УДК 636.2.053:615.272.6:612.017.1
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ РИБОТАНА
ГЛУБОКОСТЕЛЬНЫМ КОРОВАМ
Великанов В.И. - д.б.н., профессор, Кляпнев А.В. - к.б.н., доцент, Горина А.В. - ст. препаратор, Тушина Г.Д. - к.вет.н., доцент
ФГБОУ ВО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия»
Ключевые слова: телята, ранний постнатальный период развития, молозиво, глубокостельные коровы, риботан
Keywords: calves, early postnatal life, colostrum, dоwn-calving cows, риботан
Поиск новых источников повышения резистентности организма, нормализации обменных процессов и увеличения продуктивности животных остается весьма актуальным в ветеринарной практике. Вопросы иммунобиологического состояния
организма новорожденных животных стоят на первом месте в обеспечении оптимального роста и развития их в ранний постнатальный период.
Стимуляция защитных механизмов организма и поддержание на высоком уровне резистентности животных к инфекционным заболеваниям и другим неблагоприятным факторам окружающей среды в критические периоды онтогенеза остаются важнейшими задачами современного животноводства. С целью повышения колострального иммунитета, естественной резистентности и
сохранности молодняка крупного рогатого скота изучено множество препаратов [3, 4, 11, 12].
Алексеев И.А., Волков А.М., Кадиков И.Р. (2015) изучали естественную резистентность телят при использовании пробиотического препарата
Споробактерина в дозе 1,5 мл. Препарат давали телятам с первых суток жизни до 30-суточного возраста. Авторами установлено улучшение морфологического и биохимического состава крови телят. Повышалось количество эритроцитов, гемоглобина, лимфоцитов, в т.ч. Т- и В-лимфоцитов, фагоцитарной активности на 7,16%, гамма-глобулинов на 10,8% [2].
Позов С.А., Порублев В.А., Родин В.В., Орлова Н.Е. (2015) изучали влияние микроэлементов солей меди, йода и кобальта на продуктивность животных и резистентность телят. Микроэлементы давали с кормом телятам или вводили в рацион стельных коров. Авторами установлено, что введение в рацион стельных коров силоса, обогащенного этими микроэлементами, положительно влияло на новорожденных телят и молочную продуктивность коров. Отмечено повышение фагоцитарной активности и фагоцитарного индекса у телят на 45 и 60 сутки, соответственно на 29,0 и 9,89 %; 27,3 и 13,5 %. Также была выше бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, повышалось количество лейкоцитов, уровень общего белка и гамма-глобулинов [8].
Яковлев Г.А., Шуканов А.А. (2013) изучали корригирующее действие препаратов «Седимин-Se+» и «Трепел» на клинико-физиологическое состояние, рост тела, естественную резистентность и обмен веществ у бычков в возрастном аспекте. Бычкам второй группы ежедневно скармливали трепел с 90-суточного возраста, бычкам третьей группы -внутримышечно вводили «Седимин-Se+» и с 90-суточного возраста скармливали трепел. У опытных бычков в конце периода выращивания, доращивания и откорма отмечено повышение количества эритроцитов, лейкоцитов, уровня гемоглобина, АБОК, содержания общего белка, альбуминов, гамма-глобулинов,
иммуноглобулинов на 2,9-45,6 % ^<0,05)
[13].
Семенов В.Г., Петрянкин Ф.П., Яковлев С.Г., Анин А.Н. (2009); Семенов В.Г., Герасимова Н.И. (2015) проводили изучение влияния препаратов серии PS-1, PS-2, Prevention-N-A на физиологическое состояние,
морфологический и биохимический профили крови, неспецифическую резистентность организма в биологической цепи «корова - теленок - молодняк». Авторами установлено повышение количества эритроцитов, уровня гемоглобина, показателей
неспецифической резистентности,
бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, фагоцитарной активности нейтрофилов [6, 10].
Смоленцев С.Ю., Папуниди Э.К. (2017) изучали влияние
иммуностимуляторов миксоферон,
иммуноферон и гамавит на иммунитет новорожденных телят. Авторами установлено повышение у телят опытных групп иммуноглобулинов классов A, M, G, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, фагоцитарного числа и индекса. Происходило повышение относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов [9].
В ветеринарной медицине используется иммуномодулирующий
препарат Риботан, который в качестве действующего вещества содержит смесь низкомолекулярных пептидов и фрагментов дрожжевой РНК [7].
Целью исследования стало изучение влияния риботана на морфологические и биохимические показатели крови новорожденных телят после его парентерального введения
глубокостельным коровам, а также на образование и накопление в молочной железе коров иммуноглобулинов и выделение их в составе молозива.
Материал и методы исследований. Научно-хозяйственный опыт выполнен в осенне-зимний период на молочнотоварной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива
«Нижегородец» Нижегородской области.
Опыты проводились на физиологически здоровых коровах и телятах. Животные отбирались по принципу пар аналогов с учетом породности, живой массы, возраста, продуктивности и клинико-
физиологического состояния. Десять глубокостельных коров черно-пестрой породы были разделены на 2 группы -контрольную и опытную по 5 животных в каждой, от которых получили соответствующее количество
новорожденных телят. Глубокостельным коровам опытной группы внутримышечно вводили препарат «Риботан» в дозе 5 мл на животное, за 3-9 дней до отела, однократно. Коровам контрольной группы вводили 0,9 % раствор Натрия хлорида. Новорожденные телята распределялись в соответствующие коровам-матерям
группы. Телятам исследуемых групп выпаивали молозиво, полученное от их коров-матерей не позднее 30-40 минут после рождения.
На молочно-товарной ферме применяется «холодный метод
выращивания», поэтому телята с 2-дневного возраста содержались вне помещений - в боксах-домиках. Проводилось клиническое наблюдение за подопытными животными.
Пробы крови для исследования морфологического и биохимического состава у телят брали из яремной вены на 2-е и 10-е сутки жизни. Качество молозива коров контрольной и опытной групп оценивали по уровню общих иммуноглобулинов и титруемой кислотности. Отбиралась средняя проба молозива объемом 100 мл из 1, 2, 3, 4 и 5-го удоя.
Общий анализ крови (определение уровня гемоглобина, подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов) проводился на гематологическом анализаторе HTI Micro-CC-20 Plus, USA. Лейкоцитарную формулу выводили путем подсчёта лейкоцитов разных видов в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза.
Содержание Т-лимфоцитов
определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) и В-лимфоцитов - методом
розеткообразования с эритроцитами быка в системе ЕАС-РОК (В.Г. Скопичев, Н.Н. Максимюк, 2009).
С помощью автоматического биохимического анализатора ICUBIO iMagic-V7 определяли общее количество белка. Для определения белковых фракций крови (альбумин, а-глобулины,
Р-глобулины, у-глобулины) применялся анализатор Minicap, Sebia. Титруемую кислотность молозива по Тернеру и содержание иммунных глобулинов (Ig) в молозиве (молоке) с натрия сульфитом определяли по методике, изложенной в справочнике И.П. Кондрахина
(И.П. Кондрахин и соавт., 2004). Определение мочевины в сыворотке крови по цветной реакции с
диацетилмонооксимом; определение
глюкозы в крови по цветной реакции с ортотолуидином (И.П. Кондрахин и соавт., 2004).Цифровые данные, полученные в ходе эксперимента, обрабатывались статистическим методом
(Н.А. Плохинский, 1967) на персональном компьютере с установленным пакетом программ Microsoft Excel 2007. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента. Результаты рассматривались как достоверные, начиная со значения P<0,05. Исследования отобранного материала выполнялись на кафедре «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни», в межкафедральной
лаборатории ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА и на базе лаборатории «Гемохелп» г. Нижнего Новгорода.
Получено решение о выдаче патента Российской Федерации на изобретение от 13.12.2021 г. по заявке № 2021109981.
Результат исследований. В ходе э к с п еримента от клинически-здоровых коров исследуемых групп было получено молозиво хорошего качества. Уровень иммуноглобулинов и титруемая кислотность были максимальными в молозиве первого удоя и с каждым доением постепенно снижались, но в течение всего пе р иода исследований были более высокими у коров опытной группы (Таблица 1). Установлено, что молозиво 1-го и 2-го удоя коров опытной группы содержало большее количество иммуноглобулинов соответственно на 30,9 и 15,9 % по сравнению с контрольной группой, что, видимо, говорит о повышении образования этих белков в организме, вследствие усиления иммунореактивности под действием риботана. Титруемая кислотность была высокой, значения находились в пределах физиологической нормы. Титруемая кислотность молозива 1 -го и 2-го удоя коров опытной группы была выше соответственно на 13,8 и 10 %. Этот показатель обусловлен в основном кислотным характером казеина, которого в молозиве коров опытной группы, видимо, было больше.
Таблица 1 - Содержание иммуноглобулинов в молозиве, титруемая кислотность молозива подопытных коров, M±m, п=5
Показатель Контрольная группа Опытная группа
Иммуноглобулины, г/л
1 удой 58,2±1,68 76,2±1,32*
2 удой 31,44±1,01 36,44±0,79*
3 удой 14,8±0,47 15,12±0,55
4 удой 11,08±0,4 11,48±0,49
5 удой 8,64±0,23 9,38±0,33
Титруемая кислотность, °Т
1 удой 41,8±0,66 47,6±1,16*
2 удой 31,8±0,66 35,0±0,7*
3 удой 30,0±0,7 28,6±1,16
4 удой 27,0±0,7 24,2±1,11
5 удой 22,8±0,86 21,2± 1,15
Примечание: здесь и далее в таблицах * - Р<0,05 по парному критерию при сравнении с контролем
Количество эритроцитов и уровень гемоглобина у телят контрольной и опытной групп были сходными между собой на вторые и десятые сутки жизни.
Результаты, полученные в ходе исследования, показали, что у телят опытной группы через сутки после рождения наблюдалось большее количество лейкоцитов на 69 % по сравнению с контрольной группой. С возрастом данный показатель у животных исследуемых групп увеличился, при этом количество лейкоцитов на 10-е сутки жизни было больше у опытных телят на 42 % по сравнению с контролем (Р<0,05) (Таблица 2).
Полученные лейкограммы крови телят позволили определить тип развивающихся адаптационных реакций у новорожденных телят по процентному содержанию лимфоцитов и их соотношению к сегментоядерным нейтрофилам. Остальные форменные элементы крови и общее число лейкоцитов, являлись лишь дополнительными признаками реакций, свидетельствующими о степени их полноценности, напряженности (Л.Х. Гаркави и др., 1982, 1990). На вторые сутки жизни у подопытных телят отмечали реакцию тренировки.
Таблица 2 - Морфологические показатели крови подопытных телят, М±т, п=5
На 2 сутки жизни На 10 сутки жизни
Показатель контрольная опытная контрольная опытная
группа группа группа группа
Эритроциты, млн./мкл 6,85±0,23 6,61±0,25 6,21±0,21 5,62±0,07
Лейкоциты, тыс./ мкл 7,10±0,39 12,0±0,15* 8,52±0,10 12,1±0,13*
Лейкоформула, %
Эозинофилы 1,6±0,5 1,0±0,4 0,6±0,2 0,8±0,3
Базофилы 0 0 0,2±0,2 0,4±0,2
Палочкоядерные нейтрофилы 6,8±0,5 5,6±0,4 5,8±0,2 4,6±0,4
Сегментоядерные нейтрофилы 38,8±0,5 45,0±0,4 44,8±0,6 43,0±0,4
Нейтрофилы, тыс./мкл 3,23±0,17 6,07±0,09 4,31±0,11 5,76±0,10
Моноциты 2,6±0,2 2,0±0,6 3,0±0,4 2,6±0,4
Лимфоциты 50,2±0,9 46,4±0,5 45,6±0,5 48,6±0,4
Лимфоциты, тыс./мкл 3,57±0,24 5,54±0,07 3,86±0,08 5,88±0,06
Лимфоциты/сегментоядерные нейтрофилы 1,29±0,04 1,02±0,03 1,0±0,03 1,12±0,02
Нейтрофилы/лимфоциты 0,90±0,03 1,1±0,03 1,1±0,02 0,97±0,02
Таблица 3 - Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови подопытных телят, М±т, п=5
Показатель На 2 сутки жизни На 10 сутки жизни
контрольная группа опытная группа контрольная группа опытная группа
Т-клетки, % 61,0±0,44 68,0±1,3 62,4±0,5 64,4±0,6
тыс./мкл 2,17±0,15 3,75±0,07 2,4±0,06 3,78±0,03
В-клетки, % 19,2±0,37 17,0±1,41 23,4±0,24 19,6±0,5
В-клетки, тыс./мкл 0,67±0,05 0,92±0,04 0,89±0,02 1,13±0,03
Адаптация организма к условиям внешней среды быстрее проходила у телят опытной группы, о чем говорит повышение на 12 % индекса
лимфоциты/сегментоядерные нейтрофилы на 10-е сутки жизни
Абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов на 2-е сутки
жизни повысилось у телят опытной группы соответственно на 72,8 и 11,4 %. Относительное количество В-лимфоцитов в крови опытных телят было ниже чем у контрольных на 11,4 % через сутки после рождения, а абсолютное количество было более высоким. Через 10 суток относительное количество Т-лимфоцитов у
телят опытной группы было сходным с контролем, а абсолютное количество было выше на 57,5 %. Относительное количество В-лимфоцитов у опытных телят было ниже, а абсолютное повышено. Таким образом, применение препарата «Риботан»
глубокостельным коровам за 3-9 дней до отела оказывает влияние на клеточный иммунитет и ускоряет пролиферацию Т-лимфоцитов у полученных
новорожденных телят.
Таблица 4 - Иммунобиохимические показатели крови подопытных телят, M±m, п=5
Показатель На 2 сутки жизни На 10 сутки жизни
контрольная группа опытная группа контрольная группа опытная группа
Общий белок, г/л 59,76±0,61 71,98±0,41* 57,86±0,50 68,42±2,04*
Альбумины, г/л 21,25±0,63 22,3±0,34 22,64±0,67 24,8±0,46*
а-глобулины, г/л 18,56±0,59 18,74±0,47 15,18±0,32 15,62±0,60
Р-глобулины, г/л 5,34±0,40 6,96±0,16* 7,86±0,68 8,74±0,48
у-глобулины, г/л 14,38±0,73 23,98±0,53* 12,16±0,47 19,26±1,54*
Гемоглобин, г/л 84,6±1,3 87,0±1,3 85,4±1,6 85,8±0,8
Мочевина, ммоль/л 3,41±0,15 3,63±0,1 3,52±0,16 3,73±0,18
Глюкоза, ммоль/л 4,4±0,14 4,8±0,07 4,6±0,15 4,8±0,1
Белковый состав плазмы крови взаимосвязан с физиологическим состоянием и резистентностью организма, а также играет важную роль в метаболических процессах. Так уровень общего белка в крови является высокоинформативным показателем,
характеризующим гомеостатическое
состояние организма. Установлено, что на 2-е сутки жизни у телят опытной группы был выше уровень общего белка сыворотки крови на 20,4 %, в большей степени за счет гамма-глобулинов и бета-глобулинов, их уровень был выше соответственно на 66,7 и 30,3 % (Р<0,05).
У телят опытной группы в течение десяти суток после рождения отмечалась тенденция к повышению уровней мочевины и глюкозы в крови, что может говорить о более интенсивном белковом и углеводном обмене (Р>0,05).
Фракция гамма-глобулинов
включает в себя иммуноглобулины различных классов. Основными в сыворотке крови телят являются иммуноглобулины классов А, М, G. Это полифункциональные белки, которые специфически распознают разнообразные антигены и гаптены, взаимодействуют с другими иммунокомпетентными клетками, имеющими к ним рецепторы, активируют систему комплемента, обезвреживают антигены. Повышение количества гамма-
глобулинов в сыворотке крови телят опытной группы связано с их большим поступлением с молозивом. Поэтому, инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» способствует повышению уровня колострального иммунитета у полученных от них телят.
Основными белками фракции бета-глобулинов являются трансферрин, обеспечивающий транспорт железа; гемопексин, белок, связывающий гем и предотвращающий потерю железа через выделительную систему; компоненты комплимента и бета-липопротеиды, участвующие в транспорте холестерина.
Альбумины обеспечивают
транспорт продуктов метаболизма, после предварительного гидролиза освобождают аминокислоты, которые принимают участие в синтезе специфических белков. Поэтому повышенное содержание этой фракции белка напрямую связано с продуктивностью и ростом телят.
На 10-е сутки жизни уровень общего белка у телят подопытных групп незначительно снизился за счет фракции альфа- и гамма-глобулинов, уровень бета-глобулинов и альбумина с возрастом незначительно повысился. Концентрация общего белка, альбуминов и гамма-глобулинов была выше у телят опытной группы соответственно на 18,2; 9,5 и 58,3 %
(Р<0,05).
Заключение. Применение риботана в дозе 5 мл коровам в предотельный период способствовало накоплению в молочной железе иммуноглобулинов и выделению их с молозивом. В молозиве первого и второго удоя коров опытной группы их концентрация была выше соответственно на 30,9 и 15,9 % по сравнению с контролем, при этом не исключается образование в организме, накопление и выделение других факторов иммунитета. После
выкармливания такого молозива у телят, полученных от коров опытной группы, в крови повысилось количество лейкоцитов, при этом на вторые сутки жизни было больше сегментоядерных нейтрофилов, а на десятые - происходило повышение лимфоцитов. Уровень общего белка был выше на вторые и десятые сутки жизни соответственно на 20,4 и 18,2 % в основном за счет фракции гамма-глобулинов, концентрация которых также была выше в это время соответственно на 66,7 и 58,3 %.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Абатчикова, О. А. Физиологические механизмы адаптации при холодном методе выращивания / О. А. Абатчикова, Н. Я. Костеша // Вестник ТГПУ. - 2010. - № 3(93). - С. 4449.
2. Алексеев, И. А. Естественная резистентость телят при использовании пробиотического препарата споробактерина в условиях молочной фермы / И. А. Алексеев, А. М. Волков, И. Р. Кадиков // Ветеринарный врач. - 2015.
- № 3. - С. 44-48.
3. Алимов, А. М. Влияние Стимулина на физиологическое состояние и резистентность сухостойных коров и телят / А. М. Алимов, Р. Ф. Сайфутдинов, Е. Ю. Микрюкова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.
- 2017. - Т. 232. - № 4. - С. 5-8.
4. Великанов, В. И. Колостральный иммунитет и становление неспецифической резистентности телят под влиянием иммуномодуляторов: монография / В. И. Великанов, А. В. Кляпнев, Л. В. Харитонов, С. С.
Терентьев // Санкт-Петербург: Лань, 2021.
- 160 с.
5. Гаркави, Л. Х. Активационная терапия. Антистрессорные реакции активации и тренировки и их использование для оздоровления, профилактики и лечения / Л. Х. Гаркави. -Ростов на Дону: РГУ, 2006. - 256 с.
6. Герасимова, Н. И. Обеспечение здоровья и сохранности телят отечественными биостимуляторами / Н. И. Герасимова, В. Г. Семенов // Российский журнал «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии». - Москва: ФГБНУ ВНИИВСГЭ, 2015. - № 4(16). - С. 68-70.
7. Инструкция по применению Риботана для коррекции иммунодефицитных состояний у животных. -https://4lapy.ru/upload/medialibrary/847/8477 42c972568c9dd2fe161662ea16ca.pdf (время обращения 20.04.2022)
8. Позов, С. А. Микроэлементы: естественная резистентность, продуктивность и развитие животных / С. А. Позов, В. А. Порублев, В. В. Родин, Н . Е . Орлова // Ветеринарный врач. - 2015.
- № 3. - С. 57-60.
9. Смоленцев, С. Ю. Влияние иммуностимуляторов «Миксоферон», «Иммуноферон» и «Гамавит» на показатели иммунитета телят / С. Ю. Смоленцев, Э. К. Папуниди // Ветеринарный врач. - 2017. - № 3. - С. 2126.
10. Семенов, В. Г. Выращивание здорового молодняка в личных подсобных хозяйствах, на малых и средних фермах с применением биостимулятора ПС-1 / В. Г. Семенов, Ф. П. Петрянкин, С. Г. Яковлев, А. Н. Анин // Ветеринарная патология. - 2009. - № 3 (30). - С. 128-132.
11. Тухватуллина, Л. А. Влияние препаратов «Имунофан» и «Фоспренил» на морфологический состав крови телят / Л. А. Тухватуллина, Р. Г. Каримова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2021. - Т. 247. - № 3. - С. 262-266.
12. Харитонова, О. В.
Исследование эффективности различных способов повышения колострального иммунитета у новорожденных телят / О. В. Харитонова, Л. В. Харитонов, В. И. Великанов, А. В. Кляпнев // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2018.
13. Яковлев, Г. А. Динамика ростовых, иммунологических и обменных процессов у бычков в условиях применения новых биогенных соединений
/ Г. А. Яковлев, А. А. Шуканов // Ветеринарный врач. - 2013. - № 2. - С. 51-
- № 2. - С. 81-93.
54.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ РИБОТАНА ГЛУБОКОСТЕЛЬНЫМ
КОРОВАМ
Особенности деятельности органов и систем у новорожденных животных определяются степенью их функциональной зрелости в ранний постнатальный период онтогенеза. Рождение резистентного потомства и получение молозива с высоким уровнем иммуноглобулинов и их широкой противомикробной специфичностью является одной из приоритетных задач в современном животноводстве. Целью исследования стало изучение влияния риботана, инъецированного коровам в предотельный период в дозе 5 мл, на морфологические и биохимические показатели крови новорожденных телят. Работа выполнена на базе СПК «Нижегородец» Нижегородской области. В ходе опыта определяли титруемую кислотность и уровень общих иммуноглобулинов молозива, проводили морфологический и биохимический анализ крови новорожденных телят на 2-е и 10-е сутки после рождения. В результате было отмечено увеличение количества лейкоцитов, общего белка, альбуминов и гамма-глобулинов в крови телят опытной группы, а также более высокий уровень иммуноглобулинов и титруемая кислотность молозива коров опытной группы.
PHYSIOLOGICAL, BIOCHEMICAL AND MORPHOLOGICAL PARAMETERS OF THE BLOOD OF NEWBORN CALVES AFTER THE APPLICATION OF RIBOTAN TO DOWN-
CALVING COWS
The features of the activity of organs and systems in newborn animals are determined by the degree of their functional maturity in the early postnatal period of ontogenesis. The birth of resistant offspring and the production of colostrum with a high level of immunoglobulins and their broad antimicrobial specificity is one of the priority tasks in modern animal husbandry. The aim of the scientific work was to study the effect of ribotan, injected to cows in the pre-calving period at a dose of 5 ml, on the morphological and biochemical parameters of the blood of newborn calves. The work was carried out on the basis of the APC «Nizhegorodets» of Nizhny Novgorod region. In the course of the experiment, the titratable acidity of colostrum, the level of total immunoglobulins were determined, morphological and biochemical analysis of the blood of newborn calves was carried out on the second and tenth days after birth. As a result, there was an increase in the number of leukocytes, total protein, albumin and gamma globulins in blood of calves from the experimental group, as well as a higher level of immunoglobulins and titratable acidity of colostrum of cows in the experimental group.
Великанов В.И., Кляпнев А.В., Горина А.В., Тушина Г.Д.
Резюме
Velikanov V.I., Klyapnev A.V., Gorina A.V., Tushina G.D.
Summary