CC BY
6
2. При скудном воспалительном процессе на фоне склероза и фиброза слизистой оболочки барабанной полости выявлен экссудат с регенераторным и воспалительно-регенераторным типом цитограммы. Выраженной степени воспалительной инфильтрации слизистой оболочки с грануляционной тканью соответствовал воспалительный тип экссудата.
3. Присутствие в барабанной полости воспалительного экссудата приводит к постоянному повреждению клеток слизистой оболочки, поддержанию воспаления и экссудации, необратимому из-
менению клеточного состава. Изменение соотношения лейкоцитов, макрофагов и фибробластов трансформирует процесс в сторону репарации с последующим угасанием экссудации и формированием склеротических изменений.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Дмитриев Н.С., Милешина Н.А., Колесова Л.М. Экссудативный средний отит у детей: Метод. рекомендации. - Медицина, 1996. - 36 с.
2. Jany B., Basbaum C.B. // American Review of Respiratory Disease. - 1991. - Vol.3. - S38-S41.
3. Jany B., Gallup M., Tsuda T., Basbaum C. // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 1991. - Vol.1. - Р.1-8.
4. Lee YW., Chung Y, Juhn S.K., Kim Y, Lin J. // Annals of Otology, Rhinology and Laryngology. -2011. - Vol.3. - Р.204-213.
5. Lim D.J., Hermansson A., Hellstom S.O., et al. // The Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. -2005. - Р.31-41.
6. Lin J., Tsuprun V, Kawano H., et al. // American Journal of Physiology. - 2001. - Vol.6. - L1157-L1167.
7. Lin J., Tsuboi Y, Pan W., Giebink G.S., Adams G.L., Kim Y // International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. - 2002. - Vol.3. - Р.203-211.
8. Tos M., Caye-Thomasen P. // Journal for OtoRhinoLaryngology and its Related Specialties. -2002. - Vol.2. - Р.86-94.
9. Tsuboi Y, Kim Y, Giebink G.S., et al. // Acta OtoLaryngologica. - 2002. - Vol.2. - Р.153-160.
Поступила 08.07.2019г.
Функциональная активность нейтрофилов крови при ишемически-реперфузионном поражении печени
Шахмамедова С.О.
Азербайджанский медицинский университет, Баку
Shakhmamedova S.O.
Azerbaijan Medical University, Baku
Functional activity of blood neutrophils in ischemia-reperfusion liver injury
Резюме. Рассматриваются внутриклеточные метаболические изменения нейтрофилов при ишемически-реперфузионном поражении печени. Объектом исследования послужили 50 белых крыс обоего пола. Все процедуры с животными выполнялись в соответствии с международными правилами и нормами (86/09 ЕЕС и UNESCO (Париж)), принятыми Европейским обществом биоэтики. Изменения митохондриальной (НАДФ-0) илизосомальной (КФ) ферментативной активности нейтрофилов имели разнонаправленный и фазовый характер в зависимости от сроков ишемии и времени после реперфузии. Относительно высокие значения гликогена, на фоне которого происходили эти изменения, указывают на внутриклеточную активацию процессов гликонеогенеза.
Ключевые слова: ишемия-реперфузия, печень, никотинамидадениндинуклеотидфосфатоксидаза (НАДФ-0) и кислая фосфатаза, гликоген.
Медицинские новости. — 2020. — №2. — С. 80-82. Summary. The aim of this study was to investigate the metabolic alterations in neutrophils in ischemia-reperfusion liver injury. The study was carried out on 50 white rats of both sexes. All procedures with animals were performed in accordance with international rules and regulations (86/09 EEC and UNESCO (Paris)), adopted by the European Society of Bioethics. Changes in mitochondrial and lysocomal enzymatic activity of neutrophils were interrelated and the nature of the phase depended on the duration of ischemia and the duration of reperfusion. Relatively high values of glycogen under which these changes occurred indicate intracellular activation of gluconeogenesis. Keywords: ischemia-reperfusion injury, live, nicotinamidadenindinucleotidfosfat ocsidase, acidic phosphatase, glycogen. Meditsinskie novosti. - 2020. - N2. - P. 80-82.
Ишемически-реперфузионное поражение печени рассматривается как сложный комплекс адаптивных и патологических реакций организма, включающих каскад метаболических, иммунологических и морфологических изменений, результатом которых может быть как восстановление функции органа, так и ее поражения разной степени тяжести, вплоть до гибели органа [1, 2].
Ключевыми патофизиологическими механизмами в реализации синдрома ишемии-реперфузии печени являются нарушения микроциркуляции и транспорта кислорода, воспаление, некроз и апоптоз, что в конечном итоге завершается нарушением множества функций печени и развитием печеночной недостаточности [3, 4]. Важным
фактором, способствующим развитию реперфузионных повреждений, считается окислительный стресс [5]. Дисбаланс между потребностью ткани в кислороде и его доставкой создает условия для усиленного образования свободных радикалов и активации процессов перекисного окисления липидов, ведущих в конечном счете к снижению внутриклеточного метаболизма, повреждению клеточных и субклеточных мембранных структур гепатоцитов [6, 7]. Установлено, что клетки периферической крови как элементы внутренней среды организма принимают участие во всех физиологических и патологических процессах [8, 9]. Поэтому особый интерес представляет изучение активности митохондриальных и лизосомальных ферментов и уровня
гликогена в нейтрофилах периферической крови при ишемически-реперфузионных поражениях печени.
Цель исследования - изучение внутриклеточных метаболических изменений нейтрофилов при ишемически-реперфузионном поражении печени.
Материалы и методы
Объектом исследования послужили 50 белых крыс обоего пола. Все процедуры с животными выполняли в соответствии с международными правилами и нормами (86/09 ЕЕС и LINESCO (Париж)), принятым Европейским обществом биоэтики. Под ингаляционным эфирным наркозом при условиях общего обезболивания производился срединный разрез брюшной полости. Накладывалась лига-
тура на первую ветвь артерии, входящей в печень. Ишемия печени создавалась путем пережатия сосуда в течение 5, 10 и 15 минут. Реперфузия создавалась путем расслабления лигатуры через 5, 10 и 15 минут. В соответствии с целью настоящего исследования подопытные животные были подразделены на основную группу с ишемически-реперфузионным синдромом печени (I, II, III) и контрольную, состоящую из интактных животных. В I основную группу включено 15 животных после 5-минутной, во II - 15 животных после 10-минутной, а в III -15 животных после 15-минутной ишемии-ре-перфузии. Каждая группа в зависимости от времени взятия образцов крови (через 5, 10, 15 дней) подразделена на подгруппы А, В, С.
У всех подопытных крыс цитохимическим методом [10] в нейтрофи-лах периферической крови определяли уровень гликогена (Гл), активность никотинамидадениндинуклеотид фосфат оксидазы (НАДФ-0) и кислой фосфатазы (КФ). Активность НАДФ-0 выражали средним числом гранул формазана в одном нейтрофиле (гр/н) при расчете на 50 клеток, а для КФ и Гл использовали средний цитохимический показатель (СЦП).
При статистической обработке наряду со средним цитохимическим показателем (Q±m) высчитывали коэффициент вариации (V), асимметрии (А) и эксцесса для определения степени распределения НАДф-0, КФ и Гл.
Результаты и обсуждение
Изменения цитохимической активности нейтрофилов при ишемически-
реперфузионном поражении печени отражены в таблице.
При сравнении с данными контрольной группы изменения, происходящие в цитохимическом статусе нейтрофилов основных групп (I, II, III) носят разнонаправленный характер. В нейтрофилах I группы подопытных животных выявлено достоверное увеличение активности НАДФ-0 (p<0,01), умеренное повышение содержания Гл (p>0,05) и статистически значимое снижение КФ (p<0,01). Эти изменения в зависимости от длительности ишемии носили фазовый характер. Так, в I группе после кратковременной ишемии (5 минут) активность НАДФ-0 повысилась дважды по сравнению с контролем, а во II и III группах после 10-15-минутной ишемии отмечалась выраженная депрессия вышеуказанного показателя (p<0,01).
Изменение активности КФ имело однонаправленный характер, степень снижения энзиматической активности определялась временем ишемии. Эти изменения в IA подгруппе в динамике еще более усугублялись. Во всех подгруппах (А, В, С) II и III групп отмечалось статистически значимое снижение активности КФ. Выраженная депрессия ферментативной активности установлена в С подгруппе III группы, где значения КФ уступали данным контрольной группы.
Изменения в отношении содержания Гл в нейтрофилах при ишемически-ре-перфузионном поражении печени имели одинаковый характер во всех трех группах. Статистически значимое повышение содержания этого вещества установлено
в С подгруппе II группы (p<0,01), а также В и С подгруппах III группы.
Для более совершенного анализа метаболических процессов, происходящих в нейтрофильных гранулоцитах при ишемии-реперфузии в экспериментально-цитохимическом материале, изучена структура популяционных показателей (V A, E). Установлено, что в отличие от среднетипичной активности (Q) нейтрофилов, структурные показатели популяции более точно отражают внутриклеточный метаболизм.
Так, при отсутствии выраженных изменений среднетипичной активности НАДФ-0 (7,02±0,55) в С подгруппе при кратковременной ишемии в структурных показателях популяции (V, A, E) выявлены выраженные изменения. Они указывают на высокую вариабельность энзиматической активности, на преобладание в популяции клеток с низкой, единичных клеток с высокой и дефицит клеток с типичной активностью фермента. С учетом того, что НАДФ-0 является маркером митохондрий, полученные результаты могут свидетельствовать об уменьшении количества или же повреждении данных органелл клетки, что ведет к снижению процессов энергетического метаболизма и компрометации резистентности организма.
При индивидуальном анализе выявлено, что через 5 дней после ишемии-ре-перфузии у одной, через 10 дней - у двух, через 15 дней - у трех крыс происходят восстановительные процессы в популя-ционном ядре. При этом необходимо отметить, что последнее сопровождается сменой отрицательных значений Е НАДФ-0 на положительные, а также снижается А.
Цитохимические показатели нейтрофилов белых крыс при ишемически-реперфузионном поражении печени (M±m)
1руппа НАДФ-0, гр/н КФ, сцп Гл, сцп
Q±m V A E Q±m V A E Q±m V A E
I, n=15 A1, n=5 10,2±0,51хх 42,2 0,98 0,79 0,28±0,02 43,5 0,92 0,66 0,71±0,04 44,8 0,86 0,74
Bv n=5 7,40±0,42х 43,8 1,04 0,75 0,21±0,03х 46,2 1,10 0,72 0,86±0,05 46,8 0,94 0,76
C,, n=5 7,02±0,55 46,0 1,09 0,72 0,19±0,02 48,4 1,16 0,79 0,80±0,06 51,0 1,10 0,78
II, n=15 A1, n=5 3,20±0,96 43,5 1,08 0,70 0,20±0,02х 49,2 1,08 0,72 0,88±0,05 52,6 0,88 0,75
B1, n=5 4,10±0,42 46,8 1,16 -0,36 0,18±0,02х 49,6 1,14 -0,12 0,95±0,06х 58,2 1,06 -0,16
C1, n=5 4,50±0,51 48,5 1,20 -0,34 0,17±0,02хх 51,8 1,20 -0,34 1,08±0,06хх 60,4 1,12 -0,22
III, n=15 A1, n=5 2,61±0,15хх 45,4 1,14 -0,25 0,17±0,02хх 52,0 1,19 0,75 0,92±0,08х 60,8 1,14 0,85
B1, n=5 2,72±0,16х 48,6 1,21 -0,36 0,12±0,01хх 54,6 1,25 -0,27 1,14±0,05х 61,2 1,21 -0,19
C1, n=5 2,85±0,15 52,0 1,29 -0,45 0,09±0,01хх 58,8 1,36 -0,34 1,25±0,06хх 62,4 1,28 -0,26
Контроль, n=5 5,25±0,25 32,0 0,54 0,50 0,34±0,03 38,0 0,62 0,55 0,68±0,04 36,6 0,64 0,60
Примечание. Статистическая значимость показателя в сравнении с таковым в контрольной группе: х - р<0,05; хх - р<0,01.
№2 • 2020
МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ
При сравнительном анализе цитохимических данных крыс основной группы наибольшей информативностью обладала НАДФ-0. Необходимо отметить, что НАДФ-0, являясь кардинальным цитохимическим показателем нейтрофилов периферической крови и критерием основного энергетического обмена митохондрий, отражает состояние организма в целом.
Таким образом, цитохимические показатели функциональной активности нейтрофи-лов являются информативными маркерами, отражающими состояние метаболических процессов в организме при ишемически-реперфузионном поражении печени. Изме-
нения митохондриальной (НАДФ-0) и лизо-сомальной (КФ) энзиматической активности нейтрофилов имели разнонаправленный и фазовый характер в зависимости от сроков ишемии и времени после реперфузии. Относительно высокие значения гликогена, на фоне которого происходили эти изменения, указывают на внутриклеточную активацию процессов гликонеогенеза.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Abu-Amara M. // Live Transport. - 2010. - Vol.16, N9. - Р.1016-1032.
2. Li J. // Eur. Rev Med. Pharmacol Sci. - 2015. -Vol.19, N11. - Р.2036-2047.
3. Khodosovskii M.N. // Zhurnal GrGMU. - 2016. -Vol.4. - Р.20-25.
4. Jaeschke H., Woolbright B.L. // Transplant. Rev. -2012. - Vol.26, N2. - P.103-114.
5. Donadon M., Molinari A.F, Corarri F, et al. // World Journal of Surgery. - 2016. - Vol.40, N9. - Р.2202-2212.
6. Suyavazan A. // Hepatol Res. - 2017. - Vol.47, N1. - P.31-48.
7. Guan L.-Y, Fu P.-Y, Li P-D., et al. // World Journal of Gastrointestinal Surgery. - 2014. - Vol.6, N7. - Р.122-128.
8. Borreqaard N. // Immunity. - 2010. - Vol.33, N5. -Р.657-670.
9. Combart A.F // Blood. - 2015. - Vol.125, N11. -Р.1688-1690.
10. Хейхоу Ф.Г.Дж., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия. - М., 1983. - 320 с.
Поступила 11.11.2019 г.
Статья размещена на сайте www.mednovosti.by (Архив МН) и может быть скопирована в формате Word.
Индекс инсулинорезистентности как прогностический маркер развития синдрома гиперстимуляции яичников в программах вспомогательных репродуктивных технологий
Жуковская С.В., Можейко Л.Ф.
Белорусский государственный медицинский университет, Минск
Zhukovskaya S.V., Mozheiko L.F
Belarusian State Medical University, Minsk
Insulin resistance index as a prognostic marker of ovarian hyperstimulation syndrome in assisted reproductive technologies
Резюме. В исследование вошли 718 женщин, которым проводилось экстракорпоральное оплодотворение в МЧУП«Центр репродуктивной медицины». Изучены основные показатели углеводного обмена и выявлена возможная связь этих параметров с развитием синдрома гиперстимуляции яичников (СГЯ). В результате исследования установлено наличие статистически значимой корреляции между индексом инсулинорезистентности (HOMA-IR) и развитием СГЯ. ROC-кривая показала отличное качество порога отсечения (AUC 0,931) и позволила определить пороговый уровень HOMA-IR, равный 2,4, который является ценным прогностическим маркером манифестации СГЯ с высокой чувствительностью (Se 94,2%) и специфичностью (Sp 89,1%). Ключевые слова: синдром гиперстимуляции яичников, индекс инсулинорезистентности.
Медицинские новости. - 2020. - №2. - С. 82-84. Summary. The study included 718 women who underwent in vitro fertilization at MPUE Center for Reproductive Medicine. The main indicators of carbohydrate metabolism were studied and a possible relationship between these parameters and the development of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) was revealed. As a result of the study, a statistically significant correlation was found between the insuiin resistance index (HOMA-iR) and the development of OHSS. The ROC curve showed excellent cut-off threshold quality (AUC 0.931) and allowed us to determine the HOMA-IR threshold level of 2.4, which is a valuable predictive marker for the manifestation of OHSS with high sensitivity (Se 94.2%) and spedfictty (Sp 89.1%). Keywords: ovarian hyperstimulation syndrome, insulin resistance index. Meditsinskie novosti. - 2020. - N2. - P. 82-84.
В настоящее время ведется активное обсуждение биологической роли инсулина в процессах фолликуло-генеза, в том числе и при возникновении гиперэргического овариального ответа в программах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Так, в научной публикации М. ^1е11о и соавт. (2019) отмечено, что назначение лекарственных средств, снижающих инсулинорезистент-ность тканей (в том числе метформина), способствует уменьшению риска манифестации синдрома гиперстимуляции
яичников (СГЯ) при гормональной стимуляции фолликулогенеза в программах ЭКО [1]. В работе R. Root-Bernstein и соавт. (2014) отмечено, что существует взаимосвязь между инсулинорезистент-ностью и гиперэстрогенией, а также указано, что эстрадиол имеет способность к прямой реакции связывания с молекулой инсулина и с рецептором к инсулину, вовлекаясь таким образом в сложный каскад биохимических реакций и вмешиваясь в нормальную реакцию связывания инсулина с его рецепторами [2]. Таким
образом, при наличии предшествующей инсулинорезистентности у пациенток в программах ЭКО можно предполагать усугубление данной проблемы в результате высоких уровней эстрадиола, циркулирующего в периферической крови во время овариальной стимуляции с использованием гормональных препаратов.
Учитывая широкую распространенность синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) среди женщин с бесплодием и частоту обнаружения инсулинорезистент-ности у таких женщин, достигающую
