CC BY
16
Науковий в^ник Львiвського нацiонального унiверситету ветеринарно! медицини та бютехнологш iMeHi С.З. Гжицького.
CepiH: Вeтeринарнi науки
Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences
ISSN 2518-7554 print doi: 10.32718/nvlvet9510 ISSN 2518-1327 online_http://nvlvet.com.ua
UDC 582.929.4:581.5(477.42)
Oregano Essential Oil (Origanum vulgare L.), as a Food-supplement in a Rearing of Piglets
I. Salamon1, J. Poracova1, M. Hrytsyna2
1University of Presov, Slovak Republic
2Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies, Lviv, Ukraine
Salamon, I., Poracova, J., & Hrytsyna, M. (2019). Oregano Essential Oil (Origanum vulgare L.), as a Food-supplement in a Rearing of Piglets. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences, 21(95), 55-61. doi: 10.32718/nvlvet9510
The article describes the results of the study of the physiological effect on the organism of pigs - mammals and weaned piglets. Feed additives were made from the essential oil of Origanum vulgare "Aditivum do krmnych zmesi na bazepamajoranu". It has been established that O. vulgare dry grass contains essential oils (0.15-0.50%), where carvacrol, thymol, cymol and other terpenes are main components. Extract of O. vulgare essential oil has a pronounced inhibitory effect on the enteropathogenic bacteria Escherichia coli hemolytic and Salmonella enteritica var. Enteritidis. In quantifying, it was found that 20% of the essential oil extract has inhibition role, which is 4 times more effective than 100%, has the largest inhibitory role. The resistant symbiotic bacterium of the gut Enterococcus faecium M-7 was not affected by essential oil. The following indicators were used to establish the physiological effect of herbal .supplements on the body of piglets: increasment in body weight, resistance of piglets to diseases, the state of intestinal microflora. A control and two experimental groups were addedfor the experiment, where the phyto-additive was included in to the feed: the first consisted of bacteria Lactobacillus plantarum with 0.05% extract of O. vulgare (LO) essential oil and the second - only 0.05% essential oil extract О. vulgare. (O). In the two experimental groups, the pigs' health was good and their mortality was not observed either before or after weaning. The incidence was 18% before weaning and 36% after weaning in the control group. The average daily weight gaining was significant in both groups (31-36%). Moreover, piglets were larger at birth and before weaning they increased in weight to 8 times, whereas over the next 24 days their weight increased only to 50%. The difference in gaining weight between the two expirimantal groups was insignificant. The use of the herbal supplement LO is more effective than O, because the stability index of the gut microbiota gradually increases from 2.2 to 3.37 due to decrease in the number of opportunistic bacteria Escherichia coli and enterobacteria and growth of lactobacilli. Therefore, a phyto-supplement consisting of Lactobacillus plantarum bacteria with 0.05% O. vulgare (LO) essential oil extract can be recommended as a probiotic to feed mammals and weaned pigs for improving health and disease prevention.
Key words: essential oil, O. vulgareL., food-supplement, enzymes, microorganisms, piglet.
Фггодобавка ефiрноl олп (Origanum vulgare L.) у ращонах поросят
I. Саламон1, Я. Поракова1, М. Грицина2
1Пряшiвський утверситет в м. Пряшевi, Словаюя
2Львiвський нацiональний утверситет ветеринарног медицини та бютехнологш iMeHi С.З. Гжицького, м. Львiв, Укра'та
В статтi описано результати дослiджeння фiзiологiчного впливу кормовог фШодобавки виготовленог з eфiрноi оли Origanum vulgare "Aditivum do krmnych zmesi na baze pamajoranu" на оргатзм свиней - сисутв i вiдлучeних поросят.
НАУКОВИЙ В1СНИК
шшмшгашфзшшщщН^Н
етшшшшщшдашшщмшш!
Article info
Received 09.09.2019 Received in revised form
09.10.2019 Accepted 10.10.2019
University of Presov, 15, 17th November St., SK-080 01, Presov, Slovak Republic. Tel.: +421-51-757-06-62 E-mail: ivan.salamon@unipo.sk
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska Str., 50, Lviv, 79010, Ukraine. Tel. :+38-097-561-52-30 E-mail: hrytsynamr@gmail.com
Встановлено, що суха трава O. vulgare Micmumb ефiрнi оли (0,15-0,50%), де основним компонентом е карвакрол, тимол, цимол i iншi терпени. Екстракт ефiрнuх оли O. vulgare мае виражену iнгiбуючу дЮ на ентеропатогенн бактерй Escherichia coli гемолтична i Salmonella enteritica var. Enteritidis. При ктьюсному визначенн було встановлено, що найбшьшу iнгiбуючу роль мае 20% екстракт ефiрноi оли, який е в 4 рази ефективнший вiд концентрату (100%). На резистентну симбютичну бактерт кишювника Enterococcus faecium M-7 ефiрна олiя не впливала. Для встановлення фiзiологiчного впливу фШодобавки на оргатзм поросят використовували тат показниками: збтьшення маси тта, стттсть поросят до захворювань, стан мжрофлори кишювника. Для до^ду було пiдiбрано i сформовано три групи поросят: першу - контрольну i двi до^дт. Пер-шш доcлiднiй груni додавали до корму фШодобавку в склад якоi входили бактерй Lactobacillus plantarum з 0,05% екстрактом ефiрноi оли O. vulgare (LO). В склад кормiв iншоi до^дног' групи входив лше 0,05% екстракт ефiрноi оли O. vulgare. (O). У вciх до^дних групах стан здоров 'я поросят був задовшьним i не cnоcmерiгалоcя iхньоi cмерmноcmi. В nроцеci доcлiдження встановлено, що у контрольны груni захворюватсть становила 18% перед вiдлученням i 36% тсля нього. Середньодобовий приркт маси тта у обох дослтних групах був 31-36%, nорiвняно з контрольною. Поросята даних груп при народженш мали вищу масу тта, а при вiдлученнi збтьшили свою масу у 8 раз, mодi як за наступн 24 доби iх маса збтьшилася ттьки на 50%. Рiзнuця у маci мiж двома до^дними групами була не верiгодною. Використання фШодобавки LO е бтьш ефективним, тж О, тому що тдекс cmабiльноcmi мтрофлори кишечнику поетапно зростае вiд 2,2 до 3,37 за рахунок зниження кiлькоcmi умовно-патогенних бактерт Escherichia coli i ентеробактерт та зростання лактобактерт. Отже, фтодобавку до складу якоi входять бактерй Lactobacillus plantarum з 0,05% екстрактом ефiрноi оли O. vulgare (LO) можна рекомендувати як nробiо-тик i пребютик для годiвлi поросят-сисутв i вiдлученuх поросят для покращення стану здоров 'я i профилактики захворювань.
Ключовг слова: ефiрна олiя Origanum vulgare, фimодобавка, Lactobacillus plantarum, приркт маси тта, мтрофлора кишювника.
Вступ
П1двищення ефективносп корм1в е основним аспектом виробництва продукци тваринництва, джерела високояшсного тваринного б1лка, яке ввдповщае жор-стким правилам безпечного харчування. Нишшня тенденц1я зниження використання синтетичних речо-вин як у харчуванш, так i в профшактищ i лшуванш захворювань та намагання замшити ix продуктами природного походження, дае можливосп для широкого застосування кормових добавок. Фггодобавки (екс-тракти лшарських рослин) представляють реальну i ефективну альтернативу антибютикам i xiмiотерaпев-тичним засобам. Вони е екобезпечними i пвдвищують ефектившсть кормiв, що забезпечуе отримання бшьш еколопчно безпечно! продукци тваринництва (Darmohray, 2012; Darmohray & Gonchar, 2015; Darmohray et al., 2018; Martyshuk & Gutyj, 2019; Stybel et al., 2019).
Одшею з цшних ефiроолiйниx рослин е материнка звичайна (Origanum vulgare L.), яка широко викорис-товуеться в медициш, косметологи, кулшари i може застосовуватися у годiвлi тварин. Вона виявляе висо-ку антибактерiальну i антиоксидантну актившсть та протигрибкову дш завдяки наявносп в нш ефiрниx олш, флавонощв, глiкозидiв.
В загальному, вмют ефiрниx олш в трав O. vulgare становить 0,03% - 4,6% i коливаеться у рослин, зiбраниx у рiзниx мiсцезростанняx та залежить вщ температури, сонячно! рaдiaцii, топографiчниx осо-бливостей мiсцезростання (Lukas et al., 2015). Росли-ни, що ростуть в Середземномор'! мiстять бiльшу шльшсть ефiрниx олiй, а в ix складi переважае цимил-та ациюлчний лiналоол / лiналiлацетат - хемотип. У популяцш, що ростуть в регюнах з континентальним клiматом переважае сабшш-хемотип. Серед популя-цiй, що ростуть в 1талп також видмють три хемо-типи залежно вщ умов зростання: з переважанням карвакролу / тимолу; тимолу / а-тертнеолу; лшаль лацетату i лiнaлоолу (найнижчий вмiст фенолiв) (De Martino et al., 2009).
^pyrHM Ba®nuBHM KOMnoHeHTOM O. vulgare e ^naBOHOigu Ta ^eHOflbHi khcaoth. y ubOrO Bugy bh-HBneHO BHCOKHH BMicT p03MapuH0B0i (23 Mr/r) KHCAO-th, a TaKO® flMTeOfliH-7-O-ß-D-raroKypOHig, TOgi hk npoTOKaTexiH, 3-O-Ka$eiflxiHiHOBa i KO^eiHOBi khcao-th 6ynu b He3HaHHin KinbKOCTi (Milevskaya et al., 2017). y Hag3eMHin HacTHHi O. vulgareL. ssp. hirtum 6ynO BHHBneHO HOTupHagu^Tb neTMHHx arniKOHiB, aKi 6ynu igemu^iKOBam 3 THMOxiHOHOM, a TaKO® 6eH3unO-bhh cnupT, eBreHOn, 2-$emn-eTaHOfl, thmoa, 3-reKceH-1-On i KapBaKpOn. Bohh npOaBnanu aHTHOKCugaHTHy giro, HKa 3a aKTHBHicTM npupiBHroeTbca gO a-TOKO$epOny (Milos et al., 2000).
E^iprn Onii KOpuui, OperaHO i ne6peuro buhbahah ch-nbHy aHTHMiKpO6Hy aKTHBHicTb gO naroreHHux 6aKTeprn Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium, eure-pOreMOpariHHa Escherichia coli Ol57: H7 Ta 6aKTepiH, ^O BHK^HKaroTb ncyBaHHH npOgyKTiB (Brochothrix thermosphacta Ta Pseudomonas fluorescens). TOMy O. vulgare MO®e c^y®HTH Ba®^HBOM npupOgHOM anb-TepHaTHBOM KOHcepBaHTiB gna 3anO6iraHHa pOCTy 6aK-Tepin y xapHOBux npOgyKTax (Mith et al., 2014).
B iHmOMy eKcnepuMeHTi 6yna BuaBneHa cunbHa gia eKCTpaKTy O. vulgare Ha 10 6aKTepm: Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27835 i iHmi. Ixhh gia 6yna cunbHima npOTH rpaMnO3UTUBHHx naTOreHiB Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228), Hi® npOTH rpaMHeraTHBHux E. coli (De Martino et al., 2009). O. vulgare MO®Ha pauiOHanbHO 3acTOCOByBaTH b xapHO-bhx npOgyKTax hk gna npurHineHHa pOCTy Staphylococcus aureus, TaK i gna npuraiHeHHa CHHTe3y CTa^inOKOKOBHX eHTepOTOKCHHiB. CunbHy aHTHMiKpO6Hy aKTHBHicTb Ha TunOBi mTaMH 6aKTepin nOHBnae $inOre-HeTHHHO 6nu3bKHH gO O. vulgare - He6peub (Thymus vulgaris L.) (Salamon et al., 2018).
B niTepaTypi BigMineHO gOCTaTHbO iH^OpMauii npO ^iTOxiMiHHHH CKnag chpobhhh e^ipOOniHHux pOcnuH, ix BnacTHBOCTi Ta BUKOpucTaHHa. npOTe, ManO BigOMO npO BHKOpucTaHHH niKapcbKux pOcnuH y BeTepuHapii (Salamon & Hrytsyna, 2019). EKCTpaKTH, OTpuMaHi 3 apOMaTHHHux i niKapcbKHx pOcnuH MaroTb niTKun aHTH-
септичний, ароматерапевтичний, протидiарейний та стимулюючий ефект i благотворно впливають на травления. Ц речовини все частiше використовують-ся у виглядi кормових добавок в годiвлi тварин, щоб покращити стан гх здоров'я i, таким чином, виробляти здорову Гжу тваринного походження (Darmohray et al., 2019).
Кормовi добавки визначаються "£вропейською Директивою про кормовi добавки 70/524" - як речовини або препарати, що мютять iнгредieнти, як1 пiсля включения Гх в корм впливають на його властивосп, рiст, розвиток тварин i продукцiю тваринництва. Ми можемо роздiлити кормовi добавки на чотири основш категори: харчовi добавки, ад'юванти (допомiжиi речовини), добавки, що пвдвищують виробництво продукцп, i агенти, що запоблають захворюванню тварин. На практищ для пiдвищения ефективностi виробництва свинини використовують рiзнi кормовi добавки (бшок, вiтамiни, мiнеральнi речовини та ш-шi). В лiтературi знаходимо ввдомосп про викорис-тання мiкроелементiв як кормових добавок в годiвлi поросят (Iskra, 2012; Shesterynska et al., 2014).
Фггогенш добавки - це добавки рослинного походження, а Гх використання у годiвлi тварин е перспек-тивним для профшактики захворювань. Фгтокормо-вими добавками е екстраговаш з ефiроолiйних рос-лин, наприклад, материнки звичайноГ (O. vulgare), чебрецю звичайного (Thymus vulgaris L.) чи сальви лiкарськоi (Salvia officinalis L.) ефiрнi олп. Вони ма-ють бактерiйну дiю i можуть бути альтернативою синтетичним аитимiкробним препаратам. Фггодобав-ки в дослiдi покращували апетит i, як наслвдок, у поросят спостерлалося збiльшения маси тша, зменшен-ння дiареi та зниження смертносп (Marcin et al., 2004). Часто в склад кормових добавок входять пробь отики (лактобактерп чи бiфiдобактерii'), як1 нормаль зують склад i функцii мiкрофлори. Використання таких фгтодобавок дае можливiсть отримання бiльш екологiчно безпечноГ продукцп тваринництва, що важливо для г'х застосування в практицi сiльського господарства.
У Словаччиш отримано внутрiшнiй стандарт "Aditivum do krmnych zmesi na baze pamajoranu", автор - Марiан Деметра. Стандарт поширюеться на виготовлення, випробування, оцiнку та реалiзацiю "Ком6шэрмовог добавки на основi Origanum vulgare", яка мютять бюлопчно активнi речовини - ефiрнi олп i лактобактерп. Призначена вона для поросят - сисушв i ввдлучених поросят i використовуеться з метою пок-ращення г'х виживаиия в ювенiльному вiцi.
Метою нашоГ роботи було вивчення фiзiологiчного впливу фiтодобавки "Aditivum do krmnych zmesi na baze pamajoranu" на оргатзм поросят-сисушв i щойно ввдлучених поросят за такими показниками: динашка маси тiла пiсля ii застосування, шльшсть iнфекцiйних захворювань у господарсга та стiйкiсть до них поросят.
MaTepia™ i методи дослiджень
Для досягнення мети проводили так1 дослвдення: вивчення кшькюного i як1сного складу еф1рних ол1й та ïx бактершно1 дй' на хвороботворнi мiкроорганiзми in vitro i in vivo.
Дослвдження проводили на фeрмi пана Марiана Деметра в сeлi Чакрiв. Поросяти вирощували разом i3 свиноматкою. Мшроктмат забезпечували eлeктричнi калорифери та вентилятори. Поросят роздiлили на три групи: перша контрольна група - 11 поросят, яких годували без будь-яких добавок, друга дослвдна група - 9 поросят, яким включали до рацюну Lactobacillus plantarum з 0,05% екстрактом eфiрноï олiï Origanum vulgare (LO) i третя дослвдна група (8 поросят) -включали до рацюну лише 0,05% екстракт eфiрноï оли O. vulgare (О). Експеримент проводився на породi свиней словацького бшого благородного х п'етрена. Ввдлучення поросят проводили у вщ 28 дiб. Всix експериментальних тварин годували спещальним комбiкормом без застосування кормових добавок, ^м дослвдно введених.
Ефiрна олiя була отримана дистиляцiйним апара-том (Oravec et al., 1988), спещально розробленим для ароматичних та лшарських рослин. Використовували тип дистиляцiйного апарату "HV-300" (висота: 3400 мм, ширина: 1300 мм, з контейнером для 4050 кг сухо'' рослинно'' сировини та 100-120 кг свгжого рослинного матeрiалу). Взимку для дистиляцп eфiрноï олiï використовували суxi рослини i масовий вихвд eфiрноï олп був вищий. Контейнери eфiрноï оли збе-рiгали пвд N2 при +4 °C у темному мюцг
Складники eфiрноï олiï Origanum vulgare визнача-ли за допомогою GC-MSD системи на пристроï Varian 450-GC разом з Varian 220-MS з портом ш'екцп Split-Splitless, детектором MSD у лаборатори "Calendula" Пряшiвського унiвeрситeту. Було використано двi колони: RX-5MS (неполярна), 30 m х 0,25 mm, з внут-ршшм дiамeтром: 0,25 цт, газ-носiй: гелш (21 psi) з потоком 1,50 мл.хв-1 i колонка BPX-5MS (полярна), довжиною 50 m з внутршшм дiамeтром 0,25 mm та с товщиною стацiонарноï фази 0,25 ^m. Температурна програма: 50 °C - 0 хв; 3 °C хв1 до 250 °C; 250 °C -15 мiн1. Iдeнтифiкацiя окремих компоненлв eфiрноï олiï була зроблена з використанням часiв утримання 20 автентичних стандартiв компонeнтiв фiрм: Extrasynthese, Merck, Fulka i Sigma-Aldrich.
Мшробюлопчт аналiзи iнгiбуючоï активностi eфiрниx олш проводилися в Пряшiвському утверситет^ а обидва штами бактeрiй були надаш 1нститутом фiзiологiï тварин САН в Кошице. Iнгiбуючу дiю eфiр-ноï олiï при рiзниx концентращях (100, 80, 60, 40, 20, 1, 0,1%) визначали на двох iндикаторниx штамах ен-теропатогенних бактерш, видiлeниx з рeктальноï час-тини травного тракту свиней: Escherichia coli, К антиген позитивна, гемолтгична i Salmonella enteritica рiзновид Enteritidis. При проведенш нашвшльшсного аналiзу в рщкому культуральному сeрeдовищi, куль-тури штаму наносили на соевий бульйон Триптиказе i додавали тестовану eфiрну олш. Oтриманi таким
чином зразки культивували в стандартних умовах (37 °С, 24 год). Наприкшщ цього культивування оп-тичну щшьшсть (OD6oo) при довжши хвил 600 нм, тобто зростання (або шпбувания росту) дослщжува-ного мшрооргашзму в присутносп вщповщно! конце-нтраци еф1рно! олй оцшювали спектрофотометрично, i к1льк1сть клиин при найвищих i найнижчих розве-деннях визначали к1льк1сно.
В фекалiях свиней визначали к1льк1сть таких шк-роорганiзмiв: Lactobacillus plantarum L81 (MRS + Rif 100 qm/мл), загальна кiлькiсть лактобацил (MRS), загальна аеробка (TSA), загальнi анаероби (Schaedler agar), Enterobacteriaceae (Ендо агар), Escherichia coli (MC), загальш ентерококи. Дослвдження проводили починаючи з 21 доби життя через тиждень в чотирик-ратнш повторностi.
Кiлькiсне визначення бактерш в 1 г вмiсту прямо! кишки проводили за числом колонш, що виросли на середовищах, через добу шкубаци в термостатi при 37 °С. Одержаний результат виражали в десятковому логарифмi колонieутворюючих одиниць в 1 г вмюту (lg КУО/г).
Результати та ix обговорення
Материнка звичайна (O. vulgare) - багаторiчна трав'яниста рослина, висотою вiд 0,20 до 0,50 м з червоними або рожевими суцвитями. Вид поширений на сухих i теплих мюцях.
Згiдно лiтературних даних суха сировина O. vulgare, зiбрана в 1тали давала жовто-червонуватi олй, що характеризуются типовим запахом з вихо-дом 2,35%, 3,15% i 2,93% ефiрноl олй' (De Martino et al., 2009). У "Державну фармакопею Украши", 2014
BXOguTb TpaBa Origanum onites L. a6O O. vulgare L. subsp. hirtus, a6O cyMim o6ox BugiB (Origani herba, OREGANO). BMicT e^ipHOi Onii CTaHOBHTb He MeHme 25 Mn/Kr, y nepepaxyHKy Ha 6e3BOgHy cupOBHHy; cyMa KapBaKpOny Ta THMOny He MeHme 60% y e^ipmn Onii'. OriganumN - HauiOHanbHHH Onuc, BucymeHa TpaBa O. vulgare, 3i6paHa y $a3y uBiTiHHH. BMicT: cyMa $na-BOHOigiB: He MeHme 1,5% y nepepaxyHKy Ha noreOniH 7-rnoKO3ug i cyxy cupOBHHy; e^ipHa Onia: He MeHme 1 Mn/Kr, y nepepaxyHKy Ha cyxy cupOBHHy gna uinOi cupOBHHH Ta He MeHme 0,8 Mn/Kr, y nepepaxyHKy Ha cyxy cupOBHHy gna pi3aHOi chpobhhh.
BHacnigOK npOBegeHux gOcnig®eHb 6ynO BCTaHOB-neHO, ^O cyxa TpaBa O. vulgare MicTHTb nepeBa®HO e^iprn Onii (0,15-0,50%), ge ochobhhm iHrpegieHTOM e KapBaKpOn, THMOn, uuMOn i iHmi TepneHH. Pe3ynbTaTH aHani3y rx i $i3HHHi BnacTHBOCTi e^ipHOi Onii HaBe-geHi b Ta6nuui 1.
-3k 6ynO npegcTaBneHO b nOnepegHix gOcnig®eHHax (Poracova & Sutiakova, 2003), e$ipm Onii O. vulgare MaoTb Bupa®eHy iHri6yoHy gio y KOHueHTpauiax 100, 80, 60, 40 i 20%, OKpiM 1 i 0,1%, Ha emepOnaTOreHHi 6aKTepii - Escherichia coli, K aHTureH nO3HTHBHa, reMO-niTHHHa i Salmonella enteritica pi3HOBHg Enteritidis. TOgi hk pe3HCTeHTHa CHM6iOTHHHa 6aKTepia KHmKiBHHKa Enterococcus faecium M-7 6yna criincOoo gO eKCTpaKTy e^ipHOi Onii O. vulgare. lHri6yony pOnb Mana nume HaHBH^a KOHuempauia - 100% i HacTKOBO - 80%.
npu KinbKicHOMy BH3HaneHHi (Ta6n. 2) iHri6yoHOi pOni eKCTpaKTy O. vulgare Ha Escherichia coli Ta Salmonella enterica var. Enteritidis 6ynO BCTaHOBneHO, ^O HaH6inbmHH BnnuB Mae ii pO3HHH KOHueHTpauieo Big 80 gO 20%.
Таблиця 1
Як1сний i кiлькiсний склад ефiрноl олй О. vulgare i й! фiзичнi властивостi
Хiмiчнi та фазичш параметри
MJ .
Встановлене значения (M±m)
Питома вага ( Ph . Eur., 1997) г.см -3 0,970 ± 0,002
Оптичие обертання ( Ph . Eur., 2001) - 1,516 ± 0,001
Хроматографiчиий спектр: % в eфiриоl олп
- карвакрол 55,21 ± 3,0
- тимол 16,04 ± 1,5
- мiрцен 3,0 ± 0,5
- терпшен 5,0 ± 1,0
- iзопропiлтолуол 4,0 ± 1,5
- карюфшен 4,5 ± 0,5
- терпшеол 6,0 ± 2,5
запах - вiдповiдае
колiр - червоно-корисчневий
вода в ефiрних олiях - немае
Таблиця 2
Тестування iнгiбувания дй' ефiрноl олй O. Vulgare на бактерш рiзних штамiв
Штам бактерш
Коицеитрацiя застосовуваио' сф^рно' олй (%)
100
80
60
40
20
1
0,1
Escherichia coli
Salmonella enterica var. Enteritidis
OD 600 0,170 (0 КУО мл-1) OD 600 0,212 (0 КУО мл-1)
OD 600 0,084 OD 600 0,090
OD 600 0,074 OD 600 0,089
OD 600 0.077 OD 600 0.092
OD600 0,046 (0 КУОмл-1 OD600 0,068 (0 КУО мл-1)
OD600 1,20 3 (1,1х108 КУО мл-1)
OD600 1,120 (1,1 х108 КУО мл-1)
OD600 1,50 8 (108 -1011 КУО мл-1)
OD600 1,5 5 9 (108 -1011 КУО мл-1)
Позначення: (OD600) - оптична щiльиiсть при довжииi хвилi 600 им, (КУО) - колошеутворююч одииищ
npHHOMy, Han6igbmy mri6yrony pogb Mae 20% eKC-TpaKT, aKHn e b 4 pa3H e^eKTHBHimun Big 100%. Ekct-paKT HanHH®roi KoHnempanii Man®e He npoaBgaB iHri-6yronux BgacTHBocTen.
HacTynHHM eTanoM gocgig®eHHa 6ygo 3'acyBaHHa BngHBy Ha CTaH 3gopoB'a nopocaT 0,05% eKCTpaKTy e^ipHoi ogii O. vulgare, aK kopmoboi go6aBKH b gBox BapiaHTax: nepmun - 3 gogaBaHHaM 6aKTepin Lactobacillus plantarum, gpyrun - 6e3 6aKTepin. B npo-
Ta6.^H 3
KigbKicHi Ta aKicHi noKa3HHKH niggocgigHHx nopocaT
neci eKcnepHMeHTy b gocgigHHx rpynax He cnocTepira-goca CMepTHocTi nopocaT Hi go, Hi nicga BiggyneHHa (Ta6g. 3). y KoHTpogbHin rpyni CMepTHicTb nopocaT CTaHoBHga 9%. CTaH 3gopoB'a b o6ox rpynax nopocaT 6yB 3agoBigbHHM go i nicga BiggyneHHa Big CBHHoMaTKH, Togi aK y KoHTpogbHin rpyni KigbKicTb BHnagKiB 3axBo-pMBaHHa CTaHoBHga 18% nepeg i 36% nicga BiggyneHHa. OT®e, BHKopHCTaHHa $iTogo6aßoK go KopMiB Mago no-
3HTHBHHH e$eKT.
noKa3HHKH_KoHTpogbHa I eKcnepHMeHTagbHa rpyna (LO) II eKcnepHMeHTagbHa rpyna (O)
KintKicTt Hapog®eHHx TBapHH 11 9 8
CMepTHicTt go BignyneHHa (%) 9 0 0
CMepTHicTb nicga BignyneHHa (%) 0 0 0
3axBoproBaHicTt go BignyneHHa (%) 18 0 0
3axBoproBaHicTt nicga BignyneHHa (%) 36 0 0
CepegHtogo6oBHH npupicT (%) 0,112 0,157 0,151
3rigHo giTepaTypHHx g®epeg nopocaTa Hapog®y-MTbca MeHm gopo3BHHeHHMH, nopiBHaHo 3 TegaTaMH i arHaTaMH. Maca ix Tiga npu Hapog®eHHi noBHHHa CKga-gaTH 0,7-1,0% Macu Tiga MaTepi. y HamoMy gocgi-g®eHHi cepegHbogo6oBHH npHpicT MacH TaKo® 6yB bh-^hm y rpynax, ge BHKopHCTOByBagu go6aBKH go panioHy (Ta6g. 3). nopocaTa Big Hapog®eHHa go BiggyneHHa 36igbmugu ®HBy Macy b 8 pa3, Togi aK 3a HacTynm 24 go6u BoHa 3pocga TigbKH Ha 50% (Ta6g. 4). Pi3HHHna b npupocTi Mi® KompogbHoro rpynoro i gBoMa gocgigHH-
Ta6.^H 4
iHTeHCHBHicTb pocTy niggocgigHHx nopocaT
mh CTaHoBHga b MoMeHT BiggyneHHa 21 i 23% b Ko®Hin gocgigHin rpyni (BignoBigHo, LO i O) i 3pocTaga Ha 14% (LO) i 9% (O) b nepmun TH®geHb nicga BiggyneHHa Ta Ha 3% (LO) i 7% (O) - 3a HacTynHHn TH®geHb. Pi3HHna b npupocTi Mi® gBoMa gocgigHHMH rpynaMH 6yga HeBe-gHKoro. Ao BiggyneHHa gocgigHa rpyna nopocaT, aKHM go panioHy oKpiM e^ipHHx ogin gaBagu gaKTo6aKTepii Lactobacillus plantarum Magu BHigy Macy Ha 300 r, og-HaK go KiHua eKcnepuMemy pi3HHua Mi® ixHboro Macoro 6yga Ha 138 rpaM MeHmoro.
CepedHM Maca nopocnm (x ± t . sx [0,05 %]) )
BiK (gHiB) KoHTpogbHa 2 AocgigHa rpyna LO (9 rogiB.) 3 AocgigHa rpyna O (8 rogiB.)
npu Hapog®eHHi 807 ± 8 764 ± 10 880 ± 12
21-ma go6a ®HTTa 4403 ± 16 4405 ± 14 4151 ± 5
28 go6a (BignyneHHa) 4440 ± 14 5601±21 5791±28
35 go6a 4481±13 6818 ± 32 6550±33
42 go6a 4512 ± 32 7370 ± 23 7237 ± 47
AHTHMiKpo6Hi BgacTHBocTi e^ipooginHoro eKCTpaKTy O. vulgare Ha opraHi3M nopocaT gocgig®yBagu mgaxoM BHBneHHa MiKpo^gopu KumKiBHHKa. Ha ocHoBi CTaTHC-THHHoro gocToBipHoro BH3HaneHHa KigbKocTi MiKpoop-raHi3MiB 6ygo BCTaHoBgeHo, go nopiBHaHo 3 Kompogb-Horo rpynoro, BMicT 6aKTepin b KumKiBHHKy nopocaT
3HH3HBca b cepegHboMy Ha 20-30% npu BHKopucTaHHi $iTogo6aBoK b gBox BapiaHTax: gume e^ipHoi ogii O. vulgare Ta 3 gogaBaHHaM go Hei gaKTo6aKTepin (Ta6g. 5, 6). ^k BugHo 3 Ta6guni 6 Mi® gocgigHHMH rpynaMH TaKo® e BigMiHHocTi.
Ta6.^H 5
AuHaMiKa MiKpo^gopu KumKiBHHKa b KoHTpogbHin rpyni nopocaT (K, 108)
KigbKicTb MiKpoopraHi3MiB, BHpa®eHHx y lg KyO/r BMicTy (x ± t . Sx [0,05 %])
AeHb 21_fleHb 28_flem 35_flem 42
3arantm aHaepo6u 12,51 ± 0,071 12,42 ± 0,01 11,82 ± 0,06 11,41 ± 0,06
3arantHa aepo6u 11,52 ± 0,068 12,31 ± 0,19 13.49 ± 0,08 13.23 ± 0,07
Escherichia coli 10,37 ± 0,052 10,27 ± 0,01 9,21 ± 0,07 8,85 ± 0,04
EHTepo6aKTepii 10,74 ± 0,056 10,41 ± 0,05 9.25 ± 0,061 8.59 ± 0,05
EHTepoKoKH He BH3HaneHo 7,77 ± 0,04 8.15 ± 0,05 7.45 ± 0,03
3arantm gaKTo6aKTepii 11,76 ± 0,065 11,51 ± 0,06 11,37 ± 0,06 11,47 ± 0,06
^aKTo6anugu CTinKi go pu^aMninuHy He BH3HaneHo 3,50 ± 0,05 5,67 ± 0,07 5,99 ± 0,08
iHgeKC CTa6intHocTi MiKpo^gopu KumeHHHKy 2,79 3,19 3,87 4,18
Так, шлькють Escherichia coli i ентеробактерш знизилася тд час експерименту в дослщнш групi LO, залишившись у груш O практично незмшною. За бшьш високий бактерiостатичний ефект, ймовiрно, вшповщають лактобактери.
1ндекс стабiльностi мiкрофлори кишечнику (1С-МК), який е сшввшношенням бiфiдо- i лактобактерiй до загально! кiлькостi кишково! палички говорить про стан кишково! флори, оск1льки бiфiдо- i лактобактери регулюють кшьшсний та як1сний склад кишко-во! мiкрофлори у нормi та затримують зростання i розмноження у ньому патогенних та умовно-патогенних бактерш. У першому дослiдi iндекс (1С-
МК) поетапно зростав вiд 2,2 до 3,37 за рахунок зни-ження кiлькостi умовно-патогенних бактерiй (Escherichia coli i ентеробактерш) та використання як бюдобавки ефiрних олiй O. vulgare з бактерiями Lactobacillus plantarum. Тодi як у другому дослщ, цей iндекс коливався вщ 2,18-2,39 та був досить ни-зьким i стабуним, що зумовлено антимжробною дiею лише ефiрноï олй' O. vulgare. В порiвняннi з лггературними даними (Peleno, 2019) iндекс стаб№-ностi мiкрофлори кишк1вника в штактних поросят 2-4-мiсячного вiку дорiвнював 3,0, а за нематодозно-протозоозно'' iнвазiï падав вiд 2,2 до 1,5.
Таблиця 6
Динамжа мжрофлори кишкiвника поросят в дослiдних групах
Кiлькiсть мiкроорганiзмiв, виражених у lg КУО/г вмiсту (x ± t . Sx [0,05%])
дослiдна група LO, 107
дослiдна група O, 107
День 21 День 28 День 35 День 42 День 21 День 28День 35День 42
Загальш анаероби
Загальна аероби
Escherichia coli
Ентеробактери
Ентерококи
Загальнi лактобактери
Лактобацили стiйкi до рифампщину 1ндекс стабiльностi мжрофлори кишечнику
9,69 9,78 9,53 9,20 9,81 9,57 9,45 10,05
± 0,042 ± 0,04 ± 0,04 ± 0,04 ± 0,02 ± 0,02 ± 0,02 ± 0,03
9,54 10,09 10,88 10,67 10,16 10,51 10,81 10,13
± 0,041 ± 0,05 ± 0,06 ± 0,05 ± 0,02 ± 0,03 ± 0,04 ± 0,02
8,59 8,42 7,43 7,14 8,42 8,24 8,48 8,18
± 0,039 ± 0,05 ± 0,04 ± 0,04 ± 0,02 ± 0,01 ± 0,02 ± 0,01
8,51 8,53 7,46 6,93 8,44 8,23 8,56 8,30
± 0,038 ± 0,04 ± 0,03 ± 0,03 ± 0,02 ± 0,01 ± 0,03 ± 0,02
не 6,37 6,57 6,01 4,10 4,50 4,34 4,53
визначено ± 0,03 ± 0,033 ± 0,31 ± 0,01 ± 0,02 ± 0,01 ± 0,03
9,16 9,28 9,17 9,25 9,59 9,09 9,06 9,55
± 0,040 ± 0,05 ± 0,04 ± 0,04 ± 0,04 ± 0,02 ± 0,02 ± 0,04
не 2,82 4,57 4,83
визначено ± 0,02 ± 0,03 ± 0,04
2,2 2,57 3,12 3,37 2,31 2,26 2,18 2,39
Внаслiдок проведених дослщжень з'ясовано не-значне переважання аеробних бактерiй над анаероб-ними. Це обумовлено, на нашу думку, молодим вжом поросят i недостатньою сформованютю травно'', iму-нно'' i кровоносно'' систем.
Отже, використання фгтодобавки ефiрноï олiï O. vulgare (LO) з бактергями Lactobacillus plantarum е бшьш ефективним профшактичним засобом, шж фiтодобавки лише з ефiрною олiею (О).
Висновки
1. Суха трава Origanum vulgare мютить пере-важно ефiрнi олiï (0,15-0,50%), де основним шгредь ентом е карвакрол, тимол, цимол i iншi терпени.
2. При кшьшсному визначеннi було встановле-но, що найбiльшу iнгiбуючу роль мае 20% екстракт ефiрноï олй O. vulgare на ентеропатогенш бактери -Escherichia coli, гемолiтична i Salmonella enteritica var. Enteritidis. Резистентна симбютична бактергя кишк1вника Enterococcus faecium M-7 до нього була стшкою.
3. У двох експериментальних групах не спосте-рiгалося смертностi поросят нi до, m пiсля вiдлучення вщ свиноматки. Стан здоров'я був хорошим i серед-ньодобовий прирют ваги був суттевий (31-36%) в
o6ox rpynax gO i nicna BignyneHHa. TOgi hk y kohtpo-nbHin rpyni 3axBOpoBaHicTb CTaHOBuna 18% nepeg i 36% nicna BignyneHHHM, a TaKO® cnOCTepiranaca CMep-THicTb gO BignyneHHH.
4. nOpOCHTa npu HapOg®eHHi 6ynu 6inbmi, gO BigjiyneHHH bohh 36ijibmujiH b Ba3i y 8 pa3, TOgi hk 3a HacTynHi 24 gHi ix Bara 36inbmunaca TinbKH Ha 50%. Pi3Huua b npupOCTi Mi® gBOMa gOcnigHHMH rpynaMH 6yna HecyTTeBOo.
5. B HKOpucTaHHa $iTOgO6aBKH LO (6aKTepii Lactobacillus plantarum 3 0,05% eKCTpaKTOM e^ipHOi Onii O. vulgare) e 6inbm e^eKTHBHHM, TOMy ^O iHgeKC CTa6inbHOCTi MiKpO^nOpu KumeHHHKy nOeTanHO 3pOCTaB Big 2,2 gO 3,37 3a paxyHOK 3HH®eHHa KinbKOCTi yMOBHO-naTOreHHux 6aKTepin (Escherichia coli i eHTepO6aKTe-pin). TOgi hk y gpyrOMy gOcnigi (O), uen iHgeKC KOnuBa-bch Big 2,18-2,39 i 6yB gOCHTb HH3bKHM.
6. ®iTOgO6aBKy "Aditivum do krmnych zmesi na baze pamajoranu" b CKnag hkoi BxOgaTb 6aKTepii Lactobacillus plantarum 3 0,05% eKCTpaKTOM e^ipHOi Onii O. vulgare L. (LO) MO®Ha peKOMeHgyBaTH hk npO-6iOTHK gna 3rOgOByBaHHa nOpOcaTaM-cucyHaM i Bigny-HeHOMy MOnOgHHKy gna npO^inaKTHKH iH^eKuinHux 3axBOpoBaHb.
References
Darmohray, L.M. (2012). Biotransformatsiya pozhyvnykh rechovyn netradytsiynykh kormiv v orhanizmi tvaryn. Monohrafiya, L'viv (in Ukrainian).
Darmohray, L.M., & Gonchar, M.V. (2015). Bioactivity of Pure Cultures of Bacteria and Yeast in the Background Action of the Water Extract of a Plant Galega orientalis (Lam). Research & Reviews: Journal of Veterinary Sciences, 1(1), 82-85.
http://www.n-oij.com/open-access/bioactivity-of-pure-cultures-of-bacteria-and-yeast-in-the-background-action-of-the-water-extract-of-a-plant-galega-orientalis-lam.php?aid=59849.
Darmohray, L.M., Gutyj, B.V., & Darmohray, 0.0. (2018). Antimicrobic activity concept of water extract of plants Galega orientalis (Lam.). Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. 20(87), 122-125. doi: 10.15421/nvlvet8724.
Darmohray, L.M., Orishchuk, O.S., Tsap, S.V., & Cher-nenko, O.M. (2019). Environmental justification for using of active yeast in laying hens diet. Ukrainian Journal of Ecology, 9(2), 189-194. https://www.ujecology.com/abstract/environmental-justification-for-using-of-active-yeast-in-laying-hens-diet-43898.html.
De Martino, L., De Feo, V., Formisano, C., Mignola, E., & Senatore, F. (2009). Chemical Composition and Antimicrobial Activity of the Essential Oils from Three Chemotypes of Origanum vulgare L. ssp. hirtum (Link) Ietswaart Growing Wild in Campania (Southern Italy). Molecules, 14, 27352746. doi: 10.3390/molecules14082735.
Gutierrez-Grijalva, E.P., Picos-Salas, M.A., Leyva-Lopez, N., Criollo-Mendoza, M.S., Vazquez-Olivo, G., & Heredia, J.B. (2018). Flavonoids and Phenolic Acids from Oregano: Occurrence, Biological Activity and Health Benefits. Plants, 7(1), 2-23. doi: 10.3390/plants7010002.
Iskra, R.Ia. (2012). Aktyvnist enzymiv vuhlevodnoho obminu ta vmist hliukozy v krovi svynomatok i po-rosiat za dodavannia do ratsionu nanotsytratu khromu. Naukovi dopovidi NUBiP, 8(30), 2-8 (in Ukrainian).
Lukas, B., Schmiderer, C., & Novak, J. (2015). Essential oil diversity of European Origanum vulgare L. (Lamiaceae). Phytochemistry, 119, 32-40. doi: 10.1016/j.phytochem.2015.09.008.
Marcin, A., Laukova, A., Molnarova, J., & Valiga, I. (2004). Vyuzitie pamajoranovej a salviovej silice pre zlepsenie produkcnych a zdravotnych parametrov odstavenych prasiat. http://old.agroporadenstvo.sk/rv/ liecivky/vyuz_silice.htm (in Slovak).
Martyshuk, T.V., & Gutyj, B.V. (2019). Influence of feed additive "Butaselmevit-Plus" on antioxidant status of rats in conditions of oxidative stress. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Agricultural sciences, 21(90), 76- 81. doi: 10.32718/nvlvet-a9013.
Milevskaya, V.V., Temerdashev, Z.A., Butyl'skaya, T.S. et al. (2017). Determination of phenolic compounds in medicinal plants from the Lamiaceae familyJ. Anal Chem., 72, 342. doi: 10.1134/S1061934817030091.
Milos, M., Mastelic, J., & Jerkovic, I. (2000). Chemical composition and antioxidant effect of glycosidically bound volatile compounds from oregano (Origanum vulgare L. ssp. hirtum). Food Chemistry, 71(1), 7983. doi: 10.1016/S0308-8146(00)00144-8.
Mith, H., Dure, R., Delcenserie, V., Zhiri, A., Daube, G., & Clinquart, A. (2014). Antimicrobial Activities of Essential Oils and Their Components against Food-Borne Pathogens and Food Spoilage Bacteria. Food Science & Nutrition, 2, 403-416. doi: 10.1002/fsn3.116.
Oravec, V., Varga, I., Repcak, M., Hulikova, A., & Cerny, J. (1988). Patent No. 245316, Office for Patents and Discoveries, Czechoslovak Republic (in Slovak).
Peleno, R.A. (2019). Mikrobiotsenoz kyshechnyku ta imunnyi status porosiat za nematodozno-protozooznoi invazii i khimioprofilaktyky. Lvivskyi natsionalnyi universytet veterynarnoi medytsyny ta biotekhnolohii imeni S.Z. Gzhytskoho. Dr. Vet. Sci [thesis], Lviv (in Ukrainian).
Poracova, J., & Sutiakova, I. (2003). Fytogenne krmne aditiva z liecivych rastin a ich vyuzitie vo zvysovani kvality produktov v zivocisnej vyrobe. In: Kvalita-tivne aspekty pestovania a spracovania liecivych, ar-omatickych a koreninovych rastlin: zbornik z od-borneho seminara s medzinarodnou ucast'ou, Agroinstitut Nitra, 4. decembra 2003. Nitra: Agroinstitut, 4245 (in Slovak).
Salamon, I., & Hrytsyna, M. (2019). Veterinary Medicine and the Use of Medicinal Plants. Scientific Messenger of LNU of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary Sciences, 21(94), 121-126. doi: 10.32718/nvlvet9422.
Salamon, I., Kryvtsova, M., Bucko, D., & Tarawneh Amer, H. (2018). Chemical characterization and antimicrobial activity of some essential oils after their industrial large-scale distillation. The Journal of Microbiology, Biotechnology and Food Sciences, 8(3), 965969. doi: 10.15414/jmbfs.2018-19.8.3.965-969.
Shesterynska, V.V., Trokoz, V.O, Karpovskyi, V.I., Maksin, V.I., & Kryvoruchko, D.I. (2012). Dynamika vmistu hliukozy v krovi svynei riznykh typiv nervovoi systemy za umov dodavannia do ratsionu "Iodis-kontsentratu". Biolohiia tvaryn, 14(1), 295-299 (in Ukrainian).
Stybel, V., Gutyj, B., Hariv, I., Slivinska, L., & Prijma, O. (2019). Effect of "Amprolinsyl" and "Amprolium 22%" on morphological indices of blood of turkeys for eumeria invasion. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. Series: Veterinary sciences, 21(94), 157-162. doi: 10.32718/nvlvet9429.
