с динамикой показателей его крови и в том числе ее форменных элементов [3]. Состояние параметров крови во многом лимитирует перфузию внутренних органов, а, следовательно, работу сердца и общую жизнеспособность в любых средовых условиях [1]. Серьезное место среди механизмов обеспечения гомеостаза принадлежит работе системы гемостаза и особенно активности кровяных пластинок [10].
В предшествующих исследованиях выяснено, что работа системы гемостаза в целом и, особенно его тромбоцитарного компонента, обладает некоторыми различиями между отдельными видами животных и их породами [4]. Ввиду высокой значимости для поддержания гомеостаза параметров тромботитов в научной литературе появилась точка зрения о важности проведения ее мониторинга у свиней и крупного рогатого скота для раннего выявления любых тромбоцитопатий и полного устранения дисфункций в ходе коррекции разными способами [6].
Несмотря на достаточно длительные исследования по физиологии свиней и крупного рогатого скота на протяжении разных фаз их онтогенеза [8, 9] остается не до конца выяснен нормативный уровень продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в мембранах кровяных пластинок и
состояние защитных возможностей антиокислительных энзимов тромбоцитов у быков годовалого возраста и хряков. Значимым пробелом в общей картине физиологических знаний о годовалом возрасте быков и хряков является отсутствие сведений об уровне способности к агрегации их тромбоцитов, наступающей в ответ на основные индукторы. Учитывая эти обстоятельства, в данной работе была намечена цель: определить функциональные возможности тромбоцитов у полностью здоровых оставленных на племя бычков костромской породы и хряков породы ландрас в возрасте
11-13 месяцев жизни.
Материал и методы исследований. Работа выполнена в строгом соответствии со всеми этическими нормами. Исследование проведено на 17 здоровых бычках костромской породы, в том числе 5 животных в возрасте 11 месяцев, 7 головах
12-месячного возраста и 5 головах
13-месячного возраста. Так же были обследованы 18 хряков породы ландрас в том числе 6 голов 11 -месячного возраста, 7 голов 1 2-месячного возраста и 5 голов 13-месячного возраста. Все наблюдавшиеся животные были оставлены на племя. У всех животных определяли внутритромбоцитарную активность ПОЛ по количеству в их структурах ацилгидроперекисей (АГП). Велось определение уровня активности фермента каталазы и фермента супероксидисмутазы (СОД) в отмытых и ресуспендированных тромбоцитах [10]. Подсчет содержания
тромбоцитов в составе капиллярной крови осуществлялся с применением камеры Горяева. Агрегация тромбоцитов (АТ) регистрировалась визуальным
микрометодом в ответ на добавление к богатой тромбоцитами плазме ряда индукторов этого процесса: индуктора коллагена при разведении его основной суспензии 1:2, индуктора АДФ в конечной концентрации 5 мкг/мл, индуктора тромбина в конечной концентрации 0,125 ед/мл, индуктора адреналина в конечной концентрации 5 мкг/мл, индуктора ристомицина в конечной концентрации 0,8 мг/мл [7]. Данные, полученные в ходе исследования, были подвергнуты традиционной математической обработке компьютерным способом с применением стандартного ^критерия Стьюдента.
Результат исследований. До включения в группу наблюдения на протяжении 3 недель и в ходе исследования все обследованные бычки находились под постоянным контролем их общего состояния. На момент выполнения исследования основные их жизненные
У бычков в возрасте 11 месяцев АТ позднее возникала в ответ на индуктор АДФ (33,6±0,26с) и на индуктор ристомицин (40,6±0,18с), находясь в границах нормы. Еще позднее у них АТ наступала в ответ на поступление в плазму тромбина или адреналина, составляя у 11-месячных животных 45,2±0,24с и 94,3±0,33с, соответственно. У бычков более старшего возраста найдена тенденция к увеличению показателей времени развития АТ после внесения в плазму индуктора по сравнению с таковыми в 11 -месячном возрасте.
характеристики и результаты их основных гематологических анализов были в границах нормы.
Уровень АГП в мембранах тромбоцитов обследованных бычков в возрасте 11 месяцев оказался 3,92± 0,09 Д2зз/109тр. Функциональные свойства тромбоцитарных каталазы и СОД у бычков в возрасте 11 месяцев были высоки и составляли 11000,0±22,16 МЕ/109тр. и 1810,0±2,76 МЕ/109тр., соответственно. У бычков, имеющих больший возраст, найдена тенденция к росту биологической активности каталазы и СОД (в 12 месяцев 11200,0±24,34 МЕ/109тр., 1830,0± 4,72 МЕ/109тр., в 13 месяцев -11460,0±25,18 МЕ/109тр., 1860,0± 3,29МЕ/109тр., соответственно). Это формировало у них тенденцию к уменьшению количества АГП в структурах тромбоцитов, составивших у 13-месячных животных 3,78±0,12 Д2зз/109тр.
У наблюдаемых 11 -месячных бычков быстрее всего развивалась АТ в ответ на коллаген, наступая за 25,6±0,12с (Таблица 1).
До включения в группу наблюдения на протяжении 3 недель и в ходе проведения исследования все хряки находились под динамическим
наблюдением. При взятии крови на анализ у них все соматические характеристики, а также параметры крови сохранялись в границах нормы.
Концентрация АГП в мембранах тромбоцитов хряков в возрасте 11 месяцев равнялась 3,19±0,27 Д23з/109тр. Биохимические возможности каталазы и СОД в структурах тромбоцитов у обследованных хряков достигала в возрасте
Таблица 1 - Время агрегации тромбоцитов у бычков в возрасте 11-13 месяцев
Агрегация тромбоцитов Обследованные бычки, М±т
11мес., п=5 12 мес., п=7 13 мес., п=5
Индуктор АДФ, с 33,6±0,26 34,2±0,17 36,5±0,20
Индуктор коллаген, с 25,6±0,12 26,3±0,14 27,2±0,27
Индуктор тромбин, с 45,2±0,24 46,1±0,21 47,1±0,29
Индуктор ристомицин, с 40,6±0,18 41,1±0,23 42,2±0,25
Индуктор адреналин, с 94,3±0,33 96,4±0,38 97,4±0,26
Примечание: достоверности различий АТ между возрастами у бычков не найдено
11 месяцев 11260,0±32,75 МЕ/109тр. и 1850,0±2,77 МЕ/109тр., соответственно. У хряков более старшего возраста их активность имела тенденцию к увеличению по сравнению с 11 -месячными хряками. Так активность каталазы и СОД у 12-месячных хряков составила
11380,0±26,72 МЕ/109тр., 1940,0± 4,38 МЕ/109тр., у 13-месячных хряков 11650,0±31,16 МЕ/109тр., 1990,0±
Тромбоцитарная агрегация у одиннадцати месячных хряков под влиянием АДФ (34,4±0,20с) и ристомицина (39,4±0,22с) развивалась немного позже и оказалась невысокой. Еще позднее наступала АТ в ответ на тромбин и адреналин, реализуясь у хряков в возрасте 11 месяцев за 46,8±0,31с и 95,2±0,28с, соответственно. У более старших хряков найдена тенденция к увеличению периода развития АТ по сравнению с таковой у11 месячных животных.
Известно, что сохранение разных параметров гомеостаза живого организма связано с динамикой показателей его крови и в том числе ее форменных элементов. Состояние параметров крови во многом лимитирует перфузию внутренних органов, а, следовательно, работу сердца и общую жизнеспособность организма в любых средовых условиях [2].
Реализация всех процессов метаболизма в организме хряков и бычков в полной мере обеспечивается доставкой требуемого объема кислорода и питательных веществ во все их клетки благодаря адекватным жидкостным свойствам крови [4], что сохраняет свою значимость в течение всей их жизни. Серьезную роль в обеспечении оптимума
3,24 МЕ/109тр., соответственно). Это вызвало у них тенденцию к понижению интенсивности ПОЛ в мембранах тромбоцитов - в 13-месячном возрасте количество тромбоцитарных АГП с о ставляло 2,92±0,14 Д2ээ/109тр.
У хряков, находящихся в возрасте 11 м есяцев, наиболее рано наступала АТ в ответ на коллаген, реализуясь за 26,3±0,15с ( Таблица 2).
процесса микроциркуляции имеет невысокий уровень ПОЛ в мембранах форменных элементов крови и выраженности их способности к агрегации [3]. Очень большое значение в обеспечении микроциркуляции имеет состояние гемостатических свойств тромбоцитов [7].
В ходе исследования у здоровых хряков и бычков в возрасте около года, т.е. между 11 и 13 месяцев жизни имела место тенденция к росту возможностей антиоксидантной системы тромбоцитов и склонность к понижению в них интенсивности ПОЛ, что обеспечивало некоторое постепенное ослабление стимуляции активности тромбоцитов изнутри. При проведении исследования у хряков и бычков в возрасте 11 -13 месяцев не было отмечено значимых изменений гемостатических проявлений тромбоцитов. Видимо это, вызвано стабильностью или небольшим понижением способности тромбоцитов воспринимать различные стимулирующие воздействия извне при постоянно невысоком содержании в крови животных фактора Виллебранда. Он является кофактором процесса адгезии кровяных пластинок и способен взаимодействовать на их поверхности с рецепторами к нему [6]. Формирующаяся
Таблица 2 - Время агрегации тромбоцитов у хряков в возрасте 11-13 месяцев
Агрегация тромбоцитов Обследованные хряки, M±m
11мес., п=6 12 мес., п=7 13 мес., п=5
Индуктор АДФ, с 34,4±0,20 35,8±0,21 36,9±0,25
Индуктор коллаген, с 26,3±0,15 27,4±0,12 28,8±0,30
Индуктор тромбин, с 46,8±0,31 47,5±0,19 49,0±0,24
Индуктор ристомицин, с 39,4±0,22 40,6±0,29 41,8±0,32
Индуктор адреналин, с 95,2±0,28 97,3±0,32 99,2±0,19
Примечание: достоверности различий между возрастами у хряков не получено.
рецепторная ситуация на тромбоцитарных мембранах годовалых хряков и бычков в полной мере обеспечивает
физиологический уровень
функционирования гемостаза. Это следует считать результатом сложных адаптивных процессов в мегакариоцитах хряков и бычков, ведущих к невысокому уровню активности мембранных рецепторов на их тромбоцитах.
Проведенное наблюдение показало невыраженную АТ у хряков и бычков в ответ на основные индукторы, указывая на наличие у них в годовалом возрасте оптимально невысокой функциональной активности кровяных пластинок. Найденная тенденция к замедлению АТ под влиянием сильных агонистов процесса тромбоцитарной агрегации - коллагена и тромбина, соединяющихся с
определенными рецепторами на поверхности тромбоцитов. Видимо, это связано с некоторым уменьшением рецепторов к ним на их поверхности, а также с ослаблением активности тромбоцитарной фосфолипазы С и с понижением уровня фосфолирирования протеинов сократительной
тромбоцитарной системы [3].
Невыраженная реакция кровяных пластинок взятых в исследование бычков и хряков годовалого возраста на добавление к плазме слабых стимуляторов агрегации тромбоцитов- АДФ и адреналина, в первую очередь связана с невысокой выраженностью экспрессии на их мембранах фибриногеновых рецепторов [11]. Также, видимо, это сопряжено с невыраженной активностью у них тромбоцитарной фосфолипазы А2, обеспечивающей выщепление из фосфолипидов арахидоновой кислоты в качестве субстрата для синтеза тромбоксана А2 [7]. Очевидно, в сохранении невысокого агрегационного ответа тромбоцитов достаточно серьезную роль также играет умеренная активность большого количества энзимов
тромбоцитов, участвующих в реализации тромбоцитарной реакции в ответ на любую физиологическую стимуляцию.
Таким образом, между 11 и 13 месяцами жизни у хряков породы ландрас и бычков костромской породы имеет место невысокая гемостатическая активность тромбоцитов, способная положительно сказываться на ходе микроциркуляции, сохранении гомеостаза и уровне их физического развития.
Заключение. На протяжении онтогенеза у продуктивных животных серьезную роль в сохранении у них оптимума гомеостаза играют возрастные изменения функциональных возможностей тромбоцитов. Значимость их динамики весьма велика для становления функциональных параметров органов любых продуктивных животных. Именно невысокая активность тромбоцитов во многом определяет достаточный уровень перфузию крови по капиллярам, обеспечение трофики тканей и нужный уровень в них обмена веществ. У бычков и хряков в возрасте около года найдена стабильно невысокая агрегационная способность тромбоцитов. Ее
выраженность у обоих видов животных была постоянной между 11 и 13 месяцами жизни. Данное обстоятельство во многом было связано с наличием высокой адаптации тромбоцитарного гемостаза к основным средовым влияниям на их организм в этом возрасте. Это также было связано с постоянством у них небольшого числа рецепторов на тромбоцитарной мембране к фактору Виллебранда, к агонистам агрегации и к белку фибриногену, что способно благотворно сказываться на микроциркуляции взрослеющих бычков и хряков.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Завалишина, С. Ю. Сосудистый гемостаз у телят в период молочно-растительного питания / С. Ю. Завалишина // Зоотехния. - 2012. - № 2. - С. 21.
2. Корепанова, Л. В. Кровь как показатель интерьерной особенности помесных животных / Л. В. Корепанова, О. С. Старостина, С. Д. Батанов // Зоотехния. - 2015. - № 10. - С. 26-28.
3. Краснова, Е. Г. Тромбоцитарная активность гемостаза у поросят молочного
питания / Е. Г. Краснова, И. Н. Медведев // Ветеринарная практика. - 2011. - № 3. - С. 34.
4. Кутафина, Н. В. Особенности тромбоцитарных параметров у новорожденных телят голштинской породы / Н. В. Кутафина, И. Н. Медведев // Зоотехния. - 2016. - № 1. - С. 23-25.
5. Лемешевский, В. О. Рубцовое пищеварение у бычков при разном соотношении распадаемого и нераспадаемого протеина в рационе /
B. О. Лемешевский, Е. Л. Харитонов, К. С. Остренко // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2020. - № 2. -
C. 90-98.
6. Медведев, И. Н. Механизмы функционирования гемостаза у биологических объектов / И. Н. Медведев, С.Ю. Завалишина, Е.Г. Краснова, Т.А. Белова // Международный вестник ветеринарии. -2010. -№ 1. - С. 52-55.
7. Медведев, И. Н. Активность тромбоцитарного гемостаза у новорожденных телят / И. Н. Медведев, С. Ю. Завалишина // Российская
сельскохозяйственная наука. - 2011. - № 5.
- С. 32-34.
8. Остренко, К. С. Повышение продуктивности свиней под действием стреспротекторов нового поколения / К. С. Остренко, В. П. Галочкина, В. А. Галочкин, О. С. Ленчер // Advances in Agricultural and Biological Sciences. - 2019.
- Т.5. - № 2. - С. 5-14.
9. Харитонов, Е. Л. Профилактика нарушений рубцового пищеварения у растущих бычков молочных пород / Е. Л. Харитонов, К. С. Остренко, В. О. Лемешевский // Ветеринария. - 2020.
- № 9. - С. 50-55.
10. Чевари, С. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С. Чевари, Т. Андял, Я. Штренгер // Лабораторное дело. -1991. - № 10. - С. 913.
11. Mal, G. S. Functional Platelet Activity During Ontogeny in Rats / G. S. Mal, S. Yu. Zavalishina // Indian Journal of Public Health Research & Development. -2019. - Vol. 10, № 8. - P. 1915-1919.
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ТРОМБОЦИТОВ У БЫЧКОВ КОСТРОМСКОЙ ПОРОДЫ И ХРЯКОВ ПОРОДЫ ЛАНДРАС
Соловьева Л.П., Горбунова Н.П., Калыш Т.В.
Резюме
Для сохранения гомеостаза в организме продуктивных животных весьма значим существующий уровень тромбоцитарной активности. Он в значительной мере регулирует капиллярный кровоток, а, следовательно, обмен веществ во всех тканях животных и влияет на общую жизнеспособность. Кроме того, успешная гемоперфузия в мелких сосудах создает основы для необходимой резистентности организма, формируя основы продуктивных качеств животных. В работе выполнена оценка уровня тромбоцитарной активности у оставленных на племя годовалых бычков костромской породы и годовалых хряков породы ландрас. У обоих видов продуктивных животных выраженность агрегации оказалась сравнимой и невысокой, что объяснялось небольшой активностью у них механизмов участия тромбоцитов в гемостазе. Во многом это было связано с невысокой экспрессией на мембранах тромбоцитов быков и хряков рецепторов к фибриногену и индукторам агрегации. Найденная невысокая активность тромбоцитов у годовалых бычков и хряков, без сомнения, имеет важное адаптивное значение для сохранения у них гомеостаза в сосудистом русле.
FUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF PLATELETS IN KOSTROMA BREED BULLS AND
LANDRAS BREED BOARS
Solovyeva L.P., Gorbunova N.P., Kalysh T.V.
Summary
To maintain homeostasis in the body of productive animals, the existing level of platelet activity is very significant. It largely regulates capillary blood flow, and, consequently, the metabolism in all tissues of animals and affects the overall viability. In addition, successful hemoperfusion in small vessels creates the basis for the necessary resistance of the organism, forming the basis of the productive qualities of animals. The paper assessed the level of platelet activity in one-year-old gobies of the Kostroma breed and one-year-old boars of the Landrace breed left to the tribe. In both types of productive animals, the severity of aggregation turned out to be comparable and low, which was explained by the low activity of the mechanisms of platelet participation in hemostasis. This was largely due to the low expression of receptors for fibrinogen and aggregation inducers on the membranes of bovine and boar platelets. The low activity of platelets found in one-year-old bulls and boars, no doubt, is of great adaptive importance for maintaining their homeostasis in the vascular bed.
