CC BY
9
УДК 636.2.053:615.272.6:612.017.1
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА ГЛУБОКОСТЕЛЬНЫМ КОРОВАМ
Горина А.В. - аспирант
ФГБОУ ВО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия»
Ключевые слова: телята, ранний постнатальный период развития, молозиво, глубокостельные коровы, Натрия нуклеинат
Keywords: calves, early postnatal life, colostrum, dоwn-calving cows, Sodium nucleinate
Поиск новых источников повышения резистентности организма, нормализации обменных процессов и увеличения продуктивности животных остается весьма актуальным в ветеринарной практике. Вопросы иммунобиологического состояния
организма новорожденных животных стоят на первом месте в обеспечении оптимального роста и развития их в ранний постнатальный период.
По мнению многих авторов, в основе роста и развития телят в период новорожденности лежит иммунный статус организма. Иммунная система телят в этот период имеет функциональную незрелость, в крови у них отсутствуют иммуноглобулины, выполняющие роль основного фактора защиты организма. Своевременное получение
иммунобиологически ценного молозива способствует направленному увеличению неспецифических защитных факторов организма и нормализации процессов пищеварения. Молозиво является незаменимым продуктом, так как содержит большое количество легкоусвояемых сывороточных белков, защитных иммунных факторов (иммуноглобулины A, M, G, нейтрофилы, лимфоциты, макрофаги, лактоферрин и др.), а также природных антиоксидантов (витамины А и Е, Р-каротин, селен, цинк). Гуморальная иммунная защита, обусловленная колостральным иммунитетом, является важнейшим защитным механизмом телят раннего постнатального периода развития [4, 5, 9].
Стимуляция защитных механизмов организма и поддержание на высоком уровне резистентности животных к инфекционным заболеваниям и другим неблагоприятным факторам окружающей среды в критические периоды онтогенеза остаются важнейшими задачами современного животноводства. С целью повышения колострального иммунитета, естественной резистентности и
сохранности молодняка крупного рогатого скота изучено множество препаратов [1, 2,
7, 10].
Особый интерес представляют препараты природного происхождения, обладающие высокой биологической доступностью и участвующие в процессах естественной регуляции
жизнедеятельности организма. Среди таких препаратов можно выделить
иммуномодулятор природного
происхождения Натрия нуклеинат, который имеет в своем составе натриевую соль рибонуклеиновой кислоты, полученную из монокультуры пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Препарат обладает широким спектром биологической активности и выраженными иммуностимулирующими свойствами. Определяющим фармакологическим
свойством Натрия нуклеината является стимуляция лейкопоэза, процессов регенерации и репарации, функциональной активности нейтрофилов, ^лимфоцитов, B-лимфоцитов и других
иммунокомпетентных клеток. Препарат усиливает пролиферацию клеток, синтез антител и антиинфекционную
устойчивость организма, увеличивает содержание лизоцима, индуцирует синтез интерферона [3, 6, 8].
Целью исследования стало изучение влияния 0,2 % водного раствора Натрия нуклеината на морфологические и биохимические показатели крови новорожденных телят после его парентерального введения
глубокостельным коровам, а также на образование и накопление в молочной железе коров иммуноглобулинов и выделение их в составе молозива.
Материал и методы исследований. Научно-хозяйственный опыт выполнен в осенне-зимний период на молочнотоварной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива
«Нижегородец» Нижегородской области. Объектами исследования стали 10 глубокостельных коров черно-пестрой породы, которые были разделены на 2 группы (контрольная и опытная) по 5 животных в каждой и полученные от них новорожденные телята. Животные отбирались по принципу парных аналогов с учетом породности, живой массы, возраста, продуктивности и клинико-
физиологического состояния. Животным опытной группы за 3-9 суток до предполагаемого отёла вводили 0,2 % водный раствор Натрия нуклеината в дозе 5 мл внутримышечно, однократно. Животным контрольной группы вводили 0,9 % раствор Натрия хлорида. Новорожденные телята распределялись в соответствующие группы.
Телятам исследуемых групп выпаивали молозиво, полученное от их коров-матерей не позднее 30-40 минут после рождения. На молочно-товарной ферме применяется «холодный метод выращивания», поэтому телята с 2-дневного возраста содержались вне помещений - в боксах-домиках. Проводилось клиническое наблюдение за подопытными животными.
Пробы крови для исследования морфологического и биохимического состава у телят брали из яремной вены на 2-е и 10-е сутки жизни. Качество молозива коров контрольной и опытной групп
оценивали по уровню общих иммуноглобулинов и титруемой кислотности. Отбиралась средняя проба молозива объемом 100 мл из 1, 2, 3, 4 и 5-го удоя.
Общий анализ крови (определение уровня гемоглобина, подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов) проводился на гематологическом анализаторе HTI Micro-CC-20 Plus, USA. Лейкоцитарную формулу выводили путем подсчёта лейкоцитов разных видов в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза.
Содержание Т-лимфоцитов
определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) и В-лимфоцитов - методом розеткообразования с эритроцитами быка в системе ЕАС-РОК (В.Г. Скопичев, Н.Н. Максимюк, 2009).
С помощью автоматического биохимического анализатора ICUBIO iMagic-V7определяли общее количество белка. Для определения белковых фракций крови (альбумин, а-глобулины,
Р-глобулины, у-глобулины) применялся анализатор Minicap, Sebia.
Титруемую кислотность молозива по Тернеру и содержание иммунных глобулинов (Ig) в молозиве (молоке) с натрия сульфитом определяли по методике, изложенной в справочнике
И.П. Кондрахина (И.П. Кондрахин и соавт., 2004).
Цифровые данные, полученные в ходе эксперимента, обрабатывались статистическим методом
(Н.А. Плохинский, 1967) на персональном компьютере с установленным пакетом программ Microsoft Excel 2007. Для выявления статистически значимых различий использован критерий С т ьюдента. Результаты рассматривались как достоверные, начиная со значения P<0,05.
Исследования отобранного
материала выполнялись на кафедре анатомии, хирургии и внутренних незаразных болезней, в межкафедральной лаборатории ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА и на базе лаборатории «Гемохелп» г. Нижнего Новгорода.
Получено решение о выдаче патента Российской Федерации на изобретение от 26.11.2021 г. по заявке № 2021109976.
Результат исследований. В ходе эксперимента от клинически-здоровых коров исследуемых групп было получено молозиво хорошего качества. Уровень иммуноглобулинов и титруемая кислотность были максимальными в молозиве первого удоя и с каждым доением
постепенно снижались, но в течение всего периода исследований были более высокими у коров опытной группы (Таблица 1).
Содержание иммуноглобулинов и титруемая кислотность молозива 1 -го удоя коров опытной группы были достоверно выше на 19 и 12 % (Р<0,05) по сравнению с контролем.
Таблица 1 - Содержание иммуноглобулинов в молозиве и титруемая кислотность молозива (М±т, п=5)
Показатель Группа I Группа II
Иммуноглобулины, г/л
1 удой 53,6±1,46 63,8±1,28*
2 удой 28,6±1,13 31,6±0,8
3 удой 16,8±0,94 17,2±1,2
4 удой 11,4±0,5 12±0,59
5 удой 6,8±0,3 8±0,43
Титруемая кислотность, Т
1 удой 44,8±1,31 50,2±0,86*
2 удой 34,8±1,32 36,2±0,8
3 удой 32,6±1,07 33,4±1,02
4 удой 28,4±0,74 30,2±0,86
5 удой 25,6±1,02 26,2±1,01
Примечание: здесь и далее в таблицах * - Р<0,05 по парному критерию при сравнении с контролем
Данный факт может быть обусловлен повышением образования иммунных белков в организме стельных коров, вследствие усиления
иммунореактивности под действием 0,2 % Натрия нуклеината.
Результаты, полученные в ходе исследования, показали, что у телят опытной группы через сутки после рождения наблюдается более высокий уровень лейкоцитов (9,7±0,38тыс./мкл против 7,74±0,54тыс./мкл в контроле, Р<0,05), который на 25,3 % превышал значения животных контрольной группы. С возрастом данный показатель у животных исследуемых групп увеличился, при этом количество лейкоцитов на 10-е сутки жизни было больше у опытных телят на 19,5 % (Р<0,05) по сравнению с контролем, за счет более высокого уровня лимфоцитов (Таблица 2).
Содержание гемоглобина и эритроцитов у опытных и контрольных
телят в течение всего периода исследований оставались практически сходными.
Общее количество нейтрофилов, а также относительное содержание эозинофилов и моноцитов у новорожденных телят, полученных от коров, которым за 3-9 суток перед отёлом инъецировали 0,2 % водный раствор Натрия нуклеината, было выше на 7,1; 66,7 и 42,9% соответственно, по сравнению с показателями контрольной группы животных. Относительное содержание палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов у опытных телят на 2-е сутки жизни составило 6,4±0,6 и 37,2±0,96 %, что оказалось меньше на 22 и 13 % соответственно, чем у животных контрольной группы.
С возрастом в крови животных подопытных групп отмечается появление базофилов. Относительное содержание палочкоядерных и сегментоядерных
нейтрофилов на 10-е сутки жизни у опытной группы телят было на 20,6 и 17,6 % ниже по сравнению с контролем.
Индекс лимфоциты /
сегментоядерные нейтрофилы на 2-е сутки жизни у телят контрольной группы составил 1,09±0,03, а у опытных телят 1,43±0,05, что оказалось выше на 31,2%, чем в контроле. При этом индекс
нейтрофилы/лимфоциты у животных опытной группы оказался меньше на 26,8 % (0,79±0,02 против 1,08±0,02 в контроле). С возрастом индекс лимфоциты / сегментоядерные в опытной группе не претерпел значимых изменений, но был на 42,9 % выше, чем у животных контрольной группы.
Таблица 2 - Морфологические показатели крови новорожденных телят (М±т, п=5)
Показатель На 2 сутки На 10 сутки
контроль опыт контроль опыт
Гемоглобин, г/л 87,4±1,69 86,8±7,08 88,8±2,08 84,2±3,07
Эритроциты, млн./мкл 7,02±0,23 6,44±0,49 6,32±0,23 6,03±0,31
Лейкоциты, тыс./ мкл 7,74±0,54 9,7±0,38* 9,22±0,39 11,02±0,52*
Лейкоформула, %:
эозинофилы 0,6±0,24 1,0±0,2 0,8±0,2 1,4±0,4
базофилы 0 0 0,6±0,24 0,8±0,2
палочкоядерные нейтрофилы 8,2±0,37 6,4±0,6 6,8±0,73 5,4±0,5
сегментоядерные нейтрофилы 42,8±0,8 37,2±0,96 45,4±0,67 37,4±0,5
нейтрофилы, тыс./мкл 3,94±0,3 4,22±0,14 4,81±0,21 4,55±0,32
моноциты 1,4±0,24 2,0±0,31 1,6±0,24 2,2±0,37
лимфоциты 47,0±0,7 53,4±0,5 44,8±0,58 52,6±0,92
лимфоциты, тыс./мкл 3,62±0,23 5,18±0,22 4,13±0,21 5,75±0,28
На 2-сутки жизни относительное и абсолютное содержание лимфоцитов у животных опытной группы оказалось выше на 13,6 и 43,1 % по сравнению с контрольной группой телят. Относительное содержание лимфоцитов у исследуемых групп с возрастом уменьшилось, но было выше у телят опытной группы на 17,4 %. На 10-е сутки абсолютное содержание лимфоцитов в крови животных контрольной группы увеличилось на 14,1 %, а в опытной группе - на 11 %. Однако, данный показатель у опытных телят был выше на 39,2 % по сравнению с контрольной группой.
Т-лимфоциты участвуют в регуляции активности макрофагов, продуцирующих лизоцим. Благодаря чему бактерицидность секреторных
иммуноглобулинов усиливается.
Абсолютное количество Т-лимфоцитов на 2-е сутки жизни у телят контрольной группы составило 2,05±0,15тыс./мкл, в опытной - 3,26±0,16тыс./мкл, при этом данный показатель превышал контрольных аналогов на 59% (Р<0,05). Разница в
относительном количестве Т-лимфоцитов на 2-е сутки у исследуемых телят составила 10,5 % (63,0±0,7 % против 57,0±0,7 % в контроле).
Абсолютное количество
В-лимфоцитов на 2-е сутки в контрольной группе составило 0,81±0,07 тыс./мкл, а у животных опытной группы - 1,03± 0,08 тыс./мкл, что было выше на 27,2 % (Р<0,05). Относительное количество В-клеток у опытных телят было ниже на 10,7 % по сравнению с интактными животными (20,0±1,04 % против 22,4± 0,81 % в контроле). С возрастом данные различия опытной и контрольной групп сохранились.
Абсолютное содержание Т-клеток в контрольной и опытной группах составило 2,51±0,14 и 3,67±0,16 тыс./мкл соответственно, разница по данному показателю была в 46,2 % (Р<0,05). Относительное количество Т-лимфоцитов в опытной группе телят составило 64±0,70 %, что превышало значения аналогов контрольной группы на 47 %.
Относительное и абсолютное
содержание В-лимфоцитов у животных исследуемых групп с возрастом увеличивается. В опытной группе телят относительное количество В-клеток было ниже на 7,26 %, по сравнению с контролем, а абсолютное количество В-лимфоцитов оказалось выше на 28,4 % (1,31±0,04 тыс./мкл против 1,02±0,07 тыс./мкл в контроле).
В течение всего периода исследований выявленные изменения в лейкоцитарной формуле, клеточном иммунитете и ускорение пролиферации Т-лимфоцитов свидетельствуют о стимуляции иммунной системы организма новорожденных телят после применения Натрия нуклеината стельным коровам за 39 суток перед отелом.
Данные биохимических показателей крови телят исследуемых групп представлены в таблице 3. На основании
полученных результатов следует отметить увеличение в крови уровня общего белка на 18 % (73,6±2,58 г/л против 62,36±0,58 г/л в контроле, Р<0,05), альбуминов и гамма-глобулиновна 16,5 и 53,5 % (Р<0,05) соответственно у новорожденных телят опытной группы через сутки после рождения по сравнению с контрольной группой животных.
Белковый состав плазмы крови взаимосвязан с физиологическим состоянием и резистентностью организма, а также играет важную роль в метаболических процессах. Так, уровень общего белка в крови является высокоинформативным показателем,
характеризующим гомеостатическое
состояние организма. Альбумины предоставляют аминокислоты и тем самым служат пластическим материалом для синтеза других белков и веществ.
Показатель На 2 сутки На 10 сутки
контроль опыт контроль опыт
Общий белок, г/л 62,36±0,58 73,6±2,58* 60,82±0,96 67,6±1,67*
Альбумины, г/л 21,38±0,42 24,92±1,07* 22,62±0,50 23,78±0,71*
а-глобулины, г/л 18,78±0,93 17,4±1,02 17,24±1,31 15,14±0,60
Р-глобулины, г/л 5,8±0,37 6,1±0,49 7,6±0,86 9,34±0,60
у-глобулины, г/л 16,4±0,97 25,18±2,43* 13,36±0,57 19,34±1,53*
Таблица 3 - Биохимические показатели крови новорожденных телят (M±m, n=5)
Содержание альфа-глобулинов у телят опытной группы на 2-е сутки было ниже на 7,3 %, а бета-глобулины превышали значения контрольных животных на 5,2 % (Р>0,05).
На 10-е сутки жизни уровень общего белка у телят подопытных групп снизился за счет фракций а- и у-глобулинов, при этом уровень общего белка был достоверно выше у опытной группы телят на 11,1 % (67,6±1,67г/л против 60,82±0,96г/л в контроле, Р<0,05). Содержание альбуминов и у-глобулинов в опытной группе оставалось выше на 5,13 % и 44,7 % (Р<0,05) по сравнению с контролем.
С возрастом количественное значение а-глобулинов у опытной группы телят было на 12,2 % меньше, а Р-глобулинов на 22,9 % больше относительно показателей животных контрольной группы.
Своевременное выпаивание
молозива новорожденным телятам, полученного от коров, которым за несколько дней перед отелом вводили 0,2 % водный раствор Натрия нуклеината, способствовало увеличению количества у-глобулинов в сыворотке крови опытных животных, что имеет важное значение в повышении неспецифических защитных свойств организма.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о том, что 0,2 % водный раствор Натрия нуклеината, однократно парентерально введенный стельным коровам за 3-9 суток до предполагаемого отела, способствовал накоплению в молочной железе иммуноглобулинов и других необходимых иммунных факторов, а также выделению их в составе молозива. В результате новорожденные телята получили иммунологически ценное
молозиво, что положительным образом отразилось на их физиологическом состоянии, морфологических и
биохимических показателях крови через сутки и 10 суток после рождения. Отмечено достоверно более высокое содержание в крови новорожденных телят опытной группы общего белка на 18 %, альбуминов на 16,5 %, гамма-глобулинов на 53,5 %, а также лейкоцитов на 25,3 %, в основном за счет более высокого содержания лимфоцитов.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Алимов, А. М. Влияние «Стимулина на физиологическое состояние и резистентность сухостойных коров и телят / А. М. Алимов, Р. Ф. Сайфутдинов, Е. Ю. Микрюкова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана.
- 2017. - Т. 232. - № 4. - С. 5-8.
2. Великанов, В. И. Колостральный иммунитет и становление неспецифической резистентности телят под влиянием иммуномодуляторов: монография / В. И. Великанов, А. В. Кляпнев, Л. В. Харитонов, С. С. Терентьев // Санкт-Петербург: Лань, 2021.
- 160 с.
3. Воронин, С. Натрия нуклеинат -эффективный иммуномодулятор / С. Воронин, А. Гуменюк, А. Ханис, Ю. Фёдоров // Животноводство России. -2015. - № 7. - С. 21.
4. Гертман, А. М. Лечение и профилактика болезней молодняка крупного рогатого скота: учебное пособие для вузов / А. М. Гертман, Т. С. Самсонова // Санкт-Петербург: Лань, 2021. - 148 с.
5. Кульмакова, Н. И. Продуктивные качества крупного рогатого скота и сохранность молодняка при коррекции иммунитета: монография / Н. И. Кульмакова, Р. М. Мударисов,
И. Н. Хакимов // Санкт-Петербург: Лань, 2019. - 156 с.
6. Лебединская, О. В. Иммуномодуляторы на основе нуклеиновых кислот / О. В. Лебединская,
A. Т. Гараев // Сборник статей IX Международной научно-практической конференции «Фундаментальные и прикладные научные исследования: актуальные вопросы, достижения и инновации». - Пенза, 2018. - С. 190-199.
7. Тухватуллина, Л. А. Влияние препаратов «Имунофан» и «Фоспренил» на морфологический состав крови телят / Л. А. Тухватуллина, Р. Г. Каримова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2021. - Т. 247. - № 3. - С. 262-266.
8. Федоров, Ю. Н. Иммунный статус телят и его коррекция при использовании различных схем введения Натрия нуклеината / Ю. Н. Федоров,
B. И. Клюкина, О. А. Богомолова, А. В. Поляков, Е. В. Крапивина // Вестник алтайского государственного аграрного университета. - 2014. - № 4 (114). - С. 104110.
9. Федоров, Ю. Н. Пассивный иммунитет у новорожденных телят -основа выращивания здорового молодняка / Ю. Н. Федоров, В. И. Клюкина, О. А. Богомолова, М. Н. Романенко, К. Н. Царькова // Аграрно-пищевые инновации. - 2019. - № 3(7). - С. 27-33.
10. Харитонова, О. В. Исследование эффективности различных способов повышения колострального иммунитета у новорожденных телят / О. В. Харитонова, Л. В. Харитонов, В. И. Великанов, А. В. Кляпнев // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2018. - № 2. -С . 81-93.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА
ГЛУБОКОСТЕЛЬНЫМ КОРОВАМ
Горина А.В.
Резюме
Особенности деятельности органов и систем у новорожденных животных определяются степенью их функциональной зрелости в ранний постнатальный период онтогенеза. Рождение резистентного потомства, получение молозива с высоким уровнем иммуноглобулинов и их широкой противомикробной специфичностью является одной из приоритетных задач в современном животноводстве. Целью исследования явилось изучение влияния Натрия нуклеината 0,2 % на колостральный иммунитет и становление естественной резистентности новорожденных телят. Работа выполнена на базе СПК «Нижегородец» Дальнеконстантиновского района Нижегородской области. В ходе опыта определяли титруемую кислотность молозива, уровень общих иммуноглобулинов, проводили морфологический и биохимический анализ крови новорожденных телят на 2-е и 10-е сутки после рождения. В результате было отмечено увеличение количества лейкоцитов, общего белка, альбуминов и гамма-глобулинов в крови телят опытной группы, а также более высокий уровень иммуноглобулинов и титруемая кислотность молозива коров опытной группы.
PHYSIOLOGICAL, BIOCHEMICAL AND MORPHOLOGICAL PARAMETERS OF THE BLOOD OF NEWBORN CALVES AFTER THE APPLICATION OF SODIUM NUCLEINATE
TO DОWN-CALVING COWS
Gorina A.V.
Summary
The features of the activity of organs and systems in newborn animals are determined by the degree of their functional maturity in the early postnatal period of ontogenesis. The birth of resistant offspring and the production of colostrum with a high level of immunoglobulins and their broad antimicrobial specificity is one of the priority tasks in modern animal husbandry. The aim of the research was to study the effect of Sodium nucleinate 0.2 % on colostral immunity and the development of natural resistance in newborn calves. The work was carried out on the basis of the APC «Nizhegorodets» of Nizhny Novgorod region. In the course of the experiment, the titratable acidity of colostrum, the level of total immunoglobulins was determined, morphological and biochemical analysis of the blood of newborn calves was carried out on the second and tenth days after birth. As a result, there was an increase in the number of leukocytes, total protein, albumin and gamma globulins in the blood of calves from the experimental group, as well as a higher level of immunoglobulins and titratable acidity of colostrum of cows in the experimental group.
