CC BY
6УДК 634.11: 58.02(470.63)
Киселева Г. К., Ненько Н. И., Ульяновская Е. В.
Kiseleva G. K., Nen'ko N. I., Ulyanovskaya E. V.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ АДАПТАЦИИ MALUS DOMESTICA BORKH. РАЗНОЙ ПЛОИДНОСТИ К ЗАСУХЕ
THE PHYSIOLOGICAL AND BIOCHEMICAL REGULARITIES OF ADAPTATION OF MALUS DOMESTICA BORKH DIFFERENT PLOIDY TO DROUGHT
В настоящее время в условиях Северо-Кавказского региона России получение стабильных высоких урожаев яблони ограничивается воздействием природных стрессоров летнего вегетационного периода, в частности засухи, а также эпифитотиями патогена парши. В связи с этим для стабилизации плодоношения плодовых агроценозов большое значение имеет возделывание иммунных к парше сортов яблони, устойчивых к засухе.
Цель настоящей работы - по физиолого-биохимическим параметрам листового аппарата провести сравнительную оценку устойчивости иммунных и не иммунных к парше сортов яблони к засухе и выявить сорта, перспективные для селекции и возделывания в условиях юга России.
Использованы современные высокоточные физиолого-биохимические методы исследования водного обмена, хлорофилла, каротиноидов, фенолкарбоновых кислот с применением высокоэффективного аналитического оборудования. Проведена сравнительная оценка устойчивости иммунных и не иммунных к парше сортов яблони к засухе по физиолого-биохимическим параметрам в экологических условиях летнего вегетационного периода 2013-2015 гг. Грибная инфекция парши, поражая лист, вызывает снижение ассимиляционных процессов и как следствие снижает устойчивость растений яблони к засухе. Установлено, что резервы адаптационной устойчивости сортов яблони к засухе обусловлены повышенным содержанием связанной формы воды (в 0,711,02 раза), хлорофилла (в 1,21-1,42 раза), каротиноидов (в 0,11-0,21 раза), фенолкарбоновых кислот (в 1,721,16 раза). Сорта яблони Союз, Родничок, Рассвет, Дейтон, Фортуна по физиолого-биохимическим показателям проявили себя более засухоустойчивыми в сравнении с другими изучаемыми сортами и рекомендуются как перспективные для селекции и возделывания в условиях юга России.
Ключевые слова: яблоня, засухоустойчивость, плоид-ность, пролин, связанная форма воды, индекс палисадно-сти.
Currently, under the conditions of the North Caucasus region of Russia to provide stable high yields apple limited exposure to natural stressors summer growing season, particularly drought and epiphytoties scab pathogen. In this regard, in order to stabilize the fruiting agrotcenozov fruit cultivation is of great importance immune to scab apple varieties that are resistant to drought. The purpose of this work is on the physiological and biochemical parameters of leaf apparatus to conduct a comparative evaluation of stability of immune and not immune to scab Apple varieties to drought, and to identify varieties promising for breeding and cultivation in conditions of southern Russia. Used modern high-precision physical and biochemical methods to study water metabolism, chlorophyll, carotenoids, carboxylic acids using high-performance analytical equipment. Comparative sustainability assessment of immune and not immune to scab Apple varieties to drought stress at physiological and biochemical parameters in the environmental conditions of the summer growing period 2013-2015 Fungal infection of the scab, by hitting the sheet, causes a decrease in assimilation processes, and as a consequence reduces the resistance of Apple plants to drought. It is established that the reserves of the adaptive resistance of Apple varieties to drought due to a high content of bound water forms (0.71-1.02 times), chlorophyll (1.21-1.42 times), carotenoids (0.11-0.21 times), carboxylic acids (1.72-1.16 times). Apple cultivars Union, spring, Dawn, Dayton, Oh, fortune on physiological and biochemical parameters have proved to be more drought-resistant in comparison with other studied varieties and are recommended as promising for breeding and cultivation in conditions of southern Russia.
Key words: apple tree, drought resistance, ploidy, proline, the connected form of water, the index palisade.
Ненько Наталия Ивановна -
доктор сельскохозяйственных наук, профессор, зав. лабораторией физиологии и биохимии растений ФГБНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства г. Краснодар, Россия Тел.: (8612) 52-70-74 E-mail: [email protected]
Киселева Галина Константиновна -
кандидат биологических наук, доцент, ст. научный сотрудник лаборатории физиологии и биохимии растений
ФГБНУ Северо-Кавказский зональный научно-
исследовательский институт садоводства
и виноградарства
г. Краснодар, Россия
Тел.: (8612) 52-70-74
E-mail: [email protected]
Nen'ko Nataliya Ivanovna -
Doctor in agricultural Sciences, Professor associate head of laboratory of physiology and biochemistry of the plants Federal State Budgetary Scientific Institution North Caucasian Regional Research Institute of Horticulture and Viticulture Krasnodar, Russia Tel.: (8612) 52-70-74 E-mail: [email protected]
Kiseleva Galina Konstantinovna -
Ph.D in biological Sciences, docent,
senior scientific worker of laboratory
of physiology and biochemistry
Federal State Budgetary Scientific Institution North
Caucasian Regional Research Institute of Horticulture
and Viticulture
Krasnodar, Russia
Тel.: (8612) 52-70-74
E-mail: [email protected]
Ульяновская Елена Владимировна -
доктор сельскохозяйственных наук, зав. лабораторией селекции семечковых и орехоплодных культур ФГБНУ Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства г. Краснодар, Россия Тел.: (8612) 52-70-74 E-mail: [email protected]
Ulyanovskaya Elena Vladimirovna -
Doctop in agricultural Sciences, head of laboratory
selection of seeds and nuts of Federal State Budgetary
Scientific Institution North Caucasian Regional Research
Institute of Horticulture and Viticulture
Krasnodar, Russia
Тel.: (8612) 52-70-74
E-mail: [email protected]
Введение. Для современного плодоводства вопросы повышения устойчивости растений к биотическим и абиотическим факторам среды стали особо актуальными в последние годы, в связи с локальными изменениями погодно-климатических условий. Воздействие природных стрессоров, в частности засухи, приводит к резкому снижению продуктивности и качества плодов, а нередко к гибели деревьев плодовых культур. При этом интенсивные сорта могут реализовать лишь 15-30 % потенциальной продуктивности сорта [1].
В зоне южного плодоводства степень засухоустойчивости сортов яблони имеет большое значение, так как большинство из них культивируется в неорошаемых условиях или при ограниченном орошении. В связи с этим создание сортов с высокой экологической пластичностью, устойчивых к лимитирующим факторам среды, в частности к летней засухе является одним из приоритетных направлений селекции яблони [2, 3].
По мнению видных отечественных и зарубежных генетиков современности полиплоидия обеспечивает дополнительные возможности для адаптации и выживания растительного организма в экстремальных условиях среды. Нередко триплоидные сорта яблони превосходят диплоидные по комплексу биологических и хозяйственно-ценных признаков. Учитывая более регулярное плодоношение, большую массу плодов, а также повышенное содержание в плодах питательных и биологически активных веществ у ряда триплоидных сортов, ведется селекция на полиплоидном уровне [4].
Анализ сложившегося сортимента яблони в Северо-Кавказском регионе показывает, что несмотря на существенное обновление сортовой состав яблони не обладает в полной мере необходимым сочетанием высокой адаптивности к био- и абиотическим стрессорам среды с показателями на максимально возможном уровне продуктивности и качества плодов. Поэтому необходимо введение в сортимент новых перспективных сортов, в том числе местной селекции, обладающих высокой устойчивостью к основным стрессовым факторам [5].
Повышение устойчивости к неблагоприятным условиям среды обитания плодовых растений возможно лишь на основе глубокого изучения их физиологических особенностей. В настоящее время благодаря исследованиям в области фитофизиологии мы имеем представ-
ление о многих механизмах адаптации растений к отдельным факторам среды [6].
Большая часть этих сведений получена в экспериментах на однолетних растениях. Это повышает востребованность физиолого-биохимических исследований механизмов адаптации многолетних плодовых растений, в частности яблони, проводимых в условиях плодового агроценоза Краснодарского края.
Физиолого-биохимические закономерности яблони с учетом анатомо-морфологических особенностей наиболее полно изучены для существующего сортимента яблони в средней полосе России. Выявлены зависимости для новых адаптивных сортов, отвечающих требованиям рынка и пригодных для садов интенсивного типа [4].
В условиях юга России с его характерными климатическими условиями, такими как суровость зимне-весеннего периода, резкие колебания температур ранней весной, экстремально высокие температуры летнего периода физиолого-биохимические закономерности имеют свои особенности. Изучение анатомо-морфологических особенностей листовой пластинки яблони в сочетании с физиолого-биохимическими параметрами растений вносит весомый вклад в понимание механизмов адаптации сортов яблони различной плоидно-сти к абиотическим факторам летнего периода.
Цель настоящей работы - установить физиолого-биохимические закономерности формирования адаптационной устойчивости Malus domestica Borkh. для создания сортовых конвейеров, устойчивых к засухе в экологических условиях Краснодарского края, выявить механизмы адаптации растений яблони для оценки экологической пластичности сортов яблони различной плоидности.
Материалы и методы. Исследования проводились в 2013-2015 гг. на базе ОПХ «Центральное», ЦКП приборно-аналитический, лаборатории физиологии и биохимии растений ФГБНУ СКЗНИИСиВ.
Объектами исследования служили сорта яблони различного эколого-географического происхождения и различной плоидности: диплоидные - Рассвет, Фортуна (селекции СКЗНИИСиВ), Эрли Мак, Дейтон (американской селекции) и триплоидные сорта - Союз, Родничок (селекции СКЗНИИСиВ).
Для оценки адаптационной устойчивости яблони к засухе определяли содержание свободной и связанной воды весовым методом, пигменты - спектральным методом, фенолкар-боновые (хлорогеновая, кофейная), аминокис-
лоты - методом капиллярного электрофореза на приборе Капель 104 согласно методике [7].
Анатомо-морфологические исследования проводили согласно описанной методике с использованием светового микроскопа «0!утрив» ВХ 41 [8]. Экспериментальные данные обрабатывали с помощью общепринятых методов вариационной статистики [9].
Результаты и обсуждение. Летние периоды 2013-2015 гг. в ОПХ «Центральное» (г. Краснодар) были жаркими. Температура воздуха в июле и августе 2013-2014 гг. - 35-37 °С; в 2015 г. - 38-39 °С. Количество выпавших осадков в августе по сравнению с июнем и июлем снижалось и в августе 2014-2015 гг. отмечалась засуха (осадки - 0 мм при температуре воздуха 36 и 38 °С, соответственно.
Показатели водного режима (оводненность, содержание свободной и связанной форм воды) являются важными характеристиками, которые необходимо учитывать при оценке степени засухоустойчивости сортов. Оводненность листового аппарата у диплоидов варьировала от 55,59 % до 63,85 %, у триплоидов от 57,90 % до 66,55 % (таблица 1).
Большей оводненностью листового аппарата в течение летнего вегетационного периода отличались триплоидные сорта яблони Союз и Родничок. При определении зависимости ово-дненности листового аппарата от количества выпавших осадков установлено, что с уменьшением количества выпавших осадков в августе оводненность листового аппарата у всех сортов яблони снижалась, причем у триплоидных сортов в меньшей степени, чем у диплоидных, что характеризует более активное протекание репарационных процессов.
Адаптационную устойчивость растений к засухе характеризует изменение соотношения содержания свободной и связанной форм воды. Чем засухоустойчивее сорт, тем больше он содержит связанной воды и тем выше его водоу-держивающая способность. Повышенным содержанием связанной формы воды отличались листья триплоидных сортов яблони, что характеризует их повышенную устойчивость к стрессовым факторам летнего периода.
Изучение репарационных процессов после воздействия засушливого периода подтвердило высокую адаптационную устойчивость три-плоидных сортов яблони отечественной селекции Союз и Родничок к засухе. Проведенный анализ воздействия повышенных температур летнего периода и последствий летней засухи показал значительные изменения в интенсивности и направленности физиологических процессов, в первую очередь фотосинтеза. По результатам биохимических исследований пигментного комплекса выявлены различия по содержанию суммы хлорофиллов а+в и каротина.
В летний вегетационный период содержание суммы хлорофиллов а и в у диплоидов составляло 3,12-4,39 мг/г сухого вещества; у триплоидов 4,38-5,56 мг/г сухого вещества (таблица 2).
Содержание каротина у диплоидов составляло 1,34-1,96 мг/г сухого вещества; у триплоидов 1,97-2,48 мг/г сухого вещества. Как известно, каротин выполняет защитные функции: защищает хлорофилл от окисления молекулярным кислородом и регулирует степень адаптации растений к высокой интенсивности света. Повышенное содержание каротина у триплоидных сортов яблони свидетельствует о повышенных защитных свойствах их пигментного комплекса.
Таблица1 - Показатели водного режима листового аппарата сортов яблони различной плоидности в летний вегетационный период 2013-2015 гг.
Сорта Оводненность, % Свободная вода, % Связанная вода, %
июнь | июль | август июнь | июль | август июнь | июль | август
диплоиды
Рассвет 63,85 60,71 58,10 21,40 33,46 22,69 78,59 66,54 77,31
Фортуна 61,90 60,90 61,74 28,05 37,28 31,77 71,95 62,72 68,22
Эрли Мак 62,43 60,12 56,82 22,01 48,47 31,17 77,84 60,42 68,83
Дейтон 59,64 59,62 55,59 41,58 44,68 33,76 58,41 67,96 66,23
триплои ды
Союз 65,70 61,96 57,90 19,14 20,24 18,02 80,85 79,76 81,97
Родничок 66,55 64,82 59,38 19,20 18,40 16,65 80,80 81,59 83,35
НСРп 5 0,55 0,53 0,52 0,23 0,33 0,20 0,83 0,65 0,84
Сорта хлорофилл а+в, мг/г сух. в-ва каротин, мг/г сух. в-ва
июнь | июль | август июнь | июль | август
диплоиды
Рассвет 4,05 4,39 3,12 1,56 1,91 1,65
Фортуна 4,36 4,25 3,63 1,96 1,86 1,83
Эрли Мак 3,65 3,79 3,51 1,56 1,61 1,68
Дейтон 3,31 3,64 3,16 1,34 1,69 1,41
триплоиды
Союз 5,20 5,56 4,80 2,24 2,01 2,48
Родничок 5,02 4,38 4,55 2,25 1,97 2,45
НСР0 5 0,37 0,51 0,52 0,12 0,11 0,12
Таблица 2 - Динамика содержания пигментов в листовом аппарате сортов яблони различной плоидности в течение летнего вегетационного периода 2013-2015 гг.
При засухе в клетках происходят структурные нарушения, обусловленные распадом белка и накоплением свободных аминокислот, обеспечивающих основные метаболические процессы в организме растений. В качестве критерия засухоустойчивости использовалось содержание суммы свободных аминокислот, в том числе и пролина.
Известно, что пролин повышает устойчивость плазмы клеток к обезвоживанию и обладает свойствами осмопротектора при адаптации. Накопление пролина как осмотически активного органического вещества благоприятствует удержанию воды в клетке [10]. Содержание пролина у диплоидных сортов яблони составляло 8,5-31,4 мг/г сырого вещества, у триплоид-ных 72,4-87,5 мг/г сырого вещества (рис.1).
ММШ
Рассвет фортуна Эрли Мак Дейтон
Союз Родничок
Рассвет Фортуна Эрли Мак Дейтон
Союз Родничок
Рисунок 1 - Динамика содержания пролина в листовом аппарате сортов яблони различной плоидности в течение летнего вегетационного периода 2013-2015 гг.
При действии засухи (воздушной и почвенной) у растений происходит накопление ингибиторов роста фенольной природы (хлорогеновой кислоты, флавоноидов, фенолкарбоновых кислот). Хлорогеновая и кофейная кислоты участвуют в синтезе флавоноидов в растениях, а феноль-ные соединения - эффективные антиоксиданты, повышающие устойчивость плодовых растений к стрессовым факторам. Фенолкарбоновые кислоты, прерывая цепные реакции липидов, способствуют стабилизации клеточных мембран.
Триплоидные сорта отличаются более высоким содержанием фенолкарбоновых кислот. Содержание суммы фенолкарбоновых кислот у диплоидных сортов яблони составляло 1022,82842,6 мг/кг сырого вещества, у триплоидных 3663,0-5901,9 мг/кг сырого вещества (рис. 2).
Увеличение содержания фенолкарбоновых кислот у триплоидных сортов яблони служит защитной реакцией растений на воздействие температурного стресса.
Данные физиолого-биохимических исследований сортов яблони различной плоидности и различного эколого-географического происхождения дополняют результаты анатомо-морфологических исследований листовой пластинки, проведенных параллельно в эти же сроки летнего вегетационного периода.
Рисунок 2 - Динамика содержания фенолкарбоновых кислот в листовом аппарате сортов яблони различной плоидности в течение летнего вегетационного периода 2013-2015 гг.
У триплоидных сортов яблони Союз и Родничок в отличие от изучаемых диплоидных сортов выявлены ксероморфные признаки листовой пластинки, связанные с засухоустойчивостью: увеличение толщины листовой пластинки, утолщение кутикулы и верхнего эпидермиса, увеличение толщины слоя клеток палисадной паренхимы, увеличение индекса палисадности, увеличение количества устьиц на единицу листовой поверхности, уменьшение линейных размеров устьиц.
В течение летнего вегетационного периода 2013-2015 гг. выявлено, что у диплоидных сортов общая толщина листовой пластинки составляла 178,1-201,6 мк, у триплоидов 207,7- 243,7 мк (НСР095 = 23,09); толщина кутикулы и верхнего эпидермиса у диплоидных сортов составляла 10,1-11,0 мк; у триплоидов 11,1-11,5 мк (НСР095 = 0,47); количество устьиц на единицу листовой поверхности у диплои-дов составляло 217-256 шт.; у триплоидов -278-279 шт. (НСР0 95 = 18,64); длина устьиц у диплоидов составляла 53-55 мк; у триплоидов 51-54 мк (НСР095 = 1,56); ширина устьиц у диплоидов составляла 30-35 мк, у триплоидов 2931 мк (НСР095 = 1,77). Индекс палисадности, являющийся важным анатомо-морфологическим показателем у диплоидов составлял 0,84-1,27; утриплоидов 1,25-1,47.
Среди изученных сортов наиболее крупноплодные - триплоидные сорта яблони Родничок и Союз, их средняя масса в 2013-2015 г.г. составляла 237,3 и 273,0 г соответственно в отличие от изучаемых диплоидных сортов, у которых средняя масса составляла 135,0-176,7 г. Таким образом, триплоиды могут сохранять крупно-плодность даже в условиях засухи и неустойчивого режима увлажнения, что является ценным хозяйственным свойством сорта и косвенным признаком повышенной засухоустойчивости.
Заключение. В различные по метеорологическим условиям годы (2013-2015) выявлены закономерности протекания физиолого-биохимических процессов сортов яблони различной плоидности и различного эколого-географического происхождения для создания сортовых конвейеров, устойчивых к засухе в экологических условиях Краснодарского края.
90
80
70
60
50
40
30
Подтверждена высокая адаптационная плоидных сортов Союз и Родничок, что свиде-
устойчивость триплоидных сортов яблони от- тельствует об их активном физиологическом
ечественной селекции Союз и Родничок к за- состоянии, не зависящем от воздействия по-
сухе, достигающаяся за счет повышенного со- вышенных температур.
держания связанной формы воды, пролина, Установлено, что триплоидные сорта ябло-
выполняющего протекторную функцию, фе- ни Союз и Родничок могут сохранять крупно-
нолкарбоновых кислот, пигментов, проявле- плодность в условиях засухи и неустойчивого
нием ксероморфных признаков листовой пла- режима увлажнения, что является ценным хо-
стинки. зяйственным свойством сорта и косвенным
Проведенный анализ воздействия повы- признаком повышенной засухоустойчивости. шенных температур летнего периода и послед- Полученные результаты представляют-
ствий летней засухи показал наименьшие из- ся весьма интересными и имеют дальнейшую
менения в интенсивности и направленности перспективу для фундаментальных исследова-
физиологических процессов, в первую оче- ний и прикладных разработок в области плодо-
редь фотосинтеза в листовом аппарате три- водства.
Литература
1. Жученко А. А. Настоящее и будущее адаптивной системы селекции и семеноводства растений на основе идентификации и систематизации их генетических ресурсов // Сельскохозяйственная биология. 2013. № 5. С. 8.
2. Ненько Н. И., Киселева Г. К., Ульяновская Е. В. Параметрическая оценка устойчивости растений Malus domestica Borkh. разного эколого-географического происхождения к стрессорам летнего периода // Вестник АПК Ставрополья. 2015. № 4 (20). С. 237-241.
3. Ненько Н. И., Киселева Г. К., Ульяновская Е. В. Фотосинтетическая активность листового аппарата яблони в условиях засухи // Вестник АПК Ставрополья. 2015. № 2 (18). С. 208-211.
4. Седов Е. Н., Седышева Г. А., Серова З. М. Сравнительная характеристика триплоид-ных сортов яблони разного происхождения // Аграрный вестник Урала. 2011. № 1 (80). С. 59-61.
5. Nenko N. I., Kiseleva G. K., Ulyanovska-ya H. V. The mechanisms of the adaptation of the types of the apple tree of different origin to the abiotic factors of the summer period // Agriculture & Food. 2015. Vol. 3. P. 202-208.
6. Чиркова Т. В. Физиологические основы засухоустойчивости растений. СПб. : Изд-во СПбГУ, 2002. 240 с.
7. Ненько Н. И., Дорошенко Т. Н., Гасано-ва Т. А. Физиологические методы в адаптивной селекции плодовых культур // Современные методологические аспекты организации селекционного процесса в садоводстве и виноградарстве / СКЗНИИСиВ. Краснодар, 2012. С. 189-198.
8. Киселева Г. К., Ненько Н. И. Оценка степени засухоустойчивости яблони и винограда по ксероморфным признакам листовой пластинки // Современные инструментально-аналитические методы исследования плодовых культур и винограда / СКЗНИИСиВ ;
References
1. Zhuchenko A. A. Present and future of adaptive systems of breeding and seed production of plants based on the identification and systematization of their genetic resources / Agricultural biology. 2013. № 5. P. 8.
2. Nenko N. I., Kiseleva G. K., Ulyanov E. V. Parametric estimation of plant resistance Malus domestica Borkh. different ecological-geographical origin to the stressors of summer period // Bulletin AIC Stavropol. 2015. № 4 (20). P. 237-241.
3. Nenko N. I., Kiseleva G. K., Ulyanov E. V. Photosynthetic activity of a leaf of the tree in drought conditions // Bulletin AIC Stavropol. 2015. №. 2 (18). P. 208-211.
4. Sedov E. N., Sedysheva G. A., Serova Z. M., Comparative characteristics of triploid Apple cultivars of different origin // Agrarian Bulletin of the Urals. 2011. No. 1 (80). P. 59-61.
5. Nenko N. I., Kiseleva G. K., H. V. Ulyanovska-ya The mechanisms of the adaptation of the types of the apple tree of different origin to the abiotic factors of the summer period // Agriculture & Food. 2015. Vol. 3. P. 202-208.
6. Chirkova T. V., the Physiological basis of drought resistance in plants. SPb. : Izd-vo SPbGU, 2002. 240 p.
7. Nenko N. I., Doroshenko T. N., Gasano-va T. A. physical methods in adaptive breeding of fruit crops // Modern methodological aspects of the selection process in horticulture and viticulture / North-Caucasus zonal research Institute of horticulture and viticulture. Krasnodar, 2012. P. 189-198.
8. Kiseleva G. K., Nenko N. I. Estimation of the degree of drought resistance of Apple trees and grapes on xeromorphic characteristics leaf blade // Modern instrumental analytical techniques for the study of fruit crops and grapes / North-Caucasus zonal research Institute of horticulture and viticulture; under the General editorship of N. I. Nenko. Krasnodar, 2015. S. 34-38.
9. Dospekhov B. A. Methodology of field exper-
под общей редакцией Н. И. Ненько. Краснодар, 2015. С. 34-38.
9. Доспехов Б. А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). М., 1979. 463 с.
10. Кузнецов Вл. В., Шевякова Н. И. Пролин при стрессе: биологическая роль, метаболизм, регуляция // Физиология растений 1999. № 2. С. 321-336.
iment (with bases of statistical processing of research results). M., 1979. 463 p.
10. Kuznetsov Vl. V., Shevyakova N. I., Proline under stress: biological role, metabolism, regulation // plant Physiology, 1999. №. 2. P. 321-336.
