CC BY
134
Патология, патогенез и экономический ущерб
УДК 619:616.995:636:612.128
ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ФАСЦИОЛЕЗЕ
И.Д. ШЕЛЯКИН кандидат ветеринарных наук
В.Н. КУЗЬМИЧЕВА кандидат биологических наук
И.Ю. ВЕНЦОВА кандидат биологических наук Воронежский государственный аграрный университет им. К.Д. Глинки, 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, д. 1, e-mail: inna-vencova@mail.ru
Изучены особенности функционирования ферментов трансаминирования и щелочной фосфатазы на фоне содержания белка в крови крупного рогатого скота при фасциолезе. Установлено, что функциональное состояние крови при фасциолезной инвазии характеризуется понижением уровня общего белка, увеличением активности глутаматтрансаминазы и щелочной фосфатазы.
Ключевые слова: крупный рогатый скот, фасциолез, ферменты, активность, общий белок.
Центральную роль в обеспечении жизнедеятельности организмов играют молекулярные механизмы, осуществляющие протекание и координацию целостности, направленности взаимосвязанных физиологических и биохимических процессов. В познании специфики клеточного метаболизма одно из главных мест принадлежит проблемам ферментативного катализа, и прежде всего изучению особенностей функционирования, регуляции активности, механизма действия ферментов. Исследование саморегулирования обменных процессов на уровне отдельных ферментных систем позволяет приблизиться к глубокому и детальному анализу организации метаболизма в животной клетке. Исследованию ферментативных процессов посвящено немало научных работ. Однако, многие аспекты регуляции метаболизма у животных, ин-вазированных фасциолами, изучены крайне недостаточно. Это относится, в частности, к ферменту, катализирующему гидролиз фосфорных эфиров с образованием неорганического фосфата, щелочной фосфатазе (Кф 3.1.3.1):
и глутаматтрасаминазе, катализирующей реакцию восстановления шиффова основания:
С — О + NHj ^ /С— NH -* Н С МНг
Согласно существующим представлениям, реакция, катализируемая глутаматтрансаминазой, представляет собой основной путь обратимого включения аммиака в глутаминовую кислоту. В клетках животных глута-маттрансаминаза находится преимущественно в митохондриях. Под действием трансаминаз азот глутаминовой кислоты перераспределяется, включаясь в другие аминокислоты.
Фактически, особенность функционирования ферментов трансаминиро-вания обеспечивает их вклад в поддержание баланса между конструктивным и энергетическим обменом.
Важность изучения глутаматтрансаминазы у животных, инвазированных фасциолами, определяется физиологическим значением этого фермента, участвующим в регуляции анаболических и катаболических процессов.
Реакции, связанные с обменом глутаминовой кислоты, играют важную роль в клеточном метаболизме в норме и патологии. Посредством процессов переаминирования и окислительного дезаминирования осуществляется взаимосвязь белкового обмена с реакциями цикла трикарбоновых кислот.
Образующаяся при дезаминировании а-кетоглутаровая кислота окисляется в цикле трикарбоновых кислот или используется для непрямого синтеза липидов и углеводов.
Целью данной работы было изучение активности щелочной фосфатазы, глутаматтрансаминазы, трансаминаз в крови животных на фоне содержания белка при разных стадиях заражения фасциолами для определения биохимического статуса животных при проведении лечебных мероприятий.
Материалы и методы
Исследования проводили в одном из хозяйств Воронежской области у коров симментальской породы, зараженных фасциолами. В зависимости от возраста, пола, массы, условий кормления и содержания были сформированы 3 группы коров по 10 голов в каждой. Первая группа - клинически здоровые животные; вторая - животные с первой стадией инвазии; третья группа - животные с третьей стадией поражения фасциолами.
Кровь брали из яремной вены до кормления. Для стабилизации применяли гепарин. В сыворотке крови определяли количество общего белка по Ло-ури и активность щелочной фосфатазы колориметрическим методом на основе гидролиза п-нитрофенолфосфата [1]. Активность глутаматтрансаминазы определяли по методу Олсона, трансаминаз - по методу Рейтмана и Френкеля [2]. Результаты исследований обрабатывали статистически с использованием критерия Стьюдента [3].
Результаты и обсуждение
Установлено, что у животных, зараженных фасциолами, интенсивное образование глутаминовой кислоты происходит при переаминировании аспа-рагиновой кислоты с а-кетоглутаратом, но глутаминовая кислота подвергается окислительному дезаминированию до а-кетоглутарата.
Так, активность глутаматтрансаминазы у 85 % инвазированных животных была выше нормы (92-96 ед/мг белка). Активность глутамикоаспараги-новой трансаминазы у этих животных была несколько ниже нормы (20-40 ед/мг белка), глутаматаланиновая трансаминаза максимально выражена у зараженных животных (30-70 ед/мг белка) (табл. 1).
1. Биохимические показатели сыворотки крови коров
Показатель Здоровые животные Зараженные фасциола-
(n = 10) ми животные (п = 20)
Щелочная фосфатаза, ед/мл 43,2±0,28 75,3±0,31
АЛТ, ед/л 29,4±0,17 35,9±0,22
АСТ, ед/л 43,3±0,16 49,3±0,92
ГГТ, ед/л 29,2±0,13 32,9±0,07
Содержание общего белка в сыворотке крови у животных контрольной группы составило 75,21±0,7 г/л, у животных с первой стадией инвазии -65,32±0,64 г/л, что на 13,15 % ниже, чем у контрольных животных. У животных с третьей стадией поражения содержание общего белка составило 67,37±0,5 г/л.
Активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови инвазированных и здоровых животных составила соответственно 75,3±0,31 и 43,2±0,28 ед/л. Увеличение активности щелочной фосфатазы у зараженных животных связано с воспалительным процессом в печени, разрушением гепатоцитов, за утилизацию и гидролиз которых отвечает щелочная фосфатаза.
При фасциолезе при разрушении плазматических мембран гепатоцитов ферменты быстро диффундируют в кровь, проявляя каталитическую активность.
Активность АСТ и АЛТ в крови инвазированных животных была выше, чем в крови здоровых: АСТ - 49,3±0,92, АЛТ - 35,9±0,22 ед/л соответственно.
Таким образом, уровень активности глутаматтрансаминазы, АСТ, АЛТ и щелочной фосфатазы коррелирует с функциональным состоянием гепатоцитов при фасциолезе, что имеет диагностическое значение.
В системе мероприятий по борьбе с возбудителем фасциолеза определенное место отводится дегельминтизации. Однако, применение антигелъ-минтных средств в ряде хозяйств ограничено. Для дегельминтизации жвачных используют гексихол, гексихол С, дерил О и Б, фасковерм, альбенда-зол, празиквантел, ацемидофен, ацетвикол, урсовермит, фазинекс, четырех-хлористый углерод и др.
При лечении и профилактике следует учитывать иммунный статус организма. Нами использованы гексихол С и гексихол С в сочетании с лигфолом - иммуномодулятором природного происхождения.
По окончании опыта содержание гемоглобина составило 108,48±1,88 г/л. После применения препаратов гексихола С и гексихола С в комбинации с лигфолом содержание гемоглобина повысилось до уровня контрольной группы и составило 109,8±5,64 г/л.
Применение антипаразитарных препаратов в сочетании с иммуномоду-ляторами снижает активность щелочной фосфатазы и ферментов трансами-нирования, что свидетельствует о нормализации регуляторных функций.
На основе вышеизложенного считаем перспективным применение антипаразитарных препаратов в сочетании с иммуномодуляторами при лечении фасциолеза крупного рогатого скота с целью поддержания гомеостаза и регуляции метаболизма организма.
Оздоровление животных от фасциолеза необходимо проводить в трех направлениях:
1. Дегельминтизация. В неблагополучных по фасциолезу регионах профилактические дегельминтизации проводят два раза в год (весной за 3-4 недели до выгона животных на пастбища и осенью через 2,5-3 мес после постановки на стойловое содержание);
2. Меры борьбы с малым прудовиком (экологический, биологический, физический, химический методы);
3. Меры по предотвращению попадания яиц фасциол в водоемы, а адо-лескариев - дефинитивным хозяевам: дезинвазия навоза биотермическими средствами; ограничение навозохранилищ канавками, предотвращающими смыв яиц фасциол в водоемы; организация гигиены поения животных на пастбищах; смена пастбищ 2-3 раза в сезон; использование кормов, заготовленных с болотистых участков, в корм во второй половине зимы.
Применение биологических методов по оздоровлению от фасциолеза животных - весьма эффективно, экономически оправдано и не наносит вреда окружающей среде.
Литература
1. Землянухин А.А. Малый практикум по биохимии. - Воронеж, 1985. -135 с.
2. Кондрахин И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. - М., 1985. - 267 с.
3. Лакин Г.Ф. Биометрия. - М.: Высшая школа, 1980. - 293 с.
The activity of enzymes in blood of cattle at Fasciola hepatica infection I.D. Sheljakin, V.N. Kuzmicheva, I.Y. Vencova
The features of the functioning of enzymes transamination and alkaline phosphatase in the background of protein content in cattle blood at fasciolosis are investigated. It is established that the functional state of blood at fasciolosis is characterized by a decrease in total protein level, increase activity of glutamate and alkaline phosphatase.
Keywords: cattle, fasciolosis, enzymes, activity, total protein.
