ФіТОХіМіЧНЕ ВИВЧЕННЯ ВМіСТУ БіОЛОГіЧНО-АКТИВНИХ РЕЧОВИН ТА ТЕСТУВАННЯ АНТИМіКРОБНОї АКТИВНОСТі ГАЛЕГИ СХіДНОї GALEGA ORIENTALIS (LA) Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

УДК 577.1:579.222:582.71

Дармограй Л.М., канд. с.-г. наук, доцент © Лье1еський нацюнальний утеерситет еетеринарног медицины та бютехнологт

iм.С.З. Гжицького

Ф1ТОХ1М1ЧНЕ ВИВЧЕННЯ ВМ1СТУ Б1ОЛОГ1ЧНО-АКТИВНИХ РЕЧОВИН ТА ТЕСТУВАННЯ АНТИМ1КРОБНО1 АКТИВНОСТ1 ГАЛЕГИ СХ1ДНО1 GALEGA ORIENTALIS (LA)

До^джено яюсну оцтку емкту бiологiчно-актиених речоеин е органах рослин галеги схiдноí Galega orientalis (La). Доведено еплие pi3rnx концентрацт водного екстракту даног культури на ркт чистих культур грам-позитиених i грам-негатиених бактерт i дрiжджiе. Встаноелено iнгiбуючий еплие 20% концентрацп препарату на ркт бактерт штаму Escherichia coli XL1, DH5. Бактерiальна дiя до^дженого препарату на бактерп штаму Micrococcus luteus та дрiжджi Saccharomyces cerevisiae W303 була нижчою. Окреслено перспектиеи подальших до^джень бiологiчноí цiнностi щег нетрадицтног кормоеог культури.

Ключовi слова: галега схiдна Galega orientalis (La), бiологiчно-актиенi речоеини, органи рослин, чистi культури, бактерп, дрiжджi, еодний екстракт.

Згщно публжацш втизняних i зарубiжних aBTopiB вчеш виявляють защкавлешсть щодо вивчення продуктивно! ди нетрадицшно!, альтернативно!, мало поширено!, кормово! культури галеги схщно! (Galega orientalis (La), яка належить до багаторiчних бобових рослин i3 тривалим термшом використання

[1, 2, 5, 6, 10].

Також, у науковому свт тривае пошук нових i бшьш стабшьно-сильних компонент антимiкробно! дi! природного походження на противагу кнуючим синтетичним антибютикам та пiдвищення мiкробiологiчно! чистоти продукив харчування, кормових добавок [7, 8, 9]. З щею метою вивчають вмiст бiологiчно-активних речовин в органах рослин шляхом фiтохiмiчного !х дослщження.

На попереднiх етапах проведених нами дослщжень було встановлено й вщзначено у публiкацiях, що при випасанш корiв на пасовищi з галеги схщно! Galega orientalis (La) по рос чи у дощову погоду в жодно! i3 них не виникало тимпанi! (вздуття рубця), враховуючи те, що ця культура належить до бобових. Дана ситуащя i тривалi роздуми над цiею проблемою породили щею провести фiтохiмiчнi та мжробюлопчш дослiдження. Ось чому дослщження такого плану е актуальними i прiоритетними.

Матер1али i методи. Матерiалом для дослiдження слугувала висушена вегетативна маса галеги схщно! у фазi бутошзаци i початку цвiтiння. Об'ектом дослщжень були чист культури дрiжджiв (Saccharomyces cerevisiae W303), грам-негативнi (Escherichia coli XL1, DH5), та грам-позитивш (Micrococcus

© Дармограй Л.М., 2009

239

luteus) бактери. Бюактившсть чистих культур бактерш i дрiжджiв на тлi дiï водного екстракту Galega orientalis (La) визначали за методикою [3].

В експериментах використовували середовище «Ендо» для росту грам-негативних бактерiй, середовище LB, на якому виростають як грам-позитивнi, так i грам-негативш бактерiй, а також сусло-агар для дрiжджiв.

Готували 10% i 20% витяжку препарату (10-20 г сухоï маси трави на 100 мл води), кип'ятили ïï i тсля настоювання впродовж 10-15 год. стерилiзували фiльтрацieю. Пiсля цього на поверхню чашки i3 агаризованим середовищем наносили по 0,1 мл дослщжуваного препарату i висiвали газоном суспензш тест-культури. Всi експерименти проводили у 10-ти кратнш повторюваностi (10 контрольних i 10 дослщних чашок). Аналiзували появу колонiй на 2-3 добу тсля культивування при 30 °С (дрiжджi) i першу добу при 35-37 °С (бактерiï), порiвнюючи дослiднi варiанти з контролем.

Фiтохiмiчне дослiдження щодо вивчення вмiсту БАР в органах рослин Galega orientalis (La) проводили згщно методики Н.1. Гриневич [4].

Результати вах експериментальних дослiджень опрацьованi статистично з допомогою програми Microsoft Exel Microsoft Office, 2003.

Результати дослщжень. За перюд експерименту було помiчено, що препарат дослщжуванох' культури у концентрацiï 10 % (у перерахунку на вихщну масу висушенох' рослини) практично не впливав на ркт грам-позитивних i грам-негативних бактерiй, а також дрiжджiв. При збшьшент концентрацiï препарату до 20 % був вщзначений iнгiбуючий вплив на ркт бактерiй штаму E. coli XL1 i DH5. Результати тестування антимiкробноï активностi дослiджуваного препарату наведено в таблиц 1.

Таблиця 1.

Бшактнвшсть чистих культур бактерiй i дргжджчв на тлi дн екстракту

Galega orientalis (La), (M±m, n=10)

Групи Грам-негативнi Грам - Дрiжджi

позитивш

Escherichia Escherichia coli Micrococcus Saccharomyces

coli (XL1) (DH 5) luteus cerevisiae (W 303)

Контроль 540±15 388,9±4,32 1920,6±80,6 59±5

Дослвд 430±9*** 150,0±5,75*** 1694,0±8,33* 41±4**

З дано! таблицi бачимо, що на контрольних чашках виростало 540±15 колонiй, а на чашках Í3 додаванням препарату налiчувалось 430±9 колонiй при однаковому розведеннi, тобто спостер^алося пригнiчення росту на 20 %. Дещо меншою була бактерiальна дiя дослiджуваного препарату на бактери штаму Mic. Luteus - у контролi було 1920,6±81, а у дослщних чашках Петрi - 1694,0±8 колонiй, що на 10% менше. Аналогiчний ефект впливу спостерiгався на ркт дрiжджiв штаму Saccharomyces cerevisiae (W 303): вiдповiдно 59±5-контроль та 41±4 колонiй у дослiдi. Слщ вiдзначити, що у всiх випадках додавання препарату Galega orientalis (La) не змшювала морфологiю колонiй (розмiр колонiй) тестових штамiв.

240

Яккна ощнка вмкту БАР в органах рослини Galega orientalis (la) показана у таблиц 2.

Таблиця 2.

Вмпст бioлoгiчнo-aктивниx peMosHM в op^imax poe-Turni Galega orientalis (La)

Бioлoгiчиo- Органи pocлни

активш peчoвнмн Poзeткoвi листки Kopem Стeблoвi листки Пeлюcтки

Алкалощи ++ H - -

Кумарини +++ +++ ++ ++

Флавонощи ++ ++ ++ ++

Серцевl гл1козиди - - - -

Сапoнlни +++ ++ ++ ++

Дубильн1 речовини ++ ++ ++ +++

Антрагл1козиди - - - -

Водорозчинн1 ++ +++ ++ ++

пол1цукри

Аскорб1нова +++ + ++ +++

кислота

Умовн1 позначення: + + + - eMicm БАР високий; ++ - достатнш; + - низький (cniди'); H -eMicm БАР не визначався.

За вмктом БАР ця рослина е характерною бобовою культурою. Алкалощи присутш лише в розеткових листках (++) достатнш рiвень. Яккна оцшка також показуе, що у данш рослиш е високий вмют кумаринiв, особливо у розеткових листках i коренях. В данш культурi е достатнш вмкт флавоновдв, дубильних речовин i водорозчинних полщу^в. Необхiдно вiдзначити про те, що у galega orientalis (la) вщсутш, як показуе яккна ощнка, серцевi глiкозиди i антраглжозиди. Окремо слiд наголосити про високий вмкт аскорбiновоï кислоти у листках i пелюстках за винятком корешв.

Висновки. Згiдно проведених фiтохiмiчних дослщжень встановлено, що в органах рослин галеги схiдноï (Galega orientalis (La) е достатнш рiвень алкалоïдiв та кумаришв у розеткових листках (++), флавоновдв, а також вiдносно високий вмкт аскорбiновоï кислоти у пелюстках та листках дослiджуваноï рослини. За вмктом БАР ця рослина е характерною бобовою культурою.

Внаслщок тестування антимжробнох' активностi дано1' рослини доведено, що 20% ïï водний екстракт мае шпбуючий вплив на рiст бактерш штаму Escherichia coli (XL1,DH5), а також, що бактерiальна дiя дослщжуваного препарату на бактери штаму Mic. Luteus та дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae (W 303) була нижчою на 10% у порiвняннi з контролем.

Це е першi початковi дослщження такого плану щодо цiеï культури i проблеми та мають перспективу для подальшого дослiдження.

Л1тература

1. Дармограй Л.М. Бютрансформащя поживних речовин кормiв iз Galega orientalis в органiзмi корiв. / Л.М. Дармограй / Аграрний вкник

241

Причорномор'я. 36ipHrn наукових праць. - Одеса, 2007. - Вип. 38 . - С. 57- 63.

2. Дармограй Л.М. Продуктивна дiя KopMiB з козлятника схщного на обмш речовин та молочну продуктившсть дшних rapiB. / Л.М. Дармограй, Ю.Р. Вачко, Я.1. Швторак // Науковий вiсник Львiвського нацiонального унiвеpситету ветеринарно! медицини та бютехнологш iM. С.З. Гжицького. - Львiв, 2008. - Т. 10, № 2(37), Ч. 3. - С. 22-27.

3. Маниатис Т., Фрич Э., Сембрук Дж. Молекулярное клонирование. М.: Мир, 1984. - 443 с.

4. Химический анализ лекарственных растений / [под.ред. Гринкевич Н.И.] М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.

5. Шарифьяров Б.Г. Козлятник восточный в рационах коров / Б.Г. Шарифьяров // Зоотехния, 1996, №5. - С. 15-16.

6. Bikbulatov Z.G. Feeds from goats rue in diets for cows / Z.G.Bikbulatov, F. A.Zainutdinov, B.G. Sharifyanov // Kormoproizvodstvo. - 1997. - P. 28-31.

7. Darmohray LM., Fitsyk V.P. The influence of various concentrations of water extracts Galega orientalis (La) on the growth of clear bacteria and yeasts cultures. // I Mi^dzy narodowa sesj^, kol naukowyh. Krakow, maj, 2009. p. 86-87.

8. Fairey N.A. Cross-Canada comparison of the productivity of fodder galega (Galega orientalis Lam.) with traditional herbage legumes / N.A.Fairey, L.P.Lefkovich, B E. Coulman //. Can. J. Plant Sci. - 2000. - 80, 4: P.793-800.

9. Sibanda T. In vitro antibacterial regimes of crude aqueous and acetone extracts of Garcinia kola seeds. / T.Sibanda // J. Biol. Sci. 8(1). - 2008. - P. 149-154.

10. Skorko-Sajko H. Nutritional value of galega (Galega orientalis La) forage and silage for ruminants / H.Skorko-Sajko, J.Tywonczuk, J. Skomial // J. animal and Feed Scn. 14. Suppl. 1. - 2005. - P.249-253.

Summary

PHYTOCHEMICAL STUDY OF CONTAIN BIOLOGICALL ACTIVITY SUBSTANCES AND TESTING ANTIMICROBIAL ACTIVITY GALEGA

ORIENTALIS (LA)

It has been researched high-quality valuation of contain biologicall activity substances in plants organs. It has been informed about the influence of different concentrations water extract of Galega orientalis (La) on the growth of clear culture gram-positive and gram-negative bacteries and yeasts. Install antimicrobial influence 20% concentrations of preparation on the bacteries growth (E.coli XL1, DH5). Bacterial action of preparation on the bacteries (Mic.Lut.) and yeasts (Sach.) were lower. It has been described perspectives of the future researches of this plant.

Keys word: Galega orientalis (La), biologicall activity substances, plants organs, clear culture, bactery, yeasts, water extract.

Стаття надшшла до редакцИ 9.09.2009

242